UNIDAD III– `` INDICADORES CINÉTICOS ENZIMÁTICOS´´

A) GENERALIDADES
La velocidad de las reacciones químicas puede ser aumentada por la acción de
catalizadores. Los catalizadores disminuyen la energía de activación de las reacciones
favoreciendo así la velocidad de la reacción. Las enzimas son los catalizadores biológicos
(biocatalizadores) de naturaleza proteica que participan en las reacciones químicas que
ocurren en los organismos vivo y que integran el metabolismo.

Un rasgo especial de la célula es su capacidad para realizar reacciones químicas rápidas

y a temperatura ambiente. Fuera de la célula, éstas reacciones 'sólo se pueden realizar muy
lentamente. La compleja actividad metabólica de la célula no podría realizarse a
velocidades tan bajas sin el concurso de las enzimas. Las enzimas intervienen en las
reacciones en cantidades muy pequeñas y no se destruyen apreciablemente. Las sustancias
sobre las cuales actúan se llaman Sustratos.
La principal característica que distingue a las enzimas de los catalizadores inorgánicos
es la especificidad de sustrato, actúan sobre un determinado sustrato. Esto quiere decir que
cada enzima cataliza una reacción, por lo tanto, son necesarias miles de ellas para
acelerar las diferentes reacciones que se producen en la célula.

B) TEORÍA DEL CENTRO ACTIVO

DEFINICIÓN
El centro activo de una enzima es la región que se une al sustrato (y al grupo prostético,
si existe) y contiene los residuos que participan directamente en la producción y ruptura
de enlaces.

ESTRUCTURA GENERAL
El centro activo posee 3 partes fundamentales:

1- Un esqueleto Peptídico.
2- Grupos de fijación del sustrato o Grupos de Unión.
3- Grupos Catalíticos.

1- Un esqueleto Peptídico : Que determina la conformación del

sitio activo

2- Grupos de Fijación del sustrato : Son grupos funcionales de las cadenas

o grupo de unión Laterales de los aminoácidos que sirven
para fijar el sustrato al Sitio Activo.
Por ejemplo:
Aminoácidos de cadenas no polar y
aminoácidos
polares iónico
3- Grupos Catalíticos : Son grupos funcionales de.las cadenas..
laterales de los
 Aminoácidos que determinan el tipo de
acción catalítica que se realiza. Por ejemplo:
Histidina Serina y Cisteina.

LOS CENTROS ACTIVOS SON AGUJEROS O HENDIDURAS

En todas las enzimas de estructura conocida, las moléculas de sustrato quedan

ligadas a un hoyo o a una hendidura de la cual el agua ha quedado normalmente excluida,
salvo que sea un componente de la reacción, el carácter no polar de esta hendidura
aumenta la afinidad por el sustrato. Además, el agujero crea un microambiente en el
cual ciertos residuos polares adquieren propiedades especiales para su función
catalítica.

ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL CENTRO ACTIVO

a Centro Activo
b Grupos de Fijación
c Grupos Catalíticos

El centro activo es una entidad tridimensional formada por grupos que

proceden de distintas partes de una secuencia lineal de aminoácidos: realmente
residuos muy alejados en la secuencia lineal, pueden interactuar más fuertemente que
los residuos adyacentes en la secuencia de 'aminoácidos.

Por ejemplo: en la lisozima los grupos importantes del centro activo

pertenecen a los residuos 35, 52, 62, 63 y 101 de la secuencia lineal del 129
aminoácidos.

El centro activo supone una porción relativamente pequeña del volumen

total de la enzima. Muchos de los residuos aminoácidos de una enzima no están en
contacto con el sustrato.

FUERZAS DE UNION ENTRE ENZIMA Y SUSTRATO

Los sustratos se unen a las enzimas por numerosas interacciones débiles. Las
interacciones reversibles entre biomoléculas se realizan mediante:

Enlaces electrostáticos, puentes de hidrógeno, fuerzas de Van der Waals e

interacciones hidrofóbicas. Las fuerzas de Van der Waals son importantes en la unión
sólo cuando varios átomos de sustratos se acercan simultáneamente a varios átomos
de la enzima, por tanto, la enzima y el sustrato deben tener formas complementarias.
 Así, aunque no existe 'virtualmente especificidad en una sola interacción de
Van der Waals, la especificidad se produce cuando existe la oportunidad de producir
un gran número de - enlaces de Van der Waals de manera simultánea.

