PRÁCTICA 4B

CUANTIFICACIÓN DE PLOMO POR LA TECNICA DE BAMBACH Y

BURKEY

Marco Teórico
En el Perú, desde antes de los años cincuenta del siglo pasado, la preocupación por
monitorear la salud del trabajador expuesto a plomo con indicadores biológicos de exposición
ha sido constante. Entonces el plomo en sangre ya era útil, aún cuando su método analítico
(Ditizona) no era suficientemente fidedigno. Por entonces, el diagnóstico se complementaba
con indicadores que hoy están en desuso, como reticulocitosis, volumen globular de
hematíes, hemoglobina corpuscular media, punteado basófilo de hematíes y otros; de ellos
aún usamos con éxito la hemoglobina (Hb). Hoy existen otros IBE de uso más o menos común
en la monitorización del trabajador expuesto. Uno de los más importantes continúa siendo el
Pb-S analizado ahora por absorción atómica, pues nos da una visión bastante directa de
exposición reciente y de carga corporal. El antiguo BEI hemoglobina y el nuevo ZPP nos
informan del daño bioquímico producido por la exposición. Consideraciones económicas y la
disponibilidad de laboratorios calificados algunas veces entorpecen la indicación de estos
BEIs; sin embargo esas preocupaciones nunca deben ser antepuestas a la salud del
trabajador.

Parte Experimental
Objetivos de la Práctica
• Adquirir destreza para extraer y cuantificar el plomo teniendo en cuenta las
medidas de bioseguridad.
• Cuantificar espectrofotométricamente mediante el método de Bambach y
Burkey la cantidad de plomo presente en una muestra de agua del río Ucayali.

Reactivos, materiales y equipos

1. Reactivos

(1) Reactivos
• Rojo fenol
• Citrato NH4
• NH4OH ph (7-8)
• CNK 10%

pág. 1
 • Hidroxilamina 20%
• Ditizona extractora
• Sol. Buffer ph 3.4
• Ditizona estándar

• NH4+ cianurada
2. Materiales

o Pipetas de 1,5 y 10 mL
o Peras de separación de 100 mL

3. Equipos

o Espectrofotómetro UV Visible

NOMBRE DEL ENSAYO: TECNICA DE BAMBACH& BURKEY

FUNDAMENTO
Este método se basa en la reacción del Pb (II) con la ditizona (difeniltiocarbazona)
para formar un complejo de ditizonato plúmbico de color rojo, el cual se extrae con
cloroformo, en un medio ácido (pH 7-8), cuya intensidad se cuantifica
colorimétricamente a una longitud de onda de 520 nm.

pág. 2
TÉCNICA OPERATORIA:

Primera extracción:

- Llevar la muestra a la pera de bromo(20 o 25ml), agregar III gotas de rojo de

fenol, 15ml citrato de amonio 40%, 0.9 mL NH4OH concentrado, 5mL KCN
10%, 1ml hidroxilamina clorhidrato 20% y finalmente 5 mL de ditizona
extractora. Agitar y extraer la parte clorofórmica alcalina

Segunda extracción:

• Al extracto clorofórmico adicionar 50ml de sol. Buffer (pH 3.4)

• Agitar y extraer el extracto acuoso ácido.

Tercera extracción ( Purificacion):

- Al extracto acuoso ácida, adicionar 5ml de ditizona estándar, 7ml de sol.

Cianurada de amonio. Agitar vigorosamente.
- Leer a 520 nm(espectrofotómetro)

pág. 3
pág. 4
pág. 5
Mecanismo de reacción y ecuación química balanceada
La disolución de ditizona en tetracloruro de carbono o cloroformo cambia su color
verde por el rojo cuando se agita con otra disolución neutra o alcalina que contenga
Pb2+. Por lo que hay formación de un complejo coloreado de Ditizonato de Plomo, en
medio básico y se cuantifica por espectrofotometría a 520 nm.
Se origina un quelato de acuerdo con la reacción:

Esta forma de complejo, donde el Pb se enlaza con el azufre y al N, la presentan con

ditizona los cationes que tienen alta afinidad por el sulfuro.

