Erika Luisa Mendonca Botechia

BACTERIAS – Clase 3: Bacterias

Entéricas
A. Infecciones Intestinales

Epidemiologia y Prevalencia
 Nivel Mundial: 1-5 millones de muertes al año, en menores de 5 años.
 Argentina: Segunda causa infecciosa + frecuente de muerte en menores de 5 años.
 Población de Riesgo
o Menores a 5 años.
o Ancianos
o IC
o Desnutridos
o Viajeros
o Pacientes en tratamiento con antiácidos

 Cuadro clínico más frecuente diarrea: definida como aumento en la frecuencia de deposiciones mayor a
3 por día y que las heces sean acuosas y blandas.
o Aguda  cuando frecuencia es corta (2-3 días)
o Crónica  extensión mayor de 4 semanas

Mecanismos de Trasmisión

 Directa: por contacto persona-persona (vía fecal-oral)

 Indirecta: agua y alimentos contaminados
Manifestaciones Clínicas de la Diarrea

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Causas MAS Frecuentes de los distintos tipos de diarrea…

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Mecanismos de Patogenicidad – Patógenos Entéricos

 Diversos mecanismos que pueden coexistir
 Produce daño en mucosa intestinal
 Los mecanismos son:
1. Producción de Toxinas: Altera absorción de nutrientes y electrolitos a través del TGI
2. Borrado de Microvellosidades: altera estructura de microvellosidades
3. Invasión del Epitelio Intestinal

Patógenos entéricos abordados hablaremos de 3 familias de Bacilos Gram Negativos.

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2. Familia Enterobacteriaceae
(Productores de enfermedad intestinal en amarillo)

Distribución: Ubicuos
 Microbiota Normal: Intestino animales y humano
 Microbiota Ambiental: Suelo, agua y plantas

a. Generalidades familia Enterobacteriaceae

 Bacilos Gram (-) de bordes Redondeados
 Oxidasa Negativo  ausencia de citocromo oxidasa
 Presencia de LPS: ver estructura antigénica clase BGN II
 Capsula +/-
 Movilidad
o Mayoría móvil con flagelos peritricos
o Inmóviles: Yersina y Shigella
 Anaerobios facultativos: crecen en presencia como en ausencia de O 2
 Crecimiento rápido (excepto algunas excepciones)  37C
 Fermentan Hidratos de Carbono
o Glucosa  Todos
o Lactosa (CEEKS): Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Serratia (rosa medio
MacConkey)

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 Patógenos Primaros u Oportunistas

Escherichia coli - VIROTIPOS

Escherichia Coli – Características

 6 virotipos asociados al cuadro de diarrea  Patógeno Primario  Factor de Virulencia Presente
 Móvil: flagelos peritricos
 Pueden llegar a producir Biofilm
 Presentan fimbrias tipo I que se unen a la manosa produciendo una unión débil reversible
 En general van a ser encontradas en el intestino de los mamíferos
 Forman parte de la flora intestinal
CLASIFICACION DE LA E. COLI
La E. Coli es clasificada de dos maneras, una en serotipos (antígenos O, H y K) y en virotipos (que es una
clasificación basada en factores de virulencia de esa bacteria).
Factores de virulencia (virotipos)
Van a poseer factores de virulencia o virotipos entéricos y no entéricos, o sea, unas van a producir diarrea y
otros no. Las que no producen diarrea van a producir infección del tracto urinario, bacteriemia y meningitis.
Por lo general, hay que saber que los virotipos no entéricos son los únicos que pasan a la sangre produciendo
bacteriemia.
Por ejemplo, una persona que tiene infección del tracto urinario si llega a tener una pielonefritis puede llegar a
pasar a la sangre. Cuando una produce meningitis el factor de virulencia más importante va a ser capsula.

