UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

INMUNOLOGÍA

INTEGRANTES: Figueroa Zavala Michelle Aniluz / Gómez Perero Evelyn Patricia /

Jordán Tapia Arianna de Jesús / Lopez Guevara Nicole Mikaela/ Pulla Ortega Mariela
Katherine
GRUPO:1 FECHA: 06/01/2021

RESUMEN DE TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN

Técnicas de aglutinación
En estas técnicas se hacen visibles los complejos Ag-Ac por la
aglutinación que producen los anticuerpos cuando el Ag forma
parte o se ha unido artificialmente a la superficie de glóbulos
rojos, plaquetas, leucocitos, partículas de látex, etc. Normalmente
se utilizan glóbulos rojos (hemoaglutinación) o partículas de látex
(Pascacio, 2007)

Aglutinación de partículas recubiertas por antígenos

Mientras que el entrecruzamiento de los antígenos proteicos multivalentes con el anticuerpo
produce una precipitación, la interrelación entre células o partículas de gran tamaño con los
anticuerpos dirigidos contra los antígenos de superficie conducen a una aglutinación. Dado que la
mayoría de las células poseen cargas eléctricas, se requiere una cantidad razonable de anticuerpos
entre dos células antes de que se supere la repulsión mutua. Por esto, puede ser difícil lograr la
aglutinación de células que sólo poseen un número pequeño de determinantes, a menos que se
utilicen métodos especiales, como el tratamiento adiciona con un reactivo antiglobulina. De
manera similar, la mayor avidez del anticuerpo multivalente IgM con respecto a la IgG hace que
el primero sea más eficaz como agente aglutinante, molécula por molécula
Las reacciones de aglutinación y de precipitación son la base de la mayor parte de las técnicas
inmunológicas. Su principio se basa en la reacción antígeno-anticuerpo. Para comprender lo
anterior es necesario definir qué es un antígeno y un anticuerpo. (Aguilar, 2004)
Clasificación de las reacciones de aglutinación
 Aglutinación directa: Un antígeno celular o de partículas insolubles es aglutinado
directamente por el anticuerpo. Un ejemplo de esto es la aglutinación de los eritrocitos del
grupo A por antisueros antiA, la aglutinación de los eritrocitos RH positivos por el
antisuero anti-D o la aglutinación del antígeno brucelar por anticuerpos anti-Brucella. Gran
cantidad de partículas como pueden ser eritrocitos, bacterias, hongos y virus pueden ser
aglutinados por anticuerpos séricos, algunas veces de manera inespecífica y otras muy
específicas, siendo ésta última, respuesta a una previa inmunización del organismo
productor de los anticuerpos séricos.

 Aglutinación indirecta: Se refiere a la aglutinación de las células recubiertas de antígeno

o a las partículas inertes que son portadoras pasivas de antígenos solubles. Se tienen
ejemplos de lo anterior en la utilización de partículas de gelatina en la búsqueda de
anticuerpos contra Treponema pallidum por aglutinación pasiva (TPPA), la fijación del
látex para VDRL en la sífilis y en la utilización de eritrocitos en la prueba de
hemaglutinación indirecta (HAI) en la búsqueda de anticuerpos contra Tripanosoma cruzi,
agente causal de la enfermedad de Chagas. De manera alterna, el antígeno puede ser
localizado recubriendo partículas de látex o eritrocitos con anticuerpo purificado y
practicando la llamada aglutinación inversa.

 Hemaglutinación viral: aglutinación espontánea de los eritrocitos por ciertos virus, es la

reacción de hemaglutinación viral, la cual puede inhibirse de manera específica en
presencia de anticuerpos antivirales. Por lo tanto, la hemaglutinación viral puede emplearse
para medir la cantidad de virus o para determinar, por inhibición homóloga, el título de los
anticuerpos dirigidos en contra de los virus hemaglutinantes.

 Inhibición de la aglutinación: La inhibición de la aglutinación, si se arregla de manera

