UNIVERSIDAD MONTRER

LIC. EN NUTRICION

LABORATORIO DE MIRCROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

PRACTICA # 1

PANIFICACIÓN

NOMBRE DE LOS INTEGRANTES DEL EQUIPO

PROF. Felipe de Jesús Tenorio Guzmán

Fecha de realización de la práctica:

Fecha de entrega del reporte:

 LABORATORIO DE SISTEMAS
DE PRODUCCION DE ALIMENTOS

PRACTICA #1

TECNICA DEL NUMERO MÁS PROBABLE

Objetivo General:

obteniendo de la leche bronca con un máximo de 4 horas así como sin ningún tipo
de tratamiento antes de la práctica y utilizando varios tubos de ensaye, con la
técnica del número más probable se tiene como objetivo analizar e identificar la
cantidad de microorganismos que contiene cada muestra del medio líquido con el
que se trabajó (en este caso la leche bronca) posterior a un procedimiento en el
cual se interviene con distintos reactivos.

Asimismo, se pretende evaluar el grado de turbidez de cada una de las muestras

que se utilizarán en la presente práctica y de este modo verificar si existe
presencia microbiana, en donde si dos o más tubos de ensaye se presentan con
turbidez, se puede decir que existen microorganismos; en caso de que solo un
tubo o menos muestre turbidez, se considera negativo.

Fundamento:

La técnica del numero mas probable es un procedimiento basado en la

probabilidad y estadística. Los resultados de este análisis esta directamente
relacionado con la frecuencia y ocurrencia de una serie de resultado positivos
(detección de turbidez, de gas, producción de acido o base, ect.) que se presenta
cuando se encuentra en un determinado numero de organismos en una muestra.
Esta estimulación se obtiene preparando diluciones decimales de la muestra y
trasfiriendo alícuotas de cada dilución en varios tubos generalmente de 3 a 5.
Como cualquier procedimiento de enumeración, esta técnica presenta
probablemente inherentes al análisis y esta sujetada varias fuentes de error.
En una muestra los microorganismo se encuentran distribuidos al azar y el
resultado será positivo si la alícuota contenía uno o mas de los organismos en
cuestión.
Una de las aplicaciones de este método es en el análisis de alimentos en donde la
densidad microbiana sea muy baja, menos de 10 organismos por gramo de
muestra.
La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del
Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo
microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a
35°C  1C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales
biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase
confirmativa. En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo
lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos
dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de
utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se
emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es
selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de
tolerar tanto las sales biliares como el verde brillante. La determinación del número
más probable de microorganismos coliformes fecales se realiza a partir de los
tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las
bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una
temperatura de 44.5  0.1C por un periodo de 24 a 48 h. Finalmente, la búsqueda
de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo EC, los
cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales (Agar
Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando las
pruebas bioquímicas básicas (IMViC) a las colonias típicas.

Diagrama de Flujo:

(A manera de procedimiento se va dando el flujo del proceso realizado, solo se anota el proceso
químico o la operación unitaria realizada. Por ejemplo

Recolección de Preparación
muestra de material

Observaciones:

(Se debe de incluir las observaciones pertinentes que se observaron durante la práctica, por
ejemplo si se modificó la técnica, si hubo algún cambio, si ocurrió algún imprevisto, se debe de
incluir fotos o dibujos)
Estapa 2
Conclusiones:

(Se debe de describir si se cumplió con el objetivo de la práctica o la meta que se buscaba)

Referencias (Normas APA)