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Erika Luisa Mendonca Botechia

BACTERIAS – Clase 1: Generalidades


Definición de Bacterias: Organismos UNICELULARES PROCARIOTAS que se reproducen por FISION
BINARIA son de VIDA LIBRE (excepto Rickettsias y Chlamydias – Parásitos Obligatorios) y poseen toda la
información genética, sistemas generadores de energía y biosintéticos, necesarios para su replicación.
Principales diferencias con Procariotas (núcleo primitivo) de eucariotas:

 Menor tamaño: 0,5-3um (mayoría 1 um y las menores entre 0,1 y 0,2 um son Ryckettsae y Mycoplasma)
 Estructuras nucleares:
o Ausencia de membrana nuclear  material genético se concentra en región llamada nucleosoma
o ADN cadena única y circular  Genoma haploide
 Estructuras citoplasmáticas
o Ausencia de orgánulos (es decir estructuras con membrana como mitocondrias, Golgi y RE)
o Ribosoma 70S (menor que 85s de eucariotas)
o Membrana citoplasmática  ausencia de esteroles, excepto en Mycoplasma.
 Pared Celular
o Estructura compleja
o Compuesta de peptidoglicanos, lípidos y proteínas.
 Reproducción
o Asexual  por fisión binaria
o Puede ocurrir intercambio de material genético por plásmido o bacteriófagos.

A. Estructuras Bacterianas y características bacterianas….

Vamos a los detalles…

1.NUCLEOIDE: Es la zona de la bacteria donde se encuentra el cromosoma bacteriano. NO esta envuelto por
membrana por lo que NO se puede llamar de nucleo

2.RIBOSOMA BACTERIANO: Esta compuesta por dos subunidades una 30s y otra 50s o subunidad menor y
subunidad mayor. Estas dos unidades juntas se llaman 70s. La característica dese cromosoma es que la
síntesis proteica es policistronica, o sea, pueden hacer muchas proteínas de un ARNm al mismo tiempo.
3.PARED CELULAR: Está compuesta por peptidoglicanos que es una sustancia que tiene la pared con
PEPTIDOS Y MUREINA. La función de la pared es resistencia al choque osmótico y dar forma a la bacteria.
 Difiere en bacterias gram positivas y negativas (base de diferenciación en tincion de gram)

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4. PLASMIDO Y BACTERIOFAGO – PREGUNTA DE PARCIAL

a. PLASMIDO: Es un ADN CIRCULAR extra cromosómico. Los plásmidos suelen conferirlo información
extra a la bacteria, por ejemplo, resistencia a ATB, información a toxinas, para adherencia, para producir
una capsula, etc. Los plásmidos pueden integrarse o no al cromosoma bacteriano.

Complementando
 Material genético extracromosómico que se replica de forma independiente
 Puede ser transferido a otras bacterias de la misma especie o de distintos géneros
 Contiene 2 a 30 genes
 Función: portan información que permite a la bacteria adaptarse al medio
 Transposón (genes saltarines): Material genético que se transfiere de un microorganismo a otro y dentro
del microorganismo de un sitio a otro

b. BACTERIÓFAGOS = FAGOS:
 Virus que infectan bacterias y realizan su ciclo de multiplicación en la célula bacteriana pudiendo producir
lisis de la misma.
 Si el fago se integra al genoma bacteriano  Ciclo lisogénico
 La célula bacteriana puede desarrollar una nueva característica genética codificada por el fago
 Los bacteriófagos son virus bacterianos con un genoma de ADN o ARN protegido generalmente por
membrana o capa de proteínas
 Esos elementos genéticos extra cromosómicos pueden subdividirse fuera de la célula del huésped y se
transmitido de una célula a otra
 Los bacteriófagos infectan a la célula bacteriana y pueden replicarse hasta alcanzar un gran número y
condicionar la lisis celular lo que se denomina infección lítica
 En algunos casos puede integrarse al genoma del huésped sin destruirlo lo que se denomina estado
lisogénico como sucede en el caso del bacteriófago lambda en Escherichia coli

“Ver tópico + delante de Variación Bacteriana”


4.ADHESINA (FIMBRIAS): Dar adherencia específica a un receptor celular. Son lectinas, es decir,
proteínas que se unen a hidratos de carbonos
• ADHESINAS AFIMBRICAS: lectinas unidas directamente a la membrana de la bacteria.
• ADHESINAS FIMBRICAS: lectinas unidas a la membrana a través de una prolongación proteica.

 OBS: cualquier que sea las adhesinas, fimbricas o afimbricas pueden hacer variación antigénica de
una estructura. Además, pueden tener variación de fases, una hora expresa la adhesina y otra hora no.

 OBS: Hay una fimbria particular que se llama fimbria tipo 4 que presenta contractilidad,
mecanismo conocido como twite. Ese mecanismo sirve para mover la bacteria hacia la superficie
celular, le da movimiento.
Completando sobre Fimbrias…
 Compuesta principalmente por pillina
 Adhesión a células huéspedes por proteínas en sus extremos
 Ejemplo  pueden ser factores de virulencia en colonización  infección de aparato urinario en E. Coli
5. PILIS (FIMBRIA SEXUAL): El pili es una estructura que participa en la CONJUGACION
BACTERIANA. El pili de una bacteria F+ va a contactar con una bacteria receptora o F-, cuando se contacta
el pili las bacterias se aproximan y hay un cambio de información que pasa a través de un poro proteico. La
única función del pili es permitir una aproximación de las bacterias para el cambio de informaciones.

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 Conforman un cito tubular para transferencia de grandes cromosomas bacterianas (transfiere material
genético)
 Composición: principalmente pilina
 Codificados en plásmido
****Antes de seguir  VARIACION BACTERIANA*****
Transferencia de material genético: El intercambio de material genético entre las células bacterianas puede
tener lugar a través de 3 mecanismos

1. Transformación: Captación activa e incorporación de ADN exógeno o extraño


 El otro proceso donde una bacteria puede adquirir información se llama
TRANSFORMACION, cuando una bacteria muere y su material genético (ADN DESNUDO) es
capturado por otra bacteria que está cerca.
 Proceso mediante el cual las bacterias captan fragmentos de ADN desnudo y lo incorporan a su
genoma. En la imagen vemos como una bacteria que es sensible adquiere por transformación un
segmento o fragmento de ADN que le va a dar resistencia a un determinado antibiótico

2. Transducción: Transferencia de material genético de una bacteria a otra por medio de un bacteriófago
 Hay un proceso de cambio de información que esta mediado por FAGOS o BACTERIOFAGO
(virus bacteriano), donde el fago pasa información de una bacteria a otra. Ese proceso se llama
TRANSDUCCIÓN.
3. Conjugación: Consiste en apareamiento o intercambio casi sexual de información genética entre bacteria
donante y receptora
 Transferencia de material unidireccional desde una célula donante (macho) hacia una célula receptora
(hembrea) a través del Pili sexual. El tipo de acoplamiento o sexo de una célula depende de la presencia
de célula macho o ausencia de célula hembrea en el plásmido conjugativo como es el plásmido F de
Escherichia Coli

Imagen: Transferencia de Material Genético – Variación Bacteriana

Volviendo para estructuras y características bacterianas….

