Está en la página 1de 44

lOMoARcPSD|6056807

Agar Mac Conkey - Medios de cultivo

Laboratorio de medios continuos (Universidad de Guadalajara)

StuDocu no está patrocinado ni avalado por ningún colegio o universidad.


Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)
lOMoARcPSD|6056807

Agar MacConkey
Uso: Sirve como un indicador visual de pH, distinguiendo así las bacterias gram
negativas que pueden fermentar la lactosa (Lac+) y las que no pueden (Lac-).

Fundamento: El fundamento de este medio se puede explicar a través de la


descripción de sus componentes, pues cada uno posee una finalidad que determina
una propiedad del mismo.

- Sales biliares y cristal violeta

En este sentido, el agar MacConkey tiene una composición compleja. En primer lugar
contiene sales biliares y cristal violeta.

Estos elementos se encargan de inhibir el crecimiento de bacterias Gram positivas y


algunos bacilos Gram negativos exigentes. A su vez favorece el desarrollo de los
bacilos Gram negativos que no son afectados por estas sustancias. Por ello es un
medio selectivo.

Se dice que es ligeramente selectivo en comparación a otros medios que igualmente


inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas y también de la mayoría de las
bacterias Gram negativas.

Es extremadamente selectivo para un determinado género, como por ejemplo el agar


TCBS para aislamiento de Vibrio cholerae y otras especies similares halófilas y
alcalófilas.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

- Peptonas, polipectonas y lactosa

Contiene sustancias que aportan los nutrientes necesarios a los microorganismos que
se desarrollan en este medio, como las peptonas, polipectonas y la lactosa.

La lactosa es el punto clave para que el medio sea un medio diferencial, pues los
microorganismos que poseen la capacidad para fermentar la lactosa desarrollaran
colonias rosadas fuertes.

Algunas bacterias pueden fermentar la lactosa lentamente o débilmente, desarrollando


colonias color rosado pálido y siguen siendo lactosa positiva.

Las que no fermentan la lactosa utilizan las peptonas como fuente de energía,
produciendo amoníaco, alcalinizando el medio. Por ello las colonias que se originan son
incoloras o transparentes.

- Indicador de pH

El cambio de color se logra a través de otro compuesto esencial que posee el agar
MacConkey. Este compuesto es el indicador de pH, que en este caso es el rojo neutro.

La fermentación de la lactosa genera la producción de ácidos mixtos. Los mismos


acidifican el medio a un pH por debajo de 6,8.

Esto hace que el indicador de pH vire hacia a una tonalidad rosada intenso. La
intensidad del color puede variar dependiendo el pH final.

- Agua destilada, cloruro de sodio y agar

Por otra parte, contiene agua destilada y cloruro de sodio que le dan la hidratación y
equilibrio osmótico al medio. Finalmente, el medio contiene agar, que es la base que
proporciona la consistencia de medio sólido.

El medio agar MacConkey preparado debe tener un pH final ajustado a 7,1 ± 0,2.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Contenido y composición:
Peptona pancreática de gelatina 17,0 g
Triptona 1,5 g
Peptona de carne 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Sales biliares 1,5 g
Cloruro sódico 5,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar agar 13,5 g

Formula (en gramos por litro)


Agar 13.5,
Mezcla de sales biliares 1.5,
Cloruro de sodio 5.0,
Peptona especial 3.0,
Cristal violeta 0.001,
Peptona de gelatina 17.0,
Lactosa 10.0,
Rojo neutro 0.03 (pH 7.1 ± 0.2).

Instrucciones
Rehidratar 50 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.
Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para
disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15
minutos. Enfriar aproximadamente a 45°C. Vaciar en cajas de Petri estériles. Conservar
en refrigeración de 2 a 8ºC.

Almacenamiento
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 °C,
envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelación y el
calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad
(ver la etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de incubación
recomendados. Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos pueden usarse durante
una semana siempre que se almacenen en un lugar limpio a una temperatura entre 2 y
8 °C.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Procedimiento
Para un litro de agar MacConkey se debe
pesar 50 gr del medio deshidratado, luego se
coloca en una fiola y se disuelve en un litro
de agua destilada. Después de 10 minutos
de reposo se calienta mezclando
constantemente hasta dejar hervir por 1
minuto.

Luego se coloca la fiola en el autoclave y se


esteriliza a 121°C por 20 minutos. Culminado
el tiempo, se saca del autoclave y se deja enfriar hasta alcanzar una temperatura de
45°C, para posteriormente servir en placas de Petri estériles dentro de una campana de
flujo laminar o frente al mechero de Bunsen. Dejar solidificar y guardar en un
portaplaquero de forma invertida y refrigerar en nevera a 2-8°C hasta su uso.

Interpretación de resultados

E. coli: Colonias de color de rosa a rojo (pueden estar rodeadas de una zona con
precipitación de bilis)

Enterobacter, Klebsiella: Colonias mucoides de color rosa

Proteus: Colonias incoloras, inhibición de agrupamiento dinámico alrededor de colonias


aisladas

Salmonella, Shigella: Colonias incoloras. Color del medio: Anaranjado a ámbar

Pseudomonas: Colonias irregulares, de incoloras a color rosa

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Control de calidad

Escherichia coli ATCC 25922: Crecimiento;


colonias de color rosa
Proteus mirabilis ATCC 12453: Crecimiento;
colonias de incoloras a color beige,
agrupamiento dinámico inhibido
Salmonella Typhimurium ATCC 14028:
Crecimiento; colonias de incoloras a color beige
Salmonella Abony DSM 4224: Crecimiento; colonias de incoloras a color beige
Shigella flexneri ATCC 12022: Crecimiento; colonias incoloras
Enterococcus faecalis ATCC 29212: Inhibición de parcial a completa
Staphylococcus aureus ATCC 25923: Inhibición de parcial a completa
Sin inocular: Rosa claro, ligeramente opalescente

Precauciones
Solamente para uso profesional. No utilizar las placas si muestran evidencia de
contaminación microbiana, decoloración, deshidratación, grietas o cualquier otro signo
de deterioro. Consultar los procedimientos de manipulación aséptica, riesgos biológicos
y eliminación del producto en el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO.