TEORIAS FORMACIÓN DEL COMPLEJO ENZIMA — SUSTRATO

MODELO DE PLANTILLA Y MODELO DE ADAPTACIÓN INDUCIDA

La especificidad del enlace depende de la disposición exactamente -definida de

los átomos del Centro Activo. Un sustrato debe tener una forma adecuada para
introducirse en el centro activo.

El modelo de la -llave y la cerradura de la interacción de sustratos y enzimas

establecidos por Fischer ha demostrado ser esencialmente correcto. En él el centro
activo de la enzima y el sustrato ceben parecerse estructuralmente igual que la llave
entra en su cerradura Actualmente sólo se aplica a aquellas enzimas altamente
específicas.

El modelo de Ajuste o Adaptación Inducida postulado por Koshland, plantea que

los centros activos de las enzimas tienen formas que son complementarias a la del
sustrato solo después de que el sustrato se ha unido. Aquí el sustrato encaja en el centro
activo, igual que una Mano calza en su guante. Actualmente está probado que la forma
de los centros activos de algunas -enzimas se modifican sensiblemente al unirse al
sustrato.
ESPECIFICIDAD ENZIMATICA

Las enzimas son altamente específicas- tanto en la reacción que catolizan corno
en la selección de los sustratos. Una enzima catalina normalmente una sola reacción
química o un grupo de reacciones estrechamente relacionadas. En las reacciones
enzimáticas son raras las reacciones colaterales que conducen a la formación de
productos secundarios.

La especificidad se refiere a la habilidad de una enzima para discriminar entre

dos sustratos competentes. Si el sitio activo de una enzima tiene grupos funcionales
orientados óptimamente para formar una variedad de enlaces con un sustrato dado en el
estado de transición, la enzima no estaría apta para interactuar tan bien con cualquier
otro sustrato.

Por ejemplo: Si el sustrato normal tiene un grupo hidroxilo que forma un enlace
de Hidrógeno especifico con un residuo de Glucosa de la enzima, cualquier molécula
con un grupo funcional extra para el cual la enzima no tiene sitio de unión es probable
que sea excluido de !a enzima
.
 En general, la especificidad también.se deriva de la formación de múltiples
interacciones débiles entre la enzima y muchas o todas las partes de la molécula de la
molécula de su sustrato especifico.

ESPECIFICIDA SOBRE SUSTRATO

Es la capacidad que tiene la enzima de actuar sobre un solo sustrato o sobre un
grupo de sustrato que tiene características estructurales muy similares.
ESPECIFICIDAD ABSOLUTA
Cuando una enzima sólo es capaz de unirse a un solo tipo de sustrato se dice
que la enzima tiene especificidad absoluta

Ej: La enzima L-Glutamato Dhasa sólo actúa sobre el aminoácido L-Glutamato que
cataliza su desaminación.
ESPECIFICIDAD RELATIVA
Existen otras enzimas, sin embargo, que son capaces de catalizar reacciones sobre
un grupo de diversos sustratos similares estructuralmente.
Ej: La enzima L-Aminoácido Oxidasa que produce la desaminación de varios
aminoácidos.
ESPECIFICIDAD DE ACCION
Es la capacidad que tiene la enzima de catalizar una y sólo una...de las posibles
transformaciones que puede experimentar el sustrato.

NOMENCLATURA Y CLASIFICACION
La nomenclatura de las enzimas ha ido variando con el tiempo. Primero se le
asignaron nombres triviales que no daban ninguna información sobre la enzima.
Ejemplos: EMULSINA, PTIALINA, TRIPSINA, PEPSINA, etc.
Luego fueron nombradas añadiendo el sufijo "ASA" al nombre de su sustrato
o a una palabra o frase que describiera su actividad. Ejemplos:

AMILASA Cataliza la hidrólisis del almidón.

Antes se le llamaba Ptialina.

LIPASA Cataliza la hidrólisis de los

lípidos.
 Antes se le llamaba
Emulsina.
UREASA Cataliza la hidrólisis de
Urea.

Debido al número cada vez más grande de enzimas descubiertas, recientemente ha

sido adoptado un sistema para nombrar y clasificar las enzimas.

Este sistema coloca a todas las enzimas en 6 clases principales, cada una con subclases
basadas en el tipo de reacción catalizada.

