BIOLOGÍA MOLECULAR DE LOS PRIONES

TABLA DE CONTENIDOS

PAG

RESUMEN.........................................................................................................................................2

A. INTRODUCCION.........................................................................................................................3
B. JUSTIFICACION..........................................................................................................................4
C. OBJETIVOS.................................................................................................................................4
a. OBJETIVO GENERAL............................................................................................................4
b. OBJETIVOS ESPECIFICOS...................................................................................................4
D. MARCO TEORICO.......................................................................................................................4
HISTORIA PRIONICA..................................................................................................................4
CONCEPTO DE PRIONES .........................................................................................................5
ORIGEN DE LOS PRIONES - BASE GENETICA........................................................................5
FORMACIÓN DE LOS PRIONES................................................................................................6
ISOFORMAS DE LOS PRIONES.................................................................................................8
1 .LA PROTEINA PrP CELULAR.............................................................................................8
2. LA PROTEINA PrP PATOGÉNICA......................................................................................9
CONVERSIÓN DE PrPc A PrPsc.................................................................................................9
PROTEÍNA X.............................................................................................................................12
¿CÓMO AFECTAN LOS PRIONES A LOS ANIMALES Y AL HOMBRE?.................................12
INFECCIÓN................................................................................................................................13
METODOS DE DIAGNOSTICO.................................................................................................14
E. DISCUSION................................................................................................................................15
F. BIBLIOGRAFIA..........................................................................................................................16
ANEXOS.........................................................................................................................................17

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RESUMEN.

BIOLOGIA MOLECULAR DE LOS PRIONES

Palabras clave: Prión, gen, Proteina del prion normal, Proteína del prion anormal, Cambio
conformacional, Encefalopatías Espongiformes Transmisibles.

Desde 1920 se vinieron haciendo trabajos de investigación sobre el origen de los priones y es en
1982 cuando Stanley B.Prusiner introduce el término prión que deriva de la “proteína infecciosa de
naturaleza proteíca”. Sus estudios le otorgaron el Premio Nobel de Medicina en 1997.

Los priones son pequeñas partículas infecciosas con propiedades que las hace resistentes a su
inactivación por métodos físicos–químicos. Estos priones difieren de los virus por tener isoformas
múltiples, no presentan ácido nucleico, no inducen respuesta inmune y tener solo un componente.

Las proteínas se codifican por un gen PrP ubicado en el cromosoma 20 de 253 aminoácidos (en el
humano). La proteína posee un enlace disulfuro entre los residuos 179 y 214, y tiene dos sitios
para la N-Glicosilacion y 4 repeticiones de 8 aminoacidos que ligan Cobre. Esta proteína sintetiza
un péptido de señal de 22 aminoacidos que la lleva al Retículo Endoplasmático donde hay una
glicosilacion de los residuos 181 y 197. Al resto 231 se añade una molécula de Glicosil-fosfatidil-
inositol (GPI) y luego es remodelada en el aparato de Golgi y termina anclada en la membrana
plasmática por el resto de GPI.

Las dos isoformas PrPc y PrPsc tienen el mismo tamaño 33-35 kDa e igual número de
aminoacidos (209). A la accion de proteasas la PrPc es sensible pero la PrPsc es particularmente
resistente, a esta digestión resultando una proteína de 27 a 30 kDa (PrP 27-30), esta proteína
parece ser la que provoca la infeccion por que es el principal componente de las placas que se
producen en algunas enfermedades de priones.

La PrPc y la PrPsc posee estructura primaria y modificaciones postraduccionales identicas pero

estructura terciaria y cuaternaria distintas.

La conversion de la PrPc en PrPsc involucra la modificacion de la estructura de hélice  en la hoja

. Se considera que este cambio se desencadena por la interaccion de la PrPc con la PrPsc, en un
proceso facilitado por la otra proteina, denominada proteína X. Por tanto la PrPsc sirve como
plantilla sobre la cual la PrPc se pliega de nuevo en una PrPsc naciente. Sobre la conversión se
han propuesto diversas hipótesis.

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A. INTRODUCCION.

El primer diagnóstico en la década de los 80 de la Encefalopatía Espongiforme Bovina,

comunmente conocida como enfermedad de las vacas locas, y la posterior demostracion de que
pueden transmitirse a la especie humana, levantaron un gran preocupacion pública sobre esta y
otras enfermedades relacionadas que en un conjunto se denominan Encefalopatias
Espongiformes Transmisibles.