Referencias
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2ed674cf661.pdf

https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8770

https://www.probiotek.com/productos/reactivos/medios-de-cultivo-reactivos/agar-de-mac-conkey/

https://www.lifeder.com/agar-macconkey/

Indicaciones del consumidor


Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las
indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Sal y manitol
Uso: Se utiliza para el aislamiento selectivo de estafilococos y para la detección de
Staphylococcus aureus a partir de muestras clínicas.

Fundamento: El agar manitol es selectivo gracias


a la alta concentración de sal que posee. La salinidad
actúa como sustancia inhibitoria y evita el crecimiento
de bacterias Gram negativas.
También es diferencial debido a la presencia del
carbohidrato manitol y al indicador de pH rojo de fenol.
A partir de este, las bacterias capaces de fermentar el
manitol producen ácidos, acidificando el medio,
tornándose las colonias y el medio de color amarillo.
Por otra parte, las colonias que no fermentan el manitol
crecen en el medio tomando los nutrientes que les proporciona los extractos y peptonas
de carne y la tripteína. De allí las bacterias extraen el carbono, el nitrógeno, las
vitaminas y los minerales necesarios para su crecimiento. Las colonias en este caso
pueden ser rosadas débil o fuertes, y el medio se queda del mismo color o cambia a
fucsia. El agar es la sustancia que proporciona la consistencia al medio.

Contenido y composición
Proteosa peptona 10,0 g
Extracto de carne 1,0 g
D-Manitol 10,0 g
Cloruro de sodio 75,0 g
Agar 15,0 g
Rojo fenol 25,0 mg
Agua destilada c.s.p. 1000 mL

Formula:
Fórmula Litro
Digerido enzimático de caseína 5g
Digerido enzimático de tejido animal 5g
Extracto de carne de res 1g
D-Manitol 10 g
Cloruro de sodio 75 g
Rojo de fenol 0.025 g
Agar 15 g
pH final: 7.4 ± 0.2 a 25°C

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Instrucciones: Homogeneice el polvo contenido en el frasco. Añada 111 gramos


de medio deshidratado en un litro de agua destilada estéril. Mezcle hasta que se
obtenga una suspensión homogénea. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y
luego caliente hasta hervir y que se consiga la disolución completa. Esterilice en el
autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dispense en placas de Petri o frascos.

Características: Medio de cultivo de color rojo


Almacenamiento: Una vez recibidas en el laboratorio, almacenar en lugar
oscuro y seco a una temperatura de 8 ºC, en su embalaje original hasta el momento de
uso Este medio es muy sensible a la luz, durante la incubación minimizar su exposición
a la luz. Evitar la congelación y el sobrecalentamiento. Las placas deben estar a
temperatura ambiente antes de ser inoculadas. No deben utilizarse con posterioridad a
la fecha de caducidad. Las bolsas deben ser abiertas cuando vayan a ser utilizadas,
una vez abiertas las que no se utilicen deberán mantenerse en áreas limpias y
refrigeradas.

Preparación: Para preparar un litro de agar manitol salado se pesan 111 gr del
medio deshidratado de la casa comercial de preferencia y se disuelven en 1000 ml de
agua destilada, utilizando una fiola.
Se aplica calor removiendo
frecuentemente el medio para mejorar el proceso
de disolución. Se deja hervir durante un minuto. Se
coloca la fiola en el autoclave a 121°C por 15
minutos. Terminado el tiempo, se saca la fiola del
autoclave, se deja reposar y se sirve entre 15 a
20 ml sobre placas de Petri estériles cuando la
temperatura sea aproximadamente de 50 a 55°C.
Se deja solidificar, ordenando de forma invertida en
plaqueros y guardando en nevera hasta su uso. Antes de sembrar una muestra, se
debe esperar a que la placa tome la temperatura del ambiente.

Interpretación de resultados:
Microorganismos fermentados de manitol: Colonias de color amarillos rodeadas o
no de un hilo amarillo
Microorganismos no fermentados de manitol: Colonias de color del medio rojas
rodeadas o no de halo rojizo-purpura.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Control de calidad
Staphylococcus aureus ATCC 6538:
Colonias amarillas de tamaño mediano,
amarillo medio.
Staphylococcus aureus ATCC 25923:
Colonias amarillas de tamaño mediano,
amarillo medio.
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228:
Colonias blancas de tamaño pequeño a
mediano, rojo mediano.
Proteus mirabilis ATCC 12453: Inhibición parcial (a completa); colonias incoloras,
agrupación activa inhibida.
Escherichia coli ATCC 25922: Inhibición completa Sin inocular Rojo

Materiales necesarios no previsto: Equipo y material de laboratorio,


microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales
según requerimientos

Precauciones:
- Solamente para uso diagnóstico. Uso profesional exclusivo
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado
- Utilizar ropa protectora y guantes al trabajar

Referencias
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2ed6c53aed1.pdf

http://fsoria.esDifco%20Fichas%20tecnicas/PLACAS%20DIFCO%20Y%20CROMOGENICAS%20BD/FT
%20MANNITOL%20SALT%20AGAR.pdf

https://www.lifeder.com/agar-sal-y-manitol/

https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8771

Indicaciones al consumidor
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las
indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Salmonella-Shigella
Uso: Se usa frecuentemente en el
análisis de coprocultivos y en el estudio
microbiológico de muestras de agua
residuales, aguas de consumo y
alimentos.Frecuentemente se preparan
placas dobles, en un lado se coloca
agar Salmonella-Shigella y en el otro agar
XLD.

Fundamento: Cada componente del medio de cultivo Salmonella-Shigella posee


una función específica, y el conjunto de la mezcla le brinda las propiedades que lo
caracterizan.

- Poder nutritivo
El extracto de carne y la peptona (digerido de caseína y de tejido animal) proporcionan
los nutrientes requeridos (nitrógenos, carbono y vitaminas) para el desarrollo de los
microorganismos capaces de tolerar el resto de los componentes.

- Consistencia

El agar-agar es el encargado de brindar la consistencia sólida al medio.

