METABOLISMO, NUTRICIÓN Y

CRECIMIENTO BACTERIANO
- Metabolismo
■ Conjunto de reacciones químicas coordinadas que ocurren en la célula y
que tienen por objeto generar energía y los componentes necesarios para
que ésta lleve a cabo sus funciones
○ Catabolismo → Involucra reacciones que permiten la
transformación de moléculas orgánicas complejas en moléculas
sencillas, con el subsiguiente almacenamiento de energía química
desprendida en forma de ATP
○ Anabolismo o biosíntesis → Implica la síntesis de moléculas
complejas a partir de otras más sencillas, en procesos que
requieren energía. Es responsable de la formación de los
componentes celulares y tejidos corporales y por lo tanto del
crecimiento y almacenamiento de energía mediante enlaces
químicos en moléculas orgánicas
■ El anabolismo y catabolismo, aunque son contrarios, funcionan
coordinada y armónicamente, constituyendo una unidad difícil de separar.
De hecho la mayoría de las rutas son anfibólicas, es decir, que combinan
procesos anabólicos y catabólicos
■ Los carbohidratos y otros nutrientes utilizados por las bacterias sirven una
doble función
○ Constituyen una fuente de energía
○ Proveen de átomos de carbono para la construcción de nuevas
biomoléculas
■ El ATP constituye una excelente fuente de almacenamiento de energía
debido a sus enlaces fosfato, ya que al hidrolizarse generan una variación
de energía libre de -7,3 kcal
■ Las bacterias generalmente generan energía mediante las siguientes
reacciones
○ Fosforilación a nivel de sustrato
○ Fosforilación oxidativa
○ Fotofosforilación → Durante la fotosíntesis

- Respiración Aeróbica
■ Producción de energía a partir de glucosa y en presencia de oxígeno,
liberando dióxido de carbono
■ En términos energéticos, la respiración aeróbica es muy eficiente
■ Se puede subdividir en los siguientes pasos
○ Degradación de glucosa a piruvato
● Glucólisis
▫ Ruta en la que se oxida la glucosa obteniendo 2
moléculas de piruvato, 2 ATP y 2 NADH
▫ La ruta requiere de la utilización de 2 ATP y se
producen 4 ATP por fosforilación a nivel de sustrato,
siendo la ganancia neta de 2 ATP
▫ Los equivalentes de reducción, al introducirse en la
cadena respiratoria, producirán dos moléculas de ATP
▫ Se observa en todos los grupos de microorganismos
por lo que se considera como la ruta metabólica más
primitiva → Funciona tanto en presencia como en
ausencia de oxígeno
● Ruta de las pentosas-fosfato
▫ Puede coexistir con la glucólisis y con la ruta de
Entner-Doudoroff, y funciona en condiciones aeróbicas
o anaeróbicas
▫ Es importante para la biosíntesis porque permite la
síntesis de azúcares de 4 y 5 carbonos, además de
nucleótidos y NADPH
▫ La generación de energía es muy eficiente, con una
producción de 18 moléculas de ATP
● Ruta de Entner-Doudoroff
▫ Ruta alternativa de conversión de hexosas a piruvato
que fue descubierta recientemente
▫ Comparte las primeras reacciones con la ruta de las
pentosas-fosfato, pero el 6-fosfogluconato en vez de
ser oxidado, se deshidrata para formar KDPG, que es
el intermediario clave de esta ruta
▫ Produce 1 ATP, 1 NADH y 1 NADPH por cada
molécula de glucosa procesada
▫ Se ha observado generalmente en gramnegativas,
siendo mucho menos común en grampositivas
○ Descarboxilación oxidativa
● Se realiza dos veces, una para cada molécula de piruvato
que se produce durante la glucólisis
● El producto de la reacción es acetil-CoA, que constituye el
sustrato principal del ciclo de Krebs
● En la producción del acetil-CoA, se libera 1 CO2 y 1 NADH
 ○ Ciclo de Krebs o ciclo de los ácidos tricarboxílicos (CAT)
● Ruta metabólica que consiste en la conversión cíclica del
fragmento acetil del acetil-CoA en CO2, electrones e
hidrógeno por medio de reacciones secuenciales de óxido-
reducción
● Juega un papel importante en la producción de esqueletos
de carbono para el uso en la biosíntesis
● Por cada fragmento de acetil oxidado, se liberan 2 CO2, 4
NADH y 1 FADH2
○ Transporte de electrones y fosforilación oxidativa
● La mayor parte del ATP se produce por oxidación de NADH
y FADH2 en la cadena transportadora de electrones, que en
las bacterias se encuentra asociada a la membrana
plasmática
● Los electrones pasan a través de la cadena en una serie de
reacciones de óxido-reducción, donde cada complejo
sucesivo tiene una mayor afinidad por los electrones siendo
el oxígeno el aceptor final
● A medida que los electrones pasan por la cadena, se
bombean protones al exterior celular, generando fuerzas
protonmotivas que se utilizan para sintetizar nuevo ATP

- Fermentación Anaeróbica
■ En ausencia de oxígeno o la maquinaria enzimática necesaria para
realizar respiración aeróbica, el NADH producido en la glucólisis debe
oxidarse para producir NAD+
■ La regeneración del NAD+ se logra mediante la reducción del piruvato en
alcohol, lactato, acetato u otros compuestos orgánicos
■ Es una forma de respiración anaeróbica en la que no interviene la cadena
respiratoria, en la cual una molécula orgánica sirve como aceptor de
electrones y el producto final es un compuesto orgánico
■ Energéticamente, es muy poco eficiente en comparación con la
respiración aeróbica, ya que sólo se obtienen 2 ATP por cada molécula de
glucosa

- Respiración Anaeróbica
■ El aceptor final de electrones es un ión inorgánico diferente al oxígeno,
como nitrato, sulfato, fumarato, CO2 o metales
■ Las reacciones y los pasos son similares a los de la respiración aeróbica
 ■ Aunque es un poco menos eficiente que la respiración aeróbica, es
mucho más eficiente que la fermentación anaeróbica

- Nutrición Bacteriana
■ Proceso por el que las bacterias toman del medio donde habitan las
sustancias químicas que necesitan para crecer. Dichas sustancias se
denominan nutrientes y se requieren tanto para fines energéticos como
biosintéticos
■ Los elementos químicos que necesitan las bacterias se pueden clasificar
según las cantidades en que son requeridos
○ Macronutrientes → C, H, O, N, P, S
○ Micronutrientes → K, Ca, Mg, Fe
○ Elementos traza → Mn, Co, Zn, Mb, Ni, Cu
■ Las bacterias son extremadamente flexibles en relación a las posibles
fuentes de carbono que pueden procesar
■ Clasificación de bacterias según diversos criterios nutricionales
○ Según la fuente de carbono
● Autótrofos → Utilizan CO2 y agua como únicas fuentes de
alimento y a partir de estos compuestos producen todas las
moléculas necesarias para su subsistencia, crecimiento y
proliferación
● Heterótrofos → No pueden utilizar el CO2 como tal y por lo
tanto deben obtener el carbono que necesitan a partir de
otros compuestos, como por ejemplo la glucosa
○ Según la fuente de energía
● Fotótrofos → Utilizan la luz
● Quimiótrofos → Obtienen la energía a partir de la oxidación
de sustancias orgánicas e inorgánicas
○ Según la fuente de átomos de hidrógeno o electrones
● Litótrofos → Utilizan moléculas inorgánicas
● Organótrofos → Utilizan moléculas orgánicas
■ Las bacterias se pueden clasificar según sus fuentes de obtención de
energía y carbono
○ Quimioheterótrofos → Obtienen tanto carbono como energía de
compuestos orgánicos
○ Quimioautótrofos → Obtienen carbono del CO2 y energía de
compuestos orgánicos
○ Fotoheterótrofos → Obtienen carbono de compuestos orgánicos y
energía de la luz
○ Fotoautótrofos → Obtienen carbono del CO2 y energía de la luz
 ■ Las bacterias se pueden clasificar según su comportamiento frente a
ambientes con presencia de oxígeno
○ Aerobios estrictos → Sólo crecen en presencia de oxígeno
○ Anaerobios facultativos → Realizan respiración aeróbica, aunque
pueden realizar respiración anaeróbica en ausencia de oxígeno
○ Anaerobios estrictos → No crecen en presencia de oxígeno
○ Anaerobios aerotolerantes → Soportan más oxígeno que los
anaerobios estrictos
○ Microaerobios → Son aerobios, aunque sólo toleran
concentraciones de oxígeno menores a 21%

- Transporte de Nutrientes
■ La membrana plasmática es permeable a algunas sustancias como O2,
CO2, NH3, agua, y otras pequeñas moléculas polares sin carga
■ Transporte pasivo
○ Algunas sustancias nutritivas pueden atravesar la membrana
plasmática mediante difusión pasiva a través de poros
inespecíficos, debido a la diferencia de concentración en ambos
lados de la membrana
○ Otras sustancias requieren el uso de transportadores o permeasas
que permiten la difusión facilitada, que logra el paso de compuestos
gracias a un gradiente de concentración → El transportador forma
un canal por el cual un determinado sustrato puede alcanzar el
interior celular sin gasto de energía. Los transportadores son
específicos y cada uno transporta sustratos químicamente
parecidos
○ La difusión simple no se satura, mientras que la difusión facilitada
sigue una cinética de Michaelis-Menten
■ Transporte activo
○ El transporte activo permite el paso de nutrientes a través de la
membrana en contra del gradiente de concentración, e involucra el
uso de energía
○ El transporte activo se suele realizar a expensas de un gradiente
de protones previamente creado (transporte activo secundario) por
procesos de respiración y fotosíntesis, o por hidrólisis del ATP
mediante la FoF1
○ Los principales tipos de transporte activo son los siguientes
● Transporte activo ligado a simporte de H+
● Transporte activo ligado a simporte de iones Na+
 ● Transporte activo ligado a choque osmótico, cuyo ejemplo
son los transportadores ABC dependientes de proteínas de
unión periplásmicas o ATPasa de tráfico → Este transporte le
permite a las bacterias gramnegativas el transporte de
azúcares, aminoácidos, oligopéptidos, algunas vitaminas y
metales
● Transporte acoplado a traslocación de grupos → Acopla la
entrada del sustrato con su modificación química por unión
covalente con un grupo químico. El ejemplo más común es la
fosfotransferasa de azúcares
■ Transporte de hierro
○ Es un tipo especial de transporte facilitado
○ Es importante porque el hierro actúa como cofactor de muchas
enzimas y citocromos
○ Muchas bacterias secretan moléculas llamadas sideróforos, que
son capaces de formar complejos con el hierro férrico. Este
complejo se une a un receptor específico de la membrana externa y
posteriormente entra al citoplasma por un sistema sensible a
choque osmótico

- Crecimiento Bacteriano
■ Una población bacteriana en un medio que se mantiene constante en
cuanto a parámetros nutricionales y ambientales, crece de forma tal que el
incremento del número de células es un valor constante → Dicho
crecimiento es exponencial
■ La tasa de crecimiento es el número de generaciones por unidad de
tiempo, y su inverso es el tiempo de generación o duplicación, que mide el
tiempo que le toma a una bacteria convertirse en dos
■ En condiciones ideales sin restricción de nutrientes o acumulación de
desechos, el crecimiento es ilimitado y se denomina “crecimiento
balanceado” puesto que los constituyentes se incrementan de manera
proporcional
■ En un sistema cerrado, los cultivos atraviesan cuatro fases que se pueden
evidenciar fácilmente en una curva de crecimiento
○ Fase de latencia → Tiempo entre la inoculación del cultivo y el
inicio de la duplicación. Durante esta fase las células sintetizan los
componentes de la maquinaria replicativa
○ Fase de crecimiento exponencial → Las células se dividen
activamente por fisión binaria. Como las bacterias se encuentran
 metabólicamente activas y dividiéndose, es la fase de elección para
la realización de pruebas de identificación y sensibilidad
○ Fase estacionaria → Las células detienen su crecimiento por una
disminución en la cantidad de nutrientes y un aumento en la
cantidad de desechos
○ Fase de muerte → Finalmente, el número de células que muere
supera al número de células que se dividen
■ Factores que afectan el crecimiento bacteriano y deben ser controlados
cuando se estudia el mismo
○ Cantidad de solutos
○ Osmolaridad del agua
○ pH
○ Temperatura
○ Concentración de oxígeno
○ Presión
○ Radiación