cuidadosa con antígenos altamente purificados, puede ser usada como un indicador
sensible de la cantidad del antígeno en diversos líquidos de los tejidos
 Hemaglutinación indirecta (pasiva): Este tipo de aglutinación se lleva a cabo
utilizando eritrocitos recubiertos de antígenos, o anticuerpos acoplados de
manera espontánea (adsorción pasiva) o mediante un acoplamiento químico,
utilizando diversas sustancias para este fin, tales como Acido tánico Bencidina
 bisdiazoada (BDB), Cloruro crómico (CrCIs), Glutaraldehído, clorurocianúrico
entre otros
 Algunas de las substancias que se absorben para la hemaglutinación:
 Antígenos de Escherichia coli.
 Antígenos de Yersinia.
 Lipopolisacáridos de Neisseria meningitidis.
 Antígenos de Toxoplasma.
 Derivado proteico purificado (DPP).
 Endotoxina de especies de Micoplasma.
 Virus.
 Antibióticos, especialmente penicilina.
 Ovalbúmina.
 Albúmina sérica bovina.
 Haptenos.
 Antígenos de polen.
 Gonadotrofina coriónica.
 Inhibición de la hemaglutinación: La inhibición de la aglutinación de los eritrocitos
recubiertos con antígeno por el antígeno homólogo es un método sensible y específico para
la identificación de pequeñas cantidades de antígeno soluble en la sangre o en otros líquidos
de los tejidos. El principio de este análisis es que, el anticuerpo incubado previamente con
antígenos homólogos solubles o de reacción cruzada, es «inactivada» cuando se incuba con
eritrocitos recubiertos de antígeno.
PRUEBAS DE WIDAL
La reacción de Widal es un método serológico usado
comúnmente en el diagnóstico de las fiebres tifoidea, entérica y
ondulante, la reacción mide el título del suero contra una
suspensión de microorganismos conocido
Este es un test basado en el principio de aglutinación antígeno-
anticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos contra
el antígeno O y H de la Salmonella typhi para el serodiagnóstico
de fiebre tifoidea (Campos, Medina, Mendez, & Valdez, 2012)

PRUEBAS DE HUDDLESON
La reacción de Huddleson es un método serológico que detecta anticuerpos contra
B. abortus, B. melitensis y B. Suis, agentes causales de la brucelosis; también
conocida como fiebre de malta o fiebre ondulate por el cuadro febril característico
que se representa
La prueba se basa en una reacción inmunológica entre los anticuerpos séricos y el
antígeno correspondiente produciendo una reacción de aglutinación macroscópica
Se utiliza una suspensión antígenos de B. abortus al 3-10% de gérmenes en fenol, con verde
brillante y cristal violeta para la búsqueda de anticuerpos (Campos, Medina, Mendez, & Valdez,
2012)

REACCIONES FEBRILES
Se utiliza la reacción de Weil-Feliz, esta prueba en si no busca Rickettsias, se basa en la capacidad
del suero del paciente infectado por Rickettsias para aglutinar ciertas cepas de Proteus (Reacción
cruzada) por lo que es poco sensible y específica y siempre deberá seguirse de pruebas
confirmatorias (fijación del complemento, hemaglutinación indirecta, inmunofluorescencia directa
e indirecta y otras).
El periodo de incubación es de aproximadamente 7 dias y varia de 2 a 14 días. (Campos, Medina,
Mendez, & Valdez, 2012)
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA RÁPIDA EN PLACA
1) Colocar en una placa una gota (50 ul) de suero y agregar una gota (50 ul) de
suspensión de Antígeno. C 870090000 / 00 p. 2/6 Mezclar y agitar la placa en
forma circular durante 2 minutos.
2) Observar la presencia o ausencia de aglutinación utilizando una luz indirecta sobre
fondo oscuro.
II- TITULACION RAPIDA EN PLACA
1. Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 aproximadamente.
2. Empleando las micropipetas apropiadas colocar en estos sectores 80 ul, 40ul, 20
ul, 10 ul y 5 ul de suero límpido. Repetir el procedimiento para un control negativo
y uno positivo.
3. Colocar 1 gota de Antígeno previamente agitado sobre cada gota de suero.
4. Mezclar el suero y el Antígeno utilizando una varilla abarcando un área de 2 cm
de diámetro aproximadamente. Debe emplearse una varilla distinta para cada
dilución de suero o la misma varilla mezclando a partir de la muestra más diluida.
5. Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular.
6. Observar la aglutinación utilizando luz indirecta sobre fondo oscuro.

CONCLUSION
Mediante esta práctica se analizaron los fundamentos para realizar las pruebas de
aglutinación para determinar la presencia o ausencia de anticuerpos o antígenos en una
muestra dada
Las técnicas de aglutinación se hacen visibles para los complejos Ag-Ac que producen
los anticuerpos. El Ag forma parte o se une artificialmente a la superficie de glóbulos
rojos, plaquetas, leucocitos, o partículas de látex
Generalmente títulos de 1:40 ó 1:80 son sospechosos de enfermedad. Sólo títulos mayores
de 1:80 pueden considerarse probatorios de diagnóstico de enfermedad cuando estén
acompañados de la sintomatología clínica. Títulos mayores de 1:320, son concluyentes
Bibliografía
Aguilar, V. (2004). Reacciones de Aglutinacion. Obtenido de
https://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2004/gms043p.pdf

Campos, R., Medina, J., Mendez, G., & Valdez, N. (2012). Obtenido de
https://es.slideshare.net/GrissellZulemaMendezPerez/reacciones-febriles-
12167974

Pascacio, R. V. (2007). Obtenido de

http://oldwww.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf