UNIVERSIDAD ANDINA DEL CUSCO

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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE MEDICINA HUMANA

MANUAL DE LABOTATORIO DE MICROBIOLOGÍA

General

Blga. ANA ISABEL OVIEDO VITORINO

CUSCO – PERU

2021 II
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PRACTICA N° 1
SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

ANTECEDENTES

Desde hace tiempo la Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguridad
y, en particular, la seguridad biológica son importantes cuestiones de interés internacional.
En 1983, la OMS publicó la primera edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio;
en la que se alentaba a los países a aceptar y aplicar conceptos básicos en materia de
seguridad biológica, así como elaborar códigos nacionales de prácticas para la
manipulación sin riesgo de microorganismos patógenos en los laboratorios que se
encuentran dentro de sus fronteras nacionales.
La tercera edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio de la OMS (2005)
proporciona la información más actualizada para abordar los aspectos de la seguridad y la
protección biológica que se plantean en el nuevo milenio. Asimismo, subraya la importancia
de la responsabilidad personal. Además, hace reflexionar sobre los recientes
acontecimientos mundiales que hacen evidente los peligros para la salud pública derivados
de la liberación o el uso indebido de agentes y toxinas microbianos.
Como futuros profesionales de estas disciplinas, es importante conocer los principios
básicos de seguridad en el trabajo con microorganismos, considerando los peligros relativos
que implican su manejo. De acuerdo con el potencial que tienen los microorganismos para
infectar al ser humano y los animales, se les ha clasificado en grupos de riesgo, que se
presentan en la Tabla 1.
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Tabla 1. Clasificación de microorganismos infecciosos por grupos de riesgo.

Grupo de riesgo 1 Microorganismos que tienen pocas

probabilidades de provocar enfermedades
(Riesgo individual y poblacional escaso
o nulo) en el ser humano o los animales.

Grupo de riesgo 2 Agentes patógenos que pueden provocar

enfermedades humanas o animales pero
(riesgo individual moderado, riesgo que tienen pocas probabilidades de
poblacional entrañar un riesgo grave para el personal
bajo) de laboratorio, la población, animales o el
medio ambiente. La exposición en el
laboratorio puede provocar una infección
grave, pero existen medidas preventivas y
terapéuticaseficaces y el riesgo de
propagación es limitado.

Grupo de riesgo 3 Agentes patógenos que suelen provocar

enfermedades humanas o animales
(riesgo individual elevado, riesgo graves, pero que de ordinario no se
poblacional bajo) propagan de un individuo a otro. Existen
medidas preventivas y terapéuticas
eficaces.

Grupo de riesgo 4 Agentes patógenos que suelen provocar

enfermedades graves en el
(riesgo individual y poblacional elevado)
ser humano o los animales y que se
transmiten con facilidad de un

individuo a otro, directa o indirectamente.

Por lo regular no existen

medidas preventivas y terapéuticas

eficaces

La OMS y los National Institutes of Health (NIH) de los Estados Unidos, han propuesto las
bases para la jerarquización de los laboratorios en función del grupo de riesgo al que
pertenecen los microorganismos que manejan, indicando las condiciones de acceso, tipo
de personal, equipo especial y diseño específico de las instalaciones.
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NORMAS DE SEGURIDAD EN LOS LABORATORIOS DE DOCENCIA

El Consejo Divisional de CBS aprobó un Instructivo del Funcionamiento Interno y Operativo

para Regular el Uso de los Servicios e Instalaciones de los Laboratorios de Docencia que
fue aprobado por el Consejo Académico en la Sesión número 314 del 9
de noviembre de 2009.
Un aspecto muy importante que se incluye en este instructivo es el de cumplir en forma
estricta las normas de seguridad
para evitar accidentes en el laboratorio, de manera particular en el capítulo IV de las Normas
de Seguridad Artículo17 que dice:

En el trabajo de laboratorio es fundamental la seguridad e integridad física de las personas

involucradas; por ello, no podrá realizarse ninguna práctica o actividad experimental si el
ejecutante no cuenta con los elementos de protección indispensables para su desarrollo o
no cumple con las disposiciones normativas aplicables, para lo cual se deberán cumplir
siempre las siguientes reglas.