6.FLAGELO: El flagelo tiene la función de dar movilidad las bacterias, está compuesto por proteínas que se
llaman FLAGELINAS que se une al TLR 5 que están en las membranas de las células inflamatorias, no está
presente en los endosomas que tiene TRL 3,7,8 y 9.
 Tiene estructura de gancho y cuerpo basal

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 Además de permitir movilidad a bacteria, las direcciona hasta donde hay nutrientes con función de
quimiotaxis y evitar las sustancias toxicas

PREGUNTA DE PARCIAL: Según la cantidad de flagelos que las bacterias tengan son
clasificados en:
 Monotrica: 1 solo flagelo
 Anfitricas: muchos flagelos en ambos polos (anfi: significa en sitios distintos)
 Peritricas: bacterias que poseen flagelos en su alrededor
 Lofotricas: Muchos flagelos en un solo polo

7.CAPSULA - PREGUNTA DE PARCIAL: Esta constituida por polisacáridos, o sea, una larga secuencia de
hidratos de carbono y tiene como función hacer una diseminación bacteriana porque presenta actividad
anticomplemento, y por lo tanto, antifagocítica. No hay la formación de C3b con eso no puede hacer
opsonización.
 Elemento Facultativo
 Compuesta principalmente por polisacáridos
 Factor de Virulencia: antigénico y antifagocítica
 Puede facilitar la adherencia a otras bacterias y superficie de tejidos

Las capsulas pueden contener acido siálico y eso es útil porque las capsulas con ese acido es menos
inmunogénica. Hace que los Ac que tendrían que unir a la capsula no se unan y que las células del sistema
inmune reconozcan a la capsula como se fuera algo del nuestro propio cuerpo. No son todas las bacterias que
poseen ese acido siálico en su capsula, las que poseen van a estimular menos a la producción de LB – Ac.
 Las bacterias que poseen acido siálico en su capsula son más virulentas por que escapan más al
sistema inmune, debido a que son menos inmunogénicas, o sea, que es reconocido poco a través del
BCR.
 Bacterias con capsula y con ácido siálico: La mayoría que producen Meningitis Bacteriana Aguda
como NEISSERIA MENINGITIDES. Son consideradas las peores por poseer el ácido siálico en su
capsula.
 Otro ejemplo sería el STREPTOCOCCUS AGALACTEA, STREPTOCOCCUS NEUMONEAE.

8.BIOFILM – PREGUNTA DE PARCIAL: El biofilm es un gel de mucopolisacáridos. También es llamado


de biopelícula. El biofilm no se expresa de manera constitutiva, si no, mediante alto inducción
(corumsension), o sea, las bacterias se tratan de estimular la producción de este biofilm.
Una bacteria que por ahí no tiene biofilm, por autoinducción puede presentar el biofilm, ese proceso empieza
a ocurrir cuando la población bacteriana aumenta.
 El biofilm tiene la función de: adherencia a material inerte como catéteres, sondas, prótesis, es una
adherencia no especifica que no está mediada por receptores como pasa a las adhesinas.
 La otra función es dar resistencia, protección a la bacteria a los antibióticos y al sistema inmune, con
eso la bacteria puede seguir multiplicándose. Eso nos hace pensar que una prótesis, una sonda, que
este colonizada hay que sacarla, porque por más que pase ATB no va a llegar a matar las bacterias
que ahí colonizan. A demás, este biofilm da resistencia a los desinfectantes comunes como el
detergente o jabón, pero por otro lado la lavandina es capaz de extirparlas.

 Bacterias que producen el biofilm: PSEUDOMONAS que suelen crecer en las piletas, botellas y
en lugares donde hay humedad. Esa bacteria es una oportunista y el problema pasa en pacientes
neutropénicos.

B. ¿QUE FORMAS PUEDEN ADQUIRIR LAS BACTERIAS?

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• Bacilos: Forma de bastones


• Cocos: Esféricos
• Curvas: en forma de coma (vibriones) o curvas espiraladas

Según como se agrupan:


• En cadena: Cocos en cadena que se llaman STREPTOS
• En racimos: Cocos en racismos se llaman STAPHYLOS
• La forma intermedia se llama COCOBACILO = Bastón corto EJEMPLO: BORDETELA PERTUSIS

Si se agrupan de a dos se llaman DIPLOS = DIPLOBACILOS O DIPLOCOCOS

C. CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS


Las bacterias se clasifican en 2 grandes grupos: Bacterias Gram y Bacterias no Gram  Según tincion de
gram
Bacterias No Gram
Las bacterias no gram son bacterias que por lo general no tienen pared o no se tiñe bien con técnica de tinción
gram o se pueden observar a microscopio óptico porque son delgadas.
Bacterias Gram
Las bacterias llamadas de gram son bacterias que tienen pared y que se tiñe bien con técnica de tinción gram y
que se puede observar al microscopio óptico.
Estas bacterias se subclasifican en dos grupos: Bacterias Gram Positivas y Bacterias Gram Negativas.

Bacterias Gram Positivas


Son bacterias que van a tener una pared muy gruesa
Bacterias Gram Negativas
Son bacterias que van a tener una pared muy fina, delgada.

D. TECNICA TINCION GRAM


Técnica que permite diferenciar las bacterias en 2 grandes grupos, gram positivas y gram negativas con el uso
de 2 colorantes: Cristal violeta o violeta genciana (bacterias gram positiva lo retienen) y Fucsia o Safranina
(retenido por gram negativas). Esa diferencia de retención de colorante refleja que la estructura de las
bacterias gram positivas y negativas se difieren.

Paso a paso de la tincion de Gram: PREGUNTA DE PARCIAL

1. Muestra sobre porta objeto  FIJAR bacteria con calor o dejar secar sola
2. Anadir Colorante Principal (Cristal Violeta o Violeta Genciana) x 30 seg.

