TALLER: GENÉTICA BACTERIANA

DEFINA LOS SIGUIENTES TÉRMINOS:

1. Cromosoma Bacteriano

Molécula de ácido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y circular, cerrado por

enlace covalente donde está contenida toda la información genética esencial para la vida
de la bacteria

2. Plásmidos:

Estos, son moléculas circulares de ADN de doble cadena que constituyen una unidad de
replicación independiente del cromosoma. Por esto puede encontrarse más de una copia
del mismo plásmido dentro de la célula bacteriana. En general los plásmidos de mayor
tamaño se encuentran en una o unas pocas copias, mientras que los más pequeños
pueden estar en hasta cien copias por célula (plásmidos multicopia).

3. Transposones:

Inicialmente conocidos como genes saltarines. Es una secuencia de ADN que puede
moverse autosuficientemente a diferentes partes del genoma de una célula.
Los transposones pueden saltar de un plásmido al cromosoma bacteriano o de un
plásmido a otros plásmidos; de esta manera se generan múltiples plásmidos resistentes.

4. Bacteriófagos:

Son parásitos intracelulares obligados que se multiplican al interior de las bacterias,

haciendo uso de algunas o todas sus maquinarias biosintéticas (p. ej., los virus que
infectan bacterias).

5. Bacterias Competentes:

Cultivo de bacterias (o levaduras) tratadas de tal forma que han incrementado su

capacidad para incorporar moléculas de ADN sin transducción ni conjugación.

6. Bacterias hfr:
Bacterias cuyo cromosoma contiene un plásmido conjugativo, por lo general el factor f.
Dada la capacidad de autotransferencia por conjugación del factor f, al estar unido al
cromosoma también una parte de este puede ser transferido. 

7. Transducción Generalizada:

Ocurre durante el ciclo lítico (ciclo donde el fago rompe la bacteria) de los fagos y es
capaz de transferir cualquier parte del genoma bacteriano. Durante la fase de ensamblaje
viral, fragmentos del cromosoma bacteriano pueden quedar en la cápsida viral. Cuando
este fago infecta a una nueva bacteria, el material puede ser transferido al cromosoma
bacterial. La cantidad de DNA bacteriano trasportado depende principalmente del tamaño
de la cápsida del virus.

8. Transducción Especializada:

En la transducción especializada, la partícula viral modificada transporta porciones

específicas del genoma bacteriano. Los genes transportados son bio y gal. Este proceso
es posible debido a un error durante el ciclo lisogénico. Esto ocurre cuando se induce a un
fago a abandonar el cromosoma de la célula huésped observándose en ocasiones una
escisión incorrecta. Esto hace que el fago se lleve uno de los 2 genes localizados en sus
extremos (bio y gal). El genoma viral resultante contiene porciones del cromosoma
bacteriano justo al lado del sitio de la integración.

9. Lisogenia:

Estado en el que un fago con genoma DNA mantiene una relación latente o persistente,

no lítica, con la bacteria hospedadora. durante el estado liso génico el fago no se replica,
sino que el genoma viral está integrado en el cromosoma de la bacteria y se transmite en
forma de profago a las células descendientes durante la división de la bacteria.
La inserción del profago puede ocurrir en regiones concretas del DNA del hospedador o
en cualquier lugar.
El profago también puede perpetuarse como un elemento extra cromosómico si se inserta
en un plásmido. La bacteria que contiene un fago en estado liso génico se denomina
lisógeno, y es inmune a la súper infección por el mismo fago. Los cultivos bacterianos liso
génicos pueden lisarse de forma espontánea con una frecuencia muy baja (1 x 10-6). sin
embargo, esta frecuencia de lisis (debido a la desinserción del profago y subsiguiente
replicación viral) puede aumentarse por agentes inductores como la luz ultravioleta.

10. DNA desnudo:

ADN desprovisto de cubierta  proteínica o lipídica. Para la transferencia  de genes, suele

estar constituida por un plásmido bacteriano que contiene el gen  a transferir. Se inyecta
directamente en el tejido objetivo donde se expresa generalmente sin integrarse en
el genoma de las células huésped.