Las Encefalopatias Espongiformes Transmisibles son enfermedades mortales causadas por

conformaciones anormales de una proteína denominada prión que se deposita formando placas
amiloides en determinados organos como principalmente en el cerebro. El nombre del prión deriva
de proteína infecciosa. Constituye un gran hito bioquímico el descubrimiento de que una proteina
puede provocar y transmitir una enfermedad sin necesidad de ácidos nucleicos.

Se conocen distintas enfermedades de este tipo que afectan a la especie humana, a muchos
mamiferos de interes agropecuario como ovejas, cabras y vacas y otros domésticos como
losgatos ó salvajes como ciervos, visones y alces, ademas de diversos animales que viven en
cautividad en los parques zoologicos. Las sospechas posteriormente confirmadas de que estas
enfermedades son infecciosas y de que pueden ser transmitidas de una especie a otra, y sobre
todo que pueden ser transmitidas por el consumo de animales enfermos, potenciaron las
investigaciones científicas sobre todo los aspectos relacionados con los priones.

Los priones son glucoproteinas de membrana que se anclan a la misma por una molecula de
Glicosil-fosfatidil-inositol, y cumplen funciones biologicas todavia no bien conocidas. Las isoformas
celulares normales se nombra como PrPc y las isoformas patologicas como PrPsc,
correspondiendo a las siglas “sc” a “scrapie”, una enfermedad prionica padecida por ovejas y
cabras que en español se conoce como “tembladera”.

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B. JUSTIFICACION.

Consideramos que nuestro estudio de conocer a los priones y su Biología Molecular tiene mucha
importancia porque estos al sufrir su cambio conformacional en su estructura causan daño al
hombre y a los animales provocando las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles que hoy en
dia no tienen un tratamiento específico.

El hecho de conocer la Biología Molecular de los priones nos ayuda a entender la base que tienen
los científicos para encontrar los fármacos adecuados y asi poder tratar estas enfermedades.

C. OBJETIVOS.

a. OBJETIVO GENERAL.

 Describir la Biología Molecular de los Priones.

b. OBJETIVOS ESPECIFICOS.

1. Mencionar los antecedentes del hallazgo del prión.

2. Conocer el concepto de priones.
3. Describir y representar esquemáticamente el origen genético y la formación de los priones.
4. Mencionar y describir las isoformas que tiene la proteína prion y como ocurre su cambio
conformacional.
5. Determinar el mecanismo de accion de la proteína anormal en el hombre y en los animales.

D. MARCO TEÓRICO.

Historia priónica.

 En 1920 Creutzfeldt describe por primera vez una demencia progresiva en una mujer de 22
años.

 En 1921 Jacob encuentra 4 pacientes con hallazgos similares descritos por Creutzfeldt y
entonces define como Enfermedad Creutzfeldt – Jacob (CJD).

 En 1954 Sigursson introduce el concepto de infecciones lentas.

 En 1959 el Grupo Gajdusek logra transmitir experimentalmente a monos la enfermedad CJD.

 En 1976 Daniel Gajdusek (junto a Baruch Blumberg) es galardonado con el Premio Nóbel de
Medicina por sus aportaciones al conocimiento de las enfermedades infecciosas provocadas
por virus de acción lenta.

 En 1982 Stanley B. Prusiner identifica el prión en un hámster y corrige la hipótesis de los

virus lentos diciendo que la causa de las enfermedades infecciosas de carácter lento no son
producidas por virus lentos sinó por PRIONES, esta palabra deriva de “proteinaceous
infectious particle”
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 En 1997 S.B. Prusiner es galardonado con el Premio Nóbel de Medicina por el

descubrimiento de los priones.(1)

Concepto de priones

Los priones son pequeñas partículas infecciosas de naturaleza proteica con unas sorprendentes
propiedades que las hace más resistentes que la mayoría de las proteínas a la inactivación por
métodos físico-químicos. La naturaleza de los priones surgió dada su resistencia a la inactivación
por procedimientos que destruyen los ácido nucleicos por ejemplo la luz ultravioleta.

