Hormonas Esteroideas:

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%20Ortega.pdf;jsessionid=3B8DCF97D0DB0E3222DDCFCA6556
386D?sequence=1
Las hormonas esteroideas son un conjunto de compuestos biológicos sintetizados en mamíferos a
partir del colesterol con un importante papel fisiológico. Atendiendo a sus funciones, las hormonas
esteroideas se clasifican en tres grupos: corticosteroides, hormonas sexuales y esteroides
anabolizantes.

 Los corticosteroides son un amplio grupo de hormonas esteroideas que se sintetizan

mayoritariamente en las glándulas adrenales de mamíferos. De acuerdo con sus funciones
fisiológicas se distinguen dos grupos: glucocorticoides y mineralocorticoides.

o Glucocorticoides: desempeñan funciones destacadas en la regulación del

metabolismo y de la respuesta inmune. Entre los glucocorticoides cabe mencionar
la corticosterona o la hidrocortisona (también denominado cortisol) cuya principal
función es la de secretarse en respuesta al estrés, incrementando el nivel de
glucosa en sangre, estimulando el metabolismo de hidratos de carbono, lípidos y
proteínas y deprimiendo al sistema inmune. Para la industria farmacéutica este
grupo resulta de gran interés por sus aplicaciones como antiinflamatorios e
inmunosupresores.
o Mineralocorticoides: participan en el control de la presión sanguínea y de la
homeostasis (Donova y Egorova, 2012). Su representante más importante es la
aldosterona y, junto con sus formas sintéticas, pueden resultar atractivos por sus
funciones como antidiuréticos.
 Hormonas sexuales: secretadas mayoritariamente en las gónadas, aunque también lo
hacen en las glándulas adrenales e hígado. Poseen interés farmacéutico puesto que se
pueden utilizar como anticonceptivos, en terapias hormonales o para tratar algunas
formas de cáncer de mama o de próstata.
 Dentro de este grupo se incluyen las hormonas femeninas y las hormonas masculinas.
o Hormonas femeninas: conocidas con este nombre por tener efecto feminizante,
están involucradas en el ciclo estral y en la gestación. A pesar de aparecer
mayoritariamente en las hembras también son sintetizadas por los machos,
aunque a concentraciones muchísimo menores. Este grupo está integrado por los
progestágenos, de las cuales la progesterona es la más importante, y los
estrógenos, cuyo representante es el estradiol junto con su metabolito estriol.
o Hormonas masculinas: O también llamadas andrógenos, destaca la testosterona
que es la hormona masculina por excelencia, y otras tales como la
androstenediona (AD, 4-androstene-3,17-diona), la dehidroepiandrostenerona
(DHEA) o los esteroides anabolizantes (Callewaert et al., 2010), que constituyen
otro grupo funcional de hormonas esteroideas.
 Esteroles anabolizantes: o “esteroides anabólicos androgénicos (EAA), son un grupo de
esteroides derivados de la testosterona, cuyas actividades virilizantes se ven atenuadas en
favor de las anabolizantes. Este grupo está constituido por compuestos que activan el
anabolismo y que potencian la musculación, fundamentalmente el desarrollo de músculo
esquelético. debido a sus propiedades anticatabólicas y de mejora de la utilización
proteica, los esteroides anabolizantes presentan aplicaciones terapéuticas en el
tratamiento de quemados, inmovilizados y de otros pacientes que, al estar debilitados,
podrían sufrir atrofia muscular.

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Los esferoides son lípidos terpénicos con una estructura definida, que contienen un núcleo de
ciclopentanoperhidrofenantreno o gonano con cuatro anillos fusionados (AD); esta estructura
básica se modifica por adición de diversos grupos funcionales, como carbonilos e hidroxilos
(hidrófilos) o cadenas hidrocarbonadas (hidrófobas). La actividad fisiológica de los esferoides
depende de su estructura, es decir, del tipo, número y posición de los grupos funcionales unidos al
núcleo esferoide, así como de su isomería configuracional y estructural, es decir, estereoisomería y
regioisomería, y del estado de oxidación de los anillos.

