Pilar Obregón - UCC

25a. Práctico nº 4: Fasciola hepática

Técnica para observación de Fasciola Hepática
Técnica cualitativa: con sólo la presencia de 1 huevo se da diagnóstico positivo.
➢ Fasciola en el huésped definitivo:
○ Ovinos y bovinos (también caprinos, equinos , porcinos y fauna silvestre)
■ Ovinos: > patogenicidad, formas agudas pueden causar mortalidad. Se relaciona con
la aparición (predisposición) de clostridiosis.
■ Bovinos: menos sensible que ovinos. Formas subclínicas. Clostridiosis. Decomiso de
hígados.
➢ Recordemos que los huevos son muy pesados y mucho más grandes que el resto de los nematodes
que vimos (hasta 80 um) (la fasciola es un trematode), NO van a flotar.
○ Tienen cámara de aire y no son operculados.
○ Morulados.

Diagnóstico en animal vivo - diagnóstico de laboratorio:

Observación de huevos.
➢ Coproparasitológico: prueba de sedimentación.
○ La caída de los huevos de Fasciola hepática en agua es más rápida que la de los detritus de
la materia fecal.
○ Cualitativo.
➢ Enzimas sanguíneas:
○ a) glutamato deshidrogenasa (mitocondrial) elevada cuando las larvas migran por el
parénquima a partir de los 7 a 14 días post infección. Agudas.
○ b) glutamil transpeptidasa (lesión de los canalículos biliares). Subagudas
➢ Pruebas inmunológicas: ELISA: no disponible en Argentina.

MATERIALES:
Muestras de materia fecal (MF)
Pueden permanecer refrigeradas hasta 1 semana o más sin interferir en el diagnóstico. Es de gran ayuda
identificar la edad de los animales: por ejemplo, en ovinos y caprinos generalmente comenzamos a ver
huevos después de las 12 semanas de vida, después de tres meses desde que comienzan a consumir
pasturas (PP).

MÉTODO
1. Pesar 5 grs. de MF y morterear diluyendo con 250 ml de agua corriente colocando la mezcla en
el frasco de vidrio marcado.
a. Agua de la canilla puede ser porque no necesitamos cultivar, no vamos a matar las larvas
porque queremos ver los huevos.
b. Si es materia fecal de ovino o caprino debemos romper las bolitas de materia fecal
primero y luego seguir las instrucciones.
2. Tapar el frasco y agitarlo.
3. Superponer ambos filtros y colar, recuperando el líquido en otro frasco.

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a. Usamos filtros micrometrados (mejor que coladores y gasas), que vienen de 380 um y
177 um, así dejamos pasar los huevos (140) pero no los sedimentos mayores al mismo y
no dificultan su observación.
4. Colocar lo obtenido en un tubo Falcon (cónico) enrasando en 50 ml.
5. Esperar 5 minutos.
a. En esos 5 minutos las estructuras pesadas sedimentan y las livianas suspenden.
6. Luego de transcurridos los primeros 5 minutos, realizar la 1er recuperación, eliminando mediante
la jeringa acoplada con la gomita el sobrenadante hasta llegar a los 15 ml.
7. Completar el volumen eliminado del tubo Falcon con agua corriente hasta los 50 ml finales.
8. Esperar 5 minutos.
9. Luego de transcurridos los 5 minutos, realizar la 2º recuperación, eliminando mediante la jeringa
acoplada con la gomita el sobrenadante hasta llegar a los 10 ml.
10. Esperar 5 minutos.
11. Luego de transcurridos los 5 minutos, realizar la 3ra recuperación, eliminando mediante la jeringa
acoplada con la gomita el sobrenadante hasta llegar a los 5 ml.
12. Eliminar con la pipeta Pasteur algunos ml., a fin de dejar sólo un pequeño volumen en el fondo
del tubo junto con el sedimento.
13. Colocar una gota del sedimento en cada una de las cámaras. Si queda muy espeso completar el
volumen de la cámara con agua. Homogeneizar.
14. Colocar la cámara en MO a 4X. Se observará el sedimento con alto contenido de fibras vegetales.
a. Los huevos de Fasciola se caracterizan por tener forma ovalada y una coloración algo
dorada.
b. Para ver el sedimento podemos usar la misma cámara de mcmaster que usábamos en el
hpg.
15. Si el sedimento es muy abundante se puede mover con una aguja o bien diluir con agua.
16. Algunos recomiendan para mejorar la visualización de los huevos, añadir unas gotas de Lugol.
Tener mucho cuidado de no confundirlos con los huevos de Paramphistomum!!! Son muy
similares, aunque estos últimos son algo más plateados/celestes, mientras que los de Fasciola
son más dorados. Mejor no hacerlo!
a. Se puede teñir con azul de metileno, el mismo tiñe el sedimento y no es tomado por el
huevo de Fasciola, quedando de color amarillo.
Video: min 2:05:20 práctico 1
https://drive.google.com/file/d/1n0E6ZT9eLwVaHi_5EW4/edit este es el link del power, pero a mi no
me anda, por eso siempre les pongo los minutos de la clase por las dudas.

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Diagnóstico en animal muerto - diagnóstico por Necropsia:

➢ Fasciolasis aguda: inflamación y hemorragias en parénquima hepático (migración en las primeras 8
semanas post infección). Hematomas subcapsulares, peritonitis fibrinosa.
○ Si se corta el hígado en láminas se pueden encontrar numerosas fasciolas juveniles.
➢ Fasciolosis crónica: anemia, fibrosis hepática, colangitis, ganglios linfáticos agrandados,
canalículos biliares engrosados y calcificados con presencia de Fasciolas adultas.