BIOSEGURIDAD

U N I V E R S I D A D N A C I O N A L
D E H U A N C A V E L I C A

FACULTAD DE CIENCIAS DE
INGENIERÍA
E.A.P. ZOOTECNIA
TEMA:
BIOSEGURIDAD “PREPARACION DE REACTIVOS Y MATERIALES USADOS
EN BIOLOGIA MOLECULAR”

CÁTEDRA : BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR.

CATEDRÁTICO : Ing. CHAVEZ ARAUJO, Elmer Rene

INTEGRANTES : AYRAVILCA QUISPE ALEX

Practica Pá gina 1
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CICLO : “II”

HUANCAVELICA-PERU

2017

PREPARACION DE REACTIVOS Y METERIALES USADOS EN BIOLOGIA

MOLECULAR

I. INTRODUCCION:

Es aquí donde el papel de la enseñanza experimental dentro del proceso enseñanza,

aprendizaje cumple su cometido de propiciar en el estudiante, la construcción de
conocimientos guiado por el profesor en la medida que el estudiante tenga la
oportunidad de relacionarse con los fenómenos naturales. Es por ello que esta
asignatura, aborda los aspectos sobre la infraestructura, identificación y manejo
adecuado del material, reactivos y equipos de laboratorio, al mismo tiempo permite
conocer las medidas de seguridad como son los criterios sobre disciplina, orden y
limpieza propios del trabajo dentro del laboratorio, tomando en cuenta la
importancia de los cuidados de los desechos que dañen el entorno ecológico. El
conocimiento de estos aspectos servirá como base para abordar las prácticas que
relacionan los conceptos fundamentales de la asignatura. Este método es aplicable a
las soluciones de trabajo de biotecnología: tampones, oligonucleótidos(primers), etc.
Las cuales deben ser practicadas con el debido cuidado dentro del laboratorio.

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II. OBJETIVOS:

 Desarrollar las habilidades en el estudiante, que permitan el uso eficiente de

los materiales, reactivos y equipos del laboratorio, basándose en las normas
de seguridad.

 Describir un proceso para la preparación de soluciones de trabajo de

biotecnología.

III. MATERIALES Y METODOS.

MATERIALES EQUIPOS Y REACTIVOS.

 Material de vidrio: matraz Erlenmeyer, frascos, vasos de precipitación de

100 ml, de 500 ml y de 1000 ml, probetas y fiolas.

 Balanzas.

 Placa calefactora.

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 Agitador magnético.

 Autoclave para esterilización de medios de cultivo.

 Pipetas.

 PH-metro con precisión de lectura +- 0,01 unidades de pH.

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 Material de plástico: puntas de pipetas (tips), microtubos o (ependorf),

tubos falcón.

 HCL (ácido clorhídrico).

 Ácido acético.

 Bromuro de etidio.

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 Fenol.

 SDS (dodecil sulfato de sodio).

 Aguad dd. (agua bi destilada).

METODOS.

1. Recepción de reactivos.

Los reactivos se recepcionan tal y como se indica en el procedimiento general

“reactivos y material de referencia”.

2. Registro y almacenamiento de reactivos.

Una vez que se recepcionan, los reactivos son dados de alta en el laboratorio de
biotecnología dándoles entrada en un registro de recepción de reactivos. En este
impreso se anota del nombre del reactivo, la fecha de recepción, la fecha de
caducidad y la fecha de apertura del producto.

Las condiciones de conservación a seguir están indicadas en la etiqueta comercial

del producto:

A. Conservar como se indica en la etiqueta comercial del producto generalmente

por debajo de 25°C, en lugar seco, al abrigo de la luz solar y otras fuentes de
calor. Cuando se indique, consevar a 2-8°C.

B. Comprobar la fecha de caducidad en la etiqueta.

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C. Utilizar ordenadamente cada lote. No abrir un nuevo envase hasta que el anterior
este vacio. Mirar la fecha de la etiqueta del envase abierto primero. Despues de
usarlo asegurar que el envase quede bien cerrado y devolverlo al lugar de
conservación elegido.

