FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

EAP ODONTOLOGÍA
BIOLOGÍA

CUESTIONARIO N° 05
PROTEÍNAS

ALUMNO : RODRIGUEZ QUISPE CARLOS RAFAEL

CICLO : PRIMERO

SECCIÓN : OD1M2

DOCENTE : DR. PUZA RAMIREZ ANNYELO FRED

2021
 CUESTIONARIO RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

1. Explicar y graficar la reacción de desaminación y descarboxilación en

Agar Lisina

El agar LIA (Lisina Hierro) es una prueba bioquímica utilizada para la

identificación de bacterias de la familia Enterobacteriaceae.

Originalmente esta prueba era un caldo que contenía peptonas, extracto de

levadura, glucosa, L-lisina, púrpura de bromocresol y agua destilada.
Edwards y Fife le agregaron agar-agar, citrato férrico de amonio y tiosulfato
sódico.

La prueba consiste básicamente en demostrar la presencia de la enzima

lisina descarboxilasa, capaz de reaccionar con el grupo carboxilo del
aminoácido L-lisina. También puede ocurrir una desaminación del
aminoácido por la presencia de la enzima lisina desaminasa

Descarboxilación de la lisina
Una reacción positiva es aquella en donde el fondo y la superficie del tubo
son completamente púrpuras.

Por tanto, quien determina la positividad de la prueba es la base o fondo

del medio.

Desaminación de la lisina
Un tubo que evidencia la desaminación de la lisina tendrá una superficie
color rojiza granate y un fondo amarillo (ácido), o todo el tubo color rojizo
granate.

Esta reacción se interpreta como negativa para la descarboxilación de la

lisina, pero positiva para desaminación de la lisina.
2. Explicar y graficar cada una de las experiencias observadas en los
videos

VIDEO 1: Reacción Xantoproteica

Colocar 01 ml de albumina de huevo en el tubo de ensayo, luego

agregamos 0.5 ml de ácido nítrico concentrado, luego llevamos a baño
maría a 70 °C por dos minutos; observamos que hay un cambio progresivo
de la sustancia dando un tono amarillo,

Este resultado llevamos al agua fría para enfriar el tubo de ensayo,

adicionamos gota a gota hidróxido de sodio al 40% sin agitar; observamos
un anillo color naranja lo que indica que la prueba es positiva.

VIDEO 2: PRUEBA DE BIURET

Colocar 1 ml de albumina en el tubo de ensayo, luego agregamos 5 gotas

de sulfato de cúprico o de cobre dos al 2 %, posteriormente 1 ml de
hidróxido de sodio al 20%; observamos que la prueba da positivo porque el
tubo de ensayo se torna de un color violeta o lila.
VIDEO 3: LABORATORIO EXPERIMENTAL - PROTEÍNAS U.N. SEDE
MANIZALES

Prueba cualitativa de proteínas con agua destilada y albumina de

huevo

Prueba negativa Colocar 2 ml Prueba positiva Colocar 2 ml

de agua destilada en un tubo de
ensayo (-), agregamos 2 ml de
hidróxido de sodio al 3 molar, 5
gotas de sulfato de cobre, luego
agitamos; observamos una
coloración azul leve, indicando
que el resultado para la prueba
es negativa.
de albumina de huevo en un
tubo de ensayo (+), agregamos
2 ml de hidróxido de sodio al 3
molar, 5 gotas de sulfato de
cobre, luego agitamos;
observamos una coloración
violeta indicando presencia de
proteínas

Prueba cualitativa de proteínas con leche y clara de huevo

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (M1), agregamos 2 ml de

hidróxido de sodio al 3 molar, 5 gotas de sulfato de cobre, luego agitamos;
observamos que la leche toma una coloración violeta claro, indicando que
el resultado para la prueba es positiva por la presencia de proteínas.

Colocar 2 ml de clara de huevo en un tubo de ensayo (M2), agregamos 2

ml de hidróxido de sodio al 3 molar, 5 gotas de sulfato de cobre, luego
agitamos; observamos una coloración violeta oscura, indicando que el
resultado para la prueba es positiva por la presencia de proteínas.
Desnaturalización de proteínas

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE1), agregamos 2 ml de

hidróxido de sodio al 10%, luego agitamos; observamos cómo se forma
unos grumos, característico de la coagulación de las proteínas.

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE2), agregamos 2 ml de

ácido clorhídrico al 10%, luego agitamos; observamos cómo se forma unos
grumos, característico de la proteína desnaturalizada.

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE3), agregamos 2 ml de

Etanol al 95%, luego agitamos; observamos que el efecto no es tan fuerte,
pero se alanza a diferenciar algunos cúmulos en la paredes, hay un grado
de desnaturalización menor.

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE4) en ebullición;

observamos una pequeña tela nata que corresponde a un tipo de
desnaturalización de proteínas.
Desnaturalización de proteínas

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE1), agregamos 2 ml de

sumo de limón, luego agitamos; observamos que hay una coagulación,
conocido como el corte de leche.

Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE2), agregamos 2 ml de

vinagre blanco (ácido acético), luego agitamos; observamos que hay una
coagulación (grumos).
 Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo (TE3), agregamos 2 ml de
alcohol antiséptico, luego agitamos; observamos que el cambio es leve
pero se también se visualiza unos pequeños grumos en la superficie del
tubo de ensayo.

3. Composición del Reactivo de Biuret. Explique su función

Se disuelve en 500 ml de agua destilada y se adiciona 300 ml de una

solución de NaOH al 10%. Se afora a 1000 ml con agua destilada.
Finalmente el reactivo de Biuret se guarda en un frasco ámbar y se
conserva en refrigeración.

La reacción o prueba de Biuret es un método que detecta la presencia de

compuestos de tres o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas
las proteínas y péptidos cortos. Este reactivo da un ensayo positivo con los
enlaces peptídicos entre aminoácidos, cuando la solución queda de
color violeta. Tal y como podemos observemos en el VIDEO 2 PRUEBA
DE BIURET.
 BIBLIOGRAFÍA
- Video youtube, Prueba de Lisina - LIA
https://www.youtube.com/watch?v=4_PopqhVxhs

- Video youtube, Reacción Xantoproteica

https://www.youtube.com/watch?v=GzGMbw5w4Wo

- Video youtube, Prueba de Biuret https://www.youtube.com/watch?

v=1p0xrmyKGxs

- Video youtube, Laboratorio experimental - Proteínas U.N. Sede

Manizales https://www.youtube.com/watch?v=GPFRTjJ5F3Mo

- Química Orgánica y Biológica - Laboratorio 4, Lipidos y proteinas,

recuperado de
https://users.exa.unicen.edu.ar/catedras/quimica/Quimica%20organica
%20y%20biologica/Laboratorio4_2018.pdf

- Guia de practica, Bioquimica (2002), recuperado de:

http://www.bioquimica.ucv.cl/paginas/central/Bioquimica
%20experimental%201/Guia%20laboratorio%20bioquimica.pdf