11. Sistemas De Secreción Tipo Iv:

El sistema de secreción de tipo iv es homólogo a la maquinaria de conjugación bacteriana
(y a los flagelos de las arqueas). Es capaz de transportar tanto ADN como proteínas. Fue
descubierto en agrobacterium tumefaciens, que utiliza este sistema para introducir
el plásmido ti y proteínas en el huésped que parasita. helicobacter pylori utiliza este
sistema de secreción para inyectar caga en las células epiteliales gástricas. bordetella
pertussis, el agente causal de la tos ferina, segrega la toxina pertusis en parte a través de
este sistema de secreción. legionella pneumophila, el agente causante de la legionelosis,
utiliza la secreción de tipo iv, conocida como icm/dot, para traslocar numerosas proteínas
efectoras en el huésped eucariota.

12. Pilis F:

Filamento sexual, largo, responsable de transmisión hereditaria.

EL GENOMA BACTERIANO O CROMOSOMA BACTERIANO TIENE ALGUNAS

CARACTERÍSTICAS PARTICULARES, MENCIONE ALGUNAS QUE LO DIFERENCIA
DEL GENOMA EUCARIOTA:

1. el genoma bacteriano tiene un cromosoma con todos los genes.

El genoma eucariota tiene múltiples cromosomas cuyo número es característico de
especie

2. El genoma bacteriano se encuentra en alguna región del citoplasma y no tiene

nuceloide.
El genoma eucariota está localizado en el núcleo y separado físicamente por membrana
nuclear.

3. El genoma bacteriano tiene 1 molécula casi siempre circular de ADN.

El genoma eucariota tiene formas genéticas lineales de ADN.

Las bacterias hacen recombinación genética mediante mutación, reordenamiento de

los genes existentes y transferencia horizontal de genes.

LAS MUTACIONES implican cambios en las secuencias de bases, algunos de los tipos
de mutaciones se mencionan a continuación, explique brevemente cada una ellas.

Inserción: Dentro de la secuencia del ADN se introducen nucleótidos adicionales,

interpuestos entre los que ya había, alargándose correspondientemente la cadena de
ADN o En este tipo de mutación se añade una o más bases al DNA original. De esta
forma se puede alterar el marco de lectura para formar la proteína o insertar aminoácidos
extra que son inadecuados.

Transición: o simplemente transiciones, cuando un par de bases es sustituido por su

alternativa del mismo tipo. Las dos bases púricas son adenina (A) y guanina (G), y las dos
pirimídicas son citosina (C) y timina (T). La sustitución de un par AT, por ejemplo, por un
par GC, sería una transición. O : Es el cambio en un nucleótido de una base púrica por
otra púrica o de una pirimidínica por otra pirimidínica.

Transversión:  Son las sustituciones de una purina por una pirimidina o viceversa.1 Una

Transversión solo puede ser revertida por reversión espontánea. Debido a que, a
diferencia de la Transición este tipo de mutación cambia la estructura química de manera
drástica, las consecuencias de la Transversión tienden a ser más drásticas que las de
la Transición. Las Transversiones pueden ser causadas por la radiación ionizante y
por agentes alquilantes. O cuando un par de bases es sustituida por otra del otro tipo. Por
ejemplo, la sustitución del par AT por TA o por CG.

Duplicación:  Repetición de un segmento cromosómico., En este tipo de mutación hay

un fragmento de DNA que está copiado una o varias veces, lo que altera la formación
de la cadena de aminoácidos y la función de la proteína. De esta forma se puede alterar el
marco de lectura para formar la proteína o insertar aminoácidos extra que son
inadecuados.

¿Cuales pueden ser las causas de las mutaciones y cual su impacto en la bacteria?

1) Puede haber errores en la copia de ADN

La mayoría de las mutaciones que son la base de la evolución se dan naturalmente. Por
ejemplo, cuando una célula se divide, hace una copia de su ADN, y a veces esta copia no
es perfecta.