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MECANISMOS DONDE UNA E. COLI EN EL INTESTINO SE CONVIERTE EN POTECIAL

ASESINO
Las E. Coli en nuestra flora normal pueden adquirir informaciones que las hacen transformarse de una
bacteria flora comensal en bacterias de un virotipo entérico, o sea, un virotipo que produzca enfermedad.
Pueden adquirir:
o TRANSPOSÓN: Son genes sarcarines
o ISLA DE PATOGENICIDAD: Son regiones de cromosoma bacteriano que están conservados y que
contienen todos los factores de virulencia necesarios para la enfermedad.
o BACTERIOFAGOS: Virus bacteriano o PLASMIDOS: ADN extracromosomicos

COMO SE DISTRIBUYE ESTAS E. COLI

Las E. coli que están en el INTESTINO DELGADO son:

o ECET: E. Coli enterotoxigénica (donde lo que más producen son toxinas)

o ECEA: E. Coli enteroagregativa (agregar significa ponerse una sobre la otra)
o ECAD: E. Coli agregación difusa
o ECEP: E. Coli enteropatógena

OBS: como regla general, las bacterias que están en intestino delgado van a producir DIARREA ACUOSA,
porque cuando se produce daño en la mucosa del intestino delgado lo que más produce como manifestación es
la perdida de líquido.
Las E. coli que están en el INTESTINO GRUESO son:

 ECEH: E. Coli enterohemorrágica (llama así porque la diarrea tiene sangre)

 ECEI: E. Coli enteroinvasiva (única que invade la mucosa)

OBS: Como regla general, las bacterias que están en intestino grueso van a producir
DIARREA MUCOSANGUINOLENTAS, o sea, DISENTERIA. La infección del intestino
grueso es mucho más hemorrágica, el dando no se manifiesta como perdida de líquido y si
como perdida de sangre y pus.

VIROTIPOS NO ENTERICOS DE E. COLI

(Se pregunta la via de transmisión y la enfermedad que produce)

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 En el cuadro visualizamos las diferentes características de E. coli asociadas a la producción de diarrea.

 Mayoría produce diarrea acuosa excepto: Enterohemorrágica y Enteroinvasiva
 Mayoría actividad a nivel de Intestino delgado
 Mayoría de los casos diagnostico puramente clínico, ya que lo que habría que hacer para demonstrar eses
diferentes tipos de E. coli es la demonstración en los aislamientos de los factores de virulencia que son
difíciles de hacer por lo tanto son validos solamente para los centros de referencia donde pueden hacer
diagnostico de los factores de virulencia que producen estas E. coli.
 Es importante observar que hay 1 tipo principalmente de E. coli enterohemorrágica (ECEH) que se
asocia a una enfermedad NO gastrointestinal como es la producción del SUH que produce una diarrea
sanguinolenta que es muy importante porque en esa se debe hacer diagnostico microbiológico para caso
puntual y características epidemiológicas producidas por este virotipo de E. coli

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 Sitio de Infección: Colon

 Cuadros clínico:
o portación asintomática
o purpura trombocitopénica
o diarreas acuosas con sangre

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o SUH
 Para ejercer este efecto patogénico presenta las siguientes características de virulencia
Factores de Virulencia – E. coli ENTEROHEMORRAGICA (ECEH)

 Puede producir megaplásmido que codifica para fimbria de adherencia que son una hemolisina y una
adhesina
 Mecanismo especial al enterocito que se denomina adherencia y borrado esto se caracteriza por una
intima adherencia de la bacteria a la célula intestinal
 El factor + importante es la producción de verocitotoxina, hay 2 verocitotoxina que son: la 1 (VT1) y la
2 (VT2) que reciben esa denominación por efecto citopatogénico sobre células verus también se
denomina toxina shiga like (STX) por su semejanza biológica y estructural con toxina shiga sintetizada
por Shigella dysenteriae
 Esas toxinas son de tipo AB que están compuestas por 2 subunidades:
o Subunidad A  enzimáticamente activa
o Subunidad B  fijación a un sector de la superficie de células del tubo digestivo
 Una vez que subunidad B se ha fijado permite el ingreso de la subunidad A que ejerce su efecto
produciendo un bloqueo reversible de la síntesis proteica

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 Desde el punto de vista epidemiológico tiene como reservorio principal el tubo digestivo de ganado
vacuno
 También puede tener vía de transmisión directa de persona a persona pacientes infectados
 Hay distintos de E. coli enterohemorrágica de la cual la mas frecuente que produce SUH en argentina es la
O:157
 Hay otros serotipos dentro las cuales la O:155 es la mas frecuente

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Shigella spp.