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3. Lavar con H2O x 2 segundos


4. Precipitar colorante con MORDIENTE LUGOL o YODO x 60 seg.
5. Lavar con H2O
6. DECOLAR con mezcla de Alcohol-Acetona x 10-30seg.
7. Lavar con H2O
8. CONTRACOLOR Fucsina o Safranina x 30-60 seg.
9. Lavar con H2O
10. Dejar SECAR

Después de este proceso van a quedar bacterias tenidas con color violeta y otra con color fucsia. Las que
quedaron con color violeta son las que tienen la pared gruesa (gram +) y las que quedaron de color fucsina
son las que tienen la pared fina (gram -). La técnica tinción gram nos permite:
• Ver que es una bacteria gram
• Saber que tipo gram es
• Ver la forma de la bacteria
• Ver la disposición
1. ESTRUCTURA DE LA BACTERIA GRAM POSITIVA
• Gruesa pared con peptidoglicanos y ácidos teicoicos o lipoteicoico
• Simple membrana (membrana citoplasmática)
• Tiñe violeta
• Tiene una enzima que sintetiza la pared llamada de PBP o proteína ligadora de penicilina. (cuando se
administra penicilina se inhibe la síntesis de pared y la bacteria muere por choque osmótico)

 OBS: La penicilina pertenecen a un grupo llamado β-Lactamicos, donde todos des este grupo
inhibe la PBP. Las bacterias para contrarrestar estos ATB producen enzimas que tratan de

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degradar los β-lactamicos llamadas de β-lactamasas, al dar ATB ellas no permiten la inhibición
del PBP. Esa β-lactamasas funciona como mecanismo de resistencia. Eso es realizado por gram +
o gram -. En las gram + esa enzima es difundida rápidamente.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS


COCOS BACILOS
EL STAPHYLOCOCCUS ESPORULADOS
EL STREPTOCOCCUS EL CLOSTRIDIUM
ENTEROCOCCUS EL BACILLUS

NO ESPORULADOS
LISTERIA
CORYNEBACTERIUM

¿QUE ES UNA ESPORA? – Pregunta de PARCIAL


Una espora bacteriana es un elemento de resistencia que resiste a condiciones adversas en el medio ambiente
que pueden ser calor, frio, oxigeno, desinfectantes, antisépticos. Lo que no puede resistir una espora es la
esterilización, porque ese procedimiento mata cualquier forma de vida.
Metabolismo de las esporas: Desde el punto de vista metabólico, las esporas son inactivas, por lo tanto, no
producen toxinas, no se replican. Para producir toxinas y para replicarse deben pasar a la fase vegetativa que
ocurre todo lo contrario, se replican, se reproducen, es una fase metabólica y no es de resistencia.
 OBS: La fase vegetativa no resiste a ningún tipo de procedimiento que resiste la fase espora.

EJ: CLOSTRIDIUM, BACILLUS – UNICAS FORMADORAS DE ESPORAS - En el ambiente están como


esporas, pero cuando entran en nuestro cuerpo cambian a una fase vegetativa.
Endosporas
 Resistencia al calor, radiación, desecación.
 Permite supervivencia en ambientes desfavorables
 Producidas principalmente por los géneros Bacillus y Clostridium
 DNA protegido por ácido dipicolinico y proteínas
 Luego de la activación por stress, la disponibilidad de nutrientes dispara la germinación y el crecimiento
 La localización de la espora en la célula puede ser usada para la identificación
 Se forma esporas podemos decir que estamos en presencia de bacillus o clostridium

2. ESTRUCTURA DE LA BACTERIA GRAM NEGATIVA


• Delgada pared sin acido o lipoteicoico en su pared
• Doble membrana (citoplasmática y membrana externa selectiva).
• Entre esta doble membrana hay un espacio llamado de espacio periplasmático que va a promover
una mayor concentración de enzimas β-lactamasas con eso son más resistente a los medicamentos
β-lactamicos.
• Tiene la membrana externa anclada a la pared por una lipoproteína llamada BRAUN
• La membrana externa es asimétrica en su composición porque:
 capa externa está compuesta 90% de una sustancia llamada LPS o LOS (lipopolisacáridos
o lipooligosacaridos).
 La capa interna no tiene esas sustancias. Las dos sustancias tienen en común LIPIDO A
(endotoxina) e HIDRATO DE CARBONO CENTRAL (presente en cualquier bacteria gram -).

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 La LPS tienen de diferente el ANTIGENO SOMÁTICO O que tienen variabilidad génica.

Composición del LPS – Pregunta de PARCIAL


 El LPS, es una endotoxina que está presente principalmente en Bacterias Gram NEGATIVAS en la
membrana externa
 Está formado por 3 regiones estructurales
1. Antígeno O  La estructura del antígeno O puede variar en distintas bacterias por ejemplo tenemos
en el serotipo de Escherichia Coli O enterohemorrágicas, serotipo O:157H7, es uno de los
responsables del síndrome urémico hemolítico, lo antígeno O siempre esta hacia el exterior
 endotoxina que se une al TLR 4 de las células inflamatorias estimula la célula a producir
inflamación.
 Es llamada de Endo porque forma parte de la membrana de la bacteria.
 El lípido A solo es endotóxico cuando se produce lisis de la bacteria por acción de
antibióticos)
2. Core  región central, antígeno conservado sin variabilidad
3. Lípido A  constituye componente básico del LPS que es esencial para la viabilidad de la bacteria y
es responsable por actividad

Endotoxina Bacteriana  Asociada al antígeno O


 LPS se encuentra en membrana externa de las bacterias GRAM NEGATIVAS.
 Se une a las células del huésped, se unen a receptores a nivel de la célula huésped, activan a linfocitos B,
inducen la liberación de IL-1, IL-6, factor de necrosis tumoral y otros factores por parte de macrófagos,
células dendríticas y otras células
 Los LPS pueden ocasionar fiebre, provocar un shock y llevar a sepsis

Composición del LOS – Pregunta de PARCIAL


1. Lípido A
2. Hidrato de Carbono
3. CORE
4. Carece de la porción O del LPS
 Presentes en bacterias del género Neisseria
 Se desprende con facilidad de la célula bacteriana
 Este antígeno es MAS CORTO, siendo el género Neisseria mas susceptible a lisis por el sistema del
complemento del huésped

Mas estructuras y características de las GRAM NEGATIVAS…


• Tiñe rosa
• Tiene una enzima que sintetiza la pared llamada de PBP o proteína ligadora de penicilina.

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• Poseen proteínas transmembrana llamada de proteína de membrana externa o OMP que tienen función
de:
 Función porina, funciona como poro que puede pasar sin gasto energético de manera
bidireccional macromoléculas polares
 Actúa como bomba de eflujo, que lo que hace es expulsar antibióticos (unidireccional) o
Funciona como adhesinas
 Funciona como invasinas (estimula la endocitosis bacteriana)
 Actúa como receptores de bacteriófagos, que se pegan y meten su material genético.

