4. ¿Cuáles son las ventajas y limitaciones de la tinción de gram?

VENTAJAS

 Es eficaz
 Es económica
 Es un método rápido y sencillo
 Permite observar la forma, el tamaño y la agrupación de microorganismos
 Permite diferenciar bacterias gram positivas de gram negativas.
 Permite saber si la microbiota es mixta o monoespecífica.

Limitaciones de la tinción de Gram:

Algunas bacterias Gram-positivas pueden perder su tinción fácilmente y por lo tanto aparecen
como una combinación de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas (Gram-variable). Cuando
el exceso de decolorado incluso las bacterias Gram positivas pueden mostrarse de un color
rosado y cuando presentan una decoloración las bacterias Gram negativas aparecen como
Gram positivas.

La reacción Gram también depende de la edad de la célula. Viejos cultivos de bacterias gram
positivas (en donde las paredes celulares son débiles) pueden fácilmente decolorizarse.

Las células gram positivas afectadas por agentes activos de paredes ceulares como antibióticos
pueden volverse gram negativa.

Las bacterias gram positivas como actinomices, arthobacter, corynebacterium,

mycobacterium y propionibacterium tiene paredes celulares sensibles a romperse durante la
división celular, resultando en tinción gram negativa de esas células. En cultivos de bacillos y
clostridium, una disminución en el espesor peptidoglicano durante la división celular puede
causar que algunas de ella se muestren como gram negativas.

Algunos grupos de bacterias pueden mostrar respuesta variable a la tinción, la cual puede
deberes al crecimiento del stress (falta de nutrientes, inadecuada temperatura pH, o
electrolitos) que resulta en un número no viable de células gram negativas en un cultivo de
gram positiva.

Algunas bacterias tienen a mostrarse gram negativas cuando crecen en un medio acido.

La pérdida de las paredes celulares de las bacterias Gram-positivas puede hacerlas gram
negativas (L-forms). Las bacterias que no poseen pared celular son siempre gram negativas.
Bacterias como la Mycobacterium que tienen un contenido extra flexible en sus paredes
celulares son difíciles de teñir.

Pequeñas y finas células bacterianas como Treponema, Chlamydia, Rickettsia son algunas
veces difíciles de teñir por el método de gram.

Las bacterias gram positivas que han sido fagocitadas por polimophs pueden también aparecer
como gram negativas.