Los priones son patógenos infecciosos que difieren de las bacterias, hongos, parásitos, virus y
viroides tanto n su estructura y características físico-químicas como en la enfermedad que causan.
Los priones presentan importantes características que los diferencian de los virus:

1. Los priones son formas moleculares múltiples (isoformas) y los virus son formas únicas con
diferentes morfologías estructurales.

2. Los priones no presentan ácido nucleico esencial dentro de la partícula infecciosa y los virus
poseen un genoma formado por ácido nucleico que sirve de molde para la replicación.

3. Los priones no inducen respuesta inmune y los virus sí.

4. el único componente conocido es la proteína PrP y los virus están compuestos por ácidos
nucleicos, proteínas y otros constituyentes.(2)

Origen de los priones - Base Genética.

Parecería que en todos los vertebrados existe un gen codificador (PrP), pleomorfo, que se expresa
durante la embriogénesis.
 
En el caso del hombre, está ubicado en el cromosoma 20. Tiene una secuencia de 253 codones
(esta cadena sufrirá posteriores modificaciones) que codifican la proteína priónica normal (PrPc)
de igual número de aminoácidos (AA) que es sintetizado en el citoplasma de las neuronas del
Sistema Nervioso Central y, en menor grado, en células linforreticulares.

En 1995 se descubrió en el ratón - y se reportó en 1999 - la presencia de un gen (PrP-D) cercano

al gen PrP. Codifica la proteína doppel o Dpl con 179 a-a, cuya secuencia es 25% idéntica a la
proteína priónica PrPc. La denominación de doppel alude a que sería una especie de “doble” o
“sombra” de la proteína priónica.
 

En condiciones normales su expresión es mínima en el Sistema Nervioso Central, pero en ratones

desprovistos de priones PrPc, la proteína doppel aparece allí causando un proceso
neurodegenerativo. Parecería que la interacción entre ambos genes (PrP y PrP-D) podría ser
importante en el desarrollo de las EE. (3)

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Este gen se encuentra altamente conservado y se ha identificado en mas de 13 especies de

mamífereos. Generalmente está compuesto por dos exones no traducidos en 5`separados por un

intrón de 2kb, que tras el splincing quedan unidos al exón 3 que contiene la region codificante
(750bp).El codon de iniciación se localiza a 10 nucleótidos 3`del sitio aceptor de splincing lo que
imposibilita la interrupción del mensaje y la existencia de formas alternativas. Experimentos de
clonaje han permitido obtener todo un conjunto de mutaciones ligadas a patologías hereditarias,
perfilar posicione polimorficas y describir una rica variedad de mutaciones sin sentido en distintas
especies.(4)

El gen se expresa de manera constitutiva prácticamente en todos los tejidos del organismo adulto
siendo su expresión máxima en tejidos neuronales fundamentalmente en el cerebro, cerebelo,
médula e hipotálamo.

BASE GENETICA PARA LA FORMACION DE PRIONES

Sintesis de PRION
normal PrPc en SNC y
GEN codificador PrP Sist, Linforreticular.
Cromosoma 20 (humano)

Sintesis de DOPPEL
Dpl que interactua con
GEN codificador PrP-D PrPsc en EE.
Cercano a locus PrP.

En ovinos hay un GEN SIP (Scrapie Incubation Period) que determina

el periodo de incubacion de scrapie.

Formación de los Priones.

 
En el núcleo de las neuronas y otras células se encuentra el gen PrP que transcribe a un RNAm
específico el código que va a permitir, en los ribosomas del citoplasma y con la ayuda del RNAt y
RNAr, su traducción a aminoácidos y la transferencia de éstos al punto de síntesis de la proteína
PrPc normal.

La primera modificación de la cadena obtenida (de 253 aminoácidos en el hombre) consiste en la

separación de la secuencia Líder N-terminal. Este segmento (peptido señal hidrofóbico) constituye
la señal que indica a la proteína que ha de ir al Retículo endoplásmico (es la SRP). Una vez haya
penetrado en el retículo endoplásmico se separa esta SRP del resto de la proteína (esta SRP esta
constituida por los 22 primeros 22 residuos).