Las proteínas OMP son antigénicas, por lo tanto, pueden generar variación antigénica para invadir la respuesta
inmune. También pueden cambiar el diámetro de su poro para evitar la entrada de los antibióticos. Pueden
incorporar acido siálico producen mimetismo molecular.
3. Envoltura Bacteriana Bacilo Acido Álcool Resistente  BAAR (Introducción + detalle ver classe
especifica)
 Identificación por coloración de Ziehl-Nielsen
 Agente causal de la Tuberculosis
 Mycobacterias que serían los BAAR poseen capa de peptidoglicano ligeramente diferente a la anterior
porque esta entrelazada y unida mediante a enlaces covalentes y el principal componente es el acido
micólico

C. Nutrición Bacteriana

 Es el proceso por el que los seres vivos toman del medio donde habitan sustancias químicas (nutrientes)
que necesitan para crecer con 2 objetivos
1. Energéticos  Reacciones de Mantenimiento
2. Biosintéticos  Reacciones Plásticas o Anabolismo
 HIERRO es esencial para respiración y síntesis de ADN de la bacteria
o Desarrollaran determinados mecanismos para captación del hierro tanto libre como asociado a
macromoléculas

Clasificación Nutrición Bacteriana: punto de vista biosintético  para necesidades plásticas o de


crecimiento

Autótrofas: Emplean compuestos inorgánicos para sintetizar compuestos orgánicos


Autótrofas fotosintéticas
 Ejemplo: bacterias sulfurosas verdes y purpuras
 NO utilizan H2O como dador de electrones en la fotosíntesis (usan Autótrofas Quimiosintéticas
otros compuestos como sulfuro, hidrogeno)  A diferencia de fotosintéticas  UTILIZAN energía que desprenden
 NO producen O2 de ciertos compuestos inorgánicos para oxidarse
 Poseen pigmentos que absorben luz casi infrarroja  permite
realizar fotosíntesis prácticamente sin luz visible
Heterótrofas: Emplean compuestos orgánicos para sintetizar sus proprios compuestos orgánicos
Bacterias con relacion estrecha con otros organismos
Saprofitas  Comensales: la mayoría, no causan danos ni aportan beneficios al
 Bacterias que suelen ser de vida libre huésped.
 Viven sobre materia orgánica muerta  Parásitos: producen enfermedades
 Simbiontes

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E. RESPIRACION
BACTERIANA
Clasificación según su comportamiento frente al oxigeno

Utilizan O2
AEROBIAS: Necesitan O2 para crecer, ya que lo utilizan como aceptor final de electrones
MICROAEROFILAS: Algunos aerobios necesitan concentraciones de O inferiores a la atmosféricas (2-10%)
NO O2
ANAEROBIAS: Pueden crecer en ausencia de Oxígeno, debido a que pueden usar aceptores finales distintos del
oxígeno, o porque poseen metabolismo estrictamente fermentativo.
Anaerobios Estrictos Anaerobios Aerotolerantes Anaerobios Facultativos
 O2 es toxico  SOPORTAN presencia de O2  Pueden realizar metabolismo energético
 Carecen de CATALASA Y  Lo anterior resulta de enzimas tanto aerobio como anaerobio
PEROXIDASA detoxificantes  Varía según ambiente y disponibilidad de
 Esta carencia hace con que NO puedan  Ejemplo  Streptococcus aceptores finales de electrones
eliminar las especies reactivas de O2  Ejemplo  Enterobacterias
 Ejemplo  Clostridium

Esquema: Representación de clasificación respiratoria según [O2]


1. Aerobio Obligatorio: Porción superior  cerca del O2
2. Anaerobio Obligatorio: Parte del fondo  O2 es toxico
3. Aerobio Facultativo: Pueden crecer en cualquier parte del tubo
porque por variar entre anaerobio y aerobio.
4. Microaerófilos: Un poquito más abajo del extremo superior del
tubo xq necesitan [O2] inferiores a las atmosféricas (2-10%)
5. Aerotolerante: Espaciada por el tubo por que soportan O2, son
anaerobias, pero pueden crecer en condiciones de aerobiosis

F.
REPRODUCCION BACTERIANA
Generalmente las bacterias se multiplican por fisión binaria; tras la replicación del ADN, que está dirigida por
la ADN polimerasa de los mesosomas, la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal que separa
las dos nuevas bacterias.
Imagen Reproducción Bacteriana:
 La replicación de la bacteria es un proceso coordinado que produce 2 células hijas idénticas
División de célula bacteriana
1. Ocurre replicación que requiere extensión de la pared celular, así como la replicación del cromosoma y
formación de un tabique

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2. La fijación del ADN a la membrana arrastra cada cadena hija hacia el interior de una nueva célula
formando 2 células hijas idénticas

G. CRECIMIENTO
BACTERIANO
Gráfico Crecimiento Bacteriano: Distintas fases del crecimiento bacteriano
Al agregar bacteria en medio de cultivo (medio que tenga nutrientes para que bacteria crezca) ocurre las
siguientes fases:
1. Tiempo de Latencia: Tiempo de adaptación al medio ambiente
2. Fase Logarítmica o Exponencial: Bacterias crecen y se dividen a un tiempo de duplicación característico
del aislamiento y de las condiciones del ambiente, el número de bacterias ↑ a razón de 2
3. Fase Estacionaria: Cuando metabolitos del cultivo se agotan o puede ser que haya sustancia toxica que
interrumpa el crecimiento de modo a haber una fase estacionaria que es seguida de una fase de declinación
4. Fase de Declinación: Fase de muerte durante la cual algunas bacterias dejan de dividirse, pero siguen
siendo viables y a menudo son insensibles a ATB

¿Como se mide el crecimiento bacteriano?

 Siembra en medios líquidos  TURBIDEZ indica crecimiento


bacteriano
 Siembra en medio semisólido (placa de agar para ver si crecen)
 Lo que se ve es si están vivas o muertas, si siguen siendo
viables esas bacterias que tienen turbidez o no.

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Temperatura de Crecimiento: La MAYORIA de las bacterias que causan infecciones en humanos son mesófilas
habitualmente se sembrando a 35-37oC.
 Psicrófilos (< 20pC)
 Mesófilas (20-42oC)
 Termófilas (40-70oC

H. Toxinas Bacterianas
Definición: Son moléculas que alteran el metabolismo, la fisiología o la estructura de las células del huésped.
Según su localización pueden ser clasificadas en:
 ENDOTOXINAS: están incorporadas en la estructura de la bacteria, están localizadas en una porción del
Lípido A y son poderoso activador de la reacción inflamatoria aguda  En gram negativo
 EXOTOXINAS: son Secretables y/o exportables, se agrupan según sitio de accion en:
o Toxinas que actúan desde la superficie celular alterando señalización celular
o Toxinas que afectan la membrana plasmática
 Destrucción directa de fosfolípidos y otras estructuras
 Formación de poros
o Toxinas que requieren internalización o toxinas A/B: el sitio blanco de accion es intracelular
En muchos casos la toxina es la única responsable por los síntomas característicos de la enfermedad como por
ejemplo en los casos de toxinas preformadas de las toxinas por intoxicaciones alimentares por Staphylococcus
aureus, Bacillus cereus, toxina botulínica por Clostridium botullini

I. Clasificación de bacterias en relacion a ubicación


ORGANISMO DE VIDA LIBRE (BACTERIAS EXTRACELULARES): Bacterias que no requieren de
célula para replicarse. (STREPETOCOCCUS, STAPHYLOCCOCUS, PSEUDOMONAS)
Principales mecanismos para erradicarlas: INFLAMACIÓN, FAGOCITOSIS, OPSONIZACIÓN POR VÍA
DEL COMPLEMENTO (INFLAMACIÓN y LISIS BACTERIANA)

BACTERIAS INTRACELULARES OBLIGATORIAS: Bacterias que requieren de célula para replicarse.