1. El uso de bata en el laboratorio es obligatorio cuando se realizan experimentos. Es

recomendable vestir ropa sencilla, que proteja la mayor parte del cuerpo, de preferencia de
algodón, zapatos cerrados, con suelas gruesas y sin tacones o plataformas, así como traer
el pelo recogido.
2. No introducir ni consumir alimentos o bebidas en el laboratorio. No fumar, ni tocarse la
cara o los ojos con las manos.
3. Lavarse de manera meticulosa las manos con jabón y agua antes de salir del laboratorio,
incluso cuando salgan por breves periodos.
4. Al manipular sustancias químicas corrosivas o peligrosas se utilizarán guantes, lentes
protectores y/o mascarillas. No se deberá pipetear oralmente ningún tipo de solución o
cultivo microbiano. Siempre se utilizarán propipetas adecuadas para este fin.
5. No se admitirán visitas personales ni el uso de aparatos que distraigan la atención y
pongan en riesgo la seguridad en el trabajo.
6. Evitar la acumulación de materiales innecesarios en las mesas de trabajo. Realizar las
actividades de manera ordenada y en silencio para evitar accidentes.
7. Localizar extintores, botiquín y salidas de emergencia.

SOBRE LOS PROCEDIMIENTOS

1. Antes y después de cada sesión práctica, los alumnos limpiarán las mesas de trabajo
con el desinfectante que se le proporcionará.
2. Cuando se utilice el mechero, este será colocado en un lugar alejado del microscopio y
otros equipos.
3. En el caso de derrame de cultivos o ruptura de recipientes con cultivos activos, tratar de
conservar la calma, inmediatamente informar al profesor y/o realizar el siguiente
procedimiento:
a. Colocar toallas de papel sobre el material derramado para evitar su dispersión.
b. Agregar abundante solución desinfectante sobre las toallas.
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c. Dejar transcurrir al menos 15 minutos, retirar las toallas y tirarlas en el receptáculo

destinado a la eliminación de materiales contaminados.
4. Al concluir cada sesión práctica, el estudiante se asegurará de que los materiales de
desecho u objetos contaminados sean colocados en recipientes específicos para ello, así
como en lugares apropiados. Deberán esterilizarse tal y como indique el profesor.

SOBRE EL USO DE INSTALACIONES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

1. Operar un instrumento o aparato solamente cuando se sabe hacerlo, de otra manera,

solicitar la ayuda del profesor, del ayudante o del técnico del laboratorio, para adquirir la
destreza necesaria.
2. Una vez concluido el uso de un aparato o instrumento, seguir el procedimiento adecuado
para apagarlo, desconectarlo, guardarlo y entregar al profesor.

3. Siempre dejar perfectamente limpios todos los equipos utilizados (microscopios,

balanzas analíticas, autoclave, potenciómetros, etc.) y reportar al maestro cualquier
irregularidad en el funcionamiento.
4. Verificar que las tomas de agua, gas y aire en el lugar de trabajo estén bien cerradas.
Dejar limpias y secas las mesas de trabajo.

MATERIALES INDISPENSABLES EN CADA SESIÓN DE LABORATORIO

1. El Manual de laboratorio.
2. 2 cubre bocas y 1 par de guantes de látex.
3. Un pedazo de tela sin pelusa, cerillos, tijeras, cinta de enmarcar (masking-tape),
marcador indeleble o etiquetas pequeñas, jabón para manos.

Los laboratorios son unidades de servicio académico donde se desarrollan las prácticas de
las asignaturas de microbiología y parasitología.