 Especie prevalente en Argentina: Shigella flexneri

 Género que con mayor frecuencia produce diarrea en niños en argentina
 Reservorio exclusivo: hombre
 Sitio de infección: colon

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 Patogenia a partir de determinados factores de virulencia como son

 Capacidad de Adherencia: a las células de tubo digestivo
 Principal factor: Invasión del epitelio del tracto digestivo
 Especie Shigella dysenteriae puede producir TOXINA SHIGA que tiene la misma actividad de Toxina
shiga like de E. coli que es citotóxica, enterotoxica y neurotóxica y puede llegar a producir SUH

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Salmonella

 S. enteriditis  asociada principalmente con diarrea

 S. typhi  Fiebre tifoidea

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 Las que causan infecciones intestinales son habitualmente denominada salmonela enteriditis
o Reservorio: tubo digestivo de aves (ppal.), ganado, reptiles, peces
o Transmisión: Por ingesta de alimentos contaminados con materia fecal de animales,
principalmente por derivados de aves como pueden ser huevos y derivados crudos de aves
o Produce: Enterocolitis o diarrea
 Por otro lado, salmonella typhi, tiene:
o Único Reservorio: humano infectado
o Transmisión: por contaminación de materia fecal de personas enfermas, convalecientes y
portadores crónicos
o Fiebre Tifoidea: Enfermedad sistémica

Mecanismo Patogenico Salmonella enterica

 La salmonella entérica tiene capacidad de translocar la mucosa colónica

 Esto produce falta de respuesta inflamatoria en la submucosa
 Produce diarrea que se acompaña frecuentemente de respuesta inflamatoria

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 Salmonella typhi produce cuadro sistémico denominado fiebre tifoidea

 Una vez ingerida la salmonella typhi puede generar enfermedad y esto va a depender fundamentalmente
de la cantidad de microorganismos ingeridos, de su virulencia y de los factores dependientes del huésped
 Requiere inocuo superior a 1 millón de gérmenes para que se produzca la enfermedad

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 Una vez que bacterias han superado la barrera gástrica, la salmonella pasa a intestino delgado, se adhiere a
sectores específicos de las vellosidades intestinales y atraviesan la mucosa intestinal
 Luego alcanzan los linfáticos donde se multiplican, pasando a la sangre donde son atrapados por fagocitos
y macrófagos
 Se acumulan en hígado, bazo y medula ósea
 Finalmente, desde ahí vuelven pasar al intestino y a la vesícula biliar
 Las placas de Peyer se inflaman y pueden ulcerarse produciendo ulceras en la mucosa intestinal siendo
eses cuadros clínicos complicaciones que se pueden presentar en algunos casos
 Periodo de Incubación: variable ~ 2 a 3 semanas
 Inicio insidioso donde los síntomas son fiebre, cefalea, puede haber inicialmente diarrea o estreñimiento,
puede acompañarse de náuseas, vómitos, anorexia y erupción maculo-papular
 Complicaciones más graves: perforación intestinal y hemorragias
 También se puede presentar como complicación el estado de portador cronico: que se define como la
presencia de Salmonella typhi en las heces o orina por más de 1 año

DIAGNOSTICO DE DIARREAS AGUDAS

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Diagnostico de Diarreas Agudas

 La mayoría de los casos son
autolimitados y cursan sin diagnostico
microbiológico
 El diagnostico microbiológico es
necesario para conocer epidemiologia y
para implementación de medidas de
control.
o Implica en empleo de técnicas
de laboratorios que NO se
utilizan en Laboratorios de
Rutina
o Limitado a centros de
referencia
o Permite identificar:
 Presencia de toxinas
 Factores de virulencia
 Presencia de fimbrias
especificas

Dado el diagnostico microbiológico de las etiologías bacterianas se realiza por COPROCULTIVO

 Muestra Ideal: Materia fecal fresca recién emitida coleta en frasco estéril de boca ancha
 También se puede utilizar como coprocultivo una porción del material colectado con un hisopo de la
porción mas purulenta que contiene mayor cantidad de moco y sangre que se coloca en medio de
transporte y se conserva a temperatura ambiente
 A partir de esta muestra de materia fecal vamos a realizar observación por examen directo donde se puede
observar si hay leucocitos o hematíes o algunas bacterias móviles como campylobacter o Vibrio
 La presencia de leucocitos en materia fecal indica que proceso es producido por gérmenes de proceso
invasivo como salmonella, Shigella o campylobacter.
 Una vez que realiza la observación directa luego se realiza siembra de materia fecal en medios de
cultivo a partir de los cuales a posteriori se realiza aislamiento y identificación de los patógenos

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 Para el coprocultivo se realiza siembras en medios sólidos y líquidos de enriquecimiento