(CLAMYDIAS, CLAMYDOFILAS, RICKETSIAS)
 Tienen capacidad de ingresar y multiplicarse en interior de células en general fagocitos
OBS: Esas bacterias deben ser cultivadas obligatoriamente en medio de línea celular, pues si no hay células
no van a poder multiplicarse.

BACTERIAS INTRACELULARES FACUTATIVAS: MYCOBACTERIAS, BRUCELA, SALMONELLA


TIPHY.

BACTERIAS – Clase 2: D(x) Bacteriológico

A. Esquema General
del D(x) Bacteriologico

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1. Paciente Enfermo (sospecha de infección bacteriana) - ambulatorio, guardia, internado.


 Diagnostico Presuntivo  Clínica + Características Epidemiológicas
o Tratamiento antibiótico empírico: Cuando se presenta paciente que pensamos que tiene el proceso
infeccioso es probable que se dé un antibiótico pensando en la patología, pero primer tenemos que
tomar la muestra para el laboratorio de microbiología

2.Diagnostico Microbiológico (de Certeza)


El diagnostico microbiológico se puede hacer de:
a) Manera Directa: Examen directo y cultivo
b) Manera Indirecta: Métodos NO cultivables como búsqueda de antígenos, búsqueda de anticuerpos y
otros estudios

B. Paso a Paso del


Diagnostico Microbiológico de Certeza(1).
1- Solicitud de Laboratorio
Solicitud enviada a laboratorio de microbiología debe constar de:
 Nombre y apellido del paciente
 Historia Clínica: dada por fecha de nacimiento o DNI dependiendo del lugar
 Internación: sector – cama
 Estudios Solicitados: En sospecha de infección bacteriana, si buscamos gérmenes comunes, bacterias
anaeróbicas, otros microorganismos atípicos
 Tratamiento con antibiótico previo: fundamental para correlacionar con el resultado del estudio
 Diagnostico Presuntivo: faringitis, celulitis, neumonía y también está asociado con el tipo de muestra
solicitada
 Obra Social: o el plan que tenga el paciente
 Firma y sello del medico
El éxito del estudio depende en gran medida de la comunicación entre el médico y el laboratorio
2- MUESTRA

a) Conceptos Básicos para la toma de muestra: Permiten diagnostico microbiológico adecuado.


 Elegir el material que mejor represente el proceso infeccioso.
 Tomar la muestra en el momento adecuado y en lo posible antes de que el paciente reciba ATB por
tratamiento empírico.

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 Obtener la muestra evitando contaminarla con la flora normal del paciente: a veces hay que hacer
limpieza previamente la zona con desinfectantes para eliminar flora normal y en otros casos la toma de
muestra puede requerir una preparación previa.
 Tomar muestra que sea representativa y tenga tamaño adecuado: La muestra tiene que ser adecuada y
representativa, muestra muy pequeña la sensibilidad baja.
o Hemocultivos minino 2 frascos para aumentar sensibilidad del estudio
 Evitar el agregado e ATB que inhiban el desarrollo: Asegurarse si paciente hizo uso o no de algún
ATB, medicamentos, tópico y otros que pueda interferir en desarrollo de microorganismo
o Hemocultivos: tienen un frasco con tienen que atrapan ATB, logra  sensibilidad mismo que
paciente haya utilizado ATB previamente.
 Utilizar un recipiente estéril y adecuado para su conservación y transporte: conservar la viabilidad
del microorganismo para momento del cultivo y tiempo que requiera los estudios de LAB.
 Identificar la muestra correctamente: con las indicaciones del paciente, el tipo de la muestra.

b) TIPO, TOMA DE MUESTRA, TRANSPORTE Y CONSERVACION:

1. Sangre:
▪ Para realizar hemocultivo  suceso del hemocultivo depende de tamaño de muestra adecuado
▪ Toma de Muestra: Asepsia de la área a tomar muestra para evitar flora normal bacteriana, toma de muestra
con aguja de venopunción.
▪ CANTIDAD DE MUESTRA (CLAVE): adultos 20 ml en 2 frascos (10 ml por frasco)
o Niños y RN volumen proporcionalmente menor
▪ Transporte: frasco de hemocultivo
o Manual  poco común
o Frasco para hemocultivo automatizado  mayoría de los LAB
Hay frascos para bacterias anaeróbicas, aeróbicas, pediátricos y algunos con resinas para atrapar los ATB y
aumentar la sensibilidad del estudios en el caso que lo paciente ya tenga tenido contacto previo con ATB
▪ Conservación de la muestra: temperatura ambiente (37oC)

2. Orina:
▪ Para realizar Urocultivo
▪ Muestra de Orina  Tipos de muestra
o Urocultivo chorro medio  La + común
o Urocultivo de orina de sonda  pacientes internados o dispositivos urinarios
o Orina suprapúbica: Se realiza en prematuros que NO pueden orinar correctamente y la toma de
muestra se hace dificultosa o cuando busco bacterias anaeróbicas luego se hace punción de la vejiga
y se coloca la muestra en un frasco estéril (frasco de tapa roja)
o Muestras de nefrectomía
▪ Transporte: frasco de estéril con tapa (EL FAMOSO FRASCO DE TAPA ROJA) - Hay distintos tipos de
muestra orina que pueden ser orina de chorro medio, punción suprapúbica, orina de sonda,
independientemente de cuál sea el tipo de muestra el almacenamiento es en recipiente estéril.
▪ Conservación de la muestra: heladera
3. Material Fecal:
▪ Para realizar COPROCULTIVO  útil para detectar toxinas  Ejemplo SUH
▪ Toma de Muestra: Material fecal del paciente.
▪ Transporte y conservación:
o Cuando se utiliza medio de transporte  Stuart y Cary : conserva en temperatura ambiente
o Cuando se utiliza recipiente estéril: en heladera.

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4. Muestras Genitales: muestras de flujo vaginal, endocervicales, hisopados uretrales


▪ Almacenamiento: en medio de transporte  Stuart o Cary Blair
▪ Conservación: temperatura ambiente (medio de transporte mantiene temperatura ideal)

5. Liquido de Punción (LCR, Abscesos, otros): LCR en sospecha de meningitis, líquidos de punción de
abscesos, líquidos pleurales, líquidos abdominales.
▪ Toma de Muestra: Asepsia de la área a tomar muestra punción con aguja adecuada, luego de la muestra
eliminar aguja
▪ Almacenamiento: Liquido de Punción en recipiente o jeringa estériles SIN aguja
 A veces liquido de punción en caso de bacterias anaeróbicas se debe enviar rápidamente a laboratorio
porque bacterias anaeróbicas se mueren en presencia de O 2 o colocarlas en frasco TAB

▪ Conservación: temperatura ambiente.

