Centrifugas

Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Centrífugas
Suárez Giraldo, Ginna Paola; López Zaraza, Ricardo Andrés; Jaiquel Villamil, Juan David
gsuarezg@unbosque.edu.co, rlopezz@unbosque.edu.co, jjaiquel@unbosque.edu.co

Son aparatos que aplican fuerza centrífuga sostenida (una fuerza producida por rotación) para
impeler la materia hacia afuera del centro de rotación. Este principio es utilizado para separar
partículas en un medio líquido por sedimentación. Este tipo de dispositivos se utiliza sobre todo para
la separación de mezclas heterogéneas, es decir líquido – solidas, y mezclas entre líquidos
insolubles entre sí, con diferentes pesos. [1]
La aplicación más común de este tipo de equipos es la separación de sustancias sólidas a partir de
suspensiones altamente concentradas. Si se usa de esta manera para el tratamiento de las aguas
residuales se consigue la deshidratación y creación de sedimento más o menos consistente
dependiendo de la naturaleza del lodo tratado, y la aceleración en concentrar o aumentar el grosor
de lodo poco concentrado.
Principios físicos:
El principio físico en el que se basa el funcionamiento de la centrífuga se puede explicar mediante el
proceso de sedimentación de la arena en un recipiente de agua. Al agitar la mezcla, la fuerza de
atracción gravitacional actúa sobre la arena con más intensidad que sobre las partículas de agua
aprovechando la diferencia de peso específico entre las sustancias que deben ser separadas; esto
produce que los que los granos de arena sean atraídos al fondo de la vasija y, después de
transcurrido un tiempo, se logra distinguir entre dos capas, una inferior de arena y otra superior de
agua que la cubre. [1]
Este proceso de separación en la centrifugadora es acelerado, ya que sobre las partículas actúa una
fuerza centrífuga que es superior que la fuerza de atracción gravitatoria. En la centrifugadora la
mezcla que se quiere separar se hace girar a gran velocidad en un tambor alrededor de un eje
vertical. La magnitud de la fuerza centrífuga va desde el eje de giro hacia la periferia del tambor, el
cual es un contenedor de forma cilíndrica-cónica. La magnitud de la fuerza generada mediante la
rotación de un motor eléctrico a alta velocidad dependerá del número de revoluciones que se genere,
alcanzando incluso miles de veces la fuerza de la gravedad. [1]
El parámetro mediante el cual se separan las moléculas es el coeficiente de sedimentación (S), de
este coeficiente depende la velocidad con la que se sedimenta. En muchos casos las
macromoléculas se identifican con un número seguido de la letra “S” esto indica el valor del
coeficiente de sedimentación medido en Sverdberg’s (1 S = 1 x 10-13 segundos). [2]
El coeficiente de sedimentación de una molécula se define como la razón entre la velocidad a la que
se sedimenta la molécula (V) y la aceleración centrífuga aplicada (C) como se muestra en (1)
𝐶 2𝑟 2 (𝑑 − 𝑑0 )
𝑆= = (1)
𝑉 2𝜂
Donde r es el radio de la molécula, d es la densidad de la molécula, 𝑑0 y 𝜂 son la densidad y
viscosidad del medio. [3]
Principios de Funcionamiento
Para la separación de la mezcla el producto es introducido en la centrífuga a través de un tubo de
alimentación, cuando se produce la rotación se deposita sobre las paredes internas el solido mientras
que el líquido forma un anillo interno que cuyo grosor estará determinado por los niveles de rebose
de los tubos.
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Al finalizar el proceso de centrifugado se podrán distinguir claramente dos regiones en el recipiente:

• El sedimento que generalmente no tiene una estructura uniforme.
• El centrifugado o flotante que es el líquido a menudo claro. Algunas veces este líquido
puede verse nublado debido a que las partículas que son muy finas no se depositan
fácilmente.
En algunos casos se pueden observar más de dos regiones cuando la solución contiene elementos
de diversas densidades, como aceites. Para la separación de algunos tipos de sólidos es necesaria
la utilización de aditivos naturales o químicos, que facilitan la separación.
La centrifugación se puede dividir en dos grandes grupos el preparativo y el analítico. En el primero
se obtienen grandes cantidades de material a estudiar, mientras que en el segundo se analizan las
moléculas mediante centrifugación. [2]
• Centrifugación preparativa: El objetivo de este tipo de centrifugación es aislar partículas,
células o moléculas para su análisis o utilización posterior. Mediante este tipo se buscar
separar las partículas por medio de la velocidad de sedimentación, la masa o la densidad.
En las centrifugas de este tipo se pueden separar pequeñas partículas como virus,
complejos de proteínas, ARN y ADN plasmídico, entre otras.
• Centrifugación analítica: El objetivo de este tipo de centrifugas es estimar propiedades de
alguna partícula en concreto. Se utiliza para estudiar biomoléculas y obtener información
sobre sus características como masa molecular, densidad, pureza, etc. La
instrumentación de este tipo de dispositivos es similar a la centrifugación preparativa, pero
se requiere de sistemas de detección, cuantificación y observación de resultados. Los
experimentos principales que se realizan con centrifugación analítica son los de velocidad
de sedimentación y equilibrio de sedimentación.
A su vez, la clasificación anterior se puede dividir en:
• Diferencial: El cual se basa en la diferencia de la densidad de las moléculas la cual debe
ser grande para que pueda ser observada al centrifugar. Este tipo de centrifugación se
suele usar para la separación de partículas pero no es útil en la separación de moléculas.
• Centrifugación Zonal: en esta se utiliza el precipitado, que ocurre cuando las partículas
con mayor densidad se sedimentan al fondo. Los componentes que tienen menor
densidad quedarán en el sobrenadante mientras que las partículas con una densidad
similar a la del medio quedarán en una zona intermedia entre el precipitado y el
sobrenadante.
Adicionalmente las centrífugas se pueden clasificar en: [2]
• Centrífugas de baja velocidad o clínicas: son útiles para partículas grandes como
células o precipitados de sales insolubles. Este tipo de centrifugas alcanzan velocidades
que van desde los 2.000 a los 6.000 RPM.
• Centrífugas de alta velocidad: son útiles en la separación de fracciones celulares, pero
insuficientes para la separación de ribosomas, virus o macromoléculas. Este tipo de
centrifugas alcanzan velocidades que van desde los 10.000 a los 18.000 RPM.
• Ultracentrífugas: Las cuales pueden ser analíticas, es decir que generan datos precisos
de propiedades de sedimentación, o preparativas; las cuales se usan para el aislamiento
de partículas de bajo S (Coeficiente de sedimentación). Este tipo de centrifugas alcanzan
velocidades que van desde los 20.000 a los 75.000 RPM.
Los componentes de una centrífuga son: [1] [2]
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

• Tapa: Impide el acceso a las muestras mientras se está ejecutando la acción de

centrifugación.
• Cámara: Espacio físico donde se realiza el proceso de centrifugado.
• Interruptor de encendido: Control el suministro de energía a la centrífuga.
• Marcador de tiempo: Permite controlar el tiempo de centrifugación.
• Tacómetro: Muestra la velocidad a la que gira el rotor.
• Freno: Permite regular la detención de la centrífuga.
• Control de velocidad: Permite regular la velocidad del centrifugado.
• Rotor: Dispositivo que gira y en el cual se colocan los tubos. Pueden ser de tipo angular
(ángulo fijo), basculante o vertical.

• Motor: Es eléctrico y capaz de girar a una alta velocidad (usualmente docenas de veces
por minuto). Permite que la técnica sea ejecutada.
• Cámara de vacío: Es una pieza cóncava que sirve para contener dentro de ella el rotor y
su respectivo soporte que lo une o conecta con el motor.
• Control de Velocidad, Tiempo y Temperatura: Regula la velocidad del dispositivo al
igual que el dispositivo regulador de la temperatura necesaria para la centrifugación de
las muestras.
• En algunos dispositivos, al interior del tambor de la centrífuga se encuentra un tornillo sin
fin el cual transporta hacia el exterior el producto sólido.
Las centrifugas tienen diversos sistemas de control como los de tiempo, temperatura, control de
refrigeración, de velocidad de rotación, entre otros [2].
Los diferentes usos que se dan a las centrífugas son los siguientes:
• Medio ambiente: desecación de lodos para el tratamiento de aguas residuales.
• Industria alimentaria: la separación de la crema de la leche, la eliminación de partículas
de la cerveza o vino (clarificación), la eliminación de aceites y grasas (extracción de aceite
de oliva), extracción de miel (apicultura).
• En laboratorios: recuperar un precipitado, separar elementos en la sangre (glóbulos
rojos, glóbulos blancos, plaquetas suspendidas en plasma sanguíneo), separación de
compuestos celulares para estudio bioquímico o molecular.
• Campo nuclear: enriquecer Uranio con el isótopo ligero 235 U.
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Diagrama de bloques
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Manual de operación
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Construcción La centrífuga consta de una estructura rígida de autosoporte. La carcasa está fabricada
en lámina de aluminio y la parte trasera, en lámina de acero. La parte frontal y la tapa están
fabricadas en plástico ABS. La tapa está fijada a los ejes de las bisagras de acero y, en la parte
frontal, se fija con dos cierres electromagnéticos que bloquean la posible apertura durante el
centrifugado. La carcasa de la cámara de rotación está fabricada en una gruesa lámina de acero. El
recipiente de la cámara de rotación está fabricado en una lámina de acero inoxidable. Los rotores y
los recipientes están fabricados en aluminio, las tapas, en policarbonato y los accesorios reductores,
en polipropileno.
Instalación del rotor y los accesorios