2) Factores externos pueden causar mutaciones

Las mutaciones también pueden ser causadas por la exposición a ciertas sustancias
químicas o a radiación. Estos agentes pueden causar alteraciones en el ADN. Las
mutaciones no son causadas siempre artificialmente, aún en los ambientes aislados y no
contaminados, el ADN puede dañarse o deteriorarse. Sin embargo, cuando la célula
repara el ADN, puede no hacer un buen trabajo. Si la célula termina con un ADN
significativamente diferente al original, ha habido una mutación.

TRANSPOSICION (esquematice como se lleva a cabo, mencione que elementos hacen

parte de este mecanismo y de ejemplos de bacterias que lo realice)

Un transposón, anteriormente conocido como "gen saltarín”, es una secuencia de ADN

que puede moverse de manera autosuficiente a diferentes partes del genoma, por medio
de un proceso conocido como transposición. En este proceso, se pueden causar
mutaciones y cambio en la cantidad de ADN del genoma.
El transposón modifica el ADN de sus inmediaciones, ya sea arrastrando un gen
codificador de un cromosoma a otro, rompiéndolo por la mitad o haciendo que
desaparezca del todo. En algunas especies, la mayor parte del ADN basura (hasta un
50% del total del genoma) corresponde a transposones.

CLASIFICACIÓN
 SEGÚN EL CONTENIDO DEL TRANSPOSÒN:

- Transposón simple ò secuencia de inserción (IS)

Mecanismo de transposición no replicativo.
Contienen una secuencia central con información para la transposasa, una enzima
necesaria para la transposición, y en los extremos una secuencia repetida inversa (IR).
Cuando un transposón simple se integra en un determinado punto del ADN aparece una
repetición directa de la secuencia diana (5-12 pb).

- Transposón compuesto (Tn)

Contienen una secuencia de inserción (IS) en cada extremo en orden directo o inverso y
una región central prara la transposasa que además suele contener información de otro
tipo. Ej: los factores de transferencia de resistencia (RTF), poseen información en la zona
central para resistencia a antibióticos como el cloranfenicol, la kanamicina, la tetraciclina,
dándole una ventaja selectiva a las bacterias que lo posean.

 SEGÚN ESTRATEGIA DE TRANSPOSICIÓN:

- Clase I o retrotransposones:
Se mueven en el genoma siendo transcritos a ARN y después en ADN por
retrotranscriptasa. A su vez, se clasifican en los de origen retroviral (retrotransposones
con LTR) y de origen no retroviral (retrotransposones sin LTR).
- Clase II o DNA transposones:
Se mueven directamente de una posición a otra en el genoma usando una transcriptasa
para copiar y pegarse en otro locus del mismo.
- Clase III o MITE (Miniatura con repetición invertida de elementos transponibles

 SEGÚN MECANISMO DE TRANSPOSICIÓN

- Transposición conservativa:
El transposón sale de la sede donadora que queda vacía y se incorpora en una nueva
sede (sede receptora). No aumenta el número de copias del transposón en el interior de la
célula.
Se expresa la transposasa, y realiza dos cortes de doble cadena a la misma altura en el
genoma donante, dejando aislado el transposón. A continuación localiza una secuencia
diana (pongamos, ATGCA) en el genoma aceptor, y realiza un corte cohesivo. Tras eso
une los extremos a los del transposón aislado, y la ADN Polimerasa de la célula rellena
las zonas de cadena sencilla dejadas en la secuencia señal tras el corte cohesivo. Debido
a esto, la secuencia señal queda duplicada. Queda, sin embargo, un hueco en el genoma
donante, que puede ser letal si no se repara. Realmente, en este caso se habla más de
recombinación que de transposición.

- Transposición no conservativa:
En este caso la transposasa realiza un corte cohesivo no solo en la secuencia diana, sino
también en el genoma donante, dejando un corte a cada lado del transposón. A
continuación integra todo el genoma donante con el aceptor, mediante un curioso
mecanismo que forma un intermediario llamado “estructura entrecruzada”. Esta estructura
es resuelta por un segundo enzima, la resolvasa, que según cómo lo resuelva dará lugar
a una de las siguientes transposiciones:
Transposición no replicativa: el genoma donante se libera, dejando el integrón en el
genoma receptor. Al igual que en la transposición conservativa, queda un hueco en el
genoma donante, que puede ser letal si no se repara.
Transposición replicativa: se produce una replicación desde los extremos 3’ del genoma
aceptor, lo que acaba por duplicar el transposón, y produciendo un genoma mixto llamado
“cointegrado”. A continuación la resolvasa rompe el cointegrado mediante una
recombinación recíproca, que une los extremos del ADN aceptor original (ahora con una
de las copias del integrón) y libera el genoma donante de nuevo con su transposón.