Muchos esferoides utilizados como fármacos se sintetizan químicamente, pero desde hace mucho
tiempo se conoce que la transformación microbiana de los esferoides es una herramienta
poderosa para la generación de nuevos fármacos esteroideos, así como para la producción
eficiente de productos intermedios (precursores) clave para la síntesis química de tales fármacos.
Las bioconversiones permiten modificar los esferoides en posiciones de la molécula difícilmente
disponibles o accesibles para los agentes químicos, y la funcionalización de la molécula puede ser
realizada regio- y estéreo-específicamente. Más aún, mediante la bioconversion se pueden
completar varias reacciones en un solo paso. Estas y otras ventajas de las biotransformaciones han
supuesto una amplia expansión de las tecnologías microbianas en el campo de los esferoides, de
tal manera que las aplicaciones de los microorganismos para la modificación de esferoides se han
revisado en numerosos artículos a lo largo de los últimos años

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La biotransformación, por su parte, es una forma de modificación artificial que aprovecha la
capacidad que presentan algunas enzimas de ciertos microorganismos para realizar modificaciones
químicas sobre compuestos específicos (Sih et al., 1968). Dentro de éstas, la biotransformación de
esteroides es uno de los mejores ejemplos de la aplicación de técnicas biotecnológicas en los
procesos industriales a gran escala de manera muy rentable. El estudio en este campo se inició en
torno a la década de 1950 con el descubrimiento de un hongo perteneciente al género Rhizopus,
que era capaz de introducir específicamente en la molécula de progesterona un grupo hidroxilo,
con configuración α, en la posición 11 (Gabinskaia et al., 1971). La progesterona se obtenía
mediante síntesis química a partir del estigmasterol presente en la soja. Este hecho posibilitó la
supresión de varios pasos de síntesis requeridos hasta entonces; pasando a realizarse la
hidroxilación en C11 en un solo paso.

Otro ejemplo que sirve para ilustrar el importante avance que supuso este hallazgo, fue la síntesis
de cortisona. En 1949, la obtención de 1 g de cortisona implicaba 31 reacciones de síntesis química
a partir del ácido desoxicólico. Sin embargo, la biotransformación de desoxicólico en cortisona
empleando Rhizopus arrhizus y Aspergillus niger permitió reducir el proceso a 11 pasos de síntesis,
lo que posibilitó rebajar el coste de 200 dólares hasta menos de 1 dólar
CYP11A1: En primer lugar, el CYP11A1 se trata de un citocromo P450 mitocondrial, también
denominado P450scc (“side chain clevage”) (Halkerston et al., 1961) con gran relevancia debido a
que es una de las pocas hemoproteínas en vertebrados capaces de iniciar la esteroidogénesis a
partir de colesterol (Pikuleva, 2006; Mast et al., 2011). La función de esta enzima es la de retirar
parcialmente la cadena lateral del colesterol hasta originar pregnenolona. En la Fig. 23 se muestra
la estructura tridimensional del CYP11A1 junto con el CYP17A1 de origen humano.
El mecanismo de escisión de la cadena lateral presente en el C17 del colesterol comprende tres
reacciones. En primer lugar, el colesterol sufre una hidroxilación en el C22 formando el 22-
hidroxicolesterol; seguidamente, ocurre otra hidroxilación en el C20 originando el 20α,22-
dihidroxicolesterol y, finalmente, se produce una ruptura entre el C20 y C22 resultando en
pregnenolona y ácido propiónico (Hanukoglu y Rapoport, 1995). Como molécula donadora de
electrones, el CYP11A1 emplea el NADPH a través de la flavoproteína adrenoxina reductasa
HORMONAS ESTEROIDALES: http://www.scielo.org.mx/pdf/tip/v15n1/v15n1a3.pdf

Las hormonas esteroidales se clasifican en esteroides sexuales (andrógenos, estrógenos y

progesterona), glucocorticoides (cortisol) y mineralocorticoides L (aldosterona) y se sintetizan
principalmente en las glándulas suprarrenales, las gónadas, la placenta y el sistema nervioso
central. Su principal efecto es sobre la homeostasis corporal al modular diversas funciones como
son la reproductiva, incluyendo el desarrollo y mantenimiento de los caracteres sexuales
secundarios, entre otros.

