Síntesis de

(1-(terc-butil(1-(4,4-dimetil-5-oxo-4,5-dihidrooxazol-2-il)etoxi)amino)-
2,2-dimetilpropil)fosfonato de dietilo en un solo paso basada en SG1
funcionalizada con azlactona para la polimerización y bioconjugación
mediada por nitróxido
Estudiantes:
● Ashtin Hanna Larson Leon 18070075
● Irene Valdez Chirinos 18070015
● Kevin Anthony Oré Maldonado 18070084

Docente: Marco Guerrero Aquino, Dpto. Química Orgánica, FQIQ, UNMSM, Perú.
Resumen

Se informa sobre la síntesis en un paso de alcoxiamina

basada en SG1 funcionalizada con azlactona (AzSG1) para el
diseño de polímeros funcionales mediante polimerización
mediada por nitróxido (NMP).

2
Introducción

Es un proceso mediante el cual las moléculas simples, iguales o

POLIMERIZACIÓN diferentes reaccionan entre sí por adición o condensación y
forman otras moléculas (macromoléculas).

Es una técnica que permite realizar la unión física o química de

BIOCONJUGACIÓN
dos o más moléculas, sean de naturaleza biológica o química

3
NMP

● Polimerización mediada por nitróxido (NMP), es una técnica de polimerización

por radicales de desactivación reversible (RDRP) muy simple pero eficiente.

● Junto con otras técnicas han revolucionado el campo de la síntesis

macromolecular al permitir el diseño de arquitecturas bien definidas, complejas
y funcionales.

● El mecanismo de NMP se rige entonces por un equilibrio de

activación-desactivación reversible donde el papel del nitróxido es
desactivar reversiblemente los radicales en crecimiento en una
funcionalidad latente de alcoxiamina

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Método - Técnicas analíticas

PL-gel MIXED-D
Avance-300 espectrómetro Bruker Avance-400 espectrómetro Bruker

5
Spectrasystem RI-150 de Thermo
Electron Corp bomba Waters 515

HP Proliant BL460c

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 Reactivos y Seguridad en el Laboratorio
2,2'-bipiridina Acetonitrilo

Tóxico Inflamable Nocivo

Indicaciones de peligro Indicaciones de peligro

H301 + H311 - Tóxico en caso de ingestión o en H225 - Líquido y vapores muy inflamables
contacto con la piel H302 - Nocivo en caso de ingestión, contacto con la piel
Puede formar concentraciones de polvo combustible en o inhalación
el aire H319 - Provoca irritación ocular grave

Consejos de prudencia Consejos de prudencia

P280 - Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de P280 - Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de
protección protección
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 Reactivos y Seguridad en el Laboratorio
Alambre de Cobre Acetato de etilo

Irritante Inflamable Irritante

Indicaciones de peligro Indicaciones de peligro

Irritación en caso de ingestión, inhalación, contacto H225 - Líquido y vapores muy inflamables
con la piel y ojos H319 - Provoca irritación ocular grave
Humo de metal: fiebre está caracterizada por sabor H336 - Puede provocar somnolencia o vértigo
metálico en la boca e irritación de la garganta EUH066 - Puede provocar sequedad o grietas en la piel

Consejos de prudencia Consejos de prudencia

Protección respiratoria, guantes, lentes de seguridad P210 - Mantener alejado del calor
P280 - Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección
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 Reactivos y Seguridad en el Laboratorio
Sulfato de cobre Cloruro de sodio

Nocivo Peligroso para el Irritante

medio ambiente

Indicaciones de peligro
H302 - Nocivo en caso de ingestión Indicaciones de peligro
H315 - Provoca irritación cutánea Producto considerado no peligroso. En contacto con
H319 - Provoca irritación ocular grave los ojos puede provocar irritación.
H410 - Muy tóxico para los organismos acuáticos, con
efectos nocivos duraderos Consejos de prudencia
Llevar guantes, gafas de protección, máscara de
Consejos de prudencia protección para polvo
P280 - Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección
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 Reactivos y Seguridad en el Laboratorio
Sulfato de magnesio Pentano

Inflamable Peligroso para el

Irritante medio ambiente

Indicaciones de peligro
Indicaciones de peligro
Líquido y vapores inflamables
Intoxicación leve en caso de ingestion
Puede ser mortal en caso de ingestion/inhalacion
Irritacion en caso de contacto con los ojos
Tóxico para organismos acuáticos
Su exposición con la piel puede provocar grietas en la piel
Consejos de prudencia
Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de
Consejos de prudencia
protección
Eliminar posibles fuentes de ignición
Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección
10
MECANISMO DE REACCIÓN

11
MECANISMO DE REACCIÓN

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TRABAJO EXPERIMENTAL
Se realizó burbujeo de nitrógeno a temperatura ambiente, filtración a vacío y recristalización.