TABLA No.3.1. – CLASIFICACION INTERNACIONAL DE LAS

ENZIMAS
No. CLASES TIPO DE REACCION CATALIZADA

1 Oxidorreductasas Transferencia de electrones.

2 Transferasas Reacción de transferencia de grupos químicos
diferentes al hidrogeno
3 Hidrolasas Reacciones de Hidrólisis
4 Liasas Adición de grupos a dobles enlaces o formación
de dobles enlaces por la remoción de grupos.
Transferencia de grupos dentro de moléculas para
5 Isomerasas
producir formas isoméricas.
6 Ligasas Formación de enlaces C-C, C-S, C-0 y C-N por
reacciones de condensación acopladas al
rompimiento del ATP.

Algunos textos de bioquímica incluyen una 7ma clase de enzimas… las

TRASLOCASAS, encargadas de catalizar el movimiento de iones o moléculas a través
de las membranas o su separación dentro de las membranas.

A cada enzima se le asignó un número de clasificación con 4 dígitos y un nombre

sistemático, el cual identifica la reacción catalizada.
Ej: El nombre sistemático formal de la enzima que cataliza la siguiente reacción:

ATP + D-Glucosa ADP + D-Glucosa-6-P

Es ATP: Glucosa Fofotransferasa, el cual, indica que cataliza la trnasferencia de un
grupo fosfato desde al ATP la Glucosa. Su número de clasificación (E. c. Number) es:
 Cada dígito denota una particularidad en la enzima: Cuando el nombre sistemático
es largo o engorroso un nombre trivial puede ser usado, en este caso: Hexoquinasa.

GRUPOS CATALÍTICOS

Los grupos funcionales catalíticos en las enzimas pueden interactuar

transitoriamente con un sustrato y activarlo para la reacción. En muchos casos, esos
grupos bajan la energía de activación (y por tanto, aceleran la reacción) al proveer una
ruta de reacción de más baja energía.

También, la energía requerida para bajar la energía de activación es generalmente

derivada de interacciones no covalentes, débiles, entre el sustrato y la enzima.

El factor que separa a las enzimas de los catalizadores no enzimáticos es la

formación de un Complejo ES específico.

La interacción entre el sustrato y la enzima en este complejo está mediada por las
mismas fuerzas que estabilizan la estructura de las proteínas (enlaces de hidrógeno,
hidrofóbicos, jónicos e interacciones de Van der Waals).

La formación de cada interacción débil en el Complejo ES está acompañada por

una pequeña liberación de energía libre que provee un grado de estabilidad a la
interacción. Esta energía es llamada Energía de Aproximación o Unión. Su significado
se extiende más allá de una simple estabilización de la interacción enzima-sustrato.

La energía de aproximación es la principal fuente de energía libre usada por las

enzimas para bajar la energía de activación de las reacciones.

Dos principios interrelacionados y fundamentales proveen una explicación general

de cómo trabajan las enzimas:

1- El poder. Catalítico de las enzimas es derivado de la energía libre liberada al

formarse los múltiples enlaces e interacciones débiles que ocurren entre una
enzima y su sustrato. Esta energía además de catálisis provee especificidad.

2- Las interacciones débiles son optimizadas en el estado de transición de la reacción;

los sitios activos de las enzimas son complementarios no a los sustratos per se, sino
a los estados de-transición de las reacciones que ellas catalizan:
 Algunas interacciones débiles son formadas en el complejo ES, -pero el
complemento de todas las interacciones débiles posibles entre un sustrato y una enzima
es formado sólo cuando el sustrato alcanza el estado de transición.

Los grupos en el sustrato que están envueltos en esas interacciones débiles

pueden estar a cierta distancia de los enlaces qué son rotos o cambiados.
Las interacciones débiles que son formadas sólo en el estado de transición son las que
hacen la contribución principal a la catálisis.

El requerimiento de múltiples interacciones para conducir la catálisis es una

razón por la cual las enzimas (y algunas coenzimas) son tan grandes. La enzima debe
proveer grupos funcionales para las interacciones y también posicionar precisamente
esos grupos para que la energía de aproximación sea óptima en el estado de transición.

C) CINETICA ENZIMATICA
VELOCIDAD DE REACCION Y FACTORES QUE LA MODIFICAN

La mayoría de los factores que afectan la velocidad de las reacciones catalizadas

por enzimas lo hacen cambiando la concentración de los reactivos. Además dada la
naturaleza proteica, las enzimas son sustancias lábiles, que se inactivan por el calor, por
ácidos o bases fuertes y otros agentes capaces de desnaturalizar las proteínas.

