UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES

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PRÁCTICA N° 9 FOTOSINTESIS
PRACTICE N ° 9 PHOTOSYNTHESIS
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GARCIA SANCHES JHOAN ANDRES 117004405, MENDOZA GUTIERREZ MARIA PAULA
117004413, PAEZ LOPEZ DAYANNA 117004417, DIEGO PARRADO
ESTUDIANTES DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA, FACULTAD DE CIENCIAS
AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS,
KILOMETRO 12 VÍA. SEDE BARCELONA. VILLAVICENCI, META, COLOMBIA.

CORREOS INSTITUCIONALES
maria.paula.gutierrez@unillanos.edu.co
jhoan.andres.sanches@unillanos.edu.co
daianna.paez@unillanos.edu.co
diego.parrado@unillanos.edu.co

RESUMEN
La fotosíntesis es un proceso anabólico el cual hace que las células de las plantas con cloroplastos
(organelos que por su doble membrana se define), el estroma está dentro de los cloroplastos, allí se
encuentran los tilacoides en granas. En la membrana del tilacoide es donde se encuentran las
enzimas que captan la energía de la luz solar necesaria para el proceso de la fotosíntesis, que se
lleva a cabo en dos fases: la lumínica y la oscura. Se realiza la fase de la luz en la membrana del
tilacoide, liberando energía en forma de moléculas de ATP. La fase oscura se produce en el estroma
y sin luz, en este proceso se toma del ambiente dióxido de carbono y el ATP producido en la fase
lumínica para producir glucosa que será almacenada en forma de almidón. Y pues básicamente el
proceso de la fotosíntesis es la transformación de materia inorgánica en orgánica, también
produciendo oxígeno y glucosa, esto gracias a la luz solar y el agua. Esto lo pudimos observar en
nuestra practica de laboratorio; la hoja destapada realizaba su proceso de fotosíntesis y por ello al
aplicar lugol podíamos observar cómo se teñía de negro o azul oscuro por el almidón almacenado
allí.
Palabras clave: lugol, fotosíntesis, tilacoides, dióxido de carbono, anabolismo.
ABSTRACT
Photosynthesis is an anabolic process which causes the cells of plants with chloroplasts (organelles
defined by their double membrane), the stroma is inside the chloroplasts, there are the thylakoids in
grains. In the membrane of the thylakoid is where the enzymes that capture the energy of sunlight
necessary for the process of photosynthesis are found, which is carried out in two phases: light and
dark. The light phase is carried out in the membrane of the thylakoid, releasing energy in the form
of ATP molecules. The dark phase is produced in the stroma and without light, in this process
carbon dioxide and the ATP produced in the light phase are taken from the environment to produce
glucose that will be stored in the form of starch. And, basically, the process of photosynthesis is the
transformation of inorganic matter into organic matter, also producing mainly oxygen, thanks to
sunlight and water. We could observe this in our laboratory practice; the uncovered sheet carried
out its process of photosynthesis and for that reason when applying lugol we could observe how it
was dyed black by the presence of stored starch.
Keywords: Lugol, photosynthesis, thylakoids, carbon dioxide, anabolism.

