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PREINFORME DE LABORATORIO
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PREINFORME DE LABORATORIO

BIOQUIMICA PRACTICA
PREINFORME DE LABORATORIO No.1
HIDROLISIS Y DIALISIS DE POLISACARIDOS
Claudia Sofia Guevara Apráez
Geraldine P. Guerrero, Isabella Santacruz, Ammy N. Melo, Laura E. Vallejo
Facultad de Medicina - Primer semestre
Correos: geraldinepgm@gmail.com, isabellasantacruz26@gmail.com,
nicollemelo345@gmail.com, lauvallejo03@gmail.com

Objetivos De La Practica

Objetivo General

• Identificar y comprender los diferentes procesos planteados en la práctica, para


su correcto desempeño dentro del laboratorio.

Objetivos específicos

• Identificar cuáles son los reactivos necesarios, sus características y manejo, para
la realización de los procedimientos estipulados.
• Estudiar lo que acontece en cada procedimiento y como esto influye en el
aspecto médico.
• Comparar lo aprendido en teoría junto con la práctica, para analizar así, la
complementariedad de ambos.
• Analizar cómo es el funcionamiento de la hidrolisis, sus respectivos procesos y
resultados.
• Observar cómo es el funcionamiento de la hidrolisis, sus respectivos procesos y
resultados.
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FLUJOGRAMA
HIDROLISIS
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DIALISIS DE POLISACARIDOS

TOXICIDAD DE REACTIVOS:
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• Reactivo de Lugol:

Pictograma de peligro: Peligroso para el cuerpo (mutágeno, cancerígeno)


Color de clasificación: Azul.

Palabra de advertencia: Peligro


Indicaciones de peligro: H372 Puede provocar daño a los órganos por exposición
prolongada o repetida.
Prevención: P260 No respirar polvo/humo/gas/niebla/vapores/aerosol. P264 Lavar la
piel completamente después de manejarlo. P270 No comer, beber ni fumar mientras se
usa este producto. P314 Obtener atención/asesoramiento médico si no se siente bien.
Eliminación: P501 Eliminar el contenido y contenedor de acuerdo con las indicaciones
de la Sección 13. 1

• Reactivo de Fehling:

Pictograma de peligro: Corrosivo y peligro para el medio ambiente.


Color de clasificación: Azul y Blanco.

Palabra de advertencia: Peligro

Indicaciones de peligro: H318 Provoca lesiones oculares graves, H410 Muy tóxico para
los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos

Prevención: P273 Evitar su liberación al medio ambiente. P280 Llevar guantes/gafas de


protección.
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Respuesta: P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar


con agua cuidadosamente durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto cuando
estén presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado. P310 Llamar
inmediatamente a un CENTRO DE TOXICOLOGĺA/médico. P391 Recoger el vertido. 2

• Reactivo de Benedict
Pictograma de peligro: Irritante y peligro para el medio ambiente.
Color de clasificación: Azul.

Palabra de advertencia: Atención

Indicaciones de peligro: H319 Provoca irritación ocular grave. H411 Tóxico para los
organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos.

Prevención: P273 Evitar su liberación al medio ambiente. P280 Llevar guantes/gafas de


protección.

Respuesta: P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: aclarar


cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y
resulta fácil. Seguir
aclarando.

Eliminación: P501 Eliminar el contenido/el recipiente de conformidad con la normativa


local, regional, nacional o internacional.

• Ácido clorhídrico concentrado


Pictograma de peligro: Corrosivo e Irritante.
Color de clasificación: Blanco y azul.
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Palabra de advertencia: Peligro.


Indicaciones de peligro: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones
oculares graves; H335: Puede irritar las vías respiratorias.
Prevención: P260: No respirar los vapores; P264: Lavarse las manos
concienzudamente tras la manipulación; P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de
protección; P271: Utilizar únicamente en exteriores o en un lugar bien ventilado.
Respuesta: P310: Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACION
TOXICOLOGICA o a un médico; P321: Se necesita un tratamiento específico llevar
esta etiqueta; P363: Lavar las prendas contaminadas antes de volver a usarlas; P301 +
P330 + P331: EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito;
P303 + P361 + P353: EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitarse
inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con agua o ducharse; P304
+ P340: EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al exterior y
mantenerla en reposo en una posición confortable para respirar; P305 + P351 + P338:
EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua
durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir
aclarando; P312: Llamar a un CENTRO de información toxicológica o a un médico en
caso de malestar. 3
• HCl (15%)
Es un líquido fumante con un color entre incoloro a amarillo claro, con olor sofocante e
irritante, puede detectarse a concentraciones comprendidas entre 1 a 5 p.p.m.
Pictograma de peligro: Corrosivo (1) e Irritante (2).
Color de clasificación: Blanco y azul.
1. 2. 3.