Entre los factores que modifican la velocidad de una reacción enzimática tenernos

a) CONCENTRACION DE LA ENZIMA
b) CONCENTRACION DE SUSTRATO
c) TEMPERATURA
d) pH

a) CONCENTRACION DE LA ENZIMA
En muchas situaciones, tanto clínicas como científicas, es útil conocer no sólo si una
enzima dada está presente, sino también la cantidad en que está presente.

Si se mantienen constantes el pH y la temperatura y se adiciona una concentración alta

de sustrato, la velocidad de una reacción catalizada por enzimas será directamente
proporcional a la cantidad de enzima presente (depende de la concentración de la enzima
presente).

EFECTO DE LA CONCENTRACION DE ENZIMA

Velocidad del
Cambio en DO (As)
A 340 nm
(DO/min)

Si se
considera la situación en equilibrio puede observarse que la velocidad no siempre es
proporcional a la concentración de las enzimas. Aunque la reacción prosigue, la
velocidad de la reacción inversa la iguala. En consecuencia, podría parecer que la
velocidad de la reacción es cero, o sea, la velocidad neta de la reacción es cero, un,
requerimiento de la condición de equilibrio. No obstante), cuando la reacción
catalizada enzimáticamente inicia la conversión de uno o más sustratos a un producto
(p) no hay (p) para que ocurra la reacción inversa. Además, al iniciarse la reacción, la
concentración de S no estaba en absoluto agotada. Por lo que, al iniciarse la reacción,
es decir, la velocidad inicial (V), será directamente proporcional a la concentración
de la enzima [E].

La enzima es un reactivo que se combina con el sustrato formando un complejo

enzima-sustrato, ES, que se descompone para formar un producto P y la enzima libre:

Así, la concentración de la enzima no tiene efecto sobre la constante de equilibrio;

puesto que las enzimas afectan a las velocidades y no a las constantes de velocidad, ellas
no pueden afectar a Keq, que es una reacción de constante de velocidad.

b) CONCENTRACION DE SUSTRATO

En el transcurso de una reacción enzimática donde el pH, la temperatura y la

concentración de enzimas se mantienen constantes, la velocidad de la reacción dependerá de
la concentración del sustrato presente, si se aumenta la concentración del sustrato [S], aumentará
la velocidad hasta alcanzar el valor máximo donde se mantiene constante,- (la velocidad
inicial medida, V, crece hasta un valor máximo, V, y no más) aquí la concentración de
sustrato obviamente ya no modifica la velocidad de la reacción. La velocidad crece al
aumentar la concentración del sustrato hasta el punto donde se dice que la enzima está
"saturada" con el sustrato. La velocidad inicial medida alcanza un valor máximo y no es
afectada por incrementos ulteriores en la concentración del sustrato debido a que, aún a
concentraciones bajas del mismo, éste se encuentra en exceso Con-respecto a la enzima
por una gran relación molar:

EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO

 En los puntos A ó B al aumentar o disminuir [S] aumenta o disminuye la
cantidad de enzima asociada con S como ES, de aquí que V depende de [S].
En C, esencialmente toda la enzima está combinada con el sustrato de manera que
un incremento ulterior en [S], aunque hace aumentar la frecuencia de las colisiones
entre E y S, no puede causar incremento en la velocidad de la reacción, puesto que no
existe enzima libre disponible para reaccionar.
ECUACION DE MICHAELIS-MENTEN

El efecto de saturación es exhibido por todas las enzimas y ha conducido a la siguiente

teoría sobre la cinética:

MODELO DE MICHAELIS-MENTEN

Michaelís y Menten desarrollaron (1913) una teoría general acerca de la acción y

cinética de las enzimas. Fue ampliada por Briggs y Haldane.

La Teoría de Machaelis-Menten supone que la enzima (E) se combina con el

sustrato (S) para formar el Complejo enzima-sustrato (ES), el cual, se escinde en una
segunda etapa para formar enzima libre E y producto P, reacción mucho más lenta. Se
supone que estas reacciones son reversibles.

E+S ES E+P

La Ecuación de M-M es la ecuación de velocidad para reacciones catalizadas por

enzimas que actúan sólo sobre un sustrato.

