MICROSCOPÍA

Universidad Nacional de Rosario

Facultad de Ciencias Médicas
Cátedra de Histología Y Embriología
Laura Alonso
MICROSCOPÍA

INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN

La VISIÓN es uno de los sentidos capitales

de los seres vivos.

Les permite adaptarse al medio.

Interpretar su entorno y hasta modificarlo.
INTRODUCCIÓN

El OJO HUMANO tiene un límite de

resolución:

“un límite en su capacidad de

discriminación o separación de
imágenes”

A una distancia de 2 metros podrá distinguir dos

puntos si están separados, como mínimo, por
1.000.000 de Aº (Angstrom)
DIMENSIONES BIOLÓGICAS

Medidas del mundo visible:

1 km (kilómetro) = 1.000 m (metros)
1 m (metro) = 1.000 mm (milímetros)
1 mm (milímetro) = 1.000 um (micrómetros, ex micra)

Medidas del mundo invisible:

1 um (micrómetro) = 1.000 nm (nanómetros)
1 nm (nanómetro) = 10 Aº (angstrom)
1 nm (nanómetro) = 1.000 pm (picómetros)
INTRODUCCIÓN
LENTES:
 Anteojos
 Lupas

Sistema de lentes superpuestas a lo largo de un

soporte
o montura:
 Catalejo
 Telescopio
 ¡MICROSCOPIO!
MICROSCOPÍA

MICROSCOPIOS
 MICROSCOPIOS

MICROSCOPIO ÓPTICO, de luz, Fotónico

o de Campo claro (MO)
Trabaja con una fuente de luz, se pueden observar
células vivas y muertas, con o sin coloración.
Puede aumentar hasta 2000 veces la imagen.

MICROSCOPIO ELÉCTRONICO (ME)

Utiliza haces electrónicos (en lugar de luz).
Brinda imágenes en blanco y negro.
Puede aumentar el tamaño de la imagen hasta
10.000.000 de veces.
MICROSCOPIO ÓPTICO
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Partes
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Características

 Es una sucesión de lentes convergentes sobre un eje

óptico.

 El preparado a estudiar (objeto) se coloca sobre un soporte

aplanado (platina) y se ilumina con una fuente de luz directa.

 En la subplatina (entre luz y platina) se encuentra el

condensador, que concentra los haces de luz sobre el objeto.

 Los haces de luz que atravesaron el objeto ingresan al

objetivo y luego al ocular.

De aquí surgen los conceptos: apertura numérica y

longitud de onda, que determinarán el poder de
resolución del MO.
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Poder de
resolución

El poder de resolución del microscopio representa la

capacidad de éste para ver como distintos dos puntos muy
próximos entre sí.

Está determinado por:

• Apertura numérica: cantidad de rayos luminosos que

ingresan al objetivo (luego de atravesar el preparado).
Cuantos más haces ingresen, mayor será la apertura
numérica.
• Longitud de onda de los haces luminosos (por lo general
se toma el espectro verde-amarillo) que representa la
calidad de los mismos.
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Poder de
resolución

PR = AN / LO
Entonces:
El poder de resolución (PR) del MO es directamente
proporcional a la Apertura numérica (AN) e inversamente
proporcional a la Longitud de Onda (LO).

Al ser el PR una capacidad (no medible), lo podemos expresar

como medida a través de su inversa, el límite de
resolución: “la mínima distancia a la que deben
encontrarse dos puntos próximos para que el MO pueda
distinguirlos como distintos” 0,2 um / 2000 Aº / 200
nm
LR = LO / AN
 MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Objetivos

OBJETIVO 100x
OBJETIVO 10x OBJETIVO 40x
o de inmersión

El aumento
Se observan dos números diferentes separados por una barra / total
se consigue
AUMENTO: El primer número: 10 - 40 - 100 multiplicando
los aumentos
APERTURA NUMÉRICA: El segundo número: 0,25 – 0,65 – 1,25 del objetivo y
el
ocular!!!!!!!!!!
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO): Variedades

 Campo oscuro
 Fluorescencia
 De luz ultravioleta
 Polarización
 Contraste de fase
 Interferencia
 Barrido confocal
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
 MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

 Fuente de energía distinta: ELECTRONES (de menor longitud

de onda)

 Alto vacío en el tubo: para el libre desplazamiento de los

electrones.

 Alto voltaje de trabajo: para el corrimiento acelerado de

electrones.

 Portaobjetos especiales agujereados: grillas de cobre.

 Bobinas electromagnéticas en reemplazo de las lentes de

vidrio.

 Pantalla fluoroscópica receptora (o placa fotográfica): el ojo

humano no es sensible a los electrones.
MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS: Variedades

 De Transmisión (MET)
Revela interiores, utiliza células muertas (algunas
variedades permiten células vivas). Brinda imágenes en
blanco y negro.
Aumento: hasta 10.000.000 x
LR (límite de resolución): 4 Aº

 De Barrido (MEB)
Dispara un haz muy fino de electrones que recorre al
objeto, obteniendo imágenes tridimensionales en blanco y
negro de la superficie exterior. LR mayor que el MET.
Se sugiere
utilizar la
bibliografía
recomendada

Este archivo
se ofrece
como una
ayuda, previa
lectura del
material de
estudio.