MICROORGANISMO

La resistencia bacteriana no es un juego y estamos en alerta mundial.

Explicación de la imagen: en la parte de arriba nos muestra el año en que aparecieron en el

mercado y en la parte de abajo la fecha donde apareció la resistencia, un ejemplo de ello es la
sulfonamida que apareció en 1930 y su resistencia en 1940 , en ese momento entre 1940 y 1945
apareció la penicilina, así también muestra la vancomicina, entre otros. los microorganismos
también cambian a medida que cambian los medicamentos y cambian su estructura, la manera
de perder metabolitos y una vez que hacen resistencia a los antibióticos.

Explicación de la imagen: durante las últimas décadas no han salido moléculas reciente de
antibióticos y empiezo a tener alarma mundial, porque un estudio en reino unido que pone en
alarma a la OMS y le dice “si nosotros vamos a continuar de esta manera, con esta resistencia de
antibióticos para el 2050 (30 años) vamos a estar enfrentando la existencia de las superbacterias,
es la resistencia antibiótica microbiana (RAM) , va a matar mas gente, con una mortalidad de 10
mil personas, va a ser mayor las personas que van a morir por infecciones bacterianas, el costo de
farmacología saldrá por 100 mil millones, primero tenemos que tomar conciencia de la
importancia de estos fármacos en nuestro cuidado a nivel mundial y de nosotros depende la
adecuada formulación, concientización de la población acerca del mal uso para evitar la resistencia
antimicrobiana.

Antibiotico: sustancia de origen biológico.

Antibacteriano: sustancia natural o sintética contra bacterias.

La producción de antibióticos se basa en descubrir lo que tiene de diferente la bacteria de las

células del humano y que podamos combatirlas sin causar tanta toxicidad al ser humano.

Caracteristicas únicas de las bacterias

• Pared celular de peptidoglicano: la tienen tanto Gramnegativos como Grampositivos

(excelente blanco celular) (requiere unas enzimas para sintetizarlo y entre ellas están PBP
o penicilin binding proteíns (proteínas de unión a las penicilinas) que son las peptidasas y
glicotransferasas, allí actúan muchos antibióticos en el medio clínico y que también esté
también es uno los sitios donde ha cambiado la bacteria para causar resistencia.
• Membrana celular: con diferencias en composición de fosfolípidos respecto a los
eucariotas (no hay tanta diferencia con los eucariotas, pero con los antibióticos podemos
lograr algo de selectividad para evitar la toxicidad, aunque no le quita el riesgo que este
grupo afecte la membrana celular, pues también afecten mi membrana)
• Ribosoma 70s: (subunidades 50s y 30s) el ribosoma eucariota tiene 80s (Svedvero o
unidad de precipitación). Esto también permite inhibición selectiva .
• Hay enzimas clave también presentes en el eucariota : (RNA polimerasa. DNA
topoisomerasas, folato- reductasas). Aunque están presentes en ambos grupos, por la
gran diferencia evolutiva, la variación permite inhibirlas selectivamente.
Explicación de la imagen: vemos la bacteria con una membrana interna y una pared, seria una
bacteria Grampositiva y tendríamos antibióticos que podrían atacar la membrana, pero
recordemos que si es similar a la membrana de nuestro cuerpo podría generar toxicidad, tenemos
un grupo de antibióticos que me van a inhibir la pared celular de la bacteria y allí tenemos a los
Betalactamicos (vancomicina, penicilina, cefalosporina), los inhibidores de la biosíntesis del acido
folico que es importante para la producción de acidos nucleicos ( trimetopin y sulfanamidas),
luego tenemos el grupo que inhibe la síntesis del ADN, que actúa a nivel del ADN- girasa y ahí
tenemos a las quinolonas, RNA polimerasa en donde esta la rifampicina, tenemos el grupo que
afecta la síntesis de la subunidad 30 s de los ribosomas de las bacterias (tetraciclina y
estreptomicinas y tenemos las que afectan la síntesis de la subunidad 50s de los ribosomas
(cloranfenicol y la eritromicina).

BACTERIAS : Pared celular y membrana celular

Gramnegativos: rojo

Grampositivos: violeta

TINCION DE GRAM: creado por Hans Christian Gram (medico danes que trabajaba en Alemania)
que en pacientes con neumonía aplicaba colorantes y descubrió las que se coloraba. En 1963 M. R.
J. Salton explico el mecanismo de diferenciación de la técnica de Gram.

1. A la secreción (liquido cefalorraquideo, orina, etc) se le va a aplicar cristal violeta y va a

pintar a la pared de ese microorganismos de color fucsia.
2. Luego se le aplica iodina para quitar la coloración y que quede en el microorganismo
3. Se lava con alcohol y aquellas bacterias con características en su pared con peptidoglicano
son las que quedaran de color violeta (bacterias Grampositivas)
4. Se aplica colorante safranina que colorara de rojo las Gramnegativas

Diferencias entre bacterias Gram positivas y Gram negativas:

Bacterias Gram Positivas Bacterias Gram Negativas

Color con la tinción de Gram violeta Rojo
Pared celular Gruesa (mas peptidoglicanos) Delgada
Presencia de Ausente Presente
lipopolisacáridos en la pared
celular
 Presencia de acidos Presente Ausente
lipoteicoicos y teicoicos en la
pared celular