- Selectivo

Este medio es altamente selectivo debido a que contiene sales biliares, citrato de sodio
y verde brillante. Por ello, inhibe el crecimiento de todas las bacterias Gram positivas y
de la mayoría de los bacilos Gram negativos, incluyendo algunos coliformes. Mientras
que las bacterias del género Salmonella y algunas cepas de Shigella si soportan estos
compuestos. Principalmente, el género Salmonella es muy resistente a las sales
biliares, tanto que son capaces de vivir en la vesícula biliar de algunos pacientes
portadores que expulsan la bacteria constantemente por las heces.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

- Diferencial

La lactosa es el carbohidrato fermentable que ayuda a diferenciar las cepas


fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras. Esta propiedad es evidenciada por
la presencia del indicador de pH, que en este medio es el rojo de fenol. Las cepas
fermentadoras de lactosa dan colonias rojas, mientras que las no fermentadoras son
incoloras. Esta característica es importante, ya que Salmonella y Shigella no fermentan
la lactosa. Por otra parte, este medio contiene tiosulfato sódico como fuente de sulfuro y
citrato férrico como fuente de hierro. Ambos compuestos logran diferenciar a las
bacterias capaces de producir sulfuro de hidrógeno. Estas reaccionan para formar un
precipitado negro de sulfuro férrico insoluble y visible. Esta propiedad la tienen algunas
cepas del género Salmonella. Normalmente sus colonias son planas incoloras con un
punto negro en el centro de la misma. El resto de las Salmonellas no producen H 2S y se
desarrollan como colonias incoloras. Por otra parte, las colonias del género Shigella
son planas incoloras sin ennegrecimiento.

Contenido y composición: Codigo B231383: envase x 10 placas

Formula:

Extracto de carne bovina 5,0 g


Digerido pancreático de caseína 2,5
Digerido péptico de tejido animal 2,5
Lactosa 10,0
Sales biliares 8,5
Citrato sódico 8,5
Tiosulfato sódico 8,5
Citrato férrico 1,0
Rojo neutro 0,025
Agar 13,5 g
Verde brillante 0,330 mg
pH 7,2 ± 0,2

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Instrucciones: Placas listas para usar


Característica del producto: Medio de cultivo de color naranja ligeramente
opalescente

Almacenamiento: A 2-8 °c
Procedimiento: Este medio es muy sencillo de preparar.
Pesar 63 gr del medio comercial deshidratado y disolver en
un litro de agua destilada. Calentar la disolución y agitar. La
mezcla puede llegar hasta la ebullición hasta durante
minutos.
Este medio no debe autoclavarse. Después de su disolución
se sirve directamente sobre placas estériles sencillas o
dobles.
Al solidificar se ordenan de forma invertida en plaqueros y se guardan en nevera (2-
8°C) hasta su uso.
El medio después de preparado debe quedar a pH 7,2 ± 0.2 y con color rojo naranja.

Interpretación de los resultados:


- Microorganismos fermentadores de lactosa: Colonias rosadas o rojizas.
- Microrganismos no fermentadores de lactosa: Colonias del color del medio,
incoloras.

Control de calidad
- Escherichia coli ATCC 25922: Inhibición de parcial a completa; colonias de
color rojo carmesí con precipitación
- Enterococcus faecalis ATCC 29212: Inhibición completa.
- Salmonella Typhimurium ATCC 14028: Crecimiento de bueno a excelente;
colonias de color beige con centros blancos
- Shigella flexneri ATCC 12022: Crecimiento de adecuado a excelente; colonias
de color de rosa claro a incoloras
- Sin inocular: Rojo anaranjado, tono rosado

Materiales necesarios no previstos: Equipos y material de laboratorio,


microorganismo para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según
requerimiento.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Precauciones:
- Solamente para uso diagnóstico. Uso profesional exclusivo
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado
- Utilizar ropa protectora y guantes al trabajar

Referencias:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2ed7669fc8e.pdf

https://www.lifeder.com/agar-salmonella-shigella/#Preparacion

https://www.bd.com/resource.aspx?idx=8779

Indicaciones al consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Biggy
Uso: Las placas se incuban a temperatura
ambiente (25°C) por 24, 48 y 72 horas,
pudiendo alargarse el tiempo de incubación
hasta 5 días.
Cada especie de Candida desarrolla ciertas
características que las hace distinguir una de
otra. Los fabricantes del medio describen las
siguientes características para cada especie:
-Complejo Candida albicans: se desarrolla en este agar como colonias lisas, redondas,
color café o negras, con un ligero borde micelial. Con la salvedad de que el color
oscuro no se difunde al medio.
-Candida tropicalis: las colonias brillantes, pequeñas, de color café oscuro, con centro
negro y ligero borde micelial. El color oscuro se difunde hacia el medio, característica
que es propia de esta especie, después de haber sido incubada durante 72 horas.
-Candida krusei desarrolla colonias de aspecto rugoso, planas, de gran tamaño, con el
borde entre color café a negruzco.
-Candida parakrusei: colonias tamaño mediano, la mayoría de las veces con aspecto
rugoso, planas. El color puede variar entre café rojizo oscuro brillante a café rojizo claro.
El borde de las colonias presenta un micelio extenso, amarillento.
-Candida stellatoidea: desarrolla colonias medianas, planas, color café oscuro, casi
negro. El desarrollo micelial es muy escaso.
Un estudio realizado por Yücesoy y Marol en el 2003, demostró que el medio
CHROMagar presenta mejor sensibilidad y especificidad para la diferenciación e
identificación de distintas especies de Candida que el agar BIGGY.

Fundamento: El agar BiGGY es considerado un medio parcialmente selectivo para


el aislamiento de levaduras, especialmente del género Candida, aunque pueden crecer
otros géneros.
También es un medio diferencial porque dependiendo de la especie involucrada se
observarán características distintas en cuanto aspecto, color, forma y tamaño. Es
considerado un medio cromogénico, por el desarrollo de colores diversos en las
colonias.
El color que presentan las colonias de las levaduras se debe a la presencia de sulfito de
bismuto en el agar. Nickerson se dio cuenta de que las levaduras del género Candida
realizan una reducción extracelular del sulfito de bismuto, transformándolo en sulfuro de
bismuto (sustancia insoluble de color negro). Esto origina colonias entre marrón claro a
negro.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Este agar contiene extracto de levadura y dextrosa, lo que proporciona la fuente de


nutrientes básicos y energía para el desarrollo de las levaduras. La glicina es un
estimulante del crecimiento de las levaduras, en tanto que inhibe el desarrollo de
ciertas bacterias.
En este mismo sentido, el citrato de amonio y bismuto, así como el sulfito de sodio
actúan como inhibidores del crecimiento bacteriano. El agar es el agente que le brinda
la consistencia sólida al medio.

