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MICROBIOLOGÍA E
INMUNOLOGÍA
LABORATORIO N° 12
ROL DEL LABORATORIO EN EL DIAGNÓSTICO
MICROBIOLÓGICO DEL SÍNDROME ICTÉRICO
HEMORRÁGICO
OBJETIVOS

01 02
Diagnóstico Diagnóstico
Microbiológico Microbiológico
Fiebre Amarilla Leptospirosis

03 04
Diagnóstico Diagnóstico
Microbiológico Microbiológico
Dengue Malaria
SÍNDROME ICTÉRICO HEMORRÁGICO

DENGUE
FIEBRE AMARILLA
LEPTOSPIROSIS
MALARIA
FIEBRE AMARILLA
FIEBRE AMARILLA
 Enfermedad viral aguda hemorrágica

 Mosquitos infectados (Aedes Aegypti y


Haemogogus spp)

 Virus ARN (Arbovirus del género


Flavivirus)

 Reservorio: Humanos y monos

 Transmisión: Humano – Vector – Humano

 Transmisión: selvático , intermedio,


urbano

 Mortalidad: casos graves (50%)


EPIDEMIOLOGIA
 1980: América Latina y África

 Países latinoamericanos con más casos:


Bolivia, Brasil, Colombia, Ecuador, Perú, Venezuela

 1995: Brote en Perú con 499 casos y 192 muertes

 Según la OMS:
 200,000 nuevos casos cada año y 30000 muertes
 2013: aumento 170,000 casos graves y 60000 muertes

 90% de casos y muertes: África sub Sahariana


ARBOVIRUS
 Virus transmitido por Artrópodos Aedes Aegypti

VIRUS

ESTÓMAGO DEL MOSQUITO GLÁNDULA SALIVAL DEL


MOSQUITO
PROTEINAS VIRALES Y RESPUESTA INMUNE
CLINICA
 Incubación: 3 a 6 días

 Inicio Súbito: fiebre, escalofríos, malestar


general, cefalea, dolor en región
lumbosacra,
Nauseas, vértigo.

 Congestión conjuntival y facial,


bradicardia

 15%: Ictericia y hemorragia letal

 25 – 50% Insuficiencia hepato renal


falleciendo en 7 -10 días

 Tasa de letalidad elevada en niños y


adultos mayores.
CLINICA
CASO SOSPECHOSO (OPS)
 Enfermedad febril de inicio agudo
seguido de ictericia en 2 semanas,
más uno de los siguientes síntomas:

 Bradicardia con Fiebre (Signo de


Faget)

 Sangrado por nariz, encías, piel,


tracto digestivo

 Oliguria

 Albuminuria
LABORATORIO

 Diagnóstico molecular: Durante los primeros 10 días desde el inicio de síntomas (fase virémica), o incluso por
más de 10 días en casos severos, es posible realizar la detección del ARN viral en muestras de suero mediante
métodos moleculares como la Transcripción Reversa seguida de Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-PCR,
por sus siglas en inglés) convencional (punto final) o tiempo real.

 Aislamiento viral: El aislamiento viral puede realizarse por inoculación intracerebral en ratones o en cultivo
celular (células Vero o C6/36; puede ser realizado en contención BSL 2).

 Detección de IgM: Los anticuerpos IgM contra el virus de la fiebre amarilla pueden detectarse por ELISA
(principalmente, el ELISA de captura de IgM, MAC-ELISA por sus siglas en inglés) o cualquier otro inmunoensayo
(por ejemplo, la inmunofluorescencia indirecta).

 Otras técnicas serológicas: Estos métodos incluyen la detección de anticuerpos IgG por ELISA y de anticuerpos
neutralizantes por la técnica de neutralización por reducción de placas (PRNT, por sus siglas en inglés). En
general, el PRNT ofrece mejor especificidad que la detección de anticuerpos IgM e IgG totales.
¿PORQUE DEBEN VACUNARSE LOS VIAJEROS?