Numerosos cationes, especialmente Ag+, Cu+2, Hg+2, Cd+2 y Zn+2, reaccionan con la
ditizona, pero su inestabilidad se evita con la adición de KCN, con lo que la reacción
resulta casi específica para el plomo.

REACCIÓN DE EXTRACCIÓN:

pág. 6
Precauciones:

• A la muestra problema se añade Citrato de amonio para evitar la precipitación

de hidróxidos metálicos y la disolución de fosfatos.
• Se emplea el hidróxido de amonio, con la finalidad de crear el medio básico
para la reacción del indicador rojo de fenol.
• Se añaden iones CN- para evitar la formación de complejos coloreados de Bi,
Sn+2 y Tl+ con la ditizona.
• Se emplea el clorhidrato de hidroxilamina para evitar la oxidación de la ditizona
.

Resultados
Stándard Pp Absorbancia
m
1 2 0.03
2 3 0.07
3 4 0.11
4 5 0. 15

Absorbancia muestra #X : 0.737

pág. 7
Cálculos:

Reemplazando en: Y= 0.04x - 0.05

Calcule Ud. el resultado que la concentración para 0.737 de absorbancia.

Discusión

Conclusiones

Cuestionario

1. Explique la función de cada reactivo en la técnica.

Reactivo Función

Citrato de amonio 40%

KCN 10%

Ditizona 16 mg% en CHCl3

Rojo de fenol

Hidroxilamina clorhidrato 20%

pág. 8
 Hidróxido de amonio 20%

2. Valores normales y tóxicos de plomo

Valores Normales de plomo

Valores tóxicos de plomo

o Según la Organización Mundial de la Salud

o Según el Center of Disease Control de los Estados Unidos

3.- Indique Ud. la tecnica espectrofotometrica de absorcion atomica para el

plomo en agua y plomo en sangre.
4.- Señale cual es el límite de detección y cuantificación de la técnica de
Bambach y Burkey para la determinación del plomo en agua de rio.
5.- Señale Ud. que celda utilizaria en la técnica de Bambach y Burkey para la
determinación del plomo en agua de rio.
6.- Indique ud. una prueba ditizonometrica figura en alguna farmacopea
reciente o vigente.
7.- Indique Ud. para que realizamos la lectura del blanco de reactivo (en la
muestra problema y estándares) y detállelo, correspondiente a la técnica de
Bambach y Burkey para la determinación del plomo en agua de rio.
8.- Señale Ud. el procedimiento del uso de espectrofotometro UV-Visible desde
que se enciende, se hace la lectura de la absorbancia y se apaga.
9.- Señale como se realiza la calibración dentro del laboratorio, del
espectrofotometro UV-Visible.
10.- Indique las pruebas toxicologicas que se pueden realizar en el
espectrofotometro UV-Visible.

Referencias Bibliográficas

1. Química Analítica. D.A. Skoog, D.M. West y F.J. Holler .6ª Ed. Mc Graw Hill,
1995.

pág. 9
 2. Guatelli M. Manual Práctico de Química Toxicológica. Editorial Universitaria.
Macchi Hnos. Buenos Aires, 1958.
3. Tello L, Jave J, Guerrero J. Análisis de cuantificación de plomo en suelos de
parques recreacionales de la ciudad de lima - Perú. Ecología Aplicada, 17(1),
2018.
4. Ministerio del ambiente. Estándares de calidad ambiental. disponible en:
http://www.minam.gob.pe/calidadambiental/estandares-de-calidad-ambiental/
5. Organización mundial de la salud. Intoxicación por plomo y salud. disponible
en: https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/lead-poisoning-and-
health
6. Burriel F, Lucena F, Arribas S, Hernández J. «Química analítica de los
cationes: Plomo». Química analítica cualitativa (18ª edición edición).
Thomson. 2006; pp. 426-435.

pág. 10