****Toma de Muestra de LCR****

▪ Se realiza mediante a punción entre vertebras L3 y L4 en


condiciones estériles se puede colocar en un tubo estéril el
LCR obtenido de estas vertebras o también se pueden colocar
en estos frascos de hemocultivo y colocar en un equipo
automatizado

****Punción de piel y partes blandas  Ejemplo de toma de muestra (probable presencia de aerobias y anaeróbicas)****

▪ Observe una infección de piel y partes blandas en que se busca bacterias tanto aeróbicas como algunas
anaeróbicas.
▪ Toma de muestra es por medio de una punción y se coloca en medio de transporte especial para bacterias
anaeróbicas (TAP) lo mismo conserva tanto anaerobias cuanto aerobias.
▪ Como muestra en la cruz, NUNCA mandar al laboratorio la jeringa con la aguja por un tema de
bioseguridad
▪ Por lo tanto, se manda tubo de TAP al pensar en bacterias anaeróbicas y si no descarto la aguja y le pongo
una tapita que viene para tapar la jeringa y enviarla a LAB

6. Biopsias: Biopsias de distintas ubicaciones, órganos, tejidos


▪ Toma de Muestra: extracción de un pedazo de tejido u órgano de organismo vivo para realización de
examen microbiológico o anatomopatológico, existen distintas técnicas de biopsia que no vienen al caso.
▪ Transporte: Almacenamiento en recipiente estéril (SF)  si hay suero fisiológico mejor, para NO secar la
muestra
▪ Conservación de la muestra: temperatura ambiente

7. Catéteres:

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▪ Catéteres que son dispositivos endovasculares que se colocan en pacientes internados que puede infectar en
infecciones relacionadas a catéteres
▪ Toma de Muestra: Región debe ser desinfectada con alcohol, el catéter deberá ser retirado de forma
aséptica.
▪ Transporte y Conservación: Tubo estéril o frasco de coleta de material
▪ Conservación de la muestra: temperatura ambiente.

8. Materiales de vías respiratorias superiores: hisopado de fauces (hisopado faríngeo, hisopado de amigdlas)
▪ Para realizar hemocultivo  suceso del hemocultivo depende de tamaño de muestra adecuado
▪ Toma de Muestra: con ayuda de Swab de dacrón o alginato para evitar contaminación de la mucosa oral y
colocar muestra en medio de transporte para enviar a LAB.
▪ Transporte: Utiliza Medio de Transporte  Cary Blair o Stuart
▪ Conservación de la muestra: temperatura ambiente

9. Materiales de vías respiratorias inferiores: sospecha de Neumonía


 Esputo
 Lavados Bronquiales
 Lavados Bronco Alveolares.
▪ Toma de Muestra: Realizar toma de muestra por esputo o aspirado
▪ Transporte: Recipiente estéril
▪ Conservación de la muestra: Temperatura ambiente si NO procesa rápidamente llevar a heladera

c) MEDIO DE TRANSPORTE  Fundamento


 Algunas muestras para estudios microbiológicos requieren la utilización
de medios de transporte para mantener viables los microorganismos
presentes en la misma
 Medios de transporte mas frecuentes:
o Medio de Stuart: Imagen
o Medio de Cary Blair: a veces es mejor para determinados
microorganismos causantes de gastroenteritis

¿Qué son los medios de transporte? – Pregunta de PARCIAL


Que son los medios de transporte: Son medios que mantienen la viabilidad de los microorganismos, tienen un
material que a veces es un gel que mantiene viable el microorganismo hasta el momento que realice el cultivo,
los de mayor frecuencia son Medio de Stuart y Medio de Cary Blair.
Resumen… Material, Almacenamiento y Conservación…

MATERIAL ALMACENAMIENTO CONSERVACION

Recipiente estéril
Líquidos de punción Temperatura ambiente
Jeringa

Biopsias Recipiente estéril (SF) Temperatura ambiente

Medio de transporte* Temperatura ambiente


Materia fecal
Recipiente estéril Heladera

Orina Recipiente estéril Heladera

Secreciones vaginales
Secreciones oculares Medio de transporte* Temperatura ambiente
Exudados de fauces

Esputo/aspirado traqueal/BAL
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Recipiente estéril Heladera
Materiales para cultivo de gérmenes
anaerobios Medio conservación para anaerobios Temperatura ambiente

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C. Paso a Paso del


Diagnostico Microbiológico de Certeza(2).
a. Procedimiento TRADICIONAL – Diagnostico DIRECTO:

Microscopia: Permite saber si bacteria es gram positiva o negativa, su morfología….


▪ coloración de Gram o en Fresco
▪ Permite saber si bacteria es gram positiva o negativa, morfología…
Cultivos: Permite identificar crecimiento de colonias bacterianas, su morfología, requerimientos metabólicos,
patrones metabólicos…
▪ Requiere conocimiento de requerimientos metabólicos del microorganismo para elegir medio de cultivo
ideal.
▪ Realiza Incubación con periodo de crecimiento de colonias
Identificación de Colonias en Cultivo: una vez que los cultivos crecieron en una estufa identificamos la colonia
si es sospechosa de cocos, o de bacilos hacemos distintas identificaciones mediante a pruebas bioquímicas y
otras técnicas de proteómica o genómica que son más rápidas en laboratorios de alta complejidad
Pruebas de Sensibilidad: para saber tratamiento de ATB más adecuado para ese paciente
b. Técnicas que NO INVOLUCRAN CULTIVO – Diagnostico INDIRECTO
▪ Detección de antígenos
▪ Anticuerpos monoclonales
▪ Técnicas Moleculares: pueden ser de genómica o proteómica
c. Interpretación de los resultados
▪ Identificación de género y especie que desarrollo en cultivo
▪ Vemos si tratamiento empírico que recibió paciente compacta con la sensibilidad antimicrobiana que
obtuvimos en LAB
d. Elaboración del Informe final
▪ Importancia de un buen informe para la adecuada comunicación con el medico

D. MICROSCOPIA

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1. Fresco: permite identificar principalmente:


 Reacción Inflamatoria
o Presencia de leucocitos
o Acúmulos de leucocitos en infecciones urinarias
 Elementos NO bacterianos  Hongos y/o Parásitos
Dentro del diagnóstico microbiológico teníamos el examen en fresco (hace referencia al
examen SIN ninguna coloración) en la muestra a veces ponemos un poquito de solución
fisiológica si está muy seca y la observo en el microscopio, para ver se hay presencia de
reacción inflamatoria con leucocitos o también para ver otras estructuras como vemos en

2. Coloraciones o Tinciones:
 Gram: divide 2 grandes grupos de bacterias, GRAM + y GRAM – , da una primera
aproximación para saber de cual bacteria se trata
 Ziehl Neelsen: Para buscar bacilos acido alcohol resistentes (BAAR) como las Mycobacterias
 Giemsa: permite ver la celularidad
 Kinyoun: Observa distintas morfologías de bacterias como Nocardias y otros Actinomyces  Bacilus
parcialmente acido alcohol resistentes.

