Determinación de Vitamina E

(dl-α tocoferyl acetato)

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Establecer y garantizar una sistemática para la determinación de Vitamina E (dl-α tocoferyl acetato).
Esta Metodología aplica a Materias Primas, y Pre mezclas, que contenga este principio activo.

4.1 Equipos, Reactivos y Soluciones

4.1.1 Balanza Analítica
4.1.2 Equipo UPLC (Quaternary Solvent Manager, Sample Manager, PDA detector).
4.1.3 Metanol, grado HPLC
4.1.4 Etanol, grado HPLC.
4.1.5 Otros materiales requeridos en la determinación.
4.1.6 Condiciones Cromatograficas:
4.1.6.1 Columna : XBridge C18 5 µm.
4.1.6.2 Fase móvil Metanol : Etanol (98:2).
4.1.6.3 Diluente: Etanol
4.1.6.4 Flujo 1,0 ml/minuto.
4.1.6.5 Volumen de inyección 10 µl.
4.1.6.6 Longitud de onda: 280 nm
4.1.6.7 Temperatura de la columna 28 C°
4.1.6.8 RT aproximado: 5.91 minutos, con una sensibilidad 0.04870 AU (Este tiempo, puede
variar, dependiendo de las condiciones de la columna, fase móvil, flujo, entre otras)
4.1.6.9 ER aproximado: 7.5 minutos (Este tiempo puede variar, dependiendo de las condiciones
de la columna, fase móvil, flujo, entre otras)
4.1.6.10 Presión aproximada 2386 psi
4.1.6.11 Opciones a utilizar en el software:
4.1.6.11.1 Proyecto Vitamina E,
4.1.6.11.2 Vitamina E MI1
4.1.6.11.3 Vitamina E MS
4.1.6.11.4 El método de procesamiento, dependerá de las condiciones de la muestra a
analizar.
5.1 Preparación del Estándar:
 5.1.1 Pesar 0.04 g de Materia Prima Vitamina E50, en un balón de 100 ml, agregar 20 ml de
Etanol, llevar al ultrasónico por 10 min, transcurrido el tiempo, enfriar a temperatura ambiente
y aforar con el mismo diluente.
5.1.2 Filtrar por acrodiscos de membrana 0.2µm, alrededor de 2 ml, luego transferirlo a un vial
Ansi-48 -12 ml holder y llevar a los platos del equipo.
5.2 Preparación de la Muestra:
5.2.1 Materia Prima: Pesar 0.04 g, de muestra, en un balón de 100 ml.
5.2.2 Pre Mezcla: Pesar 5 g en un balón de 100 ml.
5.2.3 Agregar a cada balón por separado, 20 ml de etanol grado HPLC.
5.2.4 Colocar los balones en el ultrasónico por 10 min
5.2.5 Transcurrido el tiempo, dejar enfriar a temperatura ambiente
5.2.6 Llevar a volumen, todas las muestras, con el mismo diluente.
Filtrar por acrodiscos de membrana 0.2µm, alrededor de 2 ml
5.2.7 Posteriormente transferir a un vial Ansi-48 -12 ml holder y llevar a los platos del equipo.

5.3 CALCULOS PARA INGRESAR AL EQUIPO

5.3.1 SI LA MUESTRA A EVALUAR ES VITAMINA SE INGRESA DE ESTA MANERA:

Conc estándar = gr estándar X potencia certificada del estándar g%/ml
XF =1
Amout = 1
Donde:
gr estandar: Valor obtenido del peso del estandar o patrón referencial..
XF: Factor de dilución de la muestra .
Unid= g%/ml

5.4 REFERENCIAS:

5.4.1 Microvit TM. Vitamina E, Analysis Methods Rhose Poulene, ajustado a equipo

5.4.2 Métodos de vitaminas, oíl-solubles Laboratorios CienVar, proveedor del equipo.

5.4.3 Basf A.G. Estimación of vitamins and carotenois in premix and feed Metodo No. 1/1989,
adaptación B.V.
5.5 ANEXO

5.5.1 Cromatograma guía:

Sin título

R ep o rt ed b y Use r: Syst e m P roj e ct Na me : Vi t am i n a E

R ep o rt M e t ho d : S i n t í t u lo Dat e Pri n t ed :
R ep o rt M e t ho d I D:
1 212
55 2 3 /0 5 /
2012
02 :
19:2 4 p . m. Am er i ca/ C ara c as

S A M P L E INF O R M A T IO N
Sam pl e Nam e: Vi t E Lohm an 20 963 Acqui red By: System
Sam pl e T ype: Unknown Sam pl e Set Name: 150512
Vi al : 1:A,2 Acq. Method Set: Vi tam i na E MS
Inj ecti on #: 1 Processi ng M ethod: Vi tam i na E MP
Inj ecti on Vol um e: 10,00 ul Channel Nam e: PDA Ch1 280nm @4.8nm
Run T i m e: 7,5 M i nutes Proc. Chnl . Descr.: PDA Ch1 280nm @4.8nm

Date Acqui red: 15/05/2012 10:25:11 AM VET

Date Processed: 15/05/2012 01:25:59 PM VET

Auto-Scaled Chromatogram

0,040

0,030
AU

V it a m in a E - 6 , 2 1 4
0,020

0,010

0,000

0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 7,00

Minutes

Peak Results
Name RT Area Heig ht Amount Units
1 Vitamina E 6,214 520627 45908 50,167 g%/ml>