si REVIA

similitud con Baculoviridae o Asfarviridae homólogos. Estos

resultados sugieren que Mimivirus ocupa una posición
Un virus gigante en las amebas intermedia entre Poxviridae, Iridoviridae, y Phycodnaviridae, con

1 2 1 el que Mimivirus parece compartir la proteína de la cápside

Bernard La Scola, St´ éphane Audic, Catherine Robert,
Vp54 y una glucosamina sintetasa exclusiva de la Paramecium
Liang Jungang, 1 Xavier de Lamballerie, 3 Michel Drancourt, 1 bursaria Chlorella virus. El mimivirus aparece como una rama
Richard Birtles, 1 Jean-Michel Claverie, 2 * Didier Raoult 1 * profunda en el árbol filogenético (Fig. 1C), lo que sugiere una
divergencia temprana de otras familias de virus.

Durante un estudio posterior a un brote de neumonía en 1992, se
aisló un microorganismo que crece en amebas y que se asemeja a
un pequeño coco Gram-positivo (Fig. 1A) del agua de una torre de
enfriamiento en Bradford, Inglaterra. A pesar de los intentos con
varios protocolos de extracción y la reacción en cadena de la
polimerasa de baja rigurosidad, no se obtuvo ningún producto de
amplificación con Universal 16 S
cebadores bacterianos de ADNr ( 1).
Estudio de este microorganismo en Acanthamoeba
polyphaga (2) reveló una morfología viral característica con
partículas maduras de 400 nm de diámetro y rodeadas por una
torres) fueron construidos. Los insertos de plásmido se secuenciaron
desde ambos extremos con secuencias de vector flanqueantes y
cebadores de terminación de colorante. El montaje preliminar
[utilizando el software Phred / Phrap ( 7)] de datos de escopeta de
cobertura 6X confirmaron que el genoma de Mimivirus es de
aproximadamente 800 kbp (734 kbp de datos de secuencia
preliminares con puntuación phrap 20 están disponibles en la
sección WGS de GenBank, número de acceso AABV01000000). Se
identificaron más de 900 marcos de lectura abiertos (ORF) de más
de 100 aminoácidos, lo que representa
82,4% del genoma disponible, un
Aunque se necesita una mayor caracterización, la
ultraestructura icosaédrica de Mimivirus y la típica fase de eclipse
en su ciclo de vida apoyan su naturaleza viral. Además, Mimivirus
carece de genes bacterianos universales, como los que codifican
ARN ribosómico o proteínas, así como otras proteínas
bacterianas ubicuas involucradas en la traducción de proteínas.
La fracción alta (80%, PAGS valor
10 –6)
de ORF sin similitud significativa con otros organismos también es
típico de virus. Finalmente, el genoma de Mimivirus tiene 21
genes que codifican homólogos de proteínas altamente

