Universidad Nacional del Altiplano

Facultad de Ciencias Biológicas

Escuela Profesional de Biología
Programa Académico de Microbiología y Laboratorio
Clínico

TINCIÓN
TRICRÓMICO DE
VAN GIESON

Presentado por :
Sandra Priscyla Chura Tapia
 Es una tinción donde se combina la tinción nuclear mediante la hematoxilina férrica de
Weigert con la mezcla ácido pícrico-fucsina ácida, la cual permite diferenciar
cromáticamente las fibras colágenas del tejido conjuntivo.
 Este procedimiento de tinción se utiliza para diferenciar colágeno de otros tejidos
conectivos. Las fibras colágenas se tiñen en color rojo vivo frente a otros elementos
epiteliales que toman una coloración amarillenta y los núcleos celulares de color azul
negruzco.
Productos

 Xileno
 Etanol de 50º, 70º, 80º, 90º, 96º y 100º
 Hematoxilina de Weigert
 Fucsina ácida (C.I. 75290)
 Ácido pícrico
 Ácido acético
 Ácido clohídrico
 H2O destilada
 H2O corriente
 Medio de montaje
Material

 Cubetas de tinción
 Cesta para portas
 Cubreobjetos
Aplicación:

 Cortes de tejidos fijados en formol y embebidos en

parafina.
Principio del método:

 El Tricrómico de Van Gieson está compuesto por 2 colorantes que se emplean de forma
selectiva para visualizar los núcleos celulares y fibras colágenas.
El factor de diferenciación de tinción más importante está dado por el grado de
permeabilidad que ofrecen las estructuras al paso de los colorantes empleados.
Otro factor importante es el valor del pH de los colorantes de las soluciones empleadas..
Soluciones y Reactivos:

HEMATOXILINA FERRICA DE WEIGERT SOLUCION A

 HEMATOXILINA FERRICA DE WEIGERT SOLUCION B
 TRICROMICO DE VAN GIESON Solución
 AGUA desmineralizada
Solución de Trabajo de Hematoxilina Férrica:
En vial vacío mezclar partes iguales de Hematoxilina Férrica de Weigert Solución A y
Hematoxilina Férrica de Weigert Solución B.
Esta solución será estable durante 5 días.
Procedimiento

 Cualquier fijador es válido para esta tinción. Las muestras se incluyen en parafina y se cortan en
secciones de unas 8 μm que se adhieren a portaobjetos recubiertos con gelatina.
 1.- 2x10 min en xileno para desparafinar.
 2.- 2x10 min en etanol 100º
 3.- 10 min en etanol 96º
 4.- 10 min en etanol 80º
 5.- 10 min en etanol 50º
 6.- 5 min en agua destilada.
 7.- 10 min en hematoxilina férrica de Weigert (este colorante está formado por dos soluciones que
se mezclan en el momento de la tinción).
 8.- 5 min en agua corriente.
 9.- 1 min en agua destilada.
 10.- 4 a 5 min con picrofucsina de Van Gieson.
 Picrofucsina de Van Gieson

La solución de trabajo se realiza en el momento de la tinción aunque se puede dejar madurar

unas semanas. Según el caso el tiempo de tinción puede variar. De cualquier manera, antes de su
uso se le agregan 0.25 ml de ácido clorhídrico concentrado. Tras la coloración con esta mezcla no
se debe lavar con agua normal ya que ocasiona una coloración más débil, y es por ello que se
recomienda usar el agua acidificada.
 11.- 2 x 30 s en agua acidificada.Preparación del agua acidificada:
0.5 ml de ácido acético
100 ml de agua destilada
 12.- 3 x 1min en alcohol 100º
 13.- 2 x 5 min en xilol.
 14.- Montado con medio de montaje.
Resultados:

 Núcleos: Azul negruzco

 Citoplasma y demás componentes epiteliales: Amarillo
 Colágeno: Rojo
 Colágeno: rojo rosado.
 Músculo: amarillo anaranjado.
 Citoplasma: amarillo anaranjado.
 Núcleos: negro azulado.
Sección de 8 µm de grosor de una muestra
incluida en parafina teñida con tricrómico de
Van Gieson. Zona profunda de la dermis.
Usos / Limitaciones:

 Reactivo de Diagnóstico Uso in Vitro

 Usos en aplicación en muestras histológicas y citológicas.
 Almacenar en un lugar fresco. Conservar el envase herméticamente cerrado en un lugar
seco y bien ventilado, protegido de la luz. Almacenar entre 15°C y 30°C. Una vez abierto
conserva refrigerado entre 2°C y 8°C.
 Evite el contacto con los ojos y la piel. Evitar la inhalación de vapor o neblina.
Disposiciones normales de protección preventivas de incendio.
 No lo elimine en los drenajes. Contenga y recupere los residuos cuando sea posible. Evitar
la contaminación del suelo, aguas y desagües. Deseche el envase y el contenido residual
usado de acuerdo con los requerimientos federales, estatales y locales.
 No utilice este producto si el mismo ha expirado.