Palabra de advertencia: Peligro.


Indicaciones de peligro: H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares
graves; H335: Puede irritar las vías respiratorias.
Prevención: P260: No respirar los vapores; P264: Lavarse las manos concienzudamente
tras la manipulación; P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección; P271:
Utilizar únicamente en exteriores o en un lugar bien ventilado.
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Respuesta: P310: Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACION


TOXICOLOGICA o a un médico; P321: Se necesita un tratamiento específico llevar esta
etiqueta; P363: Lavar las prendas contaminadas antes de volver a usarlas; P301 + P330 +
P331: EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito; P303 +
P361 + P353: EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitarse
inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con agua o ducharse; P304 +
P340: EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al exterior y mantenerla
en reposo en una posición confortable para respirar; P305 + P351 + P338: EN CASO DE
CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios
minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando; P312:
Llamar a un CENTRO de información toxicológica o a un médico en caso de malestar. 4
• NaOH
El Hidróxido de Sodio, también conocido como sosa cáustica es un sólido blanco
cristalino sin olor que absorbe humedad del aire (higroscópico). El hidróxido de sodio es
muy corrosivo, generalmente se usa en forma sólida o como una solución de 50%. Es
usado en la industria (principalmente como una base química) en la fabricación de papel,
tejidos, y detergente.
Pictograma de peligro: Corrosivo.
Color de clasificación: Blanco.

Palabra de advertencia: Peligro.


Indicaciones de peligro: H290 Puede ser corrosivo para los metales, H314 Provoca
quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves
Prevención: P233 Mantener el recipiente herméticamente cerrado, P280 Llevar
guantes/gafas de protección.
Respuesta: P303+P361+P353 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo):
Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua [o ducharse].
P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar con agua
cuidadosamente durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto cuando estén
presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado. P310 Llamar
inmediatamente a un CENTRO DE TOXICOLOGĺA/médico. 5
• Ácido sulfúrico concentrado.
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Pictograma de peligro: Corrosivo


Color de clasificación: Azul

Palabra de advertencia: Peligro


Indicaciones de peligro: H314 Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones
oculares graves.
Prevención: P260 No respirar el humo, el gas, la niebla, los vapores o el aerosol. P264
Lavarse cuidadosamente tras la manipulación. P280 Usar guantes, ropa y equipo de
protección para los ojos y la cara.
Respuesta: P301 + P330 + P331 EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar inmediatamente
a un CENTRO DE TOXICOLOGÍA o a un médico. NO provocar el vómito. P303 +
P361 + P353 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitarse
inmediatamente las prendas contaminadas. Enjuagar la piel con agua o ducharse. P363
Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. P304 + P340 EN CASO DE
INHALACIÓN: Transportar a la persona al aire libre y mantenerla en una posición que
le facilite la respiración. P305 + P351 + P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS
OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de
contacto, cuando estén presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado.
Almacenamiento: P405 Guardar bajo llave.
Eliminación: P501 Eliminar el contenido/recipiente conforme a la reglamentación
nacional/ internacional. 6

Preguntas planteadas en la guía.

• Consulte el proceso de diálisis renal (como se realiza y para que se usa)

Es un tratamiento para personas que tienen insuficiencia renal. La insuficiencia renal es


el quinto estadio de la insuficiencia renal crónica (IRC). Los riñones sanos eliminan los
desechos de la sangre y el exceso de líquido del cuerpo. Sin embargo, cuando los
riñones no funcionan bien, estos desechos y el exceso de líquido pueden acumularse en
la sangre y causar problemas de salud. Un mal funcionamiento renal puede producir:
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✓ náuseas
✓ dificultades para dormir
✓ falta de apetito
✓ pérdida de energía
✓ hipo
✓ piel seca, picazón
✓ pérdida de peso
✓ períodos menstruales irregulares
✓ calambres musculares, especialmente de noche
✓ hinchazón
✓ anemia (recuento bajo de células sanguíneas)
✓ problemas respiratorios

¿Cómo se realiza?