 Eses medios de cultivo se incuban a 37oC
 A partir del crecimiento de colonias con aspectos característicos se realiza la identificación de patógenos
mediante pruebas bioquímicas y posterior serotipificacion y antibiograma en los casos que sean necesarios

 Para el diagnostico de E. Coli productor de toxina Shiga (Enterohemorrágica) además se deben incluir
estudios en medios especiales
 Coprocultivo se debe sembrar en medio de Agar Mc Conkey Sorbitol (SIN lactosa) ya que la mayoría de
las cepas productoras de toxina shiga son sorbitol negativas.
 Además, se pueden utilizar medios cromogénicos donde E. coli productora de toxina Shiga dan colonias
de aspecto característico
 Una vez que se obtiene los aislamientos en eses medios se hace la tipificación bioquímica y la
identificación con antisueros específicos, dirigidos contra antígeno O157: H7 o los otros antígenos que
presentan dichas cepas de E. Coli productoras de toxina shiga como O26:H11, O103:H2 y otros)
 también se puede hacer la búsqueda directa de toxina shiga en materia fecal de los pacientes o bien una
vez que uno tiene un aislamiento que ha sido identificado por antisueros como el O157 se puede hacer la
búsqueda en eses aislamientos de la producción de toxina o de los genes que codifican para la producción
de toxina, esos procedimientos sobre todo la búsqueda de genes que codifican para la producción de
toxina y factores de patogenicidad, son realizados en LAB de alta complejidad

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 Para el diagnostico de fiebre tifoidea patología producida por salmonella typhi la muestra de elección son
los hemocultivos, ya que presenta positividad mayor al 90% en inicio de los síntomas
 Otra muestra que se puede utilizar para realizar diagnósticos microbiológicos son la materia fecal y la
orina pero estas presentan mucho menor valor diagnostico
 La detección de anticuerpos contra los antígenos H y O por la reacción de Widal-Felix tiene escasa
sensibilidad y especificidad pero puede servir en algunos casos para documentar una infección

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Patógenos Entéricos NO enterobacterias

Familia: Vibrionaceae

 Vibrio cholerae es agente productor de una enfermedad denominada colera

 Es una enfermedad que por lo general se presenta en brotes epidémicos cuyo el único reservorio es el ser
humano infectado
 Particularidad que tiene Vibrio es que puede sobrevivir en agua salada y dulce por lo tanto la principal
fuente de infección es la ingesta de agua o alimentos contaminados con agua contaminada con heces
humanas
 Por ser lavado como frutas y verduras con agua contaminada por eses o bien por la ingesta de pescado o
mariscos provenientes de agua contaminadas

 Si bien V. cholerae presenta varios factores de patogenicidad el mas importante es la producción de una
exotoxina denominada toxina colérica
 Esta toxina es una toxina de tipo AB que presenta 2 subunidades: Subunidad B que se va a unir a
receptores en células epiteliales del intestino y permite que ingrese la subunidad A que es
enzimáticamente activa, esta subunidad A produce un  [AMPc] y esto se traduce en una hipersecreción
de agua y electrolitos dando como resultado diarrea de tipo Acuosa

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 La principal manifestación enfermedad producida por el Vibrio cholerae es la diarrea acuosa

 Diarrea puede ser leve moderada o grave dependiendo del volumen de agua que se pierda por las
deposiciones
 Desde el punto de vista de diagnósticos si se quiere realizar un diagnóstico microbiológico hay que hacer
un coprocultivo en medios especiales que produzcan la recuperación de Vibrio cholerae
 También se puede realizar la detección directa de toxina en heces o vomito

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Familia: Campylobacteriaceae

 Otro género bacilos Gram – que se asocia a infecciones gastrointestinales es el género campylobacter
 Dentro de ese género tenemos 2 especies que son campylobacter jejuni y campylobacter coli importantes
en la producción de diarrea
 Familia campylobacteriaceae no pertenece a la familia Enterobacteriaceae
 Este genero se considera una zoonosis ya que estas bacterias Gram -, curvas, móviles son principalmente
portada por animales principalmente aves de corral
 Por lo tanto, los alimentos de origen animal como pueden ser la carne, los huevos, leche, son fuente
infección para eses microorganismos

 Poseen muchos factores de virulencia que pueden producir

o Diarreas de tipo acuoso en algunos casos
o Diarreas de tipo disentéricas con abundante RI, sangre
o Refleja capacidad de estas bacterias de invadir mucosa intestinal

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