INTRODUCIÓN
En el laboratorio se realizaron experimentos basados en fotosíntesis, podemos decir que
la fotosíntesis es el proceso que mantiene la vida en nuestro planeta. Las plantas terrestres, las algas
de aguas dulces, marinas o las que habitan en los océanos realizan este proceso de transformación
de la materia inorgánica en materia orgánica y al mismo tiempo convierten la energía solar en
energía química. Todos los organismos heterótrofos dependen de estas conversiones energéticas y
de materia para su subsistencia. Y esto no es todo, los organismos fotosintéticos
eliminan oxígeno al ambiente, del cual también depende la mayoría de los seres vivos de este
planeta. (Ocampo,2014).
Dentro del proceso de fotosíntesis ocurren dos etapas, la primera, llamada etapa foto dependiente,
ocurre sólo en presencia de luz y la segunda, llamada etapa bioquímica o ciclo de Calvin, ocurre de
manera independiente de la luz. Pero antes de comenzar a estudiar ambas etapas es conveniente ver
algunas características de los cloroplastos que permiten la realización de la captación de energía
lumínica. (Curtis,2003).
En los eucariontes, la fotosíntesis se realiza en los cloroplastos, organelos que poseen una
membrana externa y otra interna. La membrana interna rodea una solución densa, el estroma, donde
se encuentran las membranas tilacoides, que tienen forma de sacos aplanados dispuestos en forma
apilada. Las reacciones de la etapa lumínica ocurren en los sacos tilacoides y las que fijan el
carbono, en el estroma. Los sacos tilacoides de los procariontes fotosintéticos pueden formar parte
de la membrana celular, estar aislados en el citoplasma o constituir una estructura compleja de la
membrana interna. (Copyright,2007).
El modelo ondulatorio de la luz permite a los físicos describir matemáticamente ciertos aspectos de
la luz y el modelo fotónico permite otro tipo de cálculos y predicciones matemáticas. Estos dos
modelos ya no se consideran opuestos uno al otro, sino complementarios, en el sentido de que es
necesaria una síntesis de ambos para una descripción completa del fenómeno que conocemos como
luz.(Pascual,2004).
Los sistemas vivos absorben la energía lumínica mediante el uso de pigmentos. Los organismos
fotosintéticos tienen distintos tipos de pigmentos: la clorofila, que se encuentra en los sacos
tilacoides, los carotenoides y las ficobilinas. Existen diferentes tipos de clorofila: la clorofila a, que
colecta energía luminosa y está involucrada en la transformación de energía lumínica en química; la
clorofila b, presente en las plantas y las algas verdes, y la clorofila c de las algas marrones.
(Llana,2002).
Los objetivos de esta práctica fue identificar los diferentes pigmentos implicados en proceso de la
fotosíntesis, también establecer la importancia de la clorofila y otros pigmentos relacionados con la
síntesis de almidon, por medio de la cromatografía, luego logramos reconocer la acción de la luz en
los procesos fotosintéticos de las hojas de una planta recogida en el campus de la univerdad de los
llanos.

MATERIALES
Biológicos:
Hojas frescas de espinaca (Spinaca oleraceae)
Plantas de hojas verdes y consistencia membranosa.
Equipos:
Microscopio
Baño María
Reactivos:
Etanol al 95%
Mezcla de 9 partes de éter de petróleo y una de acetona.
Solución de almidón al 10%
Solución de Lugol
Vidriería y otros:
Pinzas
Tubos de ensayo
Tira de Papel filtro
Vasos de Precipitado de 100 mL
Cajas de Petri
Morteros
Papel de cromatografía
PROCEDIMIENTO
I. SEPARACIÓN DE PIGMENTOS
 Tome una porción de hojas frescas de espinacas, retire las nervaduras mayores. Macérelas
en un mortero humedeciéndolas con un poco de etanol hasta obtener una cierta cantidad de
extracto verde.
 Obtenga una tira de papel de cromatografía con extremos en punta que pueda entrar
fácilmente en un tubo de ensayo.
  En el tubo de ensayo coloque 2 ml de una mezcla de 9 partes de éter de petróleo y 1 de
acetona.
 A dos cm del extremo en punta de papel, coloque una fina gota de del extracto de espinaca
que acaba de preparar y espere a que seque.
 Una vez esté seca la gota, introduzca la tira de papel en el tubo de ensayo que contiene la
mezcla de éter de petróleo-acetona.
 Arréglela de tal forma que solo entre en el líquido hasta 1 cm del papel de filtro.
 Asegure el extremo superior de la tira en la boca del tubo de ensayo (use un clip)
 Observe como los pigmentos se van desplazando a lo largo d ela tira. Los diferentes
pigmentos tienen solubilidades diferentes y migran a diferentes distancias.
 Cuando termine la cromatografía saque la tira de papel de filtro, déjelo secar y localice las
manchas pertenecientes a cada pigmento.
 En el solvente que se utiliza para la práctica los carotenos se mueven más rápidamente, le
siguen las xantofilas y luego las clorofilas a y b.

La clorofila es de color verde azulado, la clorofila b es de color verde amarillento, las xantofilas de
color amarillo y los carotenos variados.

NECESIDAD DE LA LUZ EN LA FOTOSÍNTESIS

 Ocho días antes de la práctica de laboratorio elija en su casa una hoja de plantas verdes y
consistencia membranosa.
 Sin desprender las hojas de la planta cubra un grupo totalmente con papel craft, asegúrese
que este quede bien adherido a la hoja.
 El resto de las hojas déjelas expuestas a luz.
 El día de la práctica desprenda todas las hojas sometidas a el tratamiento, así como 5 hojas
no tratadas y llévelas al laboratorio.
 En el laboratorio retire el papel y distinga las hojas de cada tratamiento.
 Tome las hojas que fueron tapadas y déjelas hervir en agua por varios minutos hasta que se
marchiten.
 Hiérvalas nuevamente en un recipiente que contenga 300mL de alcohol etílico al 95%.
Hierva al baño María. NO UTILICE FUEGO DIRECTO, PORQUE EL ALCOHOL ES
INFLAMABLE.
 Cuando las hojas hayan perdido sus colores, sáquelas con la ayuda de una pinza con mucho
cuidado, ya que durante el proceso la hoja se hace frágil.
 Luego sumérjalas en una caja de Petri que contenga solución acuosa de lugol.
 En un tubo de ensayo que contenga 5 mL de solución de almidón al 10%, añada unas gotas
de solución de lugol. Compare el color con los colores que se han obtenido en la hoja.
RESULTADOS