La fabricación actual de esteroides y hormonas se basa en la combinación de tecnologías

microbianas y la síntesis química. el hallazgo de un hongo perteneciente al género Rhizopus que
era capaz de introducir enzimáticamente un grupo 11αhidroxi directamente en la progesterona,
que acababa de ser sintetizada a partir del estigmasterol de la soja. Este hecho supuso un gran
avance ya que la hidroxilación en la posición 11 se realizaba en un solo paso y no en los 31 pasos
que hasta el momento requería su síntesis química a partir de deoxicolato, reduciendo más de 200
veces el coste de producción. Este hallazgo fue decisivo para explicar el desarrollo posterior de la
síntesis biotecnológica de los esteroides con actividad biológica.

La quiralidad de la estructura de muchos de estos compuestos añade complejidad al diseño del

proceso. Más aún, la síntesis química también requiere el uso de reactivos tales como piridina,
trióxido de azufre o dióxido de selenio que son peligrosos para la salud del personal implicado en
los procesos de producción y constituyen un grave problema medioambiental y laboral. Frente a
estos inconvenientes, la biotransformación de los esteroides se lleva a cabo en condiciones
medioambientales más suaves y proporcionan una alternativa eficaz a la síntesis química, una vez
que las limitaciones a menudo encontradas en lo que concierne a los rendimientos y a los niveles
de pureza de los productos se superan; es por ello que el uso de las biotransformaciones en los
procesos de producción de medicamentos esteroideos y hormonas se han multiplicado.

Los fitoesteroles junto con las sapogeninas como la diosgenina, hecogenina y solasodina, son una
de las materias primas más empleadas en la industria farmacéutica para la producción de los
esteroides. El estigmasterol, el β-sitosterol y el campesterol son los fitoesteroles más comúnmente
utilizados. Los fitoesteroles se extraen habitualmente de la soja pero también se pueden obtener
del pino o de los residuos de la industria papelera.

El colesterol, es otro de los materiales de partida utilizados en las biotransformaciones de

esteroides, y se obtiene a partir de las grasas y aceites animales, como la manteca de cerdo, el
sebo vacuno, la grasa de la leche o el aceite de pescado (Fernandes et al., 2003). Sin embargo,
debido a los exhaustivos controles de calidad que deben realizarse sobre las materias primas de
origen animal, actualmente los fitoesteroles son los más empleados.

La síntesis de las hormonas esteroideas también se realiza a partir del colesterol. Entre los
mamíferos existen seis citocromos esenciales para ello. Para la síntesis de hormonas sexuales (Fig.
I4) la molécula de colesterol se transforma en pregnenolona por el citocromo mitocondrial
CYP11A1 (denominado también P450scc, side chain cleavage) (Tuckey y Cameron, 1993; Miller y
Auchus, 2011), constituyéndose el precursor de todas las hormonas esteroideas. La pregnenolona
se transforma en progesterona mediante la enzima 3β-hidroxiesteroide
deshidrogenasa/isomerasa (3β-HSD) (Lachance et al., 1990). Esta enzima también cataliza la
transformación de 17α-hidroxipregnenolona en 17αhidroxiprogesterona,
deshidroepiandrosterona (DHEA) en androstenediona (AD) y androstenediol en testosterona. El
citocromo microsomal CYP17A1 se localiza tanto en la corteza adrenal como en las gónadas
presentando diferentes propiedades: en la corteza adrenal cataliza la 17α-hidroxilación de la
progesterona, produciéndose la 17αhidroxiprogesterona que es utilizada en la síntesis de cortisol
(glucocorticoides); mientras que en las gónadas, además de catalizar la conversión de
pregnenolona y progesterona en 17αhidroxipregnenolona y 17α-hidroxiprogesterona, genera
como productos finales DHEA y AD a partir de estos intermediarios (Nakajin et al., 1981; Liu et al.,
2005). Tanto la DHEA como el AD son sustratos de la enzima 17β-hidroxiesteroide deshidrogenasa
(17β-HSD) que catalizan su transformación en androstenediol y testosterona respectivamente
(Moghrabi y Andersson, 1998). A partir de la testosterona y por acción del citocromo microsomal
CYP19A1 (aromatasa) se produce la síntesis de estradiol (Simpson et al., 1994). Este citocromo
también puede actuar directamente sobre el AD para producir la estrona que es transformada
finalmente en estradiol. En primer lugar, el citocromo CYP21A2 transforma la progesterona y la
17α-hidroxiprogesterona en desoxicorticosterona (DOC) y cortexolona (también denominada
desoxicortisol o Reichstein's Substance S, RSS), respectivamente (Kominami et al., 1980). La DOC
es sustrato del citocromo mitocondrial CYP11B2 (aldosterona sintasa) que sintetiza la aldosterona,
hormona que controla la reabsorción de iones inorgánicos por el riñón. Por otro lado, la RSS se
transforma en cortisol (hidrocortisona, HC) por la acción del citocromo CYP11B1 (Peter et al.,
1999; Bureik et al., 2002). Existen además otros procesos esenciales para el cuerpo humano en el
que están implicados los citocromos, como la síntesis de la vitamina D3 (colecalciferol) y de su
forma bioactiva (colecalcitriol).

