BRUCELLA

BRUCELLA
 Brucella es un género de bacterias Gram
negativas conocido principalmente por producir
la enfermedad brucelosis.
o

o
o
 Brucella abortus:
Es una alfa- proteobacteria gram negativa de la familia Brucellaceae y es uno de los agentes causantes de
la brucelosis . El patógeno en forma de bastón se clasifica en el dominio Bacterias. El procariota B. abortus
no forma esporas, no es móvil y es aeróbico. Sus huéspedes principales son ternera, búfalo, carnero, yak y
bovinos
Brucella canis:
Es una proteobacteria gram negativa de la familia Brucellaceae que causa brucelosis en perros
y otros cánidos. B. canis tiene forma de varilla o coco, y es oxidasa , catalasa y ureasa
positiva. Generalmente se detecta en los órganos reproductores del animal. Esta infección
generalmente hace que el animal aborte espontáneamente al feto y también puede causar
que el animal se vuelva estéril. Es difícil de tratar. Se pueden administrar antibióticos a largo
plazo, pero generalmente resulta en una recaída. La esterilización y castración pueden ser
efectivas, y se recomiendan análisis de sangre frecuentes para monitorear el progreso.
 Brucella melitensis:
Es una bacteria cocobacilo gram negativa de la familia Brucellaceae. La bacteria causa una
inflamación severa del epidídimo, con formación de espermatoceles y adherencias fibrinosas. Sus
huéspedes principales son ovinos, caprinos y camélidos.
Brucella neotomae:
Es oxidasa negativa, produce H2S. No crece en fucsina básica, pero sí en tionina. Ha sido aislada
en ratas salvajes del desierto de Utah (USA) y no es patógena para otras especies animales ni
para el hombre.
Brucella ovis:
Requiere adición de CO2, no produce H2S. Son oxidasa negativa. No reduce nitratos a nitritos, su
desarrollo es inhibido por metil violeta pero crece en presencia de fucsina básica y tionina. No
presenta antígenos A y M de las Brucellas lisas. Presenta un antígeno de superficie rugosa (R),
que presenta reacciones cruzadas con otras Brucellas rugosas. Infecta principalmente a los ovinos
y produce epididimitis en carneros. No es patógena para otras especies animales ni para
humanos.
 Brucella suis:
Crece en presencia de tionina. Posee un antígeno A predominante. Infecta
preferentemente a los porcinos, patógena para otras especies animales y para el hombre
(excepto, el biovar 4 que afecta a renos). Presenta 4 biovares.

Medio de Cultivo
AGAR SANGRE
Estructura
 Evitan la acción de IRO. Dos
antioxidantes importantes con la
capacidad de degradar H2O2 en cepas
de Brucella, la catalasa periplásmica
monofuncional KatE y la peroxiredoxina
AhpC. Los estudios genéticos han
demostrado que KatE desintoxica los
niveles suprafisiológicos de H2O2 en
estas bacterias, mientras que AhpC
parece ser el principal eliminador
delH2O2 endógeno generado por el
metabolismo aeróbico.
 • • La virulencia DE BRUCELLA no depende de la
producción de exotoxinas y/o endotoxinas
• • La bacteria invade las células del huésped inhibiendo la
apoptosis (muerte celular programada).
• Los genes BvrS/ BvrR codifican un sistema sensor que
controla la expresión de moléculas involucradas en la
invasión celular.
• • Los genes virB codifican un sistema de secreción tipo IV
que modula el tránsito intracelular de la bacteria,
permitiendo su supervivencia.
 MECANISMO DE DEFENSA

• La patogénesis de la infección por Brucella es

bastante compleja, depende del patógeno y de los
mecanismos de defensa que se activan
• La inmunidad celular, macrófagos, citoquinas tipo Th1
y células citotóxicas participan activamente en la
resolución de la infección.
• Aunque esta bacteria no evade los mecanismos de
fagocitosis, si ha desarrollado mecanismos para la
sobrevivencia intracelular
COMO SE CONTAGIA
Por contacto directo con animales
infectados, contacto con las
secreciones de los animales que
abortan sus fetos, teniendo en
cuenta que el huésped es distinto
para cada especie de brucella
La segunda forma es
indirectamente, por medio de
la ingestión de productos
animales contaminados, o
material contaminado
 CÓMO PODEMOS EVITAR
CONTAGIARNOS