V max [S]
V =
Km + [S]

V velocidad de la reacción
Vmax velocidad máxima
Km constante de Michaelis – Menten

Conociendo Km y Vmax se puede calcular la velocidad de la reacción a una

concentración cualquiera de sustrato. En las reacciones en las cuates interviene más de
1 sustrato o de un producto, cada uno de ellos posee su propia Km característica. En
muchos casos, la constante de Michaelis (Km) es una medida inversa de la afinidad de
la enzima por su sustrato:

"Cuanto menor es el valor de Km mayor será la afinidad".

Esta relación es válida sólo para las enzimas en las que la velocidad de la reacción
es mucho mayor que la velocidad de ruptura del complejo ES para forman E + P

La ecuación se representa experimentalmente con una gráfica que es una

hipérbola rectangular.

V
V max

V max 2

La velocidad máxima es asíntota con la real, ya que, teóricamente la V max

es inalcanzable, aun experimentalmente, pues nunca toda la E estará formando
parte del complejo ES

Km Es constante para una enzima.

V max Es constante para el sistema ES, siempre que se mantenga la

cantidad de E
Original.

La Km y la Vmax pueden variar con la estructura del sustrato, el pH y la

temperatura.
Si la misma enzima puede atacar varios sustratos, los valores de Km frecuentemente
dan una corporación útil de la afinidad de la enzima para diferentes sustratos.

Los valores de Km para varias enzimas en una serie metabólica de reacciones

consecutivas pueden ocasionalmente, indicar el paso o limitante de la velocidad en el
proceso.

La constante de Michaelis-Menten (Km) de una enzima constituye una

característica útil e importante, que es fundamental no sólo para la descripción matemática
de la cinética enzimática sino también para la determinación cuantitativa de la actividad
enzimática en los tejidos y la purificación de la enzima. Además, la concentración de
sustrato que proporciona la mitad de la velocidad máxima, facilita una indización útil para
el análisis de algunos mecanismos de regulación enzimática. Un notable ejemplo de
investigación médica reciente pone de manifiesto la utilidad de Km en un nuevo aspecto.
Algunos tipos de leucemia humana y animal pueden suprimirse por administración
intravenosa de la enzima Asparaginasa que catoliza la reacción.
Asparagina + H2O Aspartato + NH4+

Este descubrimiento condujo a la conclusión de que la Asparagina presente en la sangre

es un principio nutritivo esencial para el crecimiento de los leucocitos malignos; la
Asparaginasa intravenosa produce la hidrólisis de la Asparagina en Aspartato, el cual, no
satisface las necesidades de dichas células.

GRÁFICO O DIAGRAMA DE LINEWEAVER-BURK

La ecuación de M-M puede transformarse algebraicamente en otras más útiles para la

expresión de los datos experimentales. Permiten dar a la ecuación formas lineales y
transforman a la hipérbola en una línea recta.
La más utilizada es la Representación Doble Recíproca o Diagrama de Line•eaver-Burk.
La cual, se obtiene tornando los inversos (recíprocos) de ambos miembros de la ecuación
de M-M y reordenando los términos.

V max [S]
V =
Km + [S]

1 Km I I
= • +
V Vmax [S] Vmax

Es la ecuación de una línea recta, similar a:

Y=ax+b
Dónde:

1 Km 1 1
y = ; a = ; x = ; b =
V Vmax S Vmax

1 Km 1 I
= • +
V Vmax S Vmax

E+I EI P

Cuando suficiente sustrato está presente la probabilidad de que una molécula de

inhibidor se una es mínima y la reacción exhiba una Vmax normal. Sin embargo, la Km
aumentará en la presencia del inhibidor. Este efecto sobre la aparente Km y la ausencia
de un efecto sobre la Vmax es diagnóstico de la inhibición competitiva y es fácilmente
revelado en la representación doble recíproca. En esta inhibición se produce una
modificación de la afinidad de la E con el S, que se traduce cinéticamente en un cambio
de la Km, aquí se encontrará aumentada, sin que se altere la Vmax.