Se coloca en el abdomen un tubo flexible llamado catéter mediante un procedimiento de


cirugía menor. El catéter permite que usted se conecte fácilmente a un tubo especial que
posibilita el ingreso de dos a tres cuartos de líquido de lavado dentro del abdomen. Este
líquido de lavado se denomina dializado. El dializado tarda aproximadamente 10
minutos en llenar el abdomen. Al finalizar el llenado, el catéter se tapa para que no haya
pérdidas. La pared del abdomen (denominada membrana peritoneal) actúa como filtro
natural. Permite que el exceso de líquido y los residuos que se encuentran en la sangre
pasen al líquido de lavado. Al mismo tiempo, la pared del abdomen impide la salida de
elementos que son importantes y necesarios para el cuerpo como es el caso de los
glóbulos rojos y los nutrientes. Para ser efectivo, el dializado debe permanecer en el
abdomen dos o más horas, según la contextura física de la persona y la cantidad de
residuos a extraer. Ese tiempo se denomina tiempo de permanencia. Luego de
transcurrido este lapso, se extrae el líquido de lavado del cuerpo y se coloca en una
bolsa vacía. La bolsa se desecha. Después se repite el proceso de ingreso y extracción
una determinada cantidad de veces al día utilizando un dializado nuevo. El proceso de
sustitución de las bolsas de dializado se denomina intercambio. La diálisis peritoneal
(DP) puede realizarse en el hogar, en el trabajo o mientras se está de viaje. 7
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• Consulte y describa cómo se produce la hidrólisis de glucógeno y almidón


en el ser humano
Hidrolisis de Glucógeno:

El glucógeno es un polímero ramificado de glucosa que contiene una pequeña cantidad


de fosfato y glucosamina, en el cuerpo humano, el glucógeno es almacenado
principalmente en el hígado y el músculo esquelético que suministra glucosa al torrente
sanguíneo durante los períodos de ayuno y a las células musculares durante la
contracción muscular.

La síntesis de glucógeno requiere la acción coordinada de varias enzimas. La glucosa


ingresa a las células a través de transportadores de glucosa, siendo fosforilada a glucosa
6-fosfato por las isoenzimas hexoquinasa. El siguiente paso es la isomerización de
glucosa 6-fosfato en glucosa 1-fosfato por la fosfoglucomutasa-1. Luego, la uridina 5ʹ-
difosfato (UDP) -glucosa pirofosforilasa cataliza la formación de UDP-glucosa a partir
de glucosa 1-fosfato. UDP-glucosa es el donante inmediato de glucosa para la
construcción de glucógeno. La glucogenina inicia la síntesis de glucógeno por
autoglucosilación que transporta la glucosa desde la UDP-glucosa a sí misma y forma
una cadena lineal corta de alrededor de 10 a 20 restos de glucosa. La elongación de esta
secuencia inicial de glucógeno es catalizada por la glucógeno sintasa que transfiere un
resto glucosilo de UDP-glucosa a la cadena de glucógeno en crecimiento,
proporcionando los enlaces α-1,4-glucosídicos entre los residuos de glucosa. La enzima
ramificadora introduce puntos de ramificación en la partícula de glucógeno, creando
enlaces glucosídicos α-1,6 a intervalos regulares. La laforina y la malina son proteínas
de función indefinida en los seres humanos que influyen en el ensamblaje del
glucógeno. La degradación del glucógeno tiene lugar tanto en el citoplasma como en el
interior de los lisosomas. En el citosol, la descomposición del glucógeno se logra
mediante la acción coordinada de dos enzimas, la glucógeno fosforilasa, que libera
glucosa 1-fosfato al desenredar los enlaces α-1,4-glucosídicos, y la enzima
desramificante del glucógeno que libera los puntos de ramificación liberando glucosa
libre. La glucosa 1-fosfato derivada del glucógeno en el citosol puede isomerizarse en
glucosa 6-fosfato que se desfosforila a glucosa libre por la glucosa 6-fosfatasa para que
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la glucosa salga de la célula a través de transportadores de glucosa. En los lisosomas, la


descomposición del glucógeno se logra mediante la enzima lisosomal ácida α-
glucosidasa o maltasa ácida. 8

Hidrolisis del almidón:

La hidrólisis del almidón es el paso inicial para obtener los azúcares que se utilizan en la
fermentación. Este proceso puede realizarse por vía ácida o enzimática. El proceso de
hidrólisis enzimática consiste en romper las moléculas de almidón hasta obtener glucosa
utilizando dos enzimas, la α-amilasa y luego una amiloglucosidasa (AMG). La glucosa
obtenida es el sustrato en la etapa posterior de fermentación (Castaño, et. al.,2011).

