DETERMINACION DE

LIPOPROTEINAS
Lipoproteinas
 ESTRUCTURA
 QUILOMICRONES

ESTIMULA
LPL
ATEROESCLEROSIS
 TRANSPORTE INVERSO DEL COLESTEROL
 https://www.youtube.com/watch?v=AUu2iU1YyxY
DETERMINACION DE
FRACCIONES DE COLESTEROL

HDL COLESTEROL
https://www.youtube.com/watch?v=IFQ61LRpQJY
1. COMPETENCIAS.-

 Aprende la importancia de los valores altos del colesterol HDL.

 Conoce las principales enfermedades que se producen en la disminución
de los valores normales de HDL.
 Analiza la importancia de las lipoproteínas HDL de alta densidad.
 Dar significancia clínica.
 SIGNIFICANCIA CLÍNICA:
 Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que contienen cantidades
variables de colesterol, triglicéridos, fosfolípidos y proteínas .Estas partículas
solubilizan y transportan el colesterol en el torrente sanguíneo.
 La proporción relativa de proteína y lípido determina la densidad de estas
lipoproteínas .
 La función principal de las lipoproteínas de alta densidad o HDL ( High Density
Lipoprotein) en el metabolismo lipídico es la captación y transporte de colesterol
desde los tejidos periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte
transporte reverso de colesterol.( mecanismo cardioprotector).
 El HDL colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de enfermedad
cardíaca .Por esta razón la determinación HDL colesterol es una herramienta útil
en la identificación de individuos de alto riesgo.Colesterol HDL o “bueno”: Las
cifras elevadas son protectoras del sistema cardiovascular, de forma que no solo
no importa tenerlo alto sino que es el objetivo de algunos tratamientos que esta
cifra se eleve, al menos por encima de 35 mg/dL.
 PROCEDIMIENTO.-

 En un tubo medir 0.5 ml (500 ul) de suero agregar 50 ul de reactivo precipitante.

Homogeneizar agitando durante 20 seg y dejar 30 a 40 min en refrigerador ( 4- 10
o c ) o 15 min en BM .Centrifugar 15 min a 3000 r.p.m.Usar el sobrenadante límpido
como muestra. En 3 tubos de foto colorimétrico marcados B,S y D Colocar:
HDL colesterol ( g/l) = F x A F= 0,457 METODO

Ejemplo : AS = 0.421

AD = 0.612 B (Blanco) S (Standard) P (Problema)

HDL = Sobrenadante -- - 100 ul

 VALORES DE REFERENCIA:
Standard -- 20 ul

 VN : HDL Colesterol 0,40 – 0,60 g/l Reactivo enzimático (ml) 2 ml 2ml 2ml

 CUESTIONARIO
Mezclar e Incubar 5 minutos en BM a 37ºC . Leer las absorbancias llevando a
cero el espectrofotómetro a 505 nm. Estable 2 horas.
 1. ¿Cuál es la significancia clínica en la determinación de HDL?

 2. ¿Qué representan los valores incrementados o disminuidos de HDL?

 EQUIPOS

CENTRIFUGADORA ESPECTROFOTOMETRO
BAÑO MARIA
FUNDAMENTO DEL METODO.-
 Las lipoproteínas de alta densidad HDL se separan precipitando
selectivamente las lipoproteínas de baja y muy baja densidad ( LDL
y VLDL) mediante el agregado de sulfato de dextran de PM 50.000
en presencia de iones Mg++.En el sobrenadante separado por
centrifugación quedan las HDL y se realiza la determinación del
colesterol ligado a las mismas ,empleando el sistema enzimático
Colesterol Oxidasa/peroxidasa con colorimetría según Trinder (
Feno/4- Aminofenazona).
COLESTEROL LDL
 COMPETENCIAS.-
 Analiza los problemas fisiológicos que ocasiona el valor alto de las
lipoproteínas LDL.
 Establece relaciones entre las dos fracciones HDL y LDL.
 Interpreta los resultados de laboratorio.
 Significancia clínica.-
 El contenido aproximado de colesterol en cada familia de lipoproteínas es ( en % por unidad de
peso) : 1 % en quilomicrones,18 % en las VLDL, 50 % en las LDL y 23 % las HDL. Dado que cada
familia posee distinta actividad biológica, el significado clínico de un aumento de colesterol depende
de la o las proteínas que se encuentran en exceso.

 Los mecanismos reguladores de los niveles plasmáticos de lipoproteínas son muy complejas y
pueden ser afectados por múltiples factores (genéticos, ambientales, fisiológicos o
patológicos),siendo posible encontrar valores de colesterol total cercanos al rango normal
acompañadas de alteraciones en las fracciones lipoproteicas.las más estudiadas son las HDL y LDL.

 Las LDL producto del metabolismo de las VLDL en plasma son las encargadas del transporte del
colesterol exógeno ( y en mucho menos proporción ,endógeno ) hacia el interior de las células.

 Las LDL son las encargadas de llevar el colesterol a las células. Su exceso en sangre tiende a formar

 Ateromas (placas formadas en las paredes de las arterias, que producen estrechamiento y rigidez, la

 Arterioesclerosis) favoreciendo la formación de trombos.

5.-PROCEDIMIENTO.- En un tubo de Kahn. colocar:

Muestra: (suero) 200 ul.

Reactivo A precipitante: 100 ul.

Homogeneizar agitando (sin invertir) durante 20 seg. y dejar 15 min en BM a 20-25 °C

Centrifugar 15 min a 3000 rpm. Separar inmediatamente el sobrenadante y usar para el
ensayo colorimétrico.

Tomar tres tubos:

B (Blanco) S (Standard) P (Problema)

Sobrenadante -- - 100 ul

Standard -- 20 ul

Reactivo enzimático (ml) 2 ml 2ml 2ml

Mezclar e Incubar 5 minutos en BM a 37ºC . Leer las absorbancias llevando a cero el espectrofotómetro
a 505 nm.
CALCULOS DE LOS RESULTADOS

 LDL Colesterol ( g/l) = D x F F = 0624 Ej: AS =

AD =
 VALOR DE REFERENCIA:
 Riesgo bajo o nulo (sujetos normales) : LDL menores de 1,29 g/l
 Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad de contraer
ECC): valores de LDL entre 1,30 y 1,89 g/l
 Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer ECC): valores de
LDL mayores a 1,90 g/l.
CUESTIONARIO

 1. ¿Cuál es la significancia clínica en la determinación de LDL?

 2. Se le entrega el resultado de un examen de LDL de un paciente de 56
años y es el siguiente: 1,98 g/l. El paciente de sexo masculino, fuma desde
los 25 años, ingiere alcohol 2 veces por semana, además su peso es de 98
kg.
Después de leer esta breve descripción,
¿Cuál es su apreciación del problema?
¿Qué recomendaciones le daría al paciente?
 3. Ya que el colesterol LDL es considerado el colesterol “malo”, ¿cuan
conveniente sería para el organismo su ausencia total?