Una vez introducida la molécula dentro del retículo endoplásmico la proteína comenzara a
plegarse a este proceso se formara el puente disulfuro que une los residuos 179 (Cis) con el
residuo 214 (Cis). Contiene dos sitios para N-Glicosilacion y cuatro repeticiones de 8 aminoacidos
que pueden ligar cobre, este parece tener un importante papel en la estabilidad de las formaciones
de hélice . Se postula tambien un papel activo en la homeostasis de este cation implicado en
procesos de oxido-reduccion.

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Otra modificacion que se produce, y que es específica del Reticulo Endoplasmatico es la

glicosilacion de los residuos 181 (Asn) y 197 (Asn) para formar una sialoglucoproteína (PrP-SG).
Desde aquí la PrP-SG es transportada a lo largo de los axones hasta la placa mio-neural y
tambien hasta la membrana celular.

La siguiente modificación que se produce es un ataque al residuo 231 (Ser) con glicosil-fosfatidil-
inositol (GPI). El resultado final es que PrP se corta tras el residuo 231 (Ser), donde se le une la
molécula de GPI que constituye el punto de anclaje a la membrana celular. Esa cola C-terminal
que se ha eliminado constituye precisamente la señal que indica que se ha de producir esta
modificación.

Tras todas estas modificaciones lo que tenemos es PrPc, que es la forma de PrP que podemos
encontrar normalemente en las células. PrPc sera pues una sialoglicoproteina anclada a la
membrana como orientada hacia el exterior,que se expresa en celulas del sistema nervioso.

La PrPc-SG tiene una vida de 6 horas, siendo primero degradada en la membrana, para regresar
luego al interior de la célula mediante un mecanismo de endocitosis y ser finalmente hidrolizada en
los lisosomas.(2) y (5).

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Isoformas de los priones.

De acuerdo con la hipótesis de la proteína única, los priones se componen de una proteína
patogénica denominada PrPsc (isoforma scrapie de la proteína del prión). La PrPsc se produce
por el plegamiento erróneo de una proteína celular de idéntica secuencia de aminoácidos
presente en prácticamente todos los tejidos del organismo denominada PrPc (isoforma celular de
la proteína del prión).

La proteína prión presenta dos isoformas:

1. La proteína PrP celular.- Denominada tambien PrP-sen ó PrPc tiene un tamaño de 33 – 35

kDa (PrP 33-35) La forma PrPc es una proteína proteasa–sensible (es digerida completamente por
proteasas) constituida por una sola cadena peptídica. Los datos espectroscópicos y las
simulaciones por ordenador de F.E. Cohen indican que la forma PrPc presenta un
empaquetamiento compacto con 4 hélices alfa (H1 a H4) y oligosacáridos complejos unidos a la
proteína. PrPc posee una estructura en hélices alfa (42% hélices alfa, 3% láminas beta)

PrP consta de 254 aminoácidos en ratones y hámsters y de 253 en el hombre. En su forma normal
no infecciosa, PrP es una glicoproteína hidrofóbica soluble en presencia de cantidades
significativas de solutos solubles no polares.

PrPc se presenta como una proteína anclada a la superficie de las neuronas por medio de una
molécula de GPI, y constituye un producto ampliamente expresado en las células. Los RNAm para
PrP se han descubierto en diversos órganos, como bazo, músculo esquelético o pulmones. Pero,
generalmente con índices de 10 a 50 veces inferiores que en el cerebro.

En el Sistema Nervioso Central, PrP es esencialmente neuronal, situándose sobretodo en los

botones sinápticos. Aún se desconoce la función que desempeña la PrP normal en las neuronas,
pero su distribución hace sospechar que podría estar implicada en el proceso sináptico.

Fuera del SNC, PrP se encuentra en los epitelios secretores, lo cual podría tener incidencia en la
transmisión por vía oral.

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2. La Proteína PrP Patogénica.- Denominada tambien PrP-res ó PrPsc tiene un tamaño de 33–35
kDa (PrP 33-35)A diferencia de la forma PrPc, la forma PrPsc presenta gran proporción de
láminas beta (43% láminas beta, 30% hélices alfa).