Contenido y composición:
 Extracto de levadura 1.0 g
 Glicina 10.0 g
 Glucosa 10.0 g
 Citrato-bismuto amoniacal 5.0 g
 Sulfito sódico 3.0 g
 Agar-agar 15.0 g

(Fórmula por litro) pH final: 6,8 ± 0,2

Formula (en gramos por litro)


Citrato de amonio y bismuto 5.0 g Glicina 10.0g
Sulfito de sodio 3.0 g Extracto de levadura 1.0g
Dextrosa 10.0 g Agar Bacteriológico 16.0g
pH 6.8 ± 0.2

Instrucciones:
1. Suspenda 45 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Caliente con agitación frecuente e hierva durante un minuto para disolver
completamente el medio.
3. NO AUTOCLAVE.

Almacenamiento: Una vez recibidas en el laboratorio, almacenar en lugar


oscuro y seco a una temperatura de 8 ºC, en su embalaje original hasta el momento de
uso. Evitar la congelación y el sobrecalentamiento, así como las variaciones bruscas de
temperatura . Las placas deben estar a temperatura ambiente antes de ser inoculadas.
No deben utilizarse con posterioridad a la fecha de caducidad. Las bolsas deben ser
abiertas cuando vayan a ser utilizadas, una vez abiertas las que no se utilicen deberán
mantenerse en áreas limpias y refrigeradas.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Procedimiento: Pesar 45 gr del medio de cultivo


deshidratado y disolver en un litro de agua destilada. Agitar y
calentar la mezcla, dejando hervir por 1 minuto hasta la
disolución completa. Este medio de cultivo no se esteriliza en
autoclave. Al enfriar aproximadamente a 45°C en baño de maría
verter 20 ml sobre placas de Petri estériles.
El color del medio deshidratado es gris amarillento y preparado
es un gel color blanco amarillento, en el que puede observarse un leve precipitado
floculante.
El pH debe quedar a 6,8 ± 0,2.

Interpretación de resultados:
- Candida albicans: Colonias de color rojo amarronado a negro, sin difusión de
pigmento en el med sin brillo
- C. tropicalis: Colonias de color marrón oscuro con centros negros y brillo,
oscurecimiento difuso del medio circundante (a menudo sólo después de 72 h de
incubación)
- C. krusei: Colonias grandes, planas, de color marrón rojizo, con parte superior negra
brillante, borde marrón y halos amarillentos
- C. pseudotropicalis: Colonias grandes, de color marrón rojizo y planas con borde
micelial
- Candida glabrata: Colonias de color marrón pálido a claro

Control de calidad:
- Candida albicans ATCC 60193: Colonias de color rojo amarronado, o crema
con centros marrones; sin brillo
- Candida glabrata ATCC 2001: Colonias de color marrón claro
- Candida krusei ATCC 34135: Colonias grandes, planas, de color marrón rojizo,
con parte superior negra brillante, borde marrón y halos amarillos
- Candida tropicalis ATCC 1369: Colonias marrones con centros negros y brillo,
oscurecimiento difuso del medio circundante (a menudo sólo después de 72 h de
incubación)
- Escherichia coli ATCC 2592: Inhibición de parcial a completa; colonias de color
beige
- Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853: Inhibición de parcial a completa;
colonias de color beige
- Staphylococcus aureus ATCC 25923: Inhibición de parcial a completa; colonias
de color blanco
- Sin inocular: Colonias de color blancuzco a ámbar claro, opalescentes y con
precipitado ligeramente floculante.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Materiales necesarios no previstos: Equipo y material de laboratorio,


microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales
según requerimientos

Precauciones: Este producto es para uso exclusivo de profesionales. No debe ser


utilizado en caso de presentar contaminación microbiana, decoloración, signos de
deshidratación, roturas u otros signos de deterioro. Utilizar bajo procedimientos de
laboratorio, siempre como material biopeligroso.

Referencias:
http://fsoria.es/Inform_soria/Difco%20Fichas%20tecnicas/PLACAS%20DIFCO%20Y%20CROMOGENICAS
%20BD/FT%20BIGGY

https://www.lifeder.com/agar-biggy/

https://www.bd.com/resource.Aspx?IDX=8799

Indicaciones al consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Emb
Uso: Este medio se utiliza para sembrar orina y
heces o cualquier tipo de muestras clínicas,
especialmente si se sospecha de la presencia de
bacilos Gram negativos no exigentes, como los
bacilos pertenecientes a la familia
Enterobacteriaceae, que crece muy bien en este
medio.
Las bacterias enteropatógenas de los géneros Shigella y Salmonella se distinguen por
sus colonias incoloras o ligeramente ámbar.
También crecen otros bacilos no fermentadores de lactosa como Aeromonas,
Pseudomonas, Acinetobacter, entre otros.
Así mismo, este medio es muy útil en el análisis microbiológico de alimentos y aguas,
pues es ideal para la fase completa confirmatoria de la determinación de coliformes, es
decir, para corroborar la presencia de E. coli a partir de caldos EC turbios, provenientes
de la técnica del número más probable (NMP).

Fundamento:
Selectivo
El agar EMB es sutilmente selectivo porque contiene los colorantes anilínicos (eosina y
azul de metileno), los cuales actúan como inhibidores, impidiendo el crecimiento de la
mayoría de las bacterias Gram positivas y de algunos bacilos Gram negativos
exigentes.
Sin embargo, este agar tiene el inconveniente de que algunas bacterias Gram positivas
pueden resistir la presencia de las sustancias inhibidoras y crecer como pequeñas
colonias puntiformes incoloras, tal como el Enterococcus faecalis y
algunos Staphylococcus.
También pueden crecer ciertas levaduras, como el complejo Candida albicans, que dará
colonias rosadas muy pequeñas. Inclusive se pueden desarrollar clamidosporas a partir
de esta levadura si la muestra es sembrada por profundidad.