1. Requisitos de uso:
- Mandil de algodón o dril que cubra desde el tórax hasta las rodillas y las mangas
que cubran todo el brazo con presencia de puño. El mandil no debe ser de
material sintético (Ej. Nylon).
- Pantalones y zapatos que cubran todo el pie. No debe presentarse con
sandalias.
- Cabellos recogidos.
- La mascarilla que cubra la boca y la nariz y los guantes quirúrgicos necesarios
para la práctica se solicitarán antes del laboratorio.
- El alumno NO puede ingresar al laboratorio con: Pulseras, anillos, collares o
cualquier otra prenda metálica. Bebidas, goma de mascar o cualquier tipo de
alimento.
- Los maletines, mochilas, sacos y/o abrigos, así como los teléfonos celulares
deben quedar guardados en los casilleros.
2. Con respecto al trabajo en el laboratorio el alumno:
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- No deberá iniciar la práctica sin la presencia, orientación y autorización del

docente.
- El alumno, antes de iniciada la práctica, debe haber leído la guía de tal manera
que conozca las advertencias, materiales, reactivos y procedimientos que se van
a realizar.
- Realizar sólo los experimentos programados.
- No utilizar ni tocar instrumentos o dispositivos que no estén señalados en la
práctica.
- No colocar sillas, bancas o cualquier otro mueble que impida el libre
desplazamiento por los pasadizos del laboratorio.
- Evitar humedecer el piso para evitar resbalones.
- Todo movimiento debe hacerse con cautela para evitar choques que puedan
producir roturas del material de laboratorio.
- Los trabajos de la práctica deben realizarse sobre la mesa del laboratorio sin
excepción alguna.
- Cuando tenga que mezclar un ácido con agua, vierta el ácido sobre el agua y no
al contrario, puede generar calor excesivo, salpicaduras u otras reacciones
inesperadas.
- El alumno desarrolla el cuestionario después de finalizada la práctica.
3. Al trabajar con tubos de ensayo se recomienda:
- Siempre deben estar colocados en la gradilla y no en otra localización (mesa,
bolsillos, etc.).
- No llenarlos con más del 25% de su capacidad total.
- Sujetarlos con pinzas cuando son calentados.
- La posición del tubo al momento de calentarlo debe presentar una inclinación
que impida que la salida de los vapores o líquidos entren en contacto con la
cara del operador o de los compañeros.
- Nunca calentar tubos tapados o cerrados.
- No agregar ningún reactivo a un tubo que se esté calentando.
- No utilizar recipientes no indicados para el calentamiento (Ej. matraz, probetas,
frascos, etc.)
- No dirigir la vista hacia la boca del tubo cuando se esté produciendo una
reacción o se esté calentando.
4. Con respecto al uso de los productos químicos:
- No deben ser inhalados colocando directamente la nariz sobre la boca del
recipiente.
- No deben ser tocados.
- Cada reactivo debe ser manipulado con un instrumento exclusivo para cada
uno de ellos.
- No deben ser probados.
5. Al terminar la práctica:
- La mesa debe quedar ordenada y limpia.
- Los tubos deben quedar limpios sobre las gradillas y los desechos en los
recipientes correspondientes. Todo ello bajo la supervisión del profesor.
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- En los lavatorios no se puede verter sólidos o papeles que puedan obstruir el

desagüe.
- Deben cerciorarse que las llaves de gas estén cerradas.
- Lavarse las manos prolijamente.
6. Avisar al docente en caso de:
- Fuego.
- Quemaduras.
- Salpicaduras.
Ingestión, inhalación, derrame sobre la piel de productos biológicos o químicos.

CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la bioseguridad, de cuántos niveles consta y qué características posee
cada uno de estos niveles?
2. Mencione las diferencias entre un laboratorio de microbiología y un laboratorio
convencional.
3. Mencione los pasos a seguir cuando un cultivo líquido bacteriano se derrama
sobre una superficie.
4. ¿Cuáles son los riesgos y problemáticas en el grupo que se tendrán al no seguir
las indicaciones recomendadas?