Carotenos

Xantofilas

Clorofila B

Clorofila A

Figura N°1 Cromatografía

Hoja de espinaca maceradas con ayuda del etanol (como liquido) para la prueba de
cromatografía de la hoja de espinaca, pudimos observar en color anaranjado claro en los
carotenos en la parte superior de nuestro tubo de ensayo, luego en orden descendiente
obtuvimos xantofilas(amarillo), clorofila B (verde claro) y por último, en la parte inferior clorofila
A (verde). Los líquidos que contiene el tubo de ensayo son 9 partes de éter de petróleo y 1 de
acetona.
Figura N°2 hoja destapada Figura N°2.1 hoja tapada
En la figura 2 tenemos la hoja destapada, lo que ocurre aquí es que al tener presencia de almidon
(macromolécula compuesta por dos polímeros distintos de glucosa, la amilosa y el amilo pectina)
al estar realizando normalmente el proceso de la fotosíntesis esta hoja vemos que se tiñe de color
negro al entrar en contacto con el lugol. A diferencia de la figura 2.1 que es la hoja tapada, no
tenemos presencia de glucosa (almacenada en forma de almidon), esto nos indica que no está
realizando el proceso fotosintético y por ello observamos como la hoja se tiñe totalmente de lugol.

Figura N°3 prueba de presencia de glucosa

En este tubo de ensayo lo que hacemos es una prueba en la cual utilizamos una solución de
almidon al 10% + solución de lugol, la cual nos da como resultado una tinción de color
negro por la presencia de una solución de almidon, esto lo hacemos con el fin de luego
poder identificar qué es lo que ocurre en las hojas del procedimiento anterior.

DISCUSIÓN
Cuando la iluminación es muy baja dentro de la fotosíntesis es muy probable que la
respiración sea mayor que la de la fotosíntesis, lo que quiere decir que libera más CO2 del
que necesita para dicho proceso. Cuando se aumenta la luminosidad se puede llegar a un
punto llamado punto descompensación donde la diferencia de CO2 producido y Glucosa
es 0. Por último, al exponer a la planta a una luminosidad mucho más intensa esta presenta
una acumulación de producto fotosintético (Müller,1964).

Al momento de ser observada nuestra hoja destapada previamente preparada con todo el
procedimiento de la guía, pusimos reactivo de lugol este presentó en el caso de la parte
lumínica una coloración negra/azul oscuro apenas visible en las áreas exteriores de la
muestra de la hoja lo cual significa que esta tiene presencia de glucosa almacenada
en forma de almidon en su estructura, gracias al proceso de la fotosíntesis que venía
presentando antes de ser arrancada del campus de la universidad de los llanos.

 Por otra parte, la muestra de la hoja privada de luz no presentó ninguna coloración, lo
que indica la falta de almidón y por lo tanto del proceso de fotosíntesis, esto debido a que la
radiación lumínica la energía que requieren las plantas para llevar a cabo dicho proceso.
Durante el proceso la energía lumínica pasa a ser energía química (la que se encuentra en
los enlaces atómicos) lo que participa directamente en la producción de azúcares y de
celulosa (Teresa, 2005).
Nuestra muestra de hoja tapada al ponerle lugol, se tiñe absolutamente del color del lugol
sin adquirir ninguna tonalidad distinta; sin ponerse negra como la hoja destapada esto se
debe a que no hay presencia de almidon en esta hoja ya que no estuvo realizando su
proceso fotosintético correspondiente, porque fue tapada con papel crepe cinco días antes y
esto impidió que la hoja realizara la fotosíntesis.

La IUPAC define a la cromatografía, como un método físico de separación mediante el cual

los componentes de una mezcla se separan por distribución de dos fases: una estacionaria y
otra móvil. El proceso de separación de cada sustancia es el resultado de un equilibrio entre
dos conjuntos de fuerzas contrapuestas: las de propulsión, promovidas por el flujo de la
fase móvil y las fuerzas de retención, originadas por la fase estacionaria. (Ramirez,2004)
Lo que nosotros pudimos observar en la espinaca maserada con etanol fueron carotenos en
un color naranja, xantofilas de color amarillo, clorofila B verde y por último la clorofila A
en un verde más intenso, y esto obtuvimos mediante implementos como el tubo de ensayo,
papel filtro, etanol, espinaca y 9 partes de éter de petróleo y una de acetona.
CUESTIONARIO
 ¿Puede la misma hoja en la sombra realizar fotosíntesis con la misma intensidad que
lo hace cuando está expuesta a la luz solar directamente?