BIOTRANSFORMACIÓN FÚNGICA DE COMPUESTOS ESTEROIDEOS

Desde el descubrimiento en 1952 de los efectos farmacológicos del cortisol y progesterona y la

capacidad para producirlos por parte de varias cepas del género Rhyzopus (Peterson et al., 1952),
son muchos los procesos de biotransformación de esteroides en los que los hongos han sido
empleados como biocatalizadores (Liu et al., 2006; Wuts et al., 2008; Dewick, 2009; Faramarzi y
Sadighi, 2013). Con la finalidad de mejorar los rendimientos de producción, han sido muchas y
muy valiosas las mejoras llevadas a cabo hasta nuestros días como por ejemplo mediante el
empleo de medios acuosos con adición de facilitadores de la biotransformación, biocatalizadores
inmovilizados, enzimas libres o inmovilizadas o de esporas como biocatalizadores; así como la
mejora del propio sistema, empleando sistemas de dos fases, de nubes de puntos (Cluod Point
Systems, CPS), con microemulsiones y liposomas, entre otras (Nassiri-Koopaei y Faramarzi, 2015).
Sin embargo, las mejoras llevadas a cabo sobre el catalizador del proceso han sido muy limitadas.
Los hongos resultan de especial interés como biocatalizadores en procesos de biotransformación
de compuestos esteroideos por la gran cantidad de modificaciones que son capaces de realizar
sobre ellos y la promiscuidad en el rango de sustratos sobre el que son capaces de actuar. Se
detallan a continuación algunas de las modificaciones que son capaces de realizar sobre
compuestos de tipo esteroideo:

A) 3β-Hidroxiesteroide deshidrogenasas/Δ 4 –Δ 5 isomerasas: Catalizan la oxidación e

isomerización de precursores Δ 5 -3β-hidroxiesteroides en Δ4 -cetoesteroides. Se trata de una
actividad presente en Aspergillus tamarii, capaz de actuar sobre multitud de sustratos y es una
transformación de especial interés para la industria de esteroides ya que cataliza una reacción
necesaria en la síntesis de todas las clases de hormonas esteroideas activas.

B) 17β-Hidroxiesteroide deshidrogenasas: Se trata de una actividad ampliamente distribuida entre

el reino de los hongos, presente en varios hongos filamentosos y en levaduras (Lanisnik et al.,
1992; Rizner et al., 2001). Resulta de especial interés para la industria de esteroides ya que se
emplea para la síntesis de andrógenos anabólicos (e.g., obtención de testosterona a partir de AD).

C) e) 5α-Esteroide reductasas: Catalizan la conversión de Δ 4 -3-cetoesteroides en 5α-3-

cetoesteroides. Presente en un amplio rango de especies pertenecientes al género Penicillium
(Holland et al., 1994). Resulta ser una transformación de especial interés para la industria de
esteroides ya que cataliza la conversión de testosterona en 5α-dihidrotestosterona (Cabeza et al.,
1999) y es empleado en la producción de esteroides anabólicos androgénicos (Kicman, 2008) y
agonistas de los receptores GABA.