3. Fluorescencia: Algunos Laboratorios utilizan M.O. de fluorescencia que emplean coloraciones como:
 Naranja de acridina
 Auramina rodamina
 Inmunofluorescencia
4. Campo Oscuro: empleado para búsqueda o sospecha Treponema pallidum el agente causal de sífilis
(espiroqueta de movilidad alta) y algunas otras bacterias
5. Contraste de Fase
Importancia de la identificación de la Morfología en M.O.  Microbiológica y Clínica

Microbiológica
▪ Elección del esquema inicial de identificación
▪ Elección de las pruebas de sensibilidad antibiótica y los antimicrobiaos a ensayar

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▪ Elección de los medios de cultivo


▪ Diagnostico de Infecciones por microorganismos difíciles de cultivar

Clínica
▪ Reconocimiento fisiopatológico de la entidad clínica
▪ Presunción del foco etiológico
▪ Elección de la terapia inicial
▪ Diagnóstico rápido de ciertas infecciones

E. MEDIOS DE
CULTIVO
MEDIOS DE CULTIVOS: Cuando requiere aislar bacterias
o Mantener en un medio de cultivo
o Hacer pruebas para alcanzar diagnostico

a. Tipos de Medio de Cultivo

1. MEDIOS LIQUIDOS: En el medio líquido para ver si una bacteria está creciendo tengo que ver si el
líquido se pone turbio, o sea, la turbidez/producción de gas burbujas indicaría crecimiento bacteriano.
La formación de coágulos indicaría crecimiento bacteriano. En los medios líquidos no sirven para
cuantificar las bacterias, no sirven para saber cuántas unidades formadoras de colonia hay. Los
medios líquidos son solamente cualitativos (hay o no hay crecimiento).
a. Son tubos de ensayo, más conocidos, VHI, agar cerebro corazón donde crecen todo tipo de
bacteria, muy utilizado en líquidos de punción (abdominales, pleurales, LCR)

2. MEDIOS SOLIDOS: Es un medio es llamado de semi cuantitativos o cuali-cuantitativo, porque en


los medios solidos se puede ver cuantas unidades de colonia hay y a través de eso puedo saber si hay
o no crecimiento.
a. placas de Petri donde podemos utilizar distintos medios de cultivo como medio agar sangre,
medio agar chocolate que son medios muy ricos donde crecen las bacterias
OTROS MEDIOS DE CULTIVOS…
3. MEDIOS ENRIQUECIDOS: Las bacterias pueden también aislarse en medios enriquecidos, son
medios donde agregamos alguna sustancia para favorecer el crecimiento bacteriano. Este medio es
utilizado cuando la bacteria es fastidiosa, o sea, que le cuesta crecer, que no es fácil aislar y cultivar.

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4. MEDIOS SELECTIVOS: Los medios selectivos permiten seleccionar poblaciones bacterianas


mediante el agregado de antibióticos. Estos medios son utilizados cuando las muestras vienen de
sitios no estériles, sitios donde puede haber floras. Por ejemplo, muestra de materia fecal, ponemos
antibiótico para matar todas que hacen parte de esta flora y que quede solamente la que no es y que
tiene resistencia al ATB.
a. Selectivos: son los medios donde crecen ciertos microorganismos y NO otros por ejemplo los
que se usa para muestras como materia fecal donde hay muchos microorganismos y
solamente quiero ver los causantes de gastroenteritis (en general con ATB que permite
crecimiento selectivo

5. MEDIO DIFERENCIAL: Medio que sirve para diferenciar características dentro de una las
poblaciones bacterianas. Un medio diferencial por ejemplo es el medio MAC CONKEY (que tiene
lactosa, donde hay bacterias que puede o no fermentar esa lactosa). Este tipo de medio nunca es
utilizado como medio de diagnóstico definitivo.
a. Diferenciales: En los cuales bacterias van a crecer determinados géneros con un color
(medios cromogénicos o EPS, tenemos medios EPS para urocultivo donde urocolitis se ve
rosa la Klebsiella se ve verde o azulada, enterococos turquesa) medios que por el color pensó
cual es agente etiológico

b. Identificación en CULTIVOS

 Microscopia
 Utilización del Metabolismo (utilización de azucares, compuestos orgánicos, etc…)
 Identificación serológica (látex)
 Demonstración de toxinas y factores de patogenicidad
 Métodos Automatizados
 Identificación según característica genotípica  hibridación, PCR
 Proteómica: MALDI-TOF

F. DETERMINACIO
DE LA SENSIBILIDAD ANTIBIOTICA

Definiciones Importantes (pregunta de PARCIAL) ….

 Concentracion Inhbitoria Minima (CIM):Es la mínima concentración de ATB capaz de inhibir el


crecimiento de microorganismo.

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 CBM (Cantidad Bactericida Mínima): Es la cantidad en la cual produce muerte del microorganismo, para
saberla se debe replicar tubos en placa de agar para saber si hay uno crecimiento

“CBM es donde mato, es la concentración bactericida mínima, no hay microorganismos viables en este caso
mientras CIM hay organismos que tuvieron crecimiento inhibido. Esta es la diferencia entre CIM y CBM”

a) Determinacion CIM en medio liquido

Medio Liquido – procedimiento….

 La determinación de la CIM en medio liquido consta de una serie de tubos con concentraciones de
antimicrobiano decrecientes, en el ejemplo de la imagen partimos desde 0,12mg/mL hasta 16mg/mL.
 Incubase la bacteria durante la noche (periodo overnight)
 La turbidez en el tubo de ensayo indica crecimiento por lo tanto el primer tubo donde el líquido se ve
límpido es la CIM, en este caso CIM = 1mg/mL, es decir concentración inhibitoria mínima donde NO hay
crecimiento bacteriano, pero aun existen bacterias vivas, ellas solo no pueden más replicarse.
 CBM: Para sacar la CBM, que es la concentración bactericida mínima, es decir aquella que mata a todas las
bacterias presentes en la muestra y por lo tanto NO hay más organismos viables, es necesario pasar la
muestra del tubo de ensayo para el cultivo, porque solamente de esta manera será posible determinar si la
bacteria está viva o no. En el caso de la imagen vemos que con la incubación que también ocurre en un
periodo overnight en la concentración que representa la CIM aun existe bacterias en el medio sólido, ya en
la concentración de 2mg/mL NO hay presencia de bacterias, por lo tanto, la CBM = 2 mg/mL.

b) Método Cliométrico (E-Test)


 Mismo principio del método de difusión
 La marcación emplea tiras comerciales
 Marca muy conocida  E- Test
 Cruce de crecimiento donde se forma una hélice (0.047 – creo imagen no se ve muy bien) representaría la
CIM

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c) Difusion en Agar Solido o Kirby-Bauer  Standarizado para especies de crecimiento rapido


 Método Standarizado  recomendado por centros de referencias  Bacterias de crecimiento rápido
 Inoculo Standarizado  Muestra de bacteria en una cantidad standarizada que esta determinada en las
guías de referencia  Guía utilizada en argentina: CSLI
 Con el Inoculo Standarizado lo coloco en medio determinado (hisopo  agar) donde se emplea Agar
Mueller Hinton y lo dejo incubando por 24 horas.
 Luego del periodo de incubación se observa que se formó alrededor del ATB un halo de inhibición
o Centro el Disco  Antimicrobiano
o Halo de Inhibición  Determina SENSIBILIDAD de bacteria al ATB
 El próximo paso es medir el halo con una regla y comparar el tamaño con la Guía de referencia CSLI
 En la guía se obtiene la información según el tamaño del halo si bacteria en relacion a ATB es:
o Sensible
o Moderadamente resistente o Intermedia
o Resistentes
 En la última clasificación referente al tamaño del halo de inhibición acordar que
o Halo MAYOR  MAYOR Sensibilidad
o Halo MENOR  MAYOR Resistencia

G. Repasando los pasos


para diagnóstico bacteriano…

H. ANTIBACTERIAN
OS
 Definición: droga de origen natural o sintético capaz de lisar bacterias o inhibir su desarrollo.
 Poseen toxicidad selectiva, es decir que pueden inhibir a un grupo de bacterias y a otros no.

