filtración

En la medida en que las condiciones del mercado conducen a los ela-

Jerold Martin, Vicepresidente Senior de Asuntos
Científicos. Pall Life Sciences
boradores de fármacos a buscar formas de reducir los costos, puede
considerarse la reutilización de filtros de grado esterilizante. El autor
examina la re-utilización de filtros de grado esterilizante de mem-
brana hidrofílica o hidrofóbica en aplicaciones de esterilización de
líquidos. El autor también revisa las diferentes metodologías para la
re-utilización y los factores a considerar cuando se decide si re-utilizar
filtros de grado esterilizante y proporciona el estudio de un caso que
pone de relieve los riesgos potenciales y consideraciones para la va-
lidación de procesos en la re-utilización de filtros.

Consideraciones sobre la re-utilización de

filtros de grado esterilizante

L
os filtros de membrana diseñados
para esterilizar líquidos y gases han
sido empleados con éxito en una
amplia gama de aplicaciones de proceso.
La re-utilización de filtros de grado este-
rilizante puede ser tenida en cuenta en la
medida en que las condiciones económicas
y del mercado llevan a los elaboradores
farmacéuticos, de biotecnología y vacunas
a buscar formas de mejorar la rentabilidad
mediante la reducción de costos de proce-
so. Aunque los filtros de grado esterilizante
para líquidos son generalmente desarrolla-
dos y recomendados para uso en un solo
lote o campaña, hay muchas aplicaciones
donde pueden ser sometidos a múltiples
usos (es decir, re-utilizarse). Este artículo se
enfoca sobre la re-utilización de filtros de
grado esterilizante de membrana hidrofílica
o hidrofóbica empleados en aplicaciones
de esterilización de líquidos. El autor revisa
las diferentes metodologías que pueden ser
definidas como re-utilización, debate sobre
los factores a considerar cuando se decide
si re-utilizar los filtros de grado esterilizan-
te, y proporciona el estudio de un caso que
subraya los riesgos potenciales y las consi-
deraciones para la validación de proceso en
aplicaciones de re-utilización de filtros. La
adecuación de la re-utilización de filtros de
grado esterilizante en aplicaciones de este-
rilización de líquidos depende en esencia
de los requisitos de la aplicación específica,
de los estudios de validación básicos del fil-
tro producido realizados por el proveedor,
y la validación del proceso de filtración por
el usuario final. Esta evaluación incluye la
determinación del riesgo de re-utilización
y los efectos que pueden comprometer la
capacidad del filtro para retener completa-
mente las bacterias y, así esterilizar el fluido
de proceso. Se acepta generalmente que
cuando una prueba de integridad física no
destructiva (por ejemplo, una prueba del
tipo de difusión de flujo o de punto de bur-
buja) de un filtro de grado esterilizante se
correlaciona con la retención de bacterias,
puede confiarse en los filtros re-utilizados
para proporcionar un efluente estéril siem-
pre y cuando los mismos continúen de-
mostrando su integridad bajo pruebas re-
petidas. Los métodos de ensayo de flujo
difusivo y punto de burbuja son altamente
efectivos para detectar defectos de fabri-
cación en los filtros, tales como orificios en
las membranas o bypass en los sellos del
cartucho de la membrana debido a instala-
ción inadecuada. Sin embargo, a menudo
se pasa por alto que puede ocurrir la degra-
dación de la membrana bajo condiciones
incompatibles de reutilización que pueden
comprometer las propiedades de retención
de bacterias del filtro. Dichos casos de de-
gradación de la membrana no son modela-
dos por los estudios de validación básicos
realizados por el fabricante y pueden no ser
detectables mediante pruebas de integri-
dad de producción comunes correlaciona-
das con la retención bajo esas condiciones
modelo. El estudio del caso proporcionado
en este artículo ilustra este punto. El uso y
la re-utilización de filtros de membranas de
grado esterilizante, en el rango de 0,2 μm
y aún 0,1 μm, a menudo se produce en
aplicaciones de servicio no esterilizantes de
líquidos tales como las llevadas a cabo para
la reducción o el control de carga biológica
o partículas. En estas aplicaciones, los filtros
pueden o no ser probados para integridad,
debido a que no se espera necesariamente
que eliminen el 100% de las bacterias in-
cidentes con aseguramiento validado (es
decir, esterilizar) y no se pretende que los
filtrados sean estériles. Estos pueden ser
utilizados como prefiltros o como filtros fi-
nales para el control de una carga biológica
que puede ya ser muy baja en el líquido
ingresante. Aunque dichos filtros han sido
validados por sus fabricantes para la eli-
minación cuantitativa de bacterias cuando
están íntegros en condiciones estándares,
el riesgo de falla marginal, o en algunos
casos, grosera, conlleva mucho menos con-
secuencias que un riesgo de falta de esteri-
lidad en la producción de un fármaco estéril
o el mantenimiento de un proceso estéril.
A pesar de la naturaleza menos crítica de
estas aplicaciones, muchos de los riesgos
asociados al uso de filtros de grado esterili-
zante en procesos de esterilización pueden
aplicarse y utilizarse en la evaluación del
riesgo. Los filtros de membrana hidrofóbica
de grado esterilizante para servicios de aire,
gas o ventilación, habitualmente de mem-
brana con poro en el rango de 0,2 μm fabri-

