UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

Facultad de Ingeniería Ambiental

UNIDAD DE PO S G RADO

INTRODUCCIÓN A LA
BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
Blgo Diego Macedo Prada
• Biotecnología, es tecnología aplicada
a los procesos tecnológicos.
• La biotecnología ambiental se
refiere a la aplicación de los procesos
biológicos modernos para la
protección y restauración de la calidad
del ambiente.
IMPORTANCIA… DEL CURSO
IMPORTANCIA
EN SALUD
CONSECUENCIAS • Río Rímac, cerca a Santa Eulalia – Chosica, 2017
 Bacillus sp.

Aspergillus niger

FLUJOGRAMA DE
TRATAMIENTO DE RESIDUOS Pleurotus sp.
LIGNOCELULOSICOS
Rhodotorula mucilaginosa
Rhodotorula toruloides
50x
 A B

Producción de
cerveza
artenasal
A)Materiales de trabajo
B)Filtración del mosto
C) Preparación del mosto C D
D)Sistema de enfriamiento
E)Cocción del mosto*
 • Rhodotorula graminis
Producción de
Biomasa
 • NGS Next generation sequencing.
BIOINFORMATICA • Diagnostico genomico, según el genotipo
• Diagnóstico de enfermedades raras
Base de datos de ácidos nucleicos a nivel mundial
National Center for Biotechnology Information (NCBI)
CROMOSOMAS Y GENES
INGENIERIA GENETICA
• manipulación directa de los genes endógenos de un organismo por
medio de un gen exógeno, que en la biotecnología tiene la finalidad
de modificar los genes endógenos, eliminarlos o duplicarlos.
Producción de insulina
EDICIÓN GENETICA
• CRISPR/Cas9, una técnica desarrollada hace tres
años, es tan eficaz para cortar y añadir genes que
investigadores de todo el mundo la están utilizando
en sus laboratorios.
APLICACIONES
 Rutas
metabólicas
TGA
CULTIVOS DE
HIDROPONIA
PLANTACIONES DE
CACAO
• RIO NEGRO – JUNIN
Planta de tratamiento de agua
residual (PTAR)
Gracias por su
atención…
¿preguntas?
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Facultad de Ingeniería Ambiental
UNIDAD DE PO S G RADO

Riesgos biológicos
Blgo. Diego Macedo Prada
Definición
• Algunas de las tareas que desempeñan
ciertos colectivos de trabajadores, conllevan
riesgos vinculados a la exposición a agentes
biológicos como:
• Virus, bacterias y parásitos, susceptibles de
estar contenidos o no en secreciones
biológicas como sangre, orina, saliva,
vómitos, y que pueden entrar en contacto
con piel, mucosas, sangre del trabajador y
otros.
 • Los RIESGOS BIOLÓGICOS, son los
agentes y materiales
potencialmente transmisibles para
los humanos, animales y otras
formas de vida. Ellos incluyen
patógenos conocidos y agentes
infecciosos como: Bacterias,
plasmidios, virus, hongos,
micoplasmas y parásitos, productos
celulares, productos de animales y
animales de laboratorio e insectos
que pueden ser reservorios de
agentes infecciosos y fluidos
corporales de primates.
• También se incluyen dentro de los
potenciales riesgos biológicos
aquellos usados en procedimientos
como son el DNA recombinante y
las manipulaciones genéticas.
RIESGOS BIOLÓGICOS
Agente etiológico

• El riesgo biológico, por definición esta representado por agentes patógenos que
producen infecciones en toda su extensión.
• También se incluyen reacciones alérgicas a plantas y animales, por sustancias
irritantes, alérgicas o tóxicas que pueden producir dicha reacción.
• Podrá considerarse como un riesgo biológico relacionado con el trabajo:
• El ataque de un tiburón a un buzo que trabaje en un Acuario o similar.
• La mordedura de una serpiente venenosa a un agricultor o veterinario.
• La reacción alérgica al polen de algunas plantas en una empresa de Floricultura.
• Microorganismo: Toda entidad microbiológica, celular o no, capaz de
reproducirse o de transferir material genético.
Agentes causantes de Riesgo Biológico
Virus que
Bacterias Clamidias Ricketsias Virus provocan
infección en el

Virus Virus DNA Virus RNA

Huésped Hongos
oncogénicos tumorales tumorales

Parásitos Protozoarios Helmintos Insectos

• Cualquier lista que se haga será siempre
incompleta, por el ciclo vital del entorno
que provoca la aparición de nuevos agentes
infecciosos de tipo viral.
• Ejemplo, el virus HIV o el virus del Ebola en
África.
Puestos de trabajo