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a. Mecanismo de Acción de los ATB

Familias de ANTIBIOTICOS  Según sitio de accion

Inhibidores Síntesis de Pared Celular


Unen a PBPs y a las enzimas responsables por síntesis de peptidoglicano
 Penicilina, Penicilina G, Ampicilina.
β – Lactamicos  Cefalosporina, Cefalexina, Cefaclos, Cefixine.
 Monobactamas Aztreonam
 Familia del Carbapenemes Imipenem
Glicopéptidos Inhibe ligación cruzada entre las camadas del peptidoglicano
 Vancomicina, Teicoplamina
Inhibidores Síntesis de Proteínas
Actúan sobre 30S, son sinérgicos con β-lactamicos. Los anaerobios son resistentes.
 Amikacina, gentamicina, neomicina
Aminoglucósidos  Estreptomicina
Tetraciclinas Actúan sobre unidad 30s

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 Minociclina, tetraciclina
Cloranfenicol Actúan sobre unidad 50S
Macrólidos  Eritromicina, Claritromicina Impide elongación de polipéptido del
Lincosamidas  Clindamicina, Lincomicina ribosoma 50s
Estreptogaminas  Linezolid

Inhibidores Síntesis de Ácidos Nucleicos o SU Replicación


Quinolonas Inhiben la topoisomerasa II
 Acido pipemidico, ciprofloxacina, norfloxacina
Sulfamidas Interfiere en la síntesis del Ácido Fólico
Trimetoprima  Administrados Simultáneamente
Rifampicina Inhibe la ARN polimerasa DNA dependiente

Agentes Antimicobacterianos
Isoniacida Es de primera línea, inhibe a la micolasa sintetasa
Etionamida (inhibe síntesis de ácido micólico)
Etambutol Inhibe síntesis de ácido micólico y de la espermidina
Pirazamida T(x) Tuberculosis

OTROS
Polipéptidos Inhiben la topoisomerasa II
 Polimixina B, colistin
Nitroimidazoles Distorsiona el ADN
 Metronidazol

b. Interacción entre Antimicrobianos

 Sinergismo: la actividad debida a la combinación de antimicrobianos es mayor a la suma de los efectos


individuales de cada uno de ellos.
 Antagonismo: la acción combinada de dos antimicrobianos, es menor que la del agente más efectivo solo.
 Indiferencia: la acción combinada de dos antimicrobianos no produce un efecto mayor que el predecible
por las actividades individuales de cada uno.

¿Para que usar asociación entre Antimicrobianos?

 Obtener un efecto bactericida máximo: obtener máxima muerte microbiana


 Evitar la aparición de mutantes resistentes
 Tratar una infección polimicrobiana: tratar infecciones por mas de un microorganismo

c. Resistencia Bacteriana a los ATB

 NATURAL: Se transmite hereditariamente y es propia de cada género ó especie.


o Ej: Proteus, Providencia, Morganella son resistente a los antibióticos polipeptídicos

 ADQUIRIDA: Indica que un microorganismo inicialmente sensible a un determinado antibiótico


desarrolla resistencia al mismo.

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o PRIMARIA: Desarrolla resistencia SIN NUNCA HABER


TENIDO contacto con ATB
o SECUNDARIA: Desarrolla resistencia después de haber estado
en tratamiento don ese ATB
 mutación genética
 adquisición de material genético extracromosomal.

d. Mecanismo de Resistencia

A) Impermeabilidad: Antimicrobiano NO puede ingresar a la célula

B) Modificación enzimática del antibiótico: por una enzima alteradora de


ATB que modifica al antibiótico y así ATB NO puede ejercer su función normal

C) Modificación del sitio blanco: Al modificar sitio en lo cual se une ATB luego NO puede ejercer su función

D)Bomba de Eflujo: Elimina al ATB selectril y no puede ingresar a la célula

e. β-lactamasas – principal mecanismo de resistencia a β-lactamicos, principalmente en GRAM (-)


aunque también pueden producirse en Gram + y anaerobios.

 La β-lactamasa es una enzima que hidrolisa al anillo β-lactamico y que por lo tanto inactiva el ATB antes
de su unión a la PBP, su producción puede estar mediada por plásmidos o cromosomas,
 Enzimas que inactivan los antibióticos beta-lactamicos: penicilinas y cefalosporinas

Clasificación de las β-lactamasas

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 β-lactamasas son enzimas capaces de inhibir antibióticos β-lactamicos


 Mecanismo: unión al anillo β-lactamico inhibiendo su accion y por ende el ATB NO se puede unir a la PBP
para inhibir la síntesis del peptidoglicano

 Las β-lactamasas en las bacterias Gram Negativas, se encuentran en el espacio periplásmico, en una
concentración que NO necesitan estar tan elevadas porque dependen de la cantidad de ATB que ingrese al
espacio periplásmico y esta cantidad de ingreso de ATB puede estar dado por el ingreso por porinas y
cuando llegan al espacio periplásmico se une la enzima β-lactamasas al ATB β-lactamico y el mismo NO
puede cumplir su función

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f. INHIBIDORES DE β-LACTAMASA
 Existe inhibidores β-lactamasa que se utilizan juntamente a los ATB β-lactamicos y la función de estos
inhibidores es inhibir a la enzima β-lactamasa y de esta manera el antibiótico β-lactamico puede cumplir
su función.
CARACTERÍSTICAS
 Estructura similar a los antibióticos beta-lactámicos.
 No tienen actividad antibiótica propia, o es muy baja.
 Alta afinidad por beta lactmasas. (Inhibidores “suicidas”)
 Se usan asociados a los antibióticos beta-lactámicos
o Sulbactam
o Acido clavulánico
o Tazobactam

 Otro mecanismo de resistencia estaría asociado al ingreso de ATB, si el ingreso de ATB se altera por la
porina o porque hay menos cantidad de porinas esto afectaría la cantidad de ATB que llega en el sitio
blanco y por ende puede dar resistencia.

 Las bombas de eflujo son bombas que eliminan al ATB hacia el exterior y el mismo NO puede llegar al
sitio blanco .

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