La fotosíntesis es un proceso mediante el cual las plantas convierten la energía de la luz

solas en energía química en la forma de azucares. Estos azucares son usados por las plantas
para crecer y funcionan de la misma manera como el alimento en animales y humanos.

Las plantas crecen en ambientes donde la disponibilidad de la luz fluctúa rápida y

drásticamente, por ejemplo, a raíz de las sombras de las nubes que pasan más arriba o las
hojas de los arboles más altos que se están moviendo por el viento. Las plantas entonces
tienen que ajustarse rápidamente la fotosíntesis para maximizar la captura de energía a la
vez deben evitar que el exceso de energía provoque daños. (venema,2010)

Un equipo llamado Ari Korfeld u Joseph Berry de Carnegie, descubrieron que una proteína
llamada KEA3, es crucial para ajustarse inmediatamente de la eficiencia de la fotosíntesis
en condiciones de fluctuación lumica. La fotosíntesis toma lugar en etapas. En la primera
etapa, la planta absorbe l< luz de forma de fotones y la usa para producir moléculas de
almacenamiento energético, que luego son usadas para dar energía a la segunda etapa en la
cual la planta fija carbono desde el aire formando azucares basados en carbonos tales como
sucosa y almidón. La KEA3 está implicada en la primera etapa.(jonikas,2000)

Bajo plena luz solar, la energía en exceso absorbía desde los fotones es disipada
intencionalmente por la planta como calor. Pero si la luz incidente es bloqueada por una
nube, la planta debe de cambiar su mecanismo de disipar los fotones en exceso como calor
a recolectar tantos fotones como le sea posible. KEA3 actúa como un acelerador del cambio
del modo que adapta la luz solar plena.(Jonikas,2013)

 ¿En qué consisten las reacciones luminosas y oscuras de la fotosíntesis?

 
Fase luminosa
La fase luminosa necesita luz para producir moléculas de energía orgánica (ATP y
NADPH). Esta fase la inician los pigmentos de color, principalmente clorofilas de color
verde.
Durante la fase luminosa de la fotosíntesis, la luz solar capturada a través de una serie de
reacciones que involucran a la clorofila química. Esto da como resultado la síntesis de dos
compuestos químicos de alta energía: ATP y NADPH. La energía química de este último es
retenida por electrones que pueden ser transferidos fácilmente a otros compuestos. Este
conjunto de reacciones requiere agua (H2O) de la cual se libera oxígeno durante el proceso.
El ATP y el NADPH se utilizan posteriormente para producida por glucosa a partir del
CO22 la siguiente fase de la fotosíntesis, la fase oscura.
Fase oscura
La fase oscuro utilizada en energía orgánica (ATP y NADPH). El ATP proporciona la
energía mientras que el NADPH proporciona los electrones necesarios para fijar el CO2
(dióxido de carbono) en los carbohidratos. Este ciclo de fijación del carbono también se
llama ciclo de cal, y ocurre en calvin l estroma.
La reacciones oscuras no reaccionaran si las plantas son privadas de luz durante demasiado
tiempo ya que las reacciones iniciales del proceso dependen directamente de la absorción
de luz por parte de la planta.

 ¿Cúales son las características de las plantas C3, C4 y CAM?

PLANTAS C3

Se llama así porque el bióxido de carbono primero se incorpora en un compuesto de

carbono-3 y mantiene las estomas abiertas durante el día. Aquí la fotosíntesis se lleva a
cabo a través de la hoja,

PLANTAS C4

Se llama C4 porque el CO2 primero es incorporado a un compuesto de carbono- 4; se

lleva a cabo en las células internas y mantiene las estomas abiertas durante el día,
requiere de una anatomía especializada llamada "Anatomía de Kranz". Es más rápida
que la C3 bajo altas condiciones de luz y temperatura ya que el CO2 es transportado
directamente al rubisco impidiendo que tome oxígeno y por lo tanto que pase por la foto
respiración.