Representación de Lineweaver – Burk

I- La enzima Succinato Dhasa es inhibida competitivamente por el Malonato que se

parece estructuralmente a su sustrato el Succinato También la inhiben otros
metabolitos del CK como Malato y OAA, cuando estos metabolitos se acumulan
había una disminución de la actividad de la enzima y de la intensidad del proceso
 La inhibición competitiva tiene cierto valor en la regulación del metabolismo
celular, pues existen enzimas cuyos inhibidores competitivos son productos de otras
reacciones metabólicas: e incluso de la misma vía en que participa la enzima inhibida.

Algunos medicamentos usados frecuentemente tienen acción de inhibidores

competitivos como es el caso de las llamadas SULFAS. Se parecen estructuralmente al
Ácido para Aminobenzoico (PABA), que es un sustrato imprescindible para el
metabolismo bacteriano, al producirse la inhibición se altera el metabolismo bacteriano
y se produce la muerte de la bacteria controlando así la infección. Es por esto que, deben
ser suministradas en dosis altas porque si su [ ] es baja en la sangre y tejidos el PABA
los desplaza y las bacterias no se verán afectadas.

2- Los agentes Quimioterápicos contra el cáncer tienen acción similar como anti
metabolitos.

3- La inhibición competitiva es usada terapéuticamente para tratar pacientes que han

ingerido Metanol (un solvente encontrado en el gas anticongelante). El metanol es
formaldehído por acción de la enzima Alcohol Dhasa. El formaldehído daña tejidos
y la ceguera es un resultado común, ya que, los ojos son particularmente sensible el
Etanol compite efectivamente con el metanol como un sustrato para la Alcohol Dhasa
La terapia para el envenenamiento con metanol es la infusión IV de Etanol, el cual
enlentece la formación de formaldehído grandemente así que la Mayoría del metano
puede ser excretado inofensivamente en la orina.

INHIBIC1ON NO COMPETITIVA

Es cuando el inhibidor no se une al centro activo de la enzima, sino a otro grupo

o lugar diferente ocasionando una deformación de la conformación tridimensional de la
enzima que interferirá con su actividad catalítica. La unión del inhibidor no bloquea la
unión del sustrato.

Aquí el aumento de la [S] no invierte la reacción. Así puede evitar que se forme
el complejo ES o que este se descomponga a su velocidad habitual para liberar productos.
 La enzima se inactiva cuando el inhibidor está unido, esté o no presente el sutrato.
El inhibidor efectivamente de la enzima activa y, por tanto, disminuye la Vmax aparente.
No se producirá una modificación de la Km, pero sí de la Vmax que decrece en presencia
del inhibidor.

Representacion de Lineweaver – Burk

EJEMPLOS:

1- El iodocetato puede combinarse reversiblemente con los grupos – SH de la enzima

localizados cerca del centro activo y que son esenciales para la actividad de la enzima.

2- Iones de Mercurio (Hg) o de metales pesados.

INHIBICION ACOMPETITIVA

Es cuando el inhibidor se une exclusivamente con el complejo ES formando

un complejo ESI que no libera productos.

E+S ES + I ESI P
 Aquí se modifican tanto la Vmax como la Km sin que se produzca una alteración
de la pendiente de la curva.

Es poco frecuente en las reacciones de un solo sustrato, pero es corriente en las de

2 sustratos.

Representacion de Lineweaver – Burk

INHIBICIÓN IRREVERSIBLE

Es cuando sobre la enzima actúan agentes capaces de unirse covalentemente a un

grupo funcional y modificarlo de modo permanente inactivando la molécula de la
enzima.

Esta no puede ser tratada por los principios de M-M que suponen la formación
reversibles de los complejos El o ESI.

EJEMPLOS:

1- Compuestos Organofosforados o venenos Nerviosos.

2- Fluorofosfato de Diisopropilo (DFP)
D) COFACTORES ENZIMATICOS

DEFINICIÓN

Factores que contribuyen a la eficacia catalítica de las enzimas. La actividad de

algunas enzimas depende solamente de su estructura como proteínas, mientras que, otras
necesitan además uno o más componentes no proteicos, llamados Cofactores.

Los cofactores son generalmente estables frente al calor, mientras que muchas
proteínas enzimáticas pierden la actividad por calefacción. El cofactor puede ser un ion
metálico, o bien una molécula orgánica llamada Coenzima, algunas enzimas necesitan
de ambos.
 El complejo Enzima-Cofactor catalíticamente activo recibe el nombre de
Holoenzima cuando se separa el cofactor, la proteína restante, que por sí misma es
inactiva catalíticamente se designa con el nombre de Apoenzima.