La licuefacción consiste en la hidrólisis parcial del almidón a dextrinas, se utiliza la


enzima α-amilasa que se caracteriza por su termo-estabilidad (Wiseman, 1985). Para la
sacarificación se usan las AMG, estas enzimas inician la hidrólisis de las dextrinas en
los extremos no reductores de la molécula por las uniones α-1,4, así como las uniones α-
1,6 originando dextrinas, maltosa y progresivamente avanza hasta liberar glucosa; la
temperatura óptima debe oscilar entre los 60 ºC y 75 ºC (Meléndez, 2002).

Una vez obtenidos los azúcares a partir del almidón, estos se convierten a etanol por
medio de una fermentación anaerobia. Para que el proceso de fermentación alcohólica
sea lo más eficiente posible, es necesario controlar una serie de aspectos tales como:
efecto del oxígeno, nutrientes, temperatura, pH, concentración de la glucosa y efecto del
etanol hacia las enzimas. 9

• ¿Si la muestra fuera celulosa y no almidón se tendría los mismos resultados


de la hidrólisis ácida al confrontarla con los reactivos de reconocimiento?

Tanto la celulosa como el almidón son polisacáridos, la celulosa está compuesta


exclusivamente de glucosa y el almidón está compuesto fundamentalmente por glucosa.

El almidón consta de dos ingredientes: amilosa y amilopectina. La amilosa es una


cadena lineal larga de unidades de glucosa -D - (+) - unidas por la asociación glicosídica
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C1-C4 (enlace longitudinal). La celulosa, por otro lado, es un polisacárido de cadena


lineal con unidades de β-D-glucosa unidas por un enlace glicosídico C1-C4 (enlace β).

Es posible que la celulosa no tenga los mismos resultados que el almidón, esto debido a
que la celulosa pura es insoluble mientras que el almidón en soluble al agua, esta
solubilidad puede afectar en gran medida el resultado del proceso al verse expuesto con
los diferentes reactivos de reconocimiento que se usan en la práctica.

• Consulte otro método de hidrólisis y otras formas de detectar los productos


de la hidrólisis de polisacáridos.

Existen muchos métodos de hidrolisis, entres estos tenemos:

Hidrólisis ácido-base: En esta reacción el agua se divide en un ion hidroxilo (OH–) y


un protón (H+), que es inmediatamente hidratado para formar un ion hidronio (H3O+).
Así, el agua pura manifiesta esta reacción espontáneamente.

Hidrólisis de amidas y ésteres: La hidrólisis de ésteres y amidas es una vía común de


metabolismo de fármacos, La hidrólisis de un éster da como resultado la formación de
un alcohol y un ácido; la hidrólisis de una amida da como resultado la formación de una
amina y un ácido.

Hidrólisis enzimática: Es un proceso en el que las enzimas facilitan la ruptura de


enlaces en moléculas con la adición de los elementos del agua y juega un papel
importante en el sistema humano para la digestión de los alimentos.

Una de las formas de detectar los productos de la hidrolisis de polisacáridos es con la


prueba de Lugol (prueba de yodo) esta es una reacción química usada para determinar la
presencia o alteración de almidón, el almidón en contacto con unas gotas de Reactivo de
Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color azul-violeta característico.

Fundamento: La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce


entre las espiras de la molécula de almidón.
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Prueba de almidón: Se agrega el reactivo Yodo-KI a una solución si se obtiene un


color azul-negro si hay almidón. Si no hay amilosa de almidón, el color permanecerá
naranja o amarillo. La amilopectina de almidón no da el color, ni la celulosa, ni los
disacáridos como la sacarosa en el azúcar.

• Consulte las reacciones para la formación del complejo yodo – yoduro con
almidón.

Cuando se siguen los cambios en algunas reacciones de reducción de oxidación


inorgánica, el yodo se puede utilizar como indicador para seguir los cambios del ión
yoduro y del elemento yodo. Se agrega una solución de almidón soluble. Solo el
elemento yodo en presencia de ión yoduro dará el característico color negro azulado. Ni
el elemento de yodo solo ni los iones de yoduro solos darán el resultado de color. Este
fenómeno se utiliza en la demostración del reloj de yodo. 10

Los cambios de color se deben a que, en la presencia de un polisacárido como el


almidón, el ion triyoduro reacciona para generar un complejo con la estructura del
almidón, que se visualiza con una coloración azul, violeta o púrpura oscuro. 11
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Referencias Bibliográficas:
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