PLANTAS CAM

Se llama así en honor a la primera familia de plantas en las que se descubrió "Crassulaceae"
y porque el CO2 es almacenado en forma de ácido antes de ser usado en la fotosíntesis. Los
estomas se abren por las noches cuando es más difícil que el agua se evapore y por lo
general están cerrados durante el día, es más eficiente que la C3, ya que las estomas se
abren durante la noche y si las condiciones son demasiado áridas pueden mantener las
estomas cerradas durante el día y la noche el Oxígeno que tendría que ser liberado en la
fotosíntesis es usado para la respiración y el CO2 que debería liberarse de la respiración es
usado para la fotosíntesis.( Ramirez,2004)
PLANTAS CAM, C3, C4
 Muchas plantas suculentas utilizan el mecanismo fotosintético CAM, que prioriza la
economía del agua tratando de no poner barreras a la economía del carbono. Al revés
que la mayoría de las plantas comunes de ciclo de carbono 3 o carbono 4 que mantienen
abiertos los estomas durante el día para permitir la entrada del gas dióxido de carbono
con fines fotosintéticos, las plantas que utiliza la vía CAM mantienen los estomas
cerrados durante las horas de luz.

Este proceso de la vía CAM lo utilizan las plantas para suministrar la retención de agua
por que la apertura de los estomas durante la noche permite que las plantas ahorren
agua por disminución de las pérdidas a través la transpiración, porque en el período
nocturno las temperaturas son más frescas o inclusive muy frías. La humedad relativa
durante la noche es más alta que durante el día. Se tiene en cuenta la eficiencia en el uso
de agua, que es la relación entre los moles de agua transpirada con la cantidad de moles
de CO2 fijado en la noche. Esta eficiencia es superior a la de las plantas de C3 y C4.

Esta forma de fijar el dióxido de carbono -CO2- durante la fotosíntesis permite

diferenciarlas de la mayoría de las plantas superiores que son llamadas de vía C3.
( Müller,1964)
PLANTAS C3

Se llama así porque el bióxido de carbono primero se incorpora en un compuesto de

carbono-3 y mantiene las estomas abiertas durante el día. Aquí la fotosíntesis se lleva
un cabo a través de la hoja,

PLANTAS C4

Se llama C4 porque el CO2 primero está incorporado a un compuesto de carbono-4; Se

lleva un cabo en las células internas y mantiene las estomas abiertas durante el día,
requiere una anatomía especializada llamada "Anatomía de Kranz". Es más rápido que
el C3 bajo altas condiciones de luz y temperatura ya que el CO2 es transportado
directamente al rubisco impidiendo que tome oxígeno y por lo tanto que pase por la foto
respiración.

PLANTAS CAM

Se llama así en honor a la primera familia de plantas en las que descubrió "Crassulaceae" y
porque el CO2 se almacena en forma de ácido antes de ser usado en la fotosíntesis. Los
estomas se abren por las noches cuando es más difícil que el agua se evapore y por lo
general están cerrados durante el día, es más eficiente que la C3, ya que los estomas se
abren durante la noche y si las condiciones son demasiado áridas pueden mantener las
estomas cerradas durante el día y la noche el Oxígeno que debería ser liberado en la
fotosíntesis es usado para la respiración y el CO2 que debería ser liberado de la respiración
es usado para la fotosíntesis.(Smth,2000)
 PLANTAS CAM, C3, C4

Muchas plantas suculentas utilizan el mecanismo fotosintético CAM, que prioriza la

economía del agua tratando de no poner barreras a la economía del carbono. Al revés
que la mayoría de las plantas comunes de ciclo de carbono 3 o carbono 4 que tienen
acceso abierto a los estomas durante el día para permitir la entrada del gas dióxido de
carbono con finos fotosintéticos, las plantas que utilizan la vía CAM a los estomas
cerrados durante las horas de luz.

Este proceso de la vía CAM lo que utiliza las plantas para proporcionar la retención de
agua por la apertura de los estomas durante la noche permite que las plantas ahorren
agua por la disminución de las pérdidas a través de la transpiración, porque en el
período nocturno las temperaturas son más frescas o inclusive muy frías. La humedad
relativa durante la noche es más alta que durante el día. Se tiene en cuenta la eficiencia
en el uso de agua, que es la relación entre los moles de agua transpirada con la cantidad
de moles de CO2 fijado en la noche. Esta eficiencia es superior a la de las plantas de C3
y C4.

Esta forma de fijar el dióxido de carbono -CO2- durante la fotosíntesis permite

diferenciarlas de la mayoría de las plantas superiores que son llamadas de vía C3.
(Llana,2002)

BIBLIOGRAFIA

Ocampo,2014 biosintesis
Curtis,2003 biologia 4

Copyright,2007 practica de laboratorio, santillanas.

Llana,2002 fotosíntesis artificial

Pascual,2004 isaac asimow

Müller,1964 ciencias naturales biología