EN EL GANADO (para evitar la propagación) EN LOS SERES HUMANOS

• Educación sanitaria.
• Se recomienda la vacunación del ganado • Control de la calidad de los productos
bovino, caprino y ovino en las áreas lácteos
enzoóticas con altas tasas de prevalencia
 PRUEBAS
BIOQUÍMICAS
TOMA DE MUESTRA (DIAGNOSTICO)

TOMA DE MUESTRA: FLEBOTOMÍA

Toma De Muestra Sangre Venosa Periférica

METODOS DE LABORATORIO:
Métodos directos (bacteriológico)
Para la Identificación del agente
etiológico
Realizado por medio de:
Sangre, Lcr, Medula Osea, Ganglios
Linfaticos, Liquido Sinovial
Se realiza un cultivo y un aislamiento
para identificar la especie y sus posibles
biovariedades
Métodos indirectos(serológico)
Para detectar anticuerpos específicos anti-brucella
Se realiza por medio de:
Pruebas confirmatorias cualitativa y semicuantitativa
CUALITATIVA
AGLUTINACIÓN CON ROSA DE BENGALA
Lectura en 4 min
Reacción positiva: Formación de grumos de
aglutinación.
Reacción negativa: Ausencia de grumos de
aglutinación.
SEMICUANTITATIVA
AGLUTINACION ESTANDAR EN MICROPLACA, Y
AGLUTINACION CON 2 MERCAPTOETANOL EN
MICROPLACA
Enfermedades que provocan
•

•
Enfermedades que provocan
 Características clínicas principales: :

Se presenta en forma aguda en un 50% de los casos

En general, estas formas de brucelosis son difíciles de
diagnosticar por al ausencia de signos específicos de
Puede afectar a cualquier órgano o sistema y producir
localización.
una clínica enormemente variada.

La infección puede permanecer subclínica y sólo el

aumento de los anticuerpos específicos contra
la Brucella evidencia la presencia de la enfermedad.
 CUADRO CLÍNICO
El inicio de la enfermedad suele ser insidioso

presentándose

fiebre, escalofríos, diaforesis, cansancio, anorexia y lumbalgia

Puede asociarse también a cefaleas, mialgias, odinofagia, tos, estreñimiento y pérdida

de peso.
La infección puede localizarse y ocurrir entonces osteomielitis, artritis, abscesos
esplénicos, orquiepididimitis y endocarditis.
Hemofilios
(Haemophilus)
¿Qué son?

• Haemophilus es un género de
bacterias Gram negativas con
forma de cocobacilos pero muy
pleomórficases que pueden causar
diferentes tipos de enfermedades
que involucran la respiración, los
huesos, las articulaciones y el
sistema nervioso.
 Taxonomía
Dominio: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Taxonomía
Orden: Pasteurellales
Familia: Pasteurellaceae
Género: Haemophilus
Especies H. influenzae, H. parainfluenzae, H.
ducreyi, H. aphrophilus, etc…
Características
generales
• Cocobacilos Gram negativos
• Son pleomórficos
• Inmóviles
• Tamaño: 0.4 µm de ancho x 1 µm de largo
• No forman esporas
• Se agrupan a menudo en cadenas cortas y bacilos
aislados
• Anaerobios facultativos
• Algunas especies poseen cápsula
• Algunos producen hemólisis como: H. hamolyticus
y H. parahemolyticus
• Temperatura óptima de crecimiento a 37° C
Medios de cultivo

• Los haemophilus generalmente crecerán en medios de cultivos

enriquecidos ya que necesitaran mayor requerimiento
nutrimental por ello podremos cultivarlos en los medios:
• Agar chocolate
• Agar sangre suplementado con factor V.
 Factores de Virulencia
Los principales factores de virulencia H.influnzae tipo b es la cápsula anti fagocítica polisacárida, ribosa,
ribitol y fosfato. Produce proteasas de IgA1 que pueden facilitar la colonización de la superficie mucosa.
• Capsula de polisacárido, y se han identificado seis serotipos antigénicos (a-f)
• H. Influenzae tipo B.
• 95% de las infecciones invasivas.
• Cepas no encapsuladas.

