Esterilizació n de materiales y medios de Cultivos

Materiales: Placas de Petri, Pipetas, Tubos de ensayo, Erlenmeyer, probeta, varilla de vidrio, vasos
precitados, auto clave, agua destilada, mechero vidrio reloj, estufa.

1. Lavado y desinfectado de materiales a esterilizar (pipetas, medios de cultivos, placas de Petri).

2. Envolvemos los materiales con diario. Las pipetas se envuelven en forma perpendicular a 45°
doblando la punta y se envuelve en forma ajustada. Las placas de Petri se envuelven
completamente con diario.
3. Se colocan los materiales ya envueltos en el autoclave
4. Preparación de medios de cultivo: (agar nutritivo, caldo maconkey, EMB y caldo lauril.)
Se realiza una regla de tres simples para saber la cantidad del medio de cultivo que se necesita para
disolver en 100ml de agua destilada. La cantidad de agua se mide en una probeta y el medio de
cultivo se pesa en una balanza.

5. Se disuelve la cantidad de medio que se necesita en el agua destilada (se realiza el mismo
procedimiento para todos los medios) y se agrega cada medio ya disuelto en vasos precipitados.
6. Luego de disolver el agar nutritivo se enciende un mechero, se coloca un trípode con una tela de
amiento y sobre ella se coloca el vaso precipitado con agar nutritivo el cual se revuelve con una
varilla de vidrio hasta que comience a hervir o comience a ponerse un poco espeso. Se repite el
mismo procedimiento con
7. Luego de disolver el caldo lauril se llenan 4 tubos de ensayo de doble concentración, dentro de los
tubos se encontraban campanitas de Durham los cuales se utilizan para determinar gases de
microrganismos, a los tubos se le agregaron 10 ml de caldo lauril con una pipeta, luego se hizo un
tapón con algodón el cual se colocó en los tubos de ensayo para que no entre oxigeno dentro del
tubo.
8. Con lo restante del caldo lauril se realizó una dilución para llevarlo a simple concentración
agregándole agua destilada, se llenaron 16 tubos de ensayo con campanitas de Durham dentro de
ellos, se le agregan 5 ml a cada tubo.
9. Al EMB y al caldo maconkey se le realizaron los mismos pasos que al agar nutritivo. Se los lleva a
fuego has que comiencen a hervir o se vuelva espesos.
10. Una vez listos los medios de cultivo se los pasaran a un Erlenmeyer (uno para cada uno) al igual que
a los tubos se le ponen tapones con algodón luego se los tapan con corchos y se lo envuelve con
diario y se los sujeta con un elastiquin.
11. Se colocan los medios de cultivo en el autoclave junto a los otros materiales.
12. Se llena el autoclave con 3 L de agua destilada.
13. Comienza la esterilización por