Diferencial
Por otra parte, el agar EMB también es un medio diferencial, ya que estos colorantes
juntos (eosina y azul de metileno) tienen la propiedad de formar un precipitado en pH
ácido, por tanto sirven como indicadores de la producción del mismo.
Por ello, las bacterias débilmente fermentadoras de lactosa o sacarosa producen
colonias de color púrpura en 24 a 48 horas. Por ejemplo los géneros Klebsiella,
Enterobacter y Serratia.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Aquellas bacterias que fermentan fuertemente la lactosa, como Escherichia coli, o la


sacarosa, como Yersinia enterocolítica o Proteus penneri, forman un precipitado negro
verdoso, dando un aspecto de brillo metálico característico en estas especies.
Cabe destacar que si se usa el medio EMB levine (sin sacarosa), Yersinia
enterocolítica y Proteus penneri producirán colonias transparentes.
Las bacterias que no fermentan la lactosa ni la sacarosa se nutren por la presencia de
peptonas, que proporcionan los aminoácidos y el nitrógeno necesario para el desarrollo
bacteriano, y producen colonias transparentes. Por ejemplo, los géneros Salmonella y
Shigella, entre otros.
Así mismo, es importante destacar que el género Acinetobacter puede presentar
colonias de color azul lavanda, aun cuando no es fermentador de lactosa, ni sacarosa,
pero tienen la propiedad de fijar el azul de metileno en su pared celular. Esto también
puede suceder con otras bacterias oxidativas.

Contenido y composición:
Di
ger
idopancr
eát
i
codegel
ati
na10,
0g
Lact
osa5,
0
Sacar
osa5,
0
Fos
fat
odi
pot
ási
co2,
0
Agar13,
5
Eosi
naY0,
4
Az
uldemet
i
leno0,
065
pH7,
2+/
-0,
2

Formula:
Agar bacteriológico 13.5 Peptona bacteriológica
Fosfato dipotásico 2 Eosina Y 0

Lactosa 5 Azul de metileno 0

Sacarosa 5

Instrucciones
1. Suspenda 37.5 g del medio en un litro de agua purificada.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

2. Caliente con agitación frecuente e hierva durante un minuto para disolver


completamente el medio.
3. Autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Características del producto: Medio de cultivo deshidratador: color purpura,


homgeneo, libre desplazamiento.

Almacenamiento: Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una


temperatura entre 2 y 8 °C, envueltas en su envase original, hasta justo antes de
usarlas. Evitar la congelación y el calentamiento excesivo. Las placas pueden
inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la etiqueta en el paquete) e incubarse
durante los períodos de incubación recomendados.

Procedimiento: El medio original deshidratado es de color beige claro.


Para preparar este medio de cultivo se deben pesar 36 gramos del medio deshidratado
y suspenderlo en una fiola que contenga un litro de agua destilada.
Después de dejar la mezcla 5 minutos en reposo, llevar la fiola a una fuente de calor,
mezclando de forma vigorosa y constante hasta que hierva y se logre disolver
totalmente.
Posteriormente, se debe esterilizar el medio de cultivo ya disuelto
utilizando el autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
Terminado el tiempo, se saca del autoclave y se deja reposar
brevemente. Luego se sirve aun caliente (45 – 50°C) entre 15 a 20 ml de
agar en cada placa de Petri estéril. El medio debe ser azul tornasol.
Después de servidas las placas se dejan ligeramente destapadas hasta
que el agar enfríe un poco. Luego se tapan y se deja que solidifiquen
completamente. Posteriormente se ordenan en porta plaqueros en forma invertida y se
guardan en nevera (8°C) hasta su uso.
Este procedimiento se realiza preferiblemente en una campana de flujo laminar o frente
al mechero de Bunsen para evitar que se contaminen.
Es importante tener presente que cada casa comercial indicará la cantidad a pesar para
preparar el medio de cultivo.

Interpretación de resultados:
E. coli Colonias grandes, color negro azulado, brillo verde metálico
Enterobacter/Klebsiella Colonias grandes, mucoides, color negro azulado
Proteus Colonias grandes, incoloras Salmonella Colonias grandes, desde incoloras
hasta color ámbar

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Shigella Colonias grandes, desde incoloras hasta color ámbar


Pseudomonas Colonias irregulares, incoloras
Bacterias gram-positivas Crecimiento escaso o nulo

Control de calidad:
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento de bueno a excelente; colonias de color
negro azulado con brillo verde metálico Salmonella
Typhimurium ATCC 14028 Crecimiento de bueno a excelente; colonias de gris claro a
ámbar
Shigella flexneri ATCC 12022 Crecimiento de adecuado a excelente; colonias desde
incoloras hasta ámbar claro
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición parcial; colonias incoloras
Sin inocular Púrpura con un tinte verdoso anaranjado, ligeramente opalescente

Materiales necesarios no previstos: Equipo y material de laboratorio,


microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales
según requerimientos

Referencias:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a28240e1c004.pdf
https://foodsafety.neogen.com/sp/eosin-methylene-blue-agar-levine
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8765
https://www.lifeder.com/agar-emb

Indicaciones del consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Verde brillante


Uso: Este medio es usado para la búsqueda de cepas del género
Salmonella de muestras de heces y alimentos lácteos, entre otros.
Por ser un medio bastante inhóspito, es recomendable sembrar un inóculo abundante si
se utiliza la muestra directa. En caso contrario se debe hacer un pre-enriquecimiento y
enriquecimiento de los especímenes antes de sembrar en este medio.
Como algunas cepas de Salmonella son inhibidas o crecen con dificultad, se aconseja
acompañar este medio con otros agares selectivos para Salmonella.
Toda colonia con característica típica de Salmonella debe ser sometida a pruebas
bioquímicas para su identificación definitiva.