• El H. influenzae contiene tres clases principales de antígenos de superficie: el polisacárido capsular, el lipolisacárido y las
proteínas de membrana externa.
• Estos serian responsables de la virulencia, adherencia y resistencia a los fagocitos
• Elaboran proteasas de Ig A que son enzimas capaces de hidrolizar la cadena pesada de Ig A1 humana
• L.O.S. Actúan como un factor siliostático, daña el epitelio ciliado y hace que las células epiteliales se desprendan
 Patogenia e Inmunidad
(Otitis media), los senos,
(sinusitis) y el tracto Primeros meses de vida
• H. Influenzae tiene pilis y
respiratorio inferior fimbrias para adherirse a
(bronquitis, neumonía.) las células epiteliales

• La presencia de proteasas de
Ig A le facilitan la colonización
de las mucosas, luego de
colonizar la mucosa, puede
causar infección local y
extenderse por contigüidad.

H. Influenzae con capsula

Serotipo b
Enfermedad en niños no
Infrecuente vacunados (p.ej., meningitis,
H. Parainfluenzae y H. epligotis, [laringitis
Influenzae no obstructiva], celulitis).
encapsulado, colonizan
el tracto respiratorio
superior
¿Como se contagia?

Una persona con la bacteria Hib en la nariz y la

garganta también pueden contagiar a otras
personas. Esto puede ocurrir cuando tienen la
enfermedad de Hib o incluso cuando no tienen
ningún síntoma. El contagio ocurre cuando una
persona estornuda o tose y despide saliva por la
nariz o la garganta.
Haemophilus aegypitus es una causa importante
de conjuntivitis aguda purulenta

Haemophilus ducreyies el agente etiológico bien

conocido de la enfermedad de transmisión sexual
chancro blanco o chancroide
¿Como podemos
evitar contagiarnos?
La mejor manera de prevenir la enfermedad de
Hib es asegurarse de que los niños reciban la
vacuna contra la Haemophilus influenzae tipo b
(Hib). Esta vacuna es muy eficaz y se coloca de
manera rutinaria en EE.UU.
• Los niños suelen recibir la vacuna como una
serie en las siguientes edades:
• dos meses
• cuatro meses
• seis meses (algunas marcas de vacunas no
requieren la aplicación a los 6 meses)
• Entre los 12 y los 15 meses, reciben una dosis de
refuerzo.
Especies más importantes

Haemophilus Haemophilus Haemophilus Haemophilus

influenzae parainfluenzae ducreyi aphrophilus
Haemoophilus
influenzae

• El Haemophilus influenzae es un
cocobacilo Gram-negativo
pleomórfico. Posee o no un
polisacárido específico, que
permite clasificarlos en 6 serotipos
antigénicos encapsulados
designados con letras, desde la
“a” hasta la “f”. Las cepas
encapsuladas y no encapsuladas
son potencialmente patógenas
para el humano, pero difieren en
su virulencia y mecanismos
patogénicos.
Medios de cultivo
para H. influenzae
• El medio estándar es el agar chocolate que se
prepara a menudo con sangre de caballo, que
es una buena fuente de factores X y V.
• Haemophilus influenzae no crece en medio de
Agar sangre corriente a menos que sea
suplementado con factor V
• Para efectuar antibiograma, se necesita
preparar un medio especial que además de la
base de Mueller-Hinton contiene 15ug/mL de
beta-NAD, 15ug/mL de hematina bobina,
5mg/mL de extracto de levadura y un pH de 7.2
a 7.4
• Agar tripticasa de soya
• Agar de Levinthal
¿Donde la encontramos y como
se transmite?

• Las bacterias H. influenzae viven

en el tracto respiratorio superior
y en general se transmiten por
contacto estrecho con una
persona infectada.
• Las partículas en el aire
expulsadas cuando una persona
infectada tose o estornuda
pueden ser inhaladas por otra
persona y provocarle una
infección.
Enfermedades
(infecciones)

H. influenzae causa muchas infecciones pediátricas, entre ellas:

• Meningitis
• Epiglotitis aguda
• Celulitis
• Bacteriemia
• Neumonía
• Artritis séptica
• Traqueobronquitis
• Otitis media
• Conjuntivitis
• Sinusitis
• Estas infecciones, al igual que las endocarditis y las infecciones
urinarias, pueden aparecer también en adultos, aunque son
mucho menos comunes.
Diagnostico

