FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS Y BIOMEDICAS

PROGRAMA
MICROBIOLOGIA

ASIGNATURA
MICROBIOLOGIA GENERAL I

TEMA
MEDIOS DE CULTIVOS

INTEGRANTES
BOLIVAR RUIZ YOSELIN
OÑATE PACHECO MILDRI

PRODESOR
RONIEL HERNANDEZ

UNIVERSIDAD SIMON BOLIVAR

BARRANQUILLA

2
0
1
9
 Cultivo de microalgas

1. f/2 Medium
Este es un medio de agua de mar enriquecido general común y
ampliamente utilizado diseñado para
cultivo de algas marinas costeras, especialmente diatomeas.

Componentes:

componente cantidad
solución de reserva
NaNO3 75 g/L dH2O 1 mL
(nitrato de sodio)

NaH2PO4 H2O 5 g/L dH2O 1 mL

(bisfosfato de sodio)

Na2SiO3 9H2O 30 g/L dH2O 1 mL

Metales traza solución 1 mL

solución vitamínica 0,5mL

NaH2PO4 H2O
es empleado como un regulador de la acidez y como agente quelante de algunos minerales
NaNO3
El nitrato de sodio es un conservante sintético que se encuentra presente en multitud de
alimentos
Como puede ver, el medio está compuesto por dos conjuntos de sustancias unos en
mayor concentración listados a la primera imagen (aunque es un medio bastante
diluido, dicho sea de paso)
Medios de cultivos para protozoarios
1. Medio Chalkley

Composición
Cloruro de sodio 0,1g
Cloruro de potasio 0.004g
Cloruro de calcio 0,006g
Agua destilada 1000ml

Infusiones
arroz 50g
Hojarasca 10g
Lechuga seca 1g
paja 10g
Pasto seco 10g
trigo 50g

Procedimiento
 Hacer la infusión mezclando cualquiera de los que están en la
tabla con agua destilada (esterilizar a 150°c por 15 min), dejar
enfriar
 Inocular en el medio de cultivo debajo de una campana de
extracción o cerca de un mechero
 Dejar reposar durante 24 hrs y observar crecimiento.

Arroz
50 g
Hojarasca
10 g
Lechuga seca
1g
2. Medio TYM:
Trichomonas vaginalis Se lleva a 900 ml con agua destilada y se
reparten cantidades de 90-ml en frascos. Esterilice en autoclave 15
min a 121°C y 15 lb/in2 de presión.
Puede almacenarse por varios meses a −20°C. Para completar el
medio adicione al medio 10 ml de suero bovino inactivado con
calor, en condiciones de esterilidad.
Deben adicionarse al medio antibióticos y antifúngicos.
Es efectiva una combinación de penicilina, estreptomicina y
kanamicina, más mycostatina o nystatina en concentración de 100
μg/ml. Para el cultivo de Trichomonas se inoculan tubos del medio con
un exudado vaginal sospechoso del parásito.
Los tubos de cultivo se incuban verticalmente a 35.5 °C y se
examinan diariamente durante 4 días., en un microscopio invertido.
Después de ese tiempo si no se observa crecimiento se considera
negativo.

3. Medio TYI:
Giardia intestinalis Lleve a un volumen final de 880 ml y ajuste a pH
7.0 usando una solución de hidróxido de sodio 1 N Esterilice por
filtración a través de un filtro con poro de 0.22 μm. No se
autoclavea. Se reparte en cantidades de 13 ml en tubos de 16 x 150
mm. El medio estéril TYI-base puede ser almacenado a −20°C durante
varios meses. Los cultivos pueden iniciarse a partir de trofozoítos
de biopsia duodenal, pero más comúnmente a partir de heces. En
 primer lugar, se procede a la purificación de los quistes de las heces. La
muestra de heces se diluye 1:12 (vol/vol) en agua destilada. Se toman
20 ml y se colocan en un vasito con unas perlas de vidrio,
homogenizando en un vortex por 5 min., filtrando después el
material a través de una gasa. En un recipiente con hielo se colocan
5 ml del filtrado en un tubo de centrífuga de 50-ml conteniendo
10 ml de sacarosa 1M. Se centrifuga a 450 x g durante 5 min.
Se separa el sobrenadante con una pipeta y se diluye a 50 ml con
agua.

Los tubos de cultivo se

incuban verticalmente a
35.5 °C y se examinan
diariamente en el
microscopio invertido. El
medio debe decantarse (o
extraerse con una pipeta) y
reemplazarse con medio
fresco y antibióticos
diariamente durante la
primera semana y después
cada dos días dos
semanas. Si no se
observan trofozoítos a este
tiempo, el cultivo se
Los tubos de cultivo se incuban verticalmente a 35.5 °C y se
examinan diariamente en el microscopio invertido. El medio debe
decantarse (o extraerse con una pipeta) y reemplazarse con medio
fresco y antibióticos diariamente durante la primera semana y
después cada dos días dos semanas. Si no se observan
trofozoítos a este tiempo, el cultivo se considera negativo. La
mayoría de los trofozoítos se adhieren a la pared de vidrio.

Medios de cultivos para hongos

1. BD Sabouraud
BD Sabouraud Glucose Agar se utiliza para el aislamiento y el
cultivo de hongos (levaduras, mohos y dermatofitos) a partir de
muestras clínicas.
Agar es un medio de uso general para el cultivo de dermatofitos.
Hoy en día se utiliza para el aislamiento y cultivo de todos los
hongos.
 Las peptonas en Sabouraud Agar son fuentes de factores de
crecimiento nitrogenoso.
 La glucosa aporta una fuente de energía para el crecimiento
de microorganismos.
  La alta concentración de glucosa presenta una ventaja para el
crecimiento de hongos (estables osmóticamente), mientras
que la mayoría de las bacterias no tolera la alta concentración
de azúcar.
 Además, el bajo pH es óptimo para los hongos pero no para
muchas bacterias3
Sabouraud Glucose Agar es sólo
levemente selectivo frente a las bacterias.

Composición.
Digerido pancreático de caseína 5,0 g
Digerido péptico de tejido animal 5,0 g
Glucosa 40,0
Agar 15,0
pH pH 5,6 ± 0,2

Los tubos de cultivo se

incuban verticalmente a
35.5 °C y se examinan
diariamente en el
microscopio invertido. El
medio debe decantarse (o
extraerse con una pipeta) y
reemplazarse con medio
fresco y antibióticos
diariamente durante la
primera semana y después
cada dos días dos
considera negativo. La
mayoría de l