Fundamento: Cada uno de los componentes que conforman el medio cumple una
función específica que determinan las características y propiedades del agar.
Las pluripeptonas y el extracto de levadura son la fuente de nutrientes de donde los
microorganismos toman el nitrógeno y los minerales necesarios para su desarrollo. La
lactosa y la sacarosa son fuentes de energía para los microorganismos que son
capaces de fermentarlas.
El verde brillante es la sustancia inhibidora que impide el desarrollo de las bacterias
Gram positivas y un gran número de microorganismos Gram negativos.
El cloruro de sodio brinda estabilidad osmótica al medio. Mientras que el rojo de fenol
es el indicador de pH, el mismo vira de color al detectar la producción de ácidos
proveniente de la fermentación de los carbohidratos.
Las colonias no fermentadoras de lactosa y sacarosa crecen en este medio de un color
blanco rosadas o trasparentes, sobre un fondo rojo. Por ejemplo, bacterias del género
Salmonella.
En tanto que las bacterias fermentadoras de lactosa o sacarosa capaces de crecer en
este medio, desarrollan colonias de color amarillo verdosas o verde amarillentas, sobre
un fondo amarillo verdoso. Por ejemplo, Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae.

Contenido y composición:
Código B0212405: envase x 100 g
Código B0212406: envase x 500 g

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Formula:
Extracto de levadura 3g
Digerido enzimático de caseína 5g
Digerido enzimático de tejido animal 5g
Cloruro de sodio 5g
Lactosa 10 g
Sacarosa 10 g
Verde brillante 0.0125 g
Rojo de fenol 0.08 g
Agar 20 g
pH final: 6.9 ± 0.2 a 25°C

Instrucciones:
1. Suspenda 58 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Mezcle bien.
3. Autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Características del producto: Medio de cultivo deshidratado: color verde,


homegeneo, libre desplazamiento.

Medio de cultivo preparado: color naranja amarronado

Almacenamiento: Medio de cultivo deshidratado a 10 – 35 °C


Medio de cultivo preparado a 2 – 8 °C

Preparación: - Pese 58 gramos del medio


deshidratado obtenido comercialmente. Agréguelo en un
litro de agua bidestilada. Mezcle, deje reposar unos
minutos y someta la preparación a una fuente de calor
hasta que se disuelva completamente.
-Autoclave a 121°C por 15 minutos, no sobrepase el
tiempo de esterilización.
-Dejar reposar y servir aun caliente en placas de Petri
estériles. El pH final debe quedar en 6,9 ± 0,2.
-Dejar solidificar y guardar en nevera hasta su uso. Antes de sembrar las placas deben
tomar temperatura ambiente.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

-El medio en polvo es de color verde y preparado toma un color anaranjado-marrón o


rojizo verdoso, dependiendo del pH y de la casa comercial. Un color muy pardo es
indicativo que el agar fue sobrecalentado.
-Una vez solidificado el agar no se recomienda refundir, pues el medio se deteriora.

Interpretación de resultados:
Salmonella (distinta de S. Typhi y S. Paratyphi) Colonias entre blancas y rojas,
rodeadas de zonas rojas
S. Typhi y S. Paratyphi Crecimiento nulo, o sólo trazas de éste
Especies de Shigella. Crecimiento nulo, o sólo trazas de éste
Escherichia coli, Klebsiella y Enterobacter Colonias entre amarillo y verdoso rodeadas
por zonas amarillo verdosas
Pseudomonas Crecimiento nulo, o sólo trazas de éste
Bacterias gram-positivas Crecimiento nulo, o sólo trazas de éste

Control de calidad:
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento entre nulo y moderado, colonias entre
amarillas y amarillas verdosas, halo amarillo.
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Crecimiento entre nulo y ligero, colonias amarillas
con o sin halo amarillo.
Salmonella Abony DSM 4224 Entre 10 y 100 colonias, colonias blanquecinas, halo rojo
Salmonella
Typhimurium ATCC 14028 Crecimiento entre bueno y excelente, colonias blanquecinas,
halo rojo
Sin inocular Coloración entre marrón y aceituna

Materiales necesarios no previstos: Equipo y material de laboratorio,


microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales
según requerimientos

Referencias: https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8755
https://www.lifeder.com/agar-verde-brillante/

https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a297dd65f505.pdf

Indicaciones del consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar XLD
Uso: El agar XLD se usa para la recuperación de enteropatógenos,
principalmente del género Shigella y secundariamente del género Salmonella. Es
útil para evaluar muestras de heces, agua y alimentos.

Fundamento:
-Poder nutritivo
El agar XLD cuenta con el extracto de levadura, que sirve como fuente de nutrientes a
los microorganismos que se desarrollan en este agar. Además, la presencia de
carbohidratos (xilosa, sacarosa y lactosa) proporcionan energía a las bacterias que
pueden fermentarlas.
-Selectividad del medio
Como sustancia inhibidora presenta
desoxicolato sódico; este impide el
crecimiento de las bacterias Gram positivas,
dándole el carácter selectivo al medio.

Contenido y composición:
Xilosa 3.5 g
L-Lisina 5.0 g
Lactosa 7.5 g
Sacarosa 7.5 g
Cloruro sódico 5.0 g
Extracto de levadura 3.0 g
Rojo fenol 0.08g
Desoxicolato sódico 2.5 g
Tiosulfato sódico 6.8 g
Citrato férrico amónico 0.8 g

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar 13.5 g pH : 7,4+/- 0,2

Formula:
Extracto de Levadura................................................................ 3 g
Lactosa .................................................................................. 7,5 g
Sacarosa................................................................................ 7,5 g
Xilosa ..................................................................................... 3,5 g
L-Lisina ..................................................................................... 5 g
Citrato Férrico de Amonio...................................................... 0,8 g
Rojo Fenol............................................................................ 0,08 g
Cloruro de Sodio ....................................................................... 5 g
Deoxicolato de Sodio ............................................................. 2,5 g
Tiosulfato de Sodio ................................................................ 6,8 g
Agar ..................................................................................... 13,5 g pH Final: 7,4 ± 0,2 a 25C

Instrucciones:
1. Suspenda 55 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Caliente manteniendo una agitación frecuente hasta que el medio alcance el
punto de ebullición.
3. EVITE EL SOBRECALIENTAMIENTO. NO COLOQUE EN EL AUTOCLAVE.
Almacenamiento: Almacene el envase conteniendo el medio de cultivo
deshidratado sellado firmemente y a una temperatura entre 2–30°C. Una vez abierto y
cerrado nuevamente, coloque el envase en un ambiente con baja humedad a la misma
temperatura de almacenamiento. Proteja el producto de los efectos de la humedad y de
la luz.