• Para diagnosticar la infección, los médicos toman una muestra de sangre,

pus u otros líquidos corporales y la envían al laboratorio para realizar
un cultivo bacteriano. Si aparecen síntomas de meningitis, los médicos
realizan una punción lumbar para obtener una muestra líquido
cefalorraquídeo. La identificación de la bacteria en una muestra confirma
el diagnóstico.
• Una vez identificadas las bacterias, se examinan para ver qué
antibióticos son efectivos (un proceso denominado prueba de
sensibilidad).
Tratamiento

• Se usan beta-lactámicos/inhibidores de la beta-lactamasa,

fluoroquinolonas y cefalosporinas de segunda y tercera
generación.
• Si los niños sufren una infección grave, son ingresados en el
hospital y mantenidos en aislamiento para evitar que otras
personas se expongan a las gotitas infectadas presentes en el aire
(lo que se conoce como aislamiento respiratorio) durante 24 horas
después del inicio del tratamiento con antibióticos.
Prevención

• Vacuna conjugada contra Hib (haemophilus influenzae tipo b).

• Las personas en contacto con un enfermo dentro del hogar
pueden ser portadores asintomáticos de H. influenzae.
• Todos los miembros del hogar (excepto mujeres embarazadas)
deben recibir profilaxis con rifampicina, en dosis de 600 mg por
vía oral, 1 vez al día durante 4 días.
Pruebas bioquimicas

• Producción de indol
• Actividad ureasa
• Fermentador de glucosa
• Prueba de catalasa
Haemophilus
parainfluenzae

• Haemophilus parinfluenzae es
miembro de la flora normal de la
orofaringe, y puede estar
presente en la microbiota vaginal
normal. Es la especie dentro del
género que ocupa la mayor
proporción en estos ambientes.
Habitan también en la placa
dental que se forma en la
superficie de los dientes.
Son Gram negativas, con formas
pleomórficas usualmente
filamentosas
Cultivo

• Requieren medios altamente enriquecidos que generalmente

contienen sangre, como el agar chocolate. Se pueden diferenciar
de otras especies con el requerimiento del factor V para su
crecimiento, en un ambiente enriquecido con CO2 a 35-37°C.
Enfermedades
La Haemophilus parainfluenzae causara enfermedades e infecciones como lo son:
• Otitis y conjuntivitis
• Absceso dental
• Neumonía
• Empiema
• Septicemia
• Meningitis
• Absceso cerebral
• Infecciones urinarias y genitales
Haemophilus ducreyi

• Bacilo de Ducrey es un cocobacilum Gram-

negativo causante del chancroide,
una enfermedad de transmisión
sexual caracterizados por llagas
dolorosas en los genitales (chancros), con
una base eritematosa que se transforma
en una ulceración dolorosa
con linfadenopatía asociada.
• Perteneciente a la familia Pasteurellaceae,
pero no al género Haemophilus de
acuerdo con los análisis genómicos. El
bacilo de Ducrey se le incluye en este
género debido a que no se ha creado uno
nuevo para él.
Síntomas

• Al cabo de 1 día a 2 semanas después de resultar infectada, a la persona se le formará una protuberancia
pequeña en los genitales. Esta protuberancia se convierte en una úlcera en un período de un día tras su
aparición. La úlcera:
• Varía de tamaño desde 1/8 de pulgada hasta 2 pulgadas (3 milímetros a 5 centímetros) de diámetro
• Es dolorosa
• Es suave
• Tiene bordes claramente definidos
• Tiene una base recubierta de un material gris o amarillo grisáceo
• Tiene una base que sangra fácilmente si se golpea o rasguña
• Aproximadamente la mitad de los hombres infectados presenta una sola úlcera. Las mujeres a menudo
presentan 4 o más úlceras. Estas úlceras aparecen en partes específicas.
Síntomas
• Los lugares comunes en los hombres son:
• Prepucio
• Surco detrás de la cabeza del pene
• Cuerpo del pene
• Cabeza del pene
• Abertura del pene
• Escroto
• En las mujeres:
• La ubicación más común de las úlceras es en los labios
externos de la vagina (labios mayores). Pueden presentarse
"úlceras besadoras". Estas son úlceras que aparecen en
superficies opuestas de los labios genitales.
• Otras zonas, como los labios internos de la vagina (labios
menores), la zona entre los genitales y el ano (zona perianal)
y la parte interna de los muslos también pueden resultar
comprometidas. Los síntomas más comunes en las mujeres
son dolor al orinar y al tener relaciones sexuales.
Diagnostico