D. Comprobar el reactivo en envase de tamaño adecuado de acuerdo con las

necesidades normales.

3. Preparación de buffers y otras soluciones de trabajo.

Cada uno de los buffers y soluciones de trabajo se prepara según se describe en

una ficha en la que se especifica la composición exacta y las instrucciones
concretas de preparación. Cuando se va preparar un buffer o reactivo se debe
tomar la ficha correspondiente y seguir las instrucciones. De forma general.

 Pesar las sustancias.

 Añadir una cantidad de agua destilada de forma que aproximadamente

falte 10% del volumen final requerido.

 Agitar en la placa aplicadora.

 Medir el ph en el medio atemperado (aproximadamente 25-30°C) y

ajustar.si es necesario, añadir NaOH 0,1 No HCL 0,1 N.

 Ajustar el volumen.

 Esterilizar en autoclave.

 Poner la etiqueta y consevar normalmente a temperatura ambiente o en

refrigeración si es lo indicado.

 Se registrara la preparación de la solución en la “ hoja de control de

soluciones”.

4. Productos peligrosos y eliminación de soluciones.

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Hay algunos productos que contienen sustancias toxicas y deben manejarse con
cuidado. En estos productos se indica la peligrosidad de los mismos: acidos,
sustancias irritantes, etc. Destaca por su peligrosidad de bromuro de etidio. Este
compuesto se mantiene recluido en solución concentrada al abrigo de la luz en el
frigorífico.

Los geles teñidos y otros residuos solidos que contengan este producto son
recogidos periódicamente por un preevedor aurotizado. Si se regeneran
soluciones diluidas BrEt la descontaminación se realizara según se explica en la
ficha de seguridad. El resto de soluciones de trabajo pueden eliminarse por la red
de saneamiento ordinaria.

5. Preparación de las puntas de pipetas.

 Colocar las puntas de pipetas en una solución de detergente y remover los

restos que puedan haber quedado impregnados en ellas.

 luego enjuagar en agua de caño, para después ser sumergirlo de alcohol.

 al final realizar un aclaramiento del material en agua bidestilada por

cuatro veces.

 Después de secar completamente colocarlos en las cajas seleccionándolos

de acuerdo al tamaño y tipo llevarlos a esterilizar en la autoclave.

6. Preparación de los ependorf.

 Colocar los ependorf en una solución de detergente y remover los restos

que puedan haber quedado impregnados en ellas.

 luego enjuagar en agua de caño, para después sumergirlo en alcohol.

 al final realizar un aclaramiento del material en agua bidestilada por

cuatro veces.

 Después de secar completamente colocarlos en un frasco con tapa de

acuerdo al tamaño y tipo y llevarlo a esterilizar en la autoclave.

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7. Preparación del agua.

Destilar el agua y colocarlo en el bidestilador, luego ponerlo en un frasco

graduado con tapa y llevarlo al autoclave para esterilizar.

ALGUNOS RECONOCIMIENTOS DE LOS EQUIPOS DE BIOLOGIA

MOLECULAR.

 PLACA CALEFACTORA Y AGITADOR:en este equipo sirve para

poder agitar cualquier producto que tengamos lo cual cuenta con un boron
para regular la velocidad de agitación y otro botón paracalcular la
temperatura.

 PEACHIMETRO:este equipo nos ayuda a nosotros a ver el nivel de PH

que esta el reactivo utilizado, para asi obtener resultados en donde nos
indique si aumentar o disminuir el Ph.

 BIXER O BORTEX:Este equipo nos ayudar agitar reactivos cuando están

en microtubos epeendor, porque el tamaño es pequeño como el biología
se utilizara en poca cantidad.

 TERMOMIXER:Este equipo es mucho mejor que el bixer, en lo cual

brinda varios botones de graduación por ejemplo: el tiempo en minutos lo
cual HLD nos indica que no hay tiempo dispuesto a controlar podemos
esperar un aproximado de horas.

 ESPECTROFOTOMETRO:

 EQUIPO DE ELECTROFORESIS

 ROBOT EXTRACTOR DE ADN

IV. RESULTADOS.

V. DSCUSIONES.

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