Descargado de www.sciencemag.org el 29 de marzo de 2014

cápside icosaédrica. Esta estructura es consistente con el
hallazgo de que Mimivirus no se puede filtrar a través de filtros de
tamaño de poro de 0,2 m. No se observó envoltura, pero eran
visibles fibrillas de 80 nm unidas a la cápside (fig. S1). Se observó
un ciclo de desarrollo de virus típico, incluida una fase de eclipse
(fig. S2). Como se asemeja a una bacteria en la tinción de Gram,
se denominó Mimivirus (por microbio que simula) (Fig. 1A).
Digestión de ADN mediante tratamiento con Sal I y Sac II de
partículas purificadas ( 2), seguido de electroforesis en gel de
campo pulsado, demostró que Mimivirus tiene un genoma circular
de ADN bicatenario de aproximadamente 800 pares de kilobases
(kbp). Su genoma es por tanto más grande que los genomas
secuenciados de varias bacterias, incluyendo
Mycoplasma genitalium ( 580 kbp), Ureaplasma
urealyticum ( 752 kbp), Buchnera
sp. (641 kbp) y Wigglesworthia brevipalpis ( 698 kbp) ( 3).
De acuerdo con este gran genoma, las partículas de
Mimivirus tienen un tamaño comparable al de las
bacterias pequeñas como U. urealyticum ( Figura 1B).
Los virus con los genomas más grandes descritos
anteriormente son un Phycodnavirus que infecta Pyramimonas
algas (560 kbp) y fago D de Bacillus megaterium ( 670
kpb) ( 4, 5).
fracción de codificación comparable a otros NCLDV. Las
comparaciones con las bases de datos de secuencias de proteínas
y ADN (GenBank, Swissprot y TrEMBL) no revelaron ningún signo
de contaminación por amebas o de otro tipo.
Siguiendo a Iyer et al. (8), comparamos los ORF de Mimivirus
con proteínas virales únicamente, lo que permite una mayor
sensibilidad al relacionarlo con una de las familias establecidas de
virus de ADN eucariotas grandes ( 2). Identificamos 21 proteínas
Mimivirus con atributos funcionales conocidos y homólogos claros
en al menos una de estas familias de virus, de la siguiente manera:
nueve en Phycodnaviridae, seis en Poxviridae, cinco en Iridoviridae,
y uno en Baculoviridae. Algunos de los genes también exhibieron
menor
conservadas en la mayoría de los NCLDV ( 8). Proponemos que
Mimivirus es miembro de una nueva familia de virus gigantes, el Mimiviridae,
que representa un taxón divergente dentro del grupo NCLDV.
referencias y notas
1. R. Birtles et al., Lancet 349, 925 (1997).
2. Los materiales y métodos están activados Ciencias En línea.
3. Ver www.ncbi.nlm.nih.gov/PMGifs/Genomes/eub_g.
html
4. RA Sandaa et al., Virología 290, 272 (2001).
5. MS Hutson et al., Biopolymers 35, 297 (1995).
6. MHV Van Regenmortel et al., Taxonomía de virus: séptimo
Informe del Comité Internacional de Taxonomía de Virus ( Academic
Press, San Diego, CA, 2000).
7. B. Ewing y col., Genome Res. 8, 175 (1998).
8. LM Iyer y col., J. Virol. 75, 11720 (2001).
9. Se realizó una alineación múltiple con el software T-COFFEE
(igs-server.cnrs-mrs.fr) y el árbol se calculó en el servidor EBI
(www.ebi.ac.uk/clustalw/) con las opciones predeterminadas,
ignorando los espacios, corrigiendo distancias y phylip tree.
Números de acceso: Mimivirus, AF529888; Virus de la viruela
vacuna, NP_619839;
Lymantria dispar nucleopoliedrovirus, NP_047757;
Paramecium bursia chlorella virus 1, NP_048832; virus infeccioso de
necrosis del bazo y del riñón, NP_612246; y virus de la peste porcina
africana, NP_042738.
10. Agradecemos a T. Rowbotham por proporcionar el aislado que ahora se
identifica como Mimivirus; WF Denis por su útil discusión; y B.
Guimelli, A. Carlioz y L. Barrassi por su ayuda técnica. Con el apoyo
de una subvención del Minist`
ère Fran¸çais de l'Am´ énagement du Territoire et
de l'Environnement (convención EN00C13).

El mimivirus es un virus de ADN grande

nucleocitoplasmático (NCLDV). Este grupo de virus Material en línea de apoyo
www.sciencemag.org/cgi/content/full/299/5615/2033/
incluye otras cuatro familias, incluidas las envueltas Poxviridae,
DC1
que infectan a los vertebrados Chordopoxvirinae) e Materiales y métodos
insectos Entomopoxvirinae). Los otros tres también Figs. S1 y S2

son icosaédricos. Iridoviridae

Unidad
1
é des Rickettsies, Universit´ é de la M´ éditerran´ ée,
y Phycodnaviridae son virus acuáticos, y Asfarviridae infectar CNRS UMR 6020, 13385 Marsella, Francia. 2 Laboratorio de Información
Figura 1. (A) Mimivirus (flechas) en citocentrifugado A. polyphaga como partículas Estructural y Genómica, CNRS UPR2589, Marsella, Francia. 3 Unidad
a los vertebrados 6).
Gram-positivas. ( SI) Microscopios electrónicos de Mimivirus y U. urealyticum. ( C) Árbol é des virus ´ émergents (UVE),
Se está llevando a cabo una secuenciación rápida del Universit´ é de la M´ éditerran´ ée, 13385 Marsella, Francia.
filogenético de la alineación de secuencias de subunidades pequeñas de
genoma completo. Dos bibliotecas (inserciones de 5 kb y
ribonucleótido reductasa ( 9). Se obtienen árboles similares con subunidades * A quién debe dirigirse la correspondencia. Correo electrónico:
9 kb obtenidas por cizallamiento mecánico, clonadas en didier.raoult@medecine.univ-mrs.fr ; Jean-Michel.
grandes de ribonucleótido reductasa y topoisomerasa 2.
pcdna 2.1 con Bst XI adapta- Claverie@igs.cnrs-mrs.fr

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