• El diagnóstico suele ser clínico, porque el aislamiento del

microorganismo en cultivo es difícil.
• Muestra de la base de la lesión previamente limpia con irrigación
de solución salina fisiológica estéril, tomando con una toronja seca
de dacrón o rayón. Introducir en via estéril y cortar el vástago.
puede enviarse seca o eluida en un pequeño volumen de solución
sanguínea fisiológica estéril.
• Cultivo (agar sangre o agar chocolate)
Cultivo
En general se recomienda utilizar más
de un medio de cultivo los más
recomendados son:
1) Medio base de agar para
gonococo suplementado con 2% de
hemoglobina bovina, 5% de suero
bovino fetal 1% de isovitalex y 3
µg/mL de vancomicina;
2) Medio base de Müller-Hinton
suplementado con 5% de sangre de
caballo calentada a 80° C
(chocolate), de isovitalex y 3 µg/mL
de vancomicina
Tratamiento

• La infección se trata con antibióticos, eritromicina, ceftriaxona,

azitromicina o ciprofloxacina. Las inflamaciones grandes de los
ganglios linfáticos requieren drenaje, ya sea con aguja o con
cirugía local.
Prevención

• El chancroide se propaga por contacto sexual con una persona infectada.

Evitar todas las formas de actividad sexual es la única manera absoluta
de prevenir una enfermedad de transmisión sexual.
• Sin embargo, los comportamientos sexuales más seguros pueden reducir
el riesgo. El uso apropiado de condones, ya sea del
tipo masculino o femenino, disminuye enormemente el riesgo de contraer
una enfermedad de transmisión sexual. Es necesario usar el condón
desde el comienzo hasta el final de cada actividad sexual.
Haemophilus aphrophilus

• Es una especie de bacterias Gram-

negativas con forma
de cocobacilo pero
muy pleomórficas. Aunque la
forma típica es la cocobacilar, se
consideran pleomóficas porque
pueden realmente variar
drásticamente su morfología.
Síntomas y como se contagia

• Origina abscesos hepáticos, infecciones de huesos y articulaciones,

endoftalminas, meningitis, celulitis y pericarditis. Se han presentado
además raros casos de abcesos cerebrales, usualmente asociados a
contactos con perros, por una pobre higiene dental o
procedimientos odontologicos.
Cultivo

• Se realizara el cultivo en Agar

chocolate
• Se añade sangre y se calienta
(para liberar los factores x y v)
Tratamiento

• El tratamiento de las infecciones por Haemophilus depende de la

naturaleza y la ubicación de la infección, pero para los cuadros
invasivos se usan beta-lactámicos/inhibidores de la beta-lactamasa,
fluoroquinolonas y cefalosporinas de segunda y tercera
generación el antibiotico indicado lo sabremos gracias a un
antibiograma para recomendar cual será mas efectivo.
• Ceftriaxona y ciprofloxacina
Pruebas bioquimcas

• Prueba de catalasa
• Prueba de ureasa
• Prueba de indol
Toma de
muestra
Las muestras que pueden ser
eficientes para el diagnóstico de
Haemophilus son:
• Expectoraciones
• Líquido cefalorraquídeo
• Hisopado nasofaríngeo
• Secreciones de úlceras genitales
• Orina
• Aspirado de oído medio
• Sangre
Toma de muestra

Ante un caso sospechoso de enfermedad invasora causada por H.

influenzae la toma de la muestra con guantes sin talco (punción
lumbar basada en juicio clínico y hemocultivo de acuerdo al
protocolo interno de cada institución hospitalaria) debe
preferencialmente efectuarse por personal capacitado.
Pruebas bioquimicas

Las especies de Haemophilus recuperadas de muestras humanas se identifican en

el laboratorio Clínico a través de la tinción de Gram y requerimiento de factores X
y V, reacciones hemolíticas en agar sangre de carnero, producción de catalasa y
oxidasa y mediante la utilización de diversas pruebas de rutina, que incluyen
producción de indol, actividad de ureasa y ornitina descarboxilasa y fermentación
de hidratos de carbono.
• Para Haemophilus influenzae:
Producción del indol, actividad de ureasa y catalasa
• Para Haemophilius ducreyi:
Oxidasa y catalasa