• Las actividades laborales donde existe la mayor posibilidad de

encontrar trabajadores expuestos a los riesgos biológicos son:
• Clínica, hospitales y entidades de salud.
• Laboratorios clínicos, biológicos y de bioinvestigación
• Cría y manejo de animales: ganadería, avicultura, porcicultura,
etc
• Manejo de pieles y otros productos animales
• Procesamiento de carnes.
• Servicios funerarios: Cementerios, funerarias
• Manipulación de basuras y desechos, trabajos en: alcantarillas,
redes subterráneas.
• Y otra gran variedad de actividades donde pueden provocar un
riesgo laboral.
 Los principales mecanismos por los que un microorganismo penetra en un
individuo son:

Inhalación. Fundamentalmente por la inhalación de aerosoles infecciosos o

partículas contaminadas con el agente infeccioso, transmitidas por el aire.

Vías de Ingestión. Esta es originada a través de la penetración por las manos u

objetos contaminados a la vía digestiva.

transmisión A través de heridas en la piel. Cuando la piel con solución de continuidad se

pone en contacto con superficies o materiales contaminados.

Acupunción. Fundamentalmente por heridas con objetos cortantes o

punzantes, tales como agujas, cuchillas, etc.

Oftálmica. A través de derrames, salpicaduras o contactos con las manos o

por el uso de lentes de contacto contaminados.
 • Conocer las fuentes, receptores y mecanismos de
transporte de los agentes patógenos es importante para
saber como se produce una infección. Las personas que son
el objetivo principal de este protocolo, pueden ser:
• Los portadores
• La fuente de infección
Criterios • Los vectores de un agente patógeno.

epidemiológicos El material infeccioso, puede desarrollarse en:

• Plantas de tratamiento de aguas residuales.
• Heridas quirúrgicas infectadas.
• Animales.
• Suelos.
 • Los agentes biológicos pueden vehiculizarse en:
• Saliva
• Semen
• Secreciones vaginales
• Liquido cerebro-espinal
• Líquido sinovial
• Secreción pleural

Área de • Liquido peritoneal

• Líquido pericárdico

trabajo • Liquido amniótico

• Saliva y sangre en procedimientos dentales
• cualquier otra secreción del cuerpo que este
visiblemente contaminado con sangre.
• Células o cultivos de tejidos que contengan el
virus HBV o el HIV.
• Cultivos de órganos, medios de cultivos o
soluciones similares.
• Sangre, órganos y tejidos de animales para
experimento que estén infectados con el virus
HBV o con el VIH.
Transmisión en el
puesto de trabajo
• Los agentes patógenos pueden entrar en su cuerpo e
infectarlo por diferentes medios:
• Una herida por acupuncíón ocasionada por un objeto
cortante contaminado con material infeccioso: Agujas.
Escalpelos. Vidrios rotos. Terminales dentales expuestos.
• Transmisión indirecta, como en el caso de tocar un objeto
o superficie contaminado y transferir el material infectado
a su boca, ojos, nariz, o piel abierta.
• Heridas abiertas, piel con solución de continuidad o
quemada, aun la dermatitis y el acné, así como las mucosas
de la boca, ojos y nariz.
• Superficies contaminadas
• Las superficies contaminadas constituyen unas de las
formas principales de difusión de los agentes
biológicos.
• Estos agentes pueden sobrevivir en superficies secas y
a temperatura ambiente durante algún tiempo.
 Existen múltiples Tipo de dispositivo Profundidad del pinchazo
factores, pero estos son punzante o cortante o corte.
unos de los más (aguja hueca, punzón,
importantes: bisturí.)

Factores para
la transmisión:
Situación clínica del Concentración de virus en Cantidad inoculada. Las
enfermo fuente de el líquido infectante. probabilidades de
infección. infección que se estiman
actualmente por contagio
después de un accidente
ronda el 20% para el Virus
de la Hepatitis B, el 2%
para el Virus de la
Hepatitis C y el 0,3% para
el S.I.D.A.
VIRUS EBOLA
Criterios diagnósticos
• El conocimiento previo de la agresividad de un
posible foco de infección, es el antecedente al cual
será necesario referirse cuando se piensa en la
posibilidad de una infección o enfermedad por los
riesgos biológicos.