 Riesgo de enfermedad y muerte en


viajero no vacunado a un área
endémica:

 África Occidental: 50 casos /100,000


habitantes y mortalidad de 10
casos/100000 habitantes

 Sudamérica: 5 casos /100000


habitantes y mortalidad de 1
caso/100000 habitantes.
LEPTOSPIROSIS
LEPTOSPIROSIS
 Espiroqueta aeróbica, móvil, espiras finas Reino: Monera
División: Gracilicutes
 Género: Leptospira Orden: Spirochaetales
Familia: Leptospiraceae
Géneros: Leptospira
 Dos especies: Leptonema
Turneria
 Interrogans (patogénico): 23 serogrupos y
> 250 serovares.

 Biflexa (saprófito): > 60 serovares.

 Varios serotipos
Bacteria aeróbica, crece en medios de
 Una de las pocas infecciones que afecta a Cultivo con sangre de conejo o bovino,
la vez: Hígado, pulmón y riñón pH 6.7 a 7.4 y a 28 - 30°C. PI de pocos
días a 4 semanas.
LEPTOSPIRA: MORFOLOGÍA
EPIDEMIOLOGIA
 Zoonosis de distribución mundial HUÉSPEDES TÍPICOS Y RESERVORIOS
COMUNES
 Enfermedad ambiental

 Mamíferos silvestres y domésticos.


Ratas, perros, etc

 Frecuente en inundaciones, huaycos,


huracanes.

 Estado de portador: Riñón (túbulos


renales).

 Eliminan por la Orina por un tiempo


prolongado.
LEPTOSPIROSIS EN EL PERÚ

CASOS:

1.- Loreto
2.- Madre de Dios
3.- Piura
4.- Ayacucho
FACTORES DE RIESGO
TRANSMISIÓN
 Transmisión:

 Contacto directo con sangre,


orina, tejidos u órganos de animales
infectados
 Indirecta: agua o suelo
Contaminado con orina de los
animales portadores
 Formas raras de transmisión:
 Inhalación
 Ingestión
 Vertical

Iquitos, 2012
PATOGENIA
 Enfermedad sistémica
Autolimitada (90%)

 Enfermedad grave
potencialmente fatal (10%):

 Falla renal (15%)


 Falla hepática (15%)
 Neumonitis hemorrágica
> 70% mortalidad
 Diátesis hemorrágica

FENÓMENO DEL ICEBERG


CLÍNICA
FASE INMUNE
TRIADA:

Fiebre: 100%
Cefalea: 88%
Mialgia: 80%

ADULTOS: > Mortalidad

FASE LEPTOSPIRÉMICA
ENFERMEDAD DE WEIL

PREDICTORES DE MORTALIDAD: Adultos, Insuficiencia renal aguda, Insuficiencia


Respiratoria, arritmia cardiaca, alteración del sensorio
SÍNDROME FEBRIL ICTERO HEMORRÁGICO

EL DIAGNÓSTICO ERRÓNEO CONDUCE A MALOS RESULTADOS


HISTORIA NATURAL
LABORATORIO

Microaglutinación para Treponema (MAT)


Gold estándar (bacterias vivas)
Aglutinación en cruces (INS)
CRITERIOS DE CONFIRMACIÓN
POR LABORATORIO

PCR TIEMPO REAL


Muestra: Sangre total, orina LCR

Pruebas rápidas: Sensibilidad (25%)


CULTIVO: Demora hasta 42 días ELISA: > uso
Muestra: Suero
DENGUE
DENGUE
 Enfermedad viral de mayor extensión en el mundo

 Ocasionada por Arbovirus de la familia Flaviviridae

 4 Serotipos: DENV 1 – DENV2 – DENV3 – DENV4

 Enfermedad Metaxénica: Aedes Aegypti

 128 países potencialmente afectados

 2500 millones de personas en riesgo

 50 millones de infecciones /año

 20000 fallecidos /año (OMS, 2017)


AEDES AEGYPTI
 Fiebre Amarilla  Diseminación por todas las Américas
 Dengue
 Zica  Climas tropicales y subtropicales
 Chikungunya
 Antropofilico, peridomiciliario

 Altura: 2300 m.s.n.m.