22 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL

cada de politetrafluoroetileno (PTFE) o fluoruro de polivinili-
deno (PVDF) también han sido tradicionalmente reutilizados
en servicios de múltiples lotes con esterilización con vapor
de autoclave o vapor in situ (es decir, vapor in situ (steam in
place - SIP)) entre lotes o campañas. Debido a que este artí-
culo se centra en las aplicaciones de filtración esterilizante de
líquidos, no se abordará la re-utilización de filtros de aire, gas
y ventilación.

Definiciones de re-utilización en servicios de líquidos

En general, uno puede considerar la re-utilización de filtros de
grado esterilizante como aplicada a la filtración de múltiples
lotes de producto o de otro fluido de proceso. Este enfoque
es compatible con las aplicaciones de la re-utilización de fil-
tros esterilizantes de aire, gas y ventilación en campañas o
lotes múltiples. Sin embargo, en el caso de la filtración esteri-
lizante de líquidos, hay muchas interpretaciones de re-utiliza-
ción. Cada interpretación tiene diferentes implicancias sobre
el rendimiento del filtro. Los filtros pueden considerarse como
re-utilizados cuando son empleados para múltiples lotes en
las siguientes instancias:
• Sin eliminación, enjuague, limpieza, sanitización o re-es-
terilización
• Con enjuague entre lotes solamente
• Con enjuague y re-esterilización entre lotes
• Con enjuague, limpieza y re-esterilización entre lotes
• Uso intermitente con secado entre lotes
• Sin limpieza o re-esterilización.
En el primer caso de re-utilización, que se define como “sin
eliminación, enjuague, limpieza, sanitización, o re-esteriliza-
ción”, los filtros son inicialmente esterilizados y dejados en
su lugar sin interferencia a medida que múltiples lotes de lí-
quido pasan a través de ellos. Aunque la carga adicional en
el filtro por la re-utilización es mínima con esta metodología,
un factor de riesgo significativo es que las bacterias del pri-
mer lote y lotes subsiguientes pueden permanecer viables
sobre la membrana durante los ciclos de reutilización. Estas
bacterias podrían potencialmente producir células más pe-
queñas mientras se dividen y migrar a través de los poros más
grandes del medio de filtración hasta contaminar el filtrado
y comprometer la esterilidad de los lotes más tardíos. Esta
penetración bacteriana dependiente del tiempo, a veces de-
nominada “crecimiento a través”, se ha informado para filtros
íntegros de grado esterilizante en el rango de 0,2 μm, incluso
para lotes individuales que son ejecutados durante periodos
de tiempo prolongados (> 8 hs). El resultado no sería diferen-
te si un lote único simplemente fuera subdividido en múltiples
lotes de producto, cada uno procesado a través del mismo fil-
tro instalado en periodos de tiempo más cortos consecutivos.
Este riesgo se hace mayor, sin embargo, cuando se permite
que los filtros permanezcan sin uso por tiempo adicional entre
el procesamiento de lotes consecutivos. El riesgo de penetra-
ción bacteriana dependiente del tiempo no puede ser evalua-
do por pruebas de integridad del filtro porque no hay carga
adicional sobre el filtro.
Con enjuague entre lotes
Un segundo y similar proceso de re-utilización de filtros de
grado esterilizante se produce cuando los filtros son some-
tidos a enjuague con agua u otro solvente entre cada uso