Cada una de las coenzimas contiene corno parte de su estructura, una molécula
de alguna de las vitaminas. Las coenzimas actúan, por lo general, como transportadores
intermediarios de grupos funcionales de átomos específicos o de electrones, los cuales
son transferidos en la reacción enzimática global.

Cuando la coenzima se halla unida íntimamente a la molécula de la enzima

recibe, normalmente el nombre de Grupo Prostético. Ej: Hay grupos que se unen
covalentemente como la biotina a la Acetil CoA-Carboxilasa.

Sin embargo, en algunos casos la coenzima está unida débilmente y actúa

esencialmente como uno de los sustratos especificos de aquellas enzimas.

El organismo obtiene su energía vital del metabolismo intermediario, el cual,

podría definirse como un conjunto de reacciones enzimáticas interrelacionadas,
mediante las cuales una célula viva intercambia materia y energía con su ambiente.

La respiración, función cardiaca, producción de calor y la actividad de los

órganos internos son procesos permanentes y dependen de energía. Esa energía es
obtenida básicamente de tres fuentes: glúcidos, Unidos y proteínas, a través del
metabolismo intermediario, el cual depende, en gran parte, para su desarrollo normal de
las coenzimas en cuya composición intervienen muchas vitaminas.

Así, las vitaminas, esencialmente las hidrosolubles del complejo B, regulan el.
Metabolismo debido a que son formadoras de coenzimas o cofactores requeridos por un
gran número de enzimas para tener actividad biológica. Muchos de los productos de tales
reacciones enzimáticas son metabolitos que regulan la actividad de otros puntos de
control del metabolismo.

E) VITAMINAS

GENERALIDADES

Funk, en 191 1, aisló un compuesto cristalino del polvo que resulta cuando se pule el
arroz. Descubrió su cualidad curativa y preventiva en deficiencias dietéticas en palomas
que cursaban polineuritis. Por su relación con la vitalidad y debido a que el compuesto
aislado era una amina, se le denominó Vitamina. Hoy en día sabemos que están formadas
por moléculas orgánicas contenidas en los alimentos de origen animal y vegetal, y que
se requieren para el metabolismo normal, pero que no pueden ser sintetizadas en
cantidades adecuadas por el cuerpo humano. Son factores alimenticios accesorios' para
mantener una buena salud.
Más de una decena de compuestos o grupos íntimamente relacionados se consideran
vitaminas. Aunque son sumamente heterogéneos en estructura química y en función
biológicas, pueden ser agrupados convenientemente en dos clases:

1- Vitaminas Hidrosolubles:

Ácido Ascórbico o Vitamina C.

Tiamina o B1

Riboflavina o B2

Piridoxina, Piridoxal, Piridoxamina o B6

Cianocobalamina o B12

Complejo B Niacina o Acido Nicotínico

Ácido Fólico

Ácido Pantotenico

Ácido Lipoico

Biotina

Se excretan por la orina cuando sus niveles séricos exceden la concentración

tisular. Las vitaminas hidrosolubles del Complejo B en general se encuentran juntas en
los mismos alimentos: cereales de grano entero, legumbres, vegetales de hojas verdes,
carnes y productos lácteos. Son absorbidas en el intestino, algunas son producidas por la
flora como la niotina. Una excepción notable es la vitamina B12, la cual requiere del
factor intrínseco para su absorción en el íleon distal. A causa de su solubilidad en el agua,
las vitaminas hidrosolubles no tienen forma estable de almacenamiento y deben ser
suministradas constantemente en la dieta.

Hasta el momento las vitaminas hidrosolubles, son inestables al calor, a la luz,

las soluciones fuertemente ácidas o alcalinas y al almacenamiento prolongado.Tienen
función de coenzimas necesarias en un gran número de reacciones bioquímicas
específicas.

Ejemplo: La niacina es parte de la coenzima NAD.

El ácido pantoténico es parte de la Coenzima A.

2- Vitaminas Liposolubles:

Son éstas las vitaminas A, D, E y K, están presentes en las grasas de los

alimentos como son las carnes rojas, hígado, grasa de leché, yema de huevo, aceites de
semillas vegetales v de pescado, y en hojas verdes. Estas vitaminas se metabolizan en
el organismo junto con los lípidos, en forma de lipoproteínas. Se almacenan en el
hígado y tejido adiposo. No son excretadas por la orina y por tanto se acumulan en los
tejidos de almacenamiento hasta niveles que pueden resultar tóxicos.