 Larvas: agua limpia

 Mosquitos hembras pican en el día3-4 hs. después


del amanecer y 3 -4 hs antes de oscurecer

 7 – 10 días después de haberse contaminado, el


virus se replica en las glándulas salivales
DENGUE: 2019

CASOS (73%):

1.- Madre de Dios


2.- Loreto
3.- Cajamarca
4.- San Martin
5.- Tumbes
DENGUE: CLÍNICA
FASE FEBRIL (2 – 7 días) FASE CRÍTICA

 Fiebre elevada  Alrededor del día 3- 7 (defervescencia)


 Mialgias severas y debilidad  Incremento de la permeabilidad capilar
importante  Elevación del Hto
 Escalofríos  Pérdida de liquido en las últimas 24-48 hs.
 Dolor retro ocular importante  Leucopenia, disminución plaquetas
 Artralgias generalizadas  Derrame pleural y ascitis
(hombros y rodillas)  Pt y PTT prolongados
 Rash macular: Tórax, cara y  Fibrinógeno disminuido
flexura al 3° día (dura 3 días)
 Anorexia, nauseas, vómito DENGUE SEVERO
 Prueba Torniquete positivo
 Hepatomegalia o Shock
 Manifestaciones hemorragíparas o Acumulación de liquido y distress respiratorio
Petequias, púrpura, epistaxis, o AST o ALT > 1000 U.
gingivorragia, sangrado o Compromiso de sensorio
gastrointestinal o Compromiso cardiaco y de otros órganos
CLÍNICA
CURSO CLÍNICO
LABORATORIO
ELISA AgNS1
PRUEBAS INMUNOCROMATOGRÁFICAS

SENSIBILIDAD:50%

FALSOS NEGATIVOS
DIAGNÓSTICO MOLECULAR

DETECTA RNA VIRAL. USO EN LOS PRIMEROS 5 DÍAS


CULTIVO CELULAR INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
MALARIA
MALARIA
MALARIA EN EL PERÚ
VECTOR
CICLO DE VIDA PLASMODIUM
GOTA GRUESA
GOTA GRUESA: EXTENDIDO
COLORACIÓN GIEMSA

PREPARACIÓN SOLUCIÓN GIEMSA

ESQUIZONTE GAMETOCITO
P. VIVAX P. FALCIPARUM
CARÁCTERÍSTICAS DE LOS PLASMODIUM
DIFERENCIACIÓN DE ESPECIES DE PLASMODIUM
P. FALCIPARUM

GAMETOCITO

TROFOZOITO JOVEN
P. VIVAX
DENSIDAD PARASITARIA
PRUEBA RÁPIDA

INDICACIONES
DIAGNÓSTICO MOLECULAR
ACTIVIDAD VIRTUAL
Lectura e Informe escrito:
Revise el articulo: “Desarrollo de la vacuna contra el Dengue”:
Estado actual y Futuro.
 Trabajo grupal: 4 personas.
 Lectura y resumen por escrito de lo que ustedes consideren lo más
importante (1 hoja)
 Lugar de entrega: Durante la semana elevar a la Plataforma
 Articulo se encuentra en la plataforma.
ACTIVIDAD VIRTUAL
Evaluación Diagnóstica:

 Esta evaluación tiene por finalidad recoger tus


conocimientos con respecto al tema Diagnóstico
Microbiológico en las Infecciones Respiratorias bajas
(Laboratorio N° 7) del curso de Microbiología e
Inmunología.
 Ingresa al Aula Virtual y encontrarás el cuestionario online
(5 preguntas) que deberás resolver.
 Esta actividad se realizará de manera individual al finalizar
la clase.
 Duración: 10 minutos.
MUCHAS GRACIAS

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