Propiedades que caracterizan a la forma patogénica de PrP:

1. Resistencia parcial a las proteasas. Es resistente a esta digestión resultando una proteína de
27-30 kDa (PrP 27-30) Esta parece ser la fracción mínima que provoca la infección de hecho
es el principal componente de las placas que se producen en algunas enfermedades de
priones.
2. En ocasiones se degrada y los fragmentos se agregan formando placas amiloides
extracelulares.
3. Purificada por centrifugación, al microscopio electrónico, presenta aspecto de fibrillas o
bastoncillos. Estas agregaciones se denominan SAF (Scrapie Associated Fibrils or prión
Rods) y corresponden a polímeros de PrPsc. (6)

Conversión de PrPc a PrPsc.

Ambas formas PrPc y PrPsc son codificadas por el gen PrP, pero no pueden ser el resultado de
un procesamiento alternativo del RNAm, ya que en la mayoría de las especies estudiadas la
secuencia codificadora de PrP (ORF) se halla contenida en un único exón. Diversos estudios han
puesto de manifiesto que PrPsc es un derivado post-traducción de PrPc. Esta hipótesis concuerda
con el hecho de PrPsc se acumula lentamente en los cerebros de los animales infectados, a pesar
de que los niveles de RNAm permanecen invariables durante la evolución de la enfermedad.

El origen de la proteína PrPsc aun sigue constituyendo un misterio. Ya que los agentes infecciosos
parece estar compuestos en su totalidad o en gran parte por PrPsc, es importante determinar
como y donde tiene lugar la síntesis de PrPsc. O bien, equivalentemente, como y donde adquiere
PrPsc o el precursor de PrPsc la resistencia a proteasas.

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Sin embargo, por distintas razones, la PrPc puede sufrir un cambio conformacional en su
estructura, convirtiéndose en la forma patológica, cuya estructura es predominantemente de
lámina-beta, y que se agrega espontáneamente formando depósitos amorfos o fibrillas
(denominadas fibrillas amiloides), que son resistentes a la acción de las proteasas, por lo que no
se degradan, sino que se acumulan en el medio intracelular, hasta que llega un momento en el
que impiden a la neurona llevar a cabo su función, provocando la muerte celular. en consecuencia,
pueden comenzar a acumularse en las células. Debido a su resistencia a las proteasas, esta
forma patológica del prión se denomina PrPsc.

El proceso de conversión entre la forma sana y la forma patológica es un proceso auto catalítico.
Es decir, la presencia de una molécula en forma patológica (con estructura en lámina-beta), facilita
la conversión a esta forma de otras moléculas sanas, por lo que se puede dar una reacción en
cadena que rápidamente produce que todas las PrP presentes en la célula se hallen en forma
resistente a las proteasas, produciendo entonces la enfermedad degenerativa irreversiblemente.

Ambos, priones y PrPc son proteínas similares que sólo difieren en su conformación
tridimensional. Esta cambio conformacional pueden ser, por tanto, considerado como la
"infección". El cambio de forma puede ocurrir en la superficie de la célula o en los cavéolos
(invaginaciones de la membrana celular). Los priones formados se polimeran formando fibrillas.

Los priones recién formados también pueden interceptar a las PrPc a su salida del aparato de
Golgi, obligándolas a cambiar de forma antes de que alcancen la membrana celular. Por estos
mecanismos, unas proteínas normales pueden ser transformadas en una proteínas patogénicas
en varios lugares de la célula.

El mecanismo de esta transición aún es desconocido, pero posiblemente tenga lugar a través de
la formación de láminas-beta intermoleculares (formadas por hebras beta pertenecientes a dos
moléculas diferentes, la patológica y la sana que está cambiando su conformación), que
inmediatamente se añaden al agregado insoluble, contribuyendo a su crecimiento y escapando así
a la acción de las proteasas.(6) y (7).
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Las razones que pueden llevar a la PrPc a transformarse en la forma patológica pueden ser
varias, todas ellas provocando diferentes variedades de la encefalopatía espongiforme. A
continuación se presentan hipotesis sobre mecanismos por los cuales se transforma el prion
normal en anormal:

1 PRINCIPIO DE GIBBS.- Todas las especies de vertebrados sufren mutaciones somaticas

(neuronas) espontaneas, que conducirian a las presentaciones esporadicas de Encefalopatias
Espongiformes, con una frecuencia de un caso por millon de animales de cada especie al año.

2 MUTACIONES.- Pueden causar inestabilidad de las moleculas PrPc, y su transformacion en

una molecula PrPsc de conformación Beta plana. La molecula beta plana es muy resistente y
se acumula en el sistema nervioso central.