La vitamina K, es un cofactor esencial en la síntesis de la protrombina y

antihemorrágica, a partir de esta vitamina se sintetiza la coenzima menaquinona
(vitamina K2), importante en la actividad de la enzima gamma-glutamil carboxilasa,
involucrado en el proceso de coagulación.

Las demás vitaminas liposolubles por lo general no actúan como coenzimas

pero tienen funciones particulares.

La vitamina A, llamada retinol juega un papel importante en la percepción de

la luz en el ojo (antixeroftálmica) y en el crecimiento.

La vitamina D, es importante en el metabolismo del calcio, y para evitar el

raquitismo. Existe junto a la A en el aceite de hígado de bacalao, atún, etc....

La vitamina E manifiesta su acción contra la esterilidad y participando en el

metabolismo de ácidos grasos insaturados.

F) RELACION ENTRE COFACTORES Y VITAMINAS

En el metabolismo de los glúcidos y lípidos intervienen las

siguientes coenzimas: NAD + y NADP + derivadas de la Niacina.

Pirofosfato, de Tiamina (PPT) derivado de la vitamina B 1. FAD que contiene

Riboflavina.

El metabolismo glucidico es muy activo a nivel muscular y la carencia de

tiamina, por ejemplo, ocasiona trastornos, tales como retención de agua, edema,
dilatación del corazón derecho, síntomas beribéricos, síndrome de Wernicke
Korsakoff.

El Ácido Pantoténico es un precursor de la coenzima. A, molécula activadora

del ácido acético y de los ácidos grasos. Esta vitamina también forma parte de la
 proteína acarreadora de grupos ácidos (ACP o PTA), molécula requerida en la
biosíntesis de los ácidos grasos.

La Biotina juega un papel básico en 'el metabolismo de los lípidos debido a que
activa a ciertas Carboxilasas como la acetil – CoA–Carboxilasa (principal enzima
reguladora de la síntesis de ácidos grasos).

El fosfato de Piridoxal v el NAD+ son dos coenzimas oxidativas en las

reacciones de transaminación y desaminacion oxidativa de los aminoácidos,
respectivamente.

El tetrahidrofolato derivado del Ácido fólico interviene en el metabolismo de

los ácidos nucleicos: mientras que la Riboflavina es un componente de la Xantina
oxidasa, enzima que cataliza la conversión de Xantina en Acido Úrico.

Finalmente, otras sustancias tales como ácido lipoico, inositol colina, etc...
Juegan un papel importante en el metabolismo.

TABLA No.3.2. – RESUMEN DERINGIPALES COENZIMAS

ABREVIA GRUPO. VITAMINA QUE LA

COENZIMAS TURA TRANSPORTADO FORMA
1- COENZIMAS OXIDORREDUCTASAS:
Nicotinamida Adenia Dinucleótido NAD HIDROGENO Niacina

Nicotinamida Adenin Dinucleótido Fosfato NADP HIDROGENO Niacina

Flavin Mononucleotido FMN HIDROGENO Riboflavina
Flavín Adenin Dinucleótido FAD HIDROGENO Riboflavina
Ácido Lipoico Líp HIDROGENO -----------
GRUPOS ACILOS

2- COENZIMAS TRANSFERASAS: ATP FOSFATO, AMP -----------

Adenosín Trofosfato
S-Adenosil Metionina ------ METILO -----------
Biotina ------ CARBOXILO Biotina
Coenzima A CoA ACILOS Ácido Pantoténico
Citidín Difosfato CDP FOSFORI -----------
Fosfato de Piridoxal PALP ALFA-AMINO Piridoxina
Ácido tetrahidrofólico THF / FH4 FORMILO Ac. Fólico
Pirofosfato de Tiamina PPT C2-ALDEHIDO Tiamina
Uridín Difosfato UDP MONOSACARIDO -----------
AC. URONICO
3- COENZIMAS ISOMERASAS Y LIASAS ------- Desplazaram. Cobalamína o b12
Coenzimas B12 o Cobamída Carboxilos
Fosfato de Piridoxal PALP Descarboxilación Piridoxina o B6

Pirofosfato de Tiamina TPP Descarboxilación Tiamina o B1

Uridín Difosfato UDP Isomerización Monos, ------------