Además de considerarse como posibles antecedentes:

• Las condiciones de los puestos de trabajo
• La capacidad real de transmisión de la enfermedad
• y la susceptibilidad del huésped.
 El carácter de susceptibilidad y
vulnerabilidad del huésped la dan las
condiciones inmunológicas del huésped y
su integridad biológica, tales como:

Criterios de un normal nivel de nutrición, integridad de

la piel, condiciones biológicas de las vías
diagnóstico de acceso.

Desnutrición
Teniendo en cuenta o enfermedades
condiciones que previas presentes
en las vías de
aumentan la virulencia: acceso del germen
al organismo
 Criterios de diagnóstico
Para algunas infecciones existen pruebas que indican el
contacto con un germen. Ejemplo: prueba de PPD, sin que ello
indique que hay un proceso infeccioso en actividad.
Diagnóstico de laboratorio:
Hay pruebas que confirman de forma especifica para cada tipo
de infección o enfermedad y que identifican a un germen
mediante:
• Frotis o cultivo
• Pruebas inmunologicas
• Pruebas indirectas de manifestación patológicas
• Biopsias para exámenes de anatomía patológicas
• y cualquier otro tipo de exámenes o prueba que nos
permitan hacer el diagnostico.
 PELIGROSIDAD

• Exposición mínima necesaria

• Tipo de trabajo que se realiza.
• Peligro potencial de los gérmenes con los cuales se trabaja.
• Vía de ingreso al organismo y potencial de difusión.
• Cualquier exposición, por mínima que aparentemente sea,
puede ser suficiente para que se realice un contagio y se
desarrolle la enfermedad.
• En vez de hablar de exposición mínima necesaria se
denominan:
“Niveles de Riesgo” o “Grados de Peligrosidad”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
UNIDAD DE PO S G RADO

BIORREACTORES
Blgo. Diego Macedo Prada
Biorreactor

• Un biorreactor es un recipiente o sistema

que mantiene un ambiente biológicamente
activo
• Este proceso puede ser aeróbico o
anaeróbico. Estos biorreactores son
comúnmente cilíndricos, variando en
tamaño desde algunos mililitros hasta
metros cúbicos y son usualmente
fabricados en acero inoxidable
 Como….

• Una fermentación es un proceso biológico o

bioproceso que consiste en la
descomposición de la materia orgánica por
microorganismos fermentadores (bacterias y
hongos).
COMPONENTES
DE UN
BIORREACTOR
Fotobiorreactor • Biorreactores de fermetanción
Biorreactor
• Aquí se busca mantener las mejores
condiciones ambientales al organismo o
sustancia química
• En función de flujos de entrada y salida
• 3 tipos
• Por lote (Batch)
• Lote alimentado
• Continuo o quimiostato
Diseño de biorreactores

• Las condiciones ambientales

de un biorreactor tales como
flujo de gases (por ejemplo,
oxigeno, nitrógeno, dióxido de
carbono, etc.) temperatura,
pH, oxigeno disuelto, y
velocidad de agitación o
circulación, deben ser
cuidadosamente
monitoreadas y controladas.
 Diseño de biorreactores

EL CILINDRO DEBE SER PERFECTAMENTE LOS BIORREACTORES INDUSTRIALES SIENDO FÁCILES DE MANTENER YA QUE
ESTERILIZABLE Y LIMPIO. USUALMENTE EMPLEAN BACTERIAS U OTROS REQUIEREN SOLO SOLUCIONES SIMPLES DE
ORGANISMOS SIMPLES QUE PUEDEN RESISTIR LA NUTRIENTES Y PUEDEN CRECER A GRANDES
FUERZA DE AGITACIÓN VELOCIDADES
 Economía

Finalidad Alto rendimiento

Tiempo
 Biorreactor: cultivos

LA CINÉTICA BIOLÓGICA DEPENDE DE CRECIMIENTO CELULAR VELOCIDAD DE CRECIMIENTO

LAS CARACTERÍSTICAS INTRÍNSECAS
DEL ORGANISMO O DEL CULTIVO:
Cinética de crecimiento

Cambio en el numero de
Velocidad de células o en la masa Tiempo de duplicación o
crecimiento: celular en un generación
determinado tiempo.

Tiempo necesario para

Varia entre cada
que una población se
microorganismo
duplique
 Curva de crecimiento
microbiano

• 4 fases
• Distintas para cada organismo
 Fase de adaptación a las condiciones
ambientales

Duración variable
Fase de
latencia o Duplicación insignificativa
lag
Ocurre cuando se transfiere un inoculo desde
un medio con menor volumen a uno mayor
 Duplicación celular

Actividad metabólica

Estado fisiológico mas sano

Fase Velocidad de crecimiento variable

exponencial
Condiciones ambientales

Genética

Se alarga hasta que se agotan los nutrientes.