3 INFLUENCIAS FÍSICO-QUÍMICAS.- Podrían causar mutaciones somaticas o geneticas, o

directamente cambios de conformaciion de PrPc en PrPsc, que conducirian a la presentacion
de una Encefalopatia Espongiforme.

4 ENCEFALOPATIAS CAUSADAS POR INFECCION .- Esta puede ocurrir por:

a) Ingestion de dosis infectante de priones PrPsc.- Esto ocurre con Kuru, por canibalismo ritual
endogeno. Ocurre con Scrapie que contamina praderas con placenta infectivas durante
muchos años.
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La Encefalopatia Espongiforme Bovina enfermedad de las “vacas locas” fue causada por
canibalismo industrial, por consumo de harinas de deshecho de matanza de rumiantes.
Estas harinas infectivas fueron tambien utilizadas en alimentos para gatos, perros y
animales de zoologico (felinos y rumiantes venidos de Africa) causando una Encefalopatia
Espongiforme en algunos de ellos excepto los perros, habitualemente resistentes a los
priones.

b) Por transmision vertical.- De Scrapie de borregas o sus crias. Parece ocurrir tambien, en
menor grado con vacas infectadas.

c) Por via iatrogénica.- Por la utilizacion de cadáveres de personas que murieron con CJD.
Ocurrió en el pasado por transplantes de duramadre y cornea; por el uso de hormonas
obtenidas de pituitarias; por contaminacion con priones de material quirúrgico y electrodos
intracerebrales para registro de electroencefalograma, casi imposible de esterilizar.

d) Por contacto directo.- Con materiales infectivos “en Kuru” o mediante inoculacion por
diversas vias.(3)

La proteína X.

Es un pequeño ligando detectado mediante estudios genéticos y moleculares, que se une al PrPc
y facilita su transformación a PrPsc.

Su descubrimiento se basó en la teoría según la cual, moléculas del huésped podían influir en el
comportamiento del PrPsc. Para ratificar esta teoría se inocularon ratones transgénicos con genes
PrP humanos y con genes PrP híbridos entre ratón y humano

La proteína X está involucrada en el plegamiento de las proteínas naturales a su forma anómala, y

para ello debe reconocer ciertos fragmentos de la proteína PrP sobre la que actúa. De esta forma,
priones PrPsc procedentes de especies muy alejadas evolutivamente de la del huésped al que
infectan no producirán la enfermedad fácilmente, necesitarán un largo periodo de incubación
porque la proteína X no las reconocerá.

Por la función que ejercía esta proteína se pensó que podía tratarse de una chaperona, pero hasta
el momento no se ha identificado ninguna chaperona molecular en mamíferos que intervenga en el
proceso de plegamiento de priones. La proteína X podría ser la PrPsc si éste hiciera las veces de
ligando bidentado (8)

¿Cómo afectan los priones al hombre y a los animales?

Los priones causan enfermedades de tipo neurodegenerativo denominadas como Encefalopatías

Espongiformes transmisibles (EETs). Los signos clínicos y la patología que producen varian
dependiendo de la especie afectada e incluso de casa animal afectado. En todos los casos el
desarrollo de la enfermedad es muy lento y los tiempos de incubación con ausencia total de
síntomas, son extremadamete largos (2 – 10 años dependiendo de la especie de los individuos).
En general en los animales se pueden distinguir dos fases:

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FASE PSÍQUICA: se producen cambios en el comportamiento y el temperamento.

FASE ORGÁNICA: se observan alteraciones motoras graves.

En el hombre los primeros síntomas son de origen psíquico afectando a la personalidad y al

comportamiento, con aparición de transtornos de memoria.

A medida que la enfermedad avanza aparecen dolores musculares en las extremidades inferiores.
En una fase final los síntomas principales son demencia y diestesia. La muerte sobreviene tras 6 –
12 meses desde la aparición de los primeros síntomas. En la actualidad es una enfermedad
incurable.

Desde el punto de vista anatomopatológico, se puede decir que, macroscópicamente, los cerebros
de los animales infectados aparecen normales, mientras microscópicamente los cambios mas
notorios consisten en atroglisis, vacuolización intracelular, perdida de neuronas y formación de
placas amiloides ocasionales.(2)

Infección.-

Para comprender la infeccion se tratarán dos puntos:

 La aparición de la partícula infecciosa en el huésped.