Procedimiento: Pesar 55 gr de medio XLD deshidratado y disolver en 1 litro de


agua. Calentar y agitar la mezcla hasta que llegue al punto de ebullición. No
sobrecalentar, ya que el calor daña el medio y crea un precipitado que altera la
morfología de las colonias típicas.

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Este medio no debe autoclavarse. Al disolver se debe pasar a un baño de María a 50°C.
Al enfriar se debe servir directamente sobre placas de Petri estériles. Pueden vertirse
en placas sencillas o en placas dobles. Se dejan solidificar y se guardan en nevera
hasta su uso.
Atemperar antes de usar. Como es un medio no esterilizado se recomienda prepararlo
cercano a la fecha de su uso. El pH final del medio debe quedar en 7,4 ± 0,2. El color
del medio preparado es rojo naranja, traslúcido, sin precipitado.

Interpretación de resultados:
E. coli Grandes, planos, de color amarillo. Puede haber algunas cepas inhibidas.
Enterobacter/Klebsiella Mucoides, amarillos
Proteus De rojo a amarillo. La mayoría de las cepas tienen centros de color negro.
Salmonella, positiva a H2S De rojo a amarillo con centros de color negro.
Shigella, Salmonella, negativas a H2S Rojo
Pseudomonas Rojo
Bacterias gram positivas Crecimiento escaso o nulo

Control de calidad:
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Crecimiento de bueno a excelente; colonias rojas
con centros de color negro
Salmonella Abony DSM 4224 Crecimiento de bueno a excelente; colonias rojas con
centros de color negro
Shigella flexneri ATCC 12022 Crecimiento de bueno a excelente; colonias rojas
Shigella sonnei ATCC 25931 Crecimiento de bueno a excelente; colonias rojas
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición de parcial a completa
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición de parcial a completa; colonias de amarillas a
rojo amarillentas
Proteus mirabilis ATCC 12453 Crecimiento; colonias de color rojo carmesí con centros
negros, proliferación inhibida
Sin inocular Rojo

Materiales necesarios no previstos: Medios de cultivo auxiliar, reactivos


y el equipo de laboratorio que se requiera.

Precauciones: Equipo y material de laboratorio, microorganismos para control de


calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimientos

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Referencias: https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8783
https://www.lifeder.com/agar-xld/

https://dazek.jimdo.com/microbiología/agar-xld/

Indicaciones del consumidor: Utilizar el producto hasta su


fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del
rótulo

Agar Müeller hinton


Uso: Se utiliza para realizar el antibiograma o la prueba de susceptibilidad a los
antibióticos a la mayoría de los patógenos no exigentes de crecimiento rápido.
Si el agar es suplementado con sangre sirve para realizar el antibiograma de
microorganismos exigentes como: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus sp,
Neisseria meningitidis, entre otros. También ha sido utilizado para aislar Legionella
pneumophila.

Fundamento: Por ser un medio nutritivo no selectivo es excelente para el


crecimiento de la mayoría de las bacterias patógenas. Por otra parte, su composición
simple hace que las sustancias difundan fácilmente sobre él, siendo una característica
esencial para la prueba de susceptibilidad por el método de difusión en disco. Otra de
sus características es que contiene baja cantidad de inhibidores, lo que permite que
puedan evaluarse de manera efectiva las sulfonamidas, el trimetoprim y las
tetraciclinas. Sin embargo, se debe tener presente que el medio debe cumplir ciertas
condiciones para garantizar su buen funcionamiento, entre ellas:
El ajuste del pH, la profundidad del agar y la concentración adecuada de timina,
timidina, Ca++, Mg++ y Zn++. También hay que saber que la metodología está
estandarizada y por tanto deben cumplirse todos los parámetros, tales como: La
concentración del inóculo, la concentración y conservación de los discos de antibióticos,
la colocación del número adecuado de discos sobre el agar, la distancia entre un disco
y otro, la colocación estratégica de ciertos antibióticos, la atmósfera, la temperatura y el
tiempo de incubación.

Contenido y composición:
Peptona 3.0
Hidrolisato de caseína 17.5
Agar 15
Ca2+ 20 - 25 mg/L
Mg2+ 10 -12.5 mg/L

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

pH final 7,4 ± 0.2

Formula:
Infusión de carne 2,0 g
Peptona de caseina 17,5 g
Almidón 1,5 g Agar agar 17,0 g pH final: 7,4 ± 0,2

Instrucciones: Disolver 38 g de medio en 1 litro de agua


destilada.
Calentar hasta ebullición, agitando para su disolución.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos, o bien a 116 ºC durante 15-
30 minutos.

Características: Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre


desplazamiento
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro
Suplementado con sangre: color rojo cereza

Almacenamiento: Medio de cultivo deshidratado a 10 – 35 °C


Medio de cultivo preparado a 2 – 8 °C

Procedimiento: Pesar 37 gr del medio Müeller Hinton deshidratado y disolver en


1 litro de agua destilada. Calentar el medio mientras se agita para ayudar a su
disolución. Dejar hervir por 1 minuto. Llevar al autoclave para esterilizar a 121°C por 15
minutos. Al sacar del autoclave, se debe colocar la fiola en un baño de maría a 50°C
para enfriar. Verter 25 a 30 ml en placas de Petri estériles de 10 cm de diámetro. Las
placas deben quedar con un grosor promedio de 4 mm (ideal), siendo permitido un
rango de 3-5 mm. Si se desea preparar agar sangre usando como base agar Müeller
Hinton, se vierte 5% de sangre de cordero estéril y desfibrinada antes de servir en las
placas.
El pH final del medio debe quedar entre 7,2 a 7,4.

Control de calidad:
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento satisfactorio
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Crecimiento satisfactorio
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento satisfactorio
Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Crecimiento satisfactorio
Haemophilus influenzae NCTC 8468/CIP 54.94 Crecimiento satisfactorio

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Materiales necesarios no previstos: Medios de cultivo auxiliar, reactivos


y el equipo de laboratorio que se requiera.