Características de seguridad
Cierre de la tapa
La centrífuga solo puede arrancarse con la tapa cerrada correctamente. Mientras tanto, la tapa puede
abrirse únicamente una vez que el rotor se haya detenido. En caso de apertura de la tapa por una
emergencia durante el funcionamiento, la centrífuga se apagará inmediatamente y el rotor frenará
hasta detenerse por completo.
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Detección de desequilibrio
Cuando las cargas de las cubetas opuestas o los soportes de los rotores estén desequilibradas, la
tracción se apagará durante la aceleración o el funcionamiento de la centrífuga y se mostrará el
mensaje de error.
Verificación del rotor y comprobación de la compatibilidad con un programa cargado
Directamente después del comienzo del centrifugado, una unidad verifica el tipo de rotor aplicado y,
en caso de su incompatibilidad con el tipo indicado en la aplicación o la ausencia de rotor, el proceso
de rotación se deberá detener con la proyección simultánea del mensaje de error. La conformidad
del tipo de rotor se señala con una única señal acústica. En caso de que se marque la opción de
autoidentificación (véase 9.8 Otros), se seleccionará el motor adecuado de forma automática, sin
intervención del usuario.
Inspección en estado de reposo
Es posible abrir la tapa de la centrífuga únicamente con el rotor en estado de reposo. Cuando el rotor
se está deteniendo, el diodo de STOP (Parada) está encendido y se apaga cuando se haya detenido.
(exceptuando la apertura de emergencia de la tapa) (véase p. RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS).
Comprobación de temperatura excesiva
Si la temperatura de la cámara de rotación supera los 50 °C (C0336)/65 °C (C0336R) debido a, por
ejemplo, un fallo de funcionamiento del sistema de refrigeración, la tracción se apagará y se mostrará
un mensaje de error. El reinicio solo es posible después de enfriar el dispositivo.
Elevación de la temperatura (solo C0336)
En centrífugas sin refrigeración, la temperatura de la cámara del rotor, el rotor y la muestra puede
aumentar a una temperatura superior a 40 °C, según el tiempo de funcionamiento, la fuerza g
(FCR)/velocidad y la temperatura ambiente.
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

En la centrífuga, se deberán utilizar los desinfectantes y productos de limpieza generalmente usados

en la atención sanitaria (p. ej., Aerodesina-2000, Lysoformin 3000, Melseptol, Melsept SF,
Sanepidex, Cutasept F).
Esterilización en autoclave
• Los rotores, las cubetas y los soportes circulares se pueden esterilizar en autoclave con
una temperatura de 121 °C durante 20 min (215 kPa), salvo que se especifique lo contrario
en ACCESORIO OPCIONAL.
• Durante la esterilización (en autoclave) por medio de vapor, se deberá tener en cuenta la
resistencia térmica de cada uno de los materiales.
• Durante la esterilización en autoclave, se podrá producir la deformación de los accesorios
(soportes o tapas fabricadas en plástico).
• No esterilice en autoclave los materiales desechables (p. ej., tubos, recipiente citológico).
La vida útil del accesorio depende de la frecuencia de la esterilización en autoclave y del
uso.
• La esterilización en autoclave reduce la vida útil de los componentes de plástico y
mecánicos. Los tubos de PC pueden hacerse inservibles.
• La presión de los recipientes cerrados puede provocar la deformación del plástico o su
explosión.
• Antes de esterilizar en autoclave los rotores y accesorios, lave y aclare detenidamente
con agua destilada.
• No supere nunca la temperatura y el tiempo permitidos en la esterilización en autoclave.
Si desea mantener las juntas herméticas, sustituya los anillos de sellado tras cada
esterilización en autoclave.
 Centrifugas
Instrumentos Biomédicos
Biomedicina I

Referencias

[1] M. Remedios Prado, «Centrífuga,» EcuRed, 31 10 2011. [En línea]. Available:

https://www.ecured.cu/Centrífuga. [Último acceso: 31 08 2020].

[2] A. Herráez, «Centrifugación por velocidad de sedimentación,» Universidad de Alcalá, [En línea].
Available: http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/centrif/centrif-vs.html. [Último acceso: 01
09 2020].

[3] A. Herráez, «Centrifugación por velocidad de sedimentación,» Universidad de Alcalá, [En línea].
Available: http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/centrif/sep-grad.htm. [Último acceso: 01
09 2020].

[4] Sawakinome, «Sawakinome,» [En línea]. Available:

https://es.sawakinome.com/articles/science/difference-between-preparative-and-analytical-
centrifugation.html. [Último acceso: 31 08 2020].

[5] T. -. L. Clínico, «Centrífuga de Laboratorio,» TP - Laboratorio Clínico, 22 03 2015. [En línea].

Available: https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-instrumentos-
de-un-laboratorio-quimico/centrifuga-de-laboratorio.html#. [Último acceso: 22 03 2020].