 El desarrollo de la enfermedad o proliferación del patógeno.

En el primer lugar deben distinguirse tres orígenes de infección: iatrogénico (transmitido),

heredado y la mutación espontánea. Son las tres formas de aparición de la primera partícula
infecciosa: procedencia externa, mutación heredada del gen PrP y mutación esporádica de dicho
gen.

La multiplicación del agente infeccioso es exponencial. La isoforma patógena es captada por

fagocitosis en neuronas o glia, y transportada al lisosoma para su degradación, en el lisosoma se
produce contacto entre PrPSc y PrPc y la primera induce el plegamiento de la segunda.

Las PrPSc (el núcleo 27-30 KDa) son relativamente resistentes a las proteasas y se acumulan, los
lisosomas revientan cuando se supera un determinado volumen, liberando al citosol las PrPSc y
proteínas hidrolíticas que contenían. Las proteínas hidrolíticas degradan la célula, las PrPSc (en
su forma 27-30) quedan libres en el espacio extracelular, se agregan y forman placas amiloides. El
proceso se repite en las células adyacentes, creando agujeros en el tejido cerebral.

Otra teoría trata de explicar el desarrollo de la patología, es la Teoría Cristalina, basada en que la
PrPSc forma estructuras cristalinas muy insolubles, que pueden ser inducidas en cualquier
momento del ciclo de la PrPc.

Estas enfermedades neurodegenerativas se caracterizan por una tríada patológica:

 Vacuolización o espongiosis, en el citoplasma de neuronas y células gliales. En las

enfermedades de Alzheimer o Huntington, la vacuolización es en el espacio extracelular
como resultado de la pérdida de neuronas.
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 Reacción glial o gliosis (crecimiento exagerado de las células gliales) en ausencia de

cambios infamatorios.
 Pérdida de neuronas.

Estos síntomas pueden observarse en cualquier área y lámina del neocórtex, en el putamen,
núcleo caudado, tálamo, capa molecular de la corteza cerebelosa; y son mínimos o ausentes en el
hipotálamo, globus pallidus, talo cerebral y espina dorsal. La sustancia blanca no presenta
cambios patológicos.

Las vacuolas tienen un tamaño entre 20 y 200 micras, pueden agregarse formando grandes
vacuolas que distorsionan la citoarquitectonia. Aparecen en el citoplasma de las neuronas de cada
capa de la corteza cerebral, también en neuronas de la corteza.

La espongiosis cortical puede ir acompañada de procesos análogos en ganglio basal, tálamo y

corteza cerebelosa.

Se observan depósitos amiloides de PrPSc 27-30 (insolubles) en forma de placas, llamados

placas amiloides, que se tiñen positivas para la PrP (al contrario de las placas presentes en el
Alzheimer). Tienen afinidad por la eosina, rojo congo. Presentes sobretodo a nivel del cerebelo y,
minoritariamente, a nivel del tálamo, ganglios basales y corteza cerebral. Son un buen indicador
de la infección, pero aparentemente no son causa importante de la enfermedad.

Estudios ultraestructurales han demostrado una relación de la microglía con la formación de estas
placas.

Se ha comprobado que las moléculas de PrPc se localizan en lugares distintos a los que se
encuentran las partículas PrPSc. La materia blanca, ovillos de axones mielinizados, contienen
PrPSc pero están libres de PrPc. Estas y otras investigaciones demuestran que los priones se
mueven a través de los axones de las neuronas, y la infectividad de PrPSc se basa en un patrón
de transporte retrógradoa lo largo del axón.

Todos estos síntomas aparecen sin que se produzca respuesta inmune, a excepción de un
aumento en los niveles de citokinas en los estados más tardíos de la enfermedad.

Los priones pueden ser transmitidos de un ser vivo a otro, enfermedades de origen iatrogénico
(enfermedad del Kuru, CJD iatrogénico) de forma comprobada inoculándolos directamente al
cerebro, la piel o el tejido muscular; y también a través de la alimentación (nvCJD, que es un tipo
de iatrogénica).
 