Precauciones: Equipo y material de laboratorio, microorganismos para control de


calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimientos

Referencias: https://www.lifeder.com/agar-mueller-hinton/ https://www.britanialab.com

Indicaciones del consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Agar Sangre
Uso: El medio de cultivo agar sangre es uno de los más comúnmente utilizados en el
laboratorio de microbiología. Entre los microorganismos capaces de crecer en el medio
agar sangre se tienen: bacterias aerobias estrictas, facultativas, microaerófilas,
anaerobias, Gram positivas o Gram negativas, bacterias de crecimiento rápido o
crecimiento lento. También crecen algunas bacterias exigentes o fastidiosas desde el
punto de vista nutricional, así como hongos y levaduras. Así mismo, es útil para realizar
subcultivos o reactivar cepas que metabólicamente estén muy débiles.
Sin embargo, la elección del tipo de sangre y del agar base variará dependiendo del
microorganismo probable que se sospecha recuperar y al uso que se le va a dar a la
placa (cultivo o antibiograma).

Fundamento: Ya se ha mencionado que el agar sangre tiene como característica


ser un medio enriquecido, diferencial y no selectivo. A continuación se explica el
basamento de cada una de estas propiedades. El agar sangre es un medio enriquecido
porque lleva como aditivo principal 5 -10% de sangre sobre una base de agar. Ambos
compuestos contienen muchos nutrientes y esta propiedad permite que en él puedan
crecer la mayoría de las bacterias cultivables. Ese crecimiento ocurre sin restricción; por
este motivo es no selectivo. Sin embargo, si a este medio se le adicionan compuestos
que impidan el crecimiento de algunos microorganismos y favorezca el de otros, se
vuelve selectivo. Es el caso si se adicionan ciertos tipos de antibióticos o antifúngicos.
Así mismo, el agar sangre es un medio diferencial, ya que permite distinguir 3 tipos de
bacterias: los beta-hemolíticos, alfa –hemolíticos y gamma-hemolíticos. Los beta-
hemolíticos son aquellos que tienen la capacidad de lisar o romper completamente
los glóbulos rojos, formando un halo claro alrededor de las colonias, por tanto producen
hemólisis ß ó ß –hemólisis y los microorganismos son llamados ß-hemolíticos.

Contenido y composición:

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Peptona de caseína (10 g)


Peptona de carne (5 g)
Extracto de levadura (3 g)
Extracto de corazón (3 g)
Cloruro sódico (5 g)
Almidón de maíz (1 g)
Agar bacteriológico (15 g)
Sangre de cordero (50 ml)
Fórmula (en g/l) pH: 7.2 ± 0.2.

Formula:
Digerido enzimático de caseína 15 g
Digerido enzimático de tejido 4g
animal
Extracto de levadura 2g
Maicena 1g
Cloruro de sodio 5g
Agar 14 g
pH final: 7.0 ± 0.2 a 25°C

Características: Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre


desplazamiento
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro
Suplementado con sangre: color rojo cereza

Almacenamiento: Medio de cultivo deshidratado a 10 – 35 °C


Medio de cultivo preparado a 2 – 8 °C

Procedimiento: Suspender 40 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta


ebullición y hervir durante 1 minuto. Esterilizar a 121º C durante 30 minutos (para
cantidades de más de 1 litro). Homogeneizar y distribuir en tubos de ensayo y esterilizar
a 121º C durante 15 minutos. Para preparar placas de Agar Sangre incorporar 5 a 8%
de Sangre desfibrinada antes de distribuir en placas. Para una mejor conservación de la
placa de Agar Sangre y para obtener halos hemolíticos más claros ajustar el pH a 6,8
±0,2. Si se utiliza como medio basal se obtendrán mejores crecimientos a pH 7,3 ±0,2.

Interpretación de los resultados:


Streptococci (no grupo D) Colonias pequeñas, de color blanco o grisáceo. Hemólisis
beta o alfa

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Enterococci (Grupo D) Colonias grisáceas pequeñas aunque más grandes que las de
estreptococos grupo A. Hemólisis alfa (en raras ocasiones beta)
Staphylococci Colonias grandes, de color entre blanco y gris o entre crema y amarillo,
con o sin hemólisis
Corynebacteria Colonias de pequeño a gran tamaño, color entre blanco y gris o
amarillo, con o sin hemólisis
Listeria monocytogenes Colonias de pequeño a mediano tamaño, grisáceas, con débil
hemólisis beta
Enterobacteriaceae Colonias de mediano a gran tamaño, de color gris, con o sin
hemólisis
Candida spp. Pequeñas colonias blancas

Control de calidad:
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Crecimiento bueno o excelente, débil o adecuada
hemólisis beta
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Crecimiento bueno o excelente, hemólisis alfa
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento bueno o excelente; puede ser o no
beta hemolítico
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento bueno o excelente; puede ser o no beta
hemolítico
Sin inocular Rojo (color sangre)

Materiales necesarios no previstos: Medios de cultivo auxiliar, reactivos


y el equipo de laboratorio que se requiera.

Precauciones: Equipo y material de laboratorio, microorganismos para control de


calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimientos

Referencias:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5b6b262facd0e.pdf

https://www.lifeder.com/agar-sangre

http://legacy.bd.com/resource.aspx?IDX=8760

Indicaciones del consumidor: Utilizar el producto hasta su fecha de


vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar MacConkey

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Sal y manitol

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Salmonella –
shigella

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Biggy

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Emb

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Verde brillante

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar XLD

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Müeller Hinton

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Agar Sangre

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

CBTIS 134

Álbum de medios de cultivo

Maestra: Karla Yedid Jiménez Nájera

Alumno: Mendoza Catalán Oscar Yosemir

Especialidad: Identifica Microorganismos


con Base en Técnicas Bacteriológica

Grado y grupo: “3°C”

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)


lOMoARcPSD|6056807

Descargado por Cindy Ely Lucero Quispe Andrade (20171315@lamolina.edu.pe)

También podría gustarte