ESQUEMA DE LA CONJUGACIÓN PROCARIOTA

1. La célula donante genera un pilus.

2. El pilus se adhiere a la célula receptora y ambas células se aproximan.
3. El plásmido móvil se desarma y una de las cadenas de ADN es transferida a la célula
receptora.
4. Ambas células sintetizan la segunda cadena, regenerando un plásmido completo. La
célula receptora sintetiza el pilus. Ahora ambas células son potenciales donantes.

La conjugación bacteriana es el proceso de transferencia de material genético entre una

célula bacteriana donadora y una receptora mediante el contacto directo o una conexión
que las una. A menudo es considerada el equivalente bacteriano a la reproducción sexual
o al apareamiento debido a que implica el intercambio de material génico. Durante la
conjugación la célula donadora provee un elemento génico móvil o conjuntivo que
 generalmente es un plásmido o transposón.  La mayoría de los plásmidos conjuntivos
tienen sistemas que aseguran que la célula receptora no tenga ya un elemento similar.
Este proceso es promovido por determinados tipos de plásmidos, que portan un conjunto
de genes cuyos productos participan en el proceso, y que requiere contactos directos
entre ambas células, con intervención de estructuras superficiales especializadas y de
funciones específicas (pili sexuales en los Gram negativos, y contacto íntimo en los Gram
positivos).
Algunos de estos plásmidos se comportan como episomas, es decir, que pueden
integrarse en el cromosoma; en este caso, si se produce la conjugación, se puede
transferir el propio plásmido más un segmento adyacente del cromosoma, que a su vez
podrá recombinarse con secuencias homólogas del cromosoma del receptor, dando lugar
a un cromosoma híbrido.
La información genética transferida a menudo beneficia al receptor. Las ventajas pueden
incluir resistencia antibiótica, tolerancia xenobiótica o la capacidad de usar nuevos
metabolitos. Algunos plásmidos benéficos pueden ser considerados endosimbiosis
bacteriana. Otros elementos génicos, sin embargo, pueden ser vistos como parasitismo
bacterial, y la conjugación bacteriana como un mecanismo desarrollado para su
propagación.

TRANSDUCCION (esquematice como se lleva a cabo, mencione que elementos hacen

parte de este mecanismo y de ejemplos de bacterias que lo realice)

 La transducción es la transferencia de genes de una bacteria a otra por medio de un virus.

La incorporación de genes bacterianos al interior de la cápsida de un fago se produce a
consecuencia de errores cometidos durante el ciclo duplicativo del virus. Cuando el virus
que contiene estos genes infecta a una nueva bacteria, éste tienen la capacidad de
transferirlos al cromosoma de ésta. La transducción es el mecanismo más frecuente de
intercambio y recombinación genética en las bacterias. Hay dos tipos diferentes de
transducción: la generalizada y la especializada.
 Se descubrió en salmonella typhimurium (1951), pero también se detecto en escherichia
coli.

TRANSFORMACION (esquematice como se lleva a cabo, mencione que elementos

hacen parte de este mecanismo y de ejemplos de bacterias que lo realice)

 Fue descubierta por Griffith en pruebas con ratones. Fue el primer mecanismo de
intercambio genético de bacterias.
 transformación es la alteración genética de una bacteria resultante de la absorción
directa, incorporación y expresión del material genético exógeno (ADN exógeno). El ADN
exógeno se encuentra en el ambiente y se introduce a través de la membrana de la célula
bacteriana.

Fragmentos de ADN célula donante Recombinación

o entrecruzamiento

Captación ADN integración

Célula donante Célula receptora Célula transformada