En experimentos se ha detectado la presencia del agente prionico en la sangre, pero no se han
dado casos reales de transmisión de la enfermedad por transfusiones en humanos. Aunque sí se
ha descubierto que la Encefalopatía Espongiforme Bovina puede ser transmitido en ovejas por
transfusiones de sangre de donantes que aun no hayan manifestado la enfermedad. (8).

METODOS DE DIAGNOSTICO.-

La PCR se utilizo recientemente para identificar genes sobre expresados en cerebro de hamsters
infectados por priones.
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Esta técnica está basada en el conocimiento de la secuencia del ácido nucleico, cada ciclo de la
reaccion consta de tres fases :

a) Desnaturalización de las dos hebras del DNA que se produce a una temperatura aproximada
de 95 ºC.

b) Hibridación de los oligonucleotidos a las hebras desnaturalizadas que se producen a

temperaturas entre 45 – 60 ºC según el grado de astringencia deseada.

c) Síntesis que se realiza alrededor de 72 ºC, temeperatura óptima para la DNA polimerasa.

En general se realizan de 30 a 40 ciclos de amplificación y la calidad del producto amplificado se

analiza por Electroforesis e Hibridación de los ácidos nucleicos.(10)

El método mas seguro para el diagnostico de una enfermedad priónica consiste en la detección
inequívoca de la proteína PrPsc por lo que las técnicas inmunológicas principalmente la Western
Blots son muy utilizadas. Esta técnica es un método de transferencia que analiza los antígenos
proteicos, las proteínas se separan mediante electroforesis y se transfieren a una membrana
sólida por un procedimiento de transferencia. La membrana se analiza mediante incubación con
anticuerpos seguida de un segundo paso para la detección enzimática o radiactiva de los
anticuerpos fijados.(9)

E. DISCUSION.

Los priones causan diversos problemas nerviosos por cambios que sufren en su estructura (de
PrPc a PrPsc) que dirige a las células a la muerte por apoptosis, cuando esto ocurre con poca o
nula capacidad de proliferación celular como el tejido nervioso, la pérdida de neuronas sobre todo
de células de Purkinje en el encéfalo produce huecos que microscópicamente confiere un aspecto
espongiforme al tejido lo que da el nombre a este tipo de enfermedades que se dan en el ser
humano y los animales y que pueden ser de forma adquirida o congénita.

Pero continúan siendo un gran misterio ya que no se las conoce completamente es por esto que
hasta el momento no hay fármacos para tratar estas enfermedades, hay varias exposiciones
acerca del tratamiento pero solo son especulaciones.

Actualemente para la enfermedad de las “Vacas Locas” se desarrollan test los cuales se
investigan a animales infectados viendo la resistencia a proteasas de los agregados proteicos
patológicos. La PCR tambien nos ayuda al diagnóstico asi como la Western Blots e
inmunohistoquímica que detectan a la poteina PrPsc.

Por fortuna los descubrimientos efectuados en las dos últimas decadas permitieron esclarecer
muchas interrogantes e implementar medidas para prevenir la transmisión de los animales al
hombre. Tener cuidado en tratamiento con hormonas de crecimiento , en transplantes de cornea
de personas infectadas a persona sanas.

Sin embargo todavía queda un largo camino por recorrer y hasta ahora no es posible ofrecer
ninguna alternativa potencialmente útil para el tratamiento de éstas enfermedades.

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F. BIBLIOGRAFÍA.

1. http://www.bio.vu.nl/thb/users/ingeborg/Prion4.html
2. http://www.recol.es/comunidades/veterinaria/eeb/priones/priones.htm
3. http://www.visionveterinaria.com/articulos/2705.htm
4. http://www.revnuerol.com/3102/j020129.pdf

5. http://usuarios.lycos.es/priones/cesar/prp.htm
6. http://www.bio.vu.nl/thb/users/ingeborg/Prion4.html
7. http://www.todoexpertos.com/herramientas/leermsgpublico.asp?ldproceso=1335

8. http://usuarios.lycos.es/priones/
9. HARRISON PRINCIOS DE MEDICINA INTERNA, Edición 14º, Editorial Mc Graw Hill –
Interamericana España, España, 1998, 421
10. RODES T. Juan, GUARDIA M. J, MEDICINA INTERNA, Edición 2º , Editorial MASSON SA,
Barcelona – España, 1997, 2065

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