D) Hidroxilasas de esteroides: Se trata de la modificación más común en hongos que en la mayoría

de los casos es llevada a cabo por citocromos capaces de catalizar la adición del grupo hidroxilo
regio- y estéreo-específicamente; además son enzimas de gran interés industrial ya que muchas de
las formas activas de los compuestos esteroideos son formas hidroxiladas, siendo especialmente
interesantes para la síntesis de corticosteroides, no sólo por la reducción del coste económico en
la producción sino porque son capaces de llevar a cabo hidroxilaciones en posiciones en las que
realizarlo químicamente resulta imposible o muy complicado.

BIOTRANSFORMACIÓN BACTERIANA DE COMPUESTOS ESTEROIDEOS

Las biotransformaciones in vivo de esteroides llevadas a cabo por bacterias representan un campo
de investigación bien establecido en el área de la biotecnología blanca; probablemente debido a
las ventajas que presentan las bacterias frente a otros posibles biocatalizadores, siendo una vez
más el sistema por excelencia para la producción de compuestos de interés. Desde la década de
1980, el uso de microorganismos para la síntesis de derivados de esteroides ha sido ampliamente
estudiado, debido al gran número de modificaciones que son capaces de llevar a cabo sobre
esteroides; aunque principalmente centrándose en las hidroxilaciones, la deshidrogenación en Δ 1
y la degradación de la cadena lateral.

A continuación se detallan algunas de las actividades enzimáticas capaces de realizar

modificaciones sobre esteroides en bacterias:

A) 3β-Hidroxiesteroide deshidrogesa y 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasas/Δ 4 –Δ 5 isomerasas:

Catalizan la oxidación e isomerización de precursores Δ 5 -3β-hidroxiesteroides en Δ4 -
cetoesteroides. Se trata de una actividad presente en multitud de especies pertenecientes a los
géneros Actinoplanes, Arthrobacter, Corynebacterium, Micromonospora, Mycobacterium,
Nocardia, Nocardioides, Rhodococcus, Streptomyces, etc. Se trata de una transformación de
especial interés para la industria de esteroides ya que cataliza una reacción necesaria en la síntesis
de todas las clases de hormonas esteroideas activas.

¿POR QUÉ NO SE HA CONSOLIDADO LA BIOSÍNTESIS DE HORMONAS ESTEROIDALES A NIVEL

INDUSTRIAL? los procesos basados en la tecnología recombinante no han sido aun
suficientemente investigados e implementados en este importante sector. Una explicación
plausible es que son muy pocos los trabajos que se han realizado en este campo hasta la fecha
probablemente debido, según apuntan algunos autores (Fernandes y Cabral, 2010), a que el sector
químico orgánico, dominante en este campo, es poco afin a la introducción de procesos biológicos
que requieran de una investigación compleja en tecnologías (“DNA recombinante”; ya que los MO
que se utilizan se les debe modificar su ADN para que puedan introducir las enzimas adecuadas
para realizar la biotransformación a las moléculas iniciales y así obtener el producto deseado), que
no suelen ser utilizadas por esos grupos; también debe tenerse en cuenta que el mercado de los
esteroides está muy consolidado y se mueve en estrechos márgenes de costes/beneficios, por lo
que cualquier nuevo desarrollo, antes de ser implantado a escala industrial, tiene que demostrar
una clara ventaja sobre el proceso tradicional. También presenta limitaciones en las que aún se
debe trabajar, como son el rendimiento de transformación y la aparición de subproductos que
dificultan la recuperación del producto de interés. Aunque algunas de estas biotransformaciones
están bien definidas, en muchos casos no se conoce la enzima o la ruta que las lleva a cabo,
resultando por tanto de vital importancia el conocimiento del organismo modelo para evitar
biotransformaciones a ciegas y la identificación de nuevas reacciones que puedan ser
potencialmente útiles.