 El numero de células viables
es igual numero de células
muertas

Fase estacionaria Nutriente limitante

Formación de productos de
desecho
 La muerte celular se vuelve
exponencial

Fase de
muerte
Autolisis bacterianas
 Mantener las células uniformemente distribuidas en todo el
volume de cultivo

Mantener constante y homogenea la temperatura

Minimizar los gradientes de concentración de nutrientes

Biorreactor: Mantener el cultivo puro

objetivos Mantener un ambiente aseptico

Maximizar el rendimiento y la producción

Minimizar el gasto y los costos de producción

Reducir al maximo el tiempo

Parámetros a controlar: Temperatura

• Afecta el crecimiento del cultivo de

microorganismos o células.
• Conforme aumenta la
temperatura.
• Por encima de la temperatura
máxima. CRÍTICO!
• Sensores de laboratorio:
intercambio de calor
 • El rango normal de acidez es
menor de 2,0 y de
alcalinidad mayor a 10
• El pH es controlado por el
metabolismo celular
• Levadura: 3.5 – 5.5
• Bacterias: 6.0 – 7.5
• Equipos:
• Condensador de acidez
• Condensador de alcalino
• Bombas peristálticas con
mangueras de siliconas
Parámetros a controlar: pH
Parámetros a
controlar: espuma

• Densas y jabonosas: productos oxidados

• Problemas funcionales
• Contaminación de cultivos
• No se pueden realizar bien las
mediciones
• Solución Antiespumante
• Sensor controlador
Tipos de
biorreactores:
Tanque agitado
• Más utilizados, confiables,
sistema de agitación
mecánica.
• Agitación continua, inyección
de aire por la parte inferior
• Burbujas: difusión de oxigeno
• Contiene vanos de flectores:
• Mejor mezclado
• Sistema de calor por fuera
Sistema de agitación
• Generar la potencia necesaria para producir una mezcla
perfecta para el sistema de cultivo
• Maximizar la difusión de gases en el liquido y minimizar la
producción de esfuerzos cortantes y la presión hidrodinámica
local y global, para optimizar los fenómenos de transferencia
de momentum, calor y masa.
Tipos de
Biorreactores: Air
lift
• La agitación se da por el aire que
ingresa
• Quimiostato o cultivo continuo
• Existe un flujo continuo de
reactivos frescos hacia el reactor y
el producto fluye continuamente
hacia afuera
• Se compone de:
• Un reactor con un volumen de
cultivo constante
• Entrada de nutrientes constante
• Salida biomasa
Tipos de Biorreactores:
Cultivo por lote (batch)
• Se mantiene por un tiempo
definido
• Existe un flujo continuo de
reactivos frescos hacia el reactor
y el producto fluye
continuamente hacia fuera.
• Se compone de:
• Un reactor con un volumen de
cultivo constante
• Entrada de nutrientes constante
• Salida de biomasa
 Pasos:

Cargarse con inoculo de cultivo

Cultivo por Agregar medio de cultivo fresco

lote (batch)
Lavar (flujo de salida) – Mantener el volumen constante

Una vez que el sistema alcanza el equilibrio, el numero de células y

concentración de nutrientes en la cámara permanecen constantes, y
entonces se dice que el sistema esta en estado estacionario.
Cultivo por lote (batch)
• En un sistema continuo con mezcla completa,
las condiciones son uniformes en todo el
reactor, en un equilibrio de mezcla de
nutrientes, organismos y productos.
• La alimentación del sistema es medio nutriente
libre de organismos y, en algunos casos, un
inoculo de organismos reciclados.
• Este método de cultivo continuo, permite a los
organismos crecer en condiciones de estado
estacionario, en la que el crecimiento ocurre a
una velocidad constante y en un ambiente
constante.
 Menor riesgo de contaminación.

Ventajas
Biorreactor de Flexibilidad operacional cuando los
fermentadores se utilizan para distintos
agitación vs productos.

Biorreactor Control mas cercano a la estabilidad

por Batch genética del organismo.

Una mejor coordinación con estadios del

proceso entre los previos y posteriores.
Desventajas

• Improductividad en la operación
del fermentador
• Los fermentadores deben ser
vaciados, limpiados,
esterilizados y recargados antes
de cada fermentación,
operaciones todas esenciales
pero no productivas.
• En un proceso continuo, por el
contrario, una corrida puede
durar semanas o meses.