Farmespaña INDUSTRIAL NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 23

filtración
para minimizar el arrastre de componentes
del fluido de proceso desde un producto al
próximo, o un lote al próximo. Si bien este
tipo de reutilización se beneficia de la re-
ducción de la contaminación cruzada lote
a lote y puede retardar la capacidad de
bacterias retenidas para multiplicarse me-
diante la eliminación de algunos nutrientes
derivados del líquido del proceso, el riesgo
de la penetración bacteriana en función del
tiempo persiste. Este riesgo se mantiene
porque la carga biológica viable retenida
puede continuar dividiéndose incluso bajo
condiciones de falta de nutrientes, forman-
do biofilms compuestos de células y secre-
ciones adhesivas derivadas de células que
son difíciles de eliminar por enjuague. Si
la cantidad de la carga biológica del lote
anterior es significativa, o se desarrolla
un biofilm en la membrana del filtro, hay
24 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL
En general, uno puede
considerar la reutilizacion de
filtros de grado esterilizante
como aplicada a la filtracion
de multiples lotes de producto
o de otro fluido de proceso
riesgo adicional de contaminación corrien-
te abajo con derivados bacterianos tales
como endotoxinas, en caso que el líquido
de enjuague pueda presionar las bacterias
retenidas.
Con enjuague entre lotes y re-esterili-
zación
El tercer tipo de re-utilización (enjuague
entre lotes y re-esterilización) puede limi-
tar el riesgo de penetración bacteriana en
función del tiempo extendida, más allá del
tiempo de procesamiento de un lote único
y controlar el posible desarrollo del biofilm.
Sin embargo, si el filtro no es suficiente-
mente enjuagado después de cada ciclo
de re-utilización antes de la re-esterilización
y la introducción del siguiente lote, la re-
esterilización puede degradar bacterias
retenidas y dejar niveles elevados de en-
dotoxinas bacterianas lixiviables y de otros
derivados celulares que pueden contaminar
el lote procesado subsiguientemente. Este
tipo de re-utilización también impone estrés
físico adicional en el filtro durante la re-este-
rilización. La mayoría de los filtros de grado
esterilizante están calificados por su pro-
veedor para soportar varios ciclos de vapor
de autoclave o de SIP sin compromiso para
la integridad o la capacidad de retención de
bacterias. Cabe notar, sin embargo, que las
calificaciones del filtro del proveedor se rea-
lizan generalmente en filtros intactos humedecidos sólo con
agua, sometidos a múltiples ciclos de vapor de laboratorio y, a
continuación, probados. Estas pruebas, aunque indicativas de
la robustez del filtro, no necesariamente modelan las presio-
nes de degradación química adicionales que pueden ocurrir
en el filtro cuando los residuos del producto o del agente de
limpieza no son enjuagados suficientemente antes de some-
ter el filtro al vapor. Las pruebas tampoco toman en cuenta
que el ciclo de esterilización de un usuario final en particular
puede ser más estresante para el filtro que las esterilizaciones
controladas de laboratorio realizadas por el fabricante del fil-
tro para apoyar las garantías del producto.
Con enjuague entre lotes, limpieza y re-esterilización
El cuarto tipo de re-utilización (que incorpora enjuague en-
tre lotes, limpieza y re-esterilización) reduce aún más el riesgo
de contaminación cruzada o lixiviación de derivados de las
bacterias retenidas durante el enjuague y la limpieza. A pe-
sar de la reducción del riesgo de contaminación, este tipo de
reutilización se hace más grave en términos de estrés poten-
cial para el filtro y riesgo de daños al mismo que pueden no
ser detectables mediante las pruebas de integridad de rutina.
Además de enjuagar el líquido de proceso con un solvente
adecuado, este tipo de re-utilización somete al filtro a un lí-
quido de limpieza agresivo destinado a disolver o degradar
los contaminantes retenidos. Debe determinarse la compati-
bilidad de la membrana del filtro y otros materiales compo-
nentes no sólo para el líquido de proceso de lotes en esta
situación sino que también deben considerarse los fluidos y
regímenes de limpieza, el tiempo acumulado de contacto,
etc. Los productos o agentes de limpieza residuales reteni-
dos en el filtro debido a la falta de enjuague después de la
limpieza y antes de la exposición al vapor de re-esterilización
pueden ser más agresivos a la elevada temperatura de las
condiciones del proceso de re-esterilización. Un ejemplo del
impacto potencial de estas condiciones se presenta en el es-
tudio del caso que se