Explicación de la imagen: la bacteria Gramnegativa tiene dos membranas (externa y interna) que
contiene una lipoproteína, peptidoglicano y tiene un espacio periplasmatico, proteínas a nivel de
la membrana, fosfolípidos y lipopolisacáridos a nivel de la membrana externa. En cambio, la
bacteria Grampositiva tiene tres capas de peptidoglicano (gracias a esto se tiñe de violeta), no
tiene membrana externa, en la interna tiene proteínas y fosfolípidos. la pared de la bacteria es
importante ya que en su parte interna es hiperosmolar, que tiene una concentración superior al
medio externo y sin la pared entraría agua dentro de la bacteria para mantener un equilibrio del
medio interno con el externo.
 Pared bact. Grampositivas Pared bact. Gramnegativas

Explicación de la imagen: se puede notar toda la cantidad de peptidoglicano que tiene las
bacterias Grampositivas, en comparación con las bacterias Gramnegativas. Podemos observar el
tinte que colora la pared de las células, luego el lavado con alcohol que decolora las
Gramnegativas , luego la safanina colorara las bacterias Gramnegativas.

Nosotros sabemos que las membranas están conformadas de fosfolípidos como la de nosotros,
con cabeza hidrofóbica y la parte interna hidrofílica.

Pared celular de peptidoglicano

El peptidoglicano tiene:

• 2 Monomeros (N- Acetilmuramico (NAM ) y N-Acetilglucosamina (NAG ) )

• 1 Pentapeptido de 5 aminoacidos que termina en dos alaninas.

Pasos para formar la pared:

1. Síntesis de monómero.
 2. Para formar cadenas: polimerizar el monómero (tomar una cadena lineal de
peptidoglicano) TRANSGLICOSILACION por transglicosilasas.
3. Formar puentes peptídicos entre cadenas con 5 glicinas (para darle mayor fortaleza
estructural) TRANSPEPTIDACION por transpeptidasas.

Pruebas de sensibilidad
MIC (concentración mínima inhibitoria) es la menor concentración de un antibiotico que es capaz
de inhibir el crecimiento visible de 5x106 CFU/ml tras 18-24 horas de incubación, a 35ºc. tras esa
incubación se ve si esta turbio o no.

MIC =32 mg/ L

A todos se les incularon 500000 bacterias. Se observa a ojo, sin ninguna ayuda si esta turbio o no.
Esto implica que la bacteria no crecio (pero no que la bacteria este muerta).
Concentración bactericida mínima (MBC): concentración capaz de matar 99,9% de las 50.000
unidades formadoras de colonias pueden llegar vivas 500 unidades tras la inoculación de 18 a 24
horas, en una bacteremia elevada si se hace un urocultivo puede haber un resultado antes de las
18 horas porque el crecimiento se da, en oras puede no haber un crecimiento tan rápido y como
se deben evaluar las concentraciones de los fármacos (inhibidores y concentración bactericida)
esto tiene un tiempo estipulado.

[Para que sea bactericida debe tener al menos 4 veces la concentración mínima inhibitoria.
Bacteriostática cuando se tienen más de 4 concentraciones mínimas inhibitorias] por corregir

Resistencia del microorganismo

Concentración del fármaco para alcanzar el sitio de infección (sin causar toxicidad), es inferior a la
MIC del microorganismo infectante, el microorganismo sigue creciendo porque el antibiótico no
tiene la cantidad suficiente para eliminarlo. Las concentraciones son determinadas por la CLSI y la
EUCAST. Por ejemplo, para el S. Aureus MIC de vancomicina es menor a 1.

Causas de resistencia bacteriana:

• los antibióticos son productos naturales de bacterias y hongos, por esto los microorganismos
desarrollaron mecanismos de protección (cambios estructurales para evitar el daño)
• por el sobreuso de antibióticos (automedicación) en horarios no establecidos afectando su
concentración plasmática, mientras la bacteria hace cambios estructurales después de
reconocer el antibiótico. La microbiota del paciente se ve afectada al omitir las dosis las
bacterias propias del organismo también hacen un cambio estructural y crea resistencia. El
sobreuso de antibióticos en el área veterinaria también lleva a una resistencia
• pobre control de infecciones, mala higiene y servicios sanitarios
• falta de nuevos antibióticos y compuestos químicamente similares
• mayor número de pacientes que reciben antibióticos, pacientes inmunosuprimidos, por
ejemplo, los pacientes oncológicos deben tomar antibióticos profilácticos por largo tiempo y
esto es un factor de riesgo para una resistencia bacteriana
• facilidad con que la bacteria comparte material genético con otras bacterias

tipos o mecanismos de resistencia bacteriana

• sobreproducción del blanco molecular: no es viable por el gasto que tiene la bacteria
• mutación o modificación del blanco molecular: cambio de sitio de unión del antibiótico
• flujo o expulsión activa: la bacteria permite la entrada del microorganismo pero lo expulsa
rápidamente canales
• disminución de la permeabilidad: tienen importancia los gran negativos por su doble
membrana, la bacteria puede modificar las características de membrana para disminuir aún
más la permeabilidad del farmaco
• no activación del fármaco: el fármaco puede requerir alguna estructura de la bacteria o
microorganismo para convertirse en fármaco, la bacteria inactiva éste elemento
• modificación enzimática del fármaco: por ejemplo el beta-lactamato combate el anillo
betalactámico y elimina el fin al que el antibiótico iba a actuar