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DIAGRAMA DE FLUJO

14
15
CÁLCULOS Y RESULTADOS

1 1 1

1) 526 mg
4 mL

2) 107 mg
401 mg 503 mg
403 mg
220.06 g/mol 294.35 g/mol
434.51 g/mol
1.82 × 10−3 mol 1.71 × 10−3 mol

Rendimiento= 39%

m= (403 mg / 39%)* 100%

➔ Cantidad teórica del producto:
m= 1033 mg
16
Síntesis de alcoxiamina basada en SG1 funcionalizada con azlactona (AzSG1)

Bromoazlactona
(AzBr)

Mezcla de dos
diastereoisómeros en la
región de 3.25 - 3.45 ppm

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Síntesis de alcoxiamina basada en SG1 funcionalizada con azlactona (AzSG1)
B3LYP BMK Energía de
Energía de disociación
Cálculos DFT activación
de enlace (BDE) 119.1 kJ mol− 1 123.8 kJ mol− 1 muy baja

Constante de velocidad Energía de activación (Ea) MONAMS

de disociación (kd)
128.4/130.8 kJ
119.5 kJ mol− 1
mol− 1
2.72×10−4 s−1
valor de kd 20 veces
mayor a 120°C

influenciada por

grupo electrófilo fuerte

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Síntesis de alcoxiamina basada en SG1 funcionalizada con azlactona (AzSG1)
Comparación
AzSG1 MONAMS
entre:

❏ Ángulos de cono de ❏ Propiedades electrónicas ❏ Difieren en la estabilización

Tolman similares muy cercanas de radicales

2.43 rad 2.34 rad 8.58 eV 8.92 eV 65.4 kJ mol− 1 41.2 kJ mol− 1

★ Hay una mejor estabilización del radical Az

★ La alcoxiamina AzSG1 sería un buen
iniciador para la NMP
19
 NMP de monómeros vinílicos iniciados por la alcoxiamina AzSG1
NMP de acrilato de n-butilo (nBA) NMP de estireno (S)

Grado de polimerización (DPn,th)

● Cinéticas de primer
orden
● Velocidades de
polimerización mayores
■(DPn,th=148) ◆(DPn,th=331)▲(DPn,th=627) cuando DPn más bajos ■(DPn,th=135) ◆(DPn,th=274)▲(DPn,th=536)
● Mn vs conversión
comportamiento lineal
● Dispersiones menores
con la conversión del
monómero

En ambas, la polimerización iniciada por

AzSG1 está bien controlada 20
NMP de metacrilato de metilo (MMA)
Interés en investigar si AzSG1 también podía controlar la polimerización de ésteres
metacrílicos mediante el enfoque de copolimerización.

● experimento 7 (DP n, th = 185);

● experimento 8 (DP n, th = 360)

● experimento 9 (DP n, th = 720)

21
Determinación de la fracción de la cadena viva
Para investigar la fidelidad de grupos terminales
del polímero resultante, se llevó a cabo la
espectroscopia de RMN P. Esto ha demostrado
ser un método conveniente y preciso para la
determinación de la fracción de cadena viva (LF)
cuantificando la presencia del grupo terminal
nitróxido SG1 que contiene fósforo utilizando
fosfito de dietilo (DEP) como referencia interna.

Figura 6. 31 P espectros de RMN en CDCl 3 de (a) Az-PS-SG1

(experimento 2); (b) Az-P n BA-SG1 (experimento 4), y (c) Az-P (MMA-
co -AN) -SG1 (experimento 7) sintetizado por polimerización mediada
por SG1 a partir de alcoxiamina AzSG1.

22
Disponibilidad de la funcionalidad Azlactone para el acoplamiento

● Para probar la disponibilidad de la funcionalidad

Az hacia grupos reactivos, se hizo reaccionar un
copolímero Az-P (MMA- co -AN) -SG1 con
bencilamina, un modelo conveniente de molécula
que contiene amina debido a sus protones
aromáticos que facilitan la caracterización de la
conjugados resultantes.(Figura 7 a).

● SEC confirmó cualitativamente el acoplamiento

exitoso, como se muestra por el aumento de la
traza de UV del polímero conjugado en
comparación con el del producto sin reaccionar
(Figura 7 c).

● Los protones aromáticos son visibles en la región

de 7,0 a 7,5 ppm de Espectro de H RMN.

(a) Reacción de acoplamiento entre bencilamina y un

copolímero Az-P (MMA- co -AN) -SG1.

23
 (b) Espectro de RMN de 1 H en acetona-
d 6 en la región de 0 a 7,5 ppm del
copolímero de bencilamina-P (MMA- co
-AN) -SG1. (c) Trazos de cromatografía
de exclusión por tamaño (señal UV
normalizada en la señal RI) del
copolímero Az-P (MMA- co -AN) -SG1
(experimento 7) y el copolímero de
bencilamina-P (MMA- co -AN) -SG1 .

La conjugación de polímeros sintéticos con

Aplicación a la pegilación de proteínas proteínas y péptidos es un área de gran
interés. El ejemplo más conocido es la
PEGilación
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CONCLUSIONES
❏ Se sintetizó en un paso, una nueva alquixiamina basada en SG1, que
incluía una fracción de azlactona. Este nuevo producto fue empleado
como iniciador para el NMP de estireno, acrilato de n-butilo y metacrilato
de metilo con la adición de una pequeña cantidad de acrilonitrilo.

❏ Se demostró que la conjugación con una molécula modelo permitió una

fácil funcionalización y bioconjugación; de manera que se obtuvo
exitósamente el acoplamiento entre un polímero a base de azlactona
PEG y una proteína modelo, lisozima.

❏ El presente trabajo representa una fácil alternativa para la síntesis

de alcoxiaminas basadas en SG1 funcionalizadas; así como el hecho
de usar por primera vez una fracción de azlactona en combinación
con NMP, que permitirán posibles nuevos métodos de
acoplamiento.

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 REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
Delplace, V., Harrisson, S., Ho, H. T., Tardy, A., Guillaneuf, Y., Pascual, S., ... &
Nicolas, J. (2015). One-step synthesis of azlactone-functionalized SG1-based
alkoxyamine for nitroxide-mediated polymerization and bioconjugation.
Macromolecules, 48(7), 2087-2097.

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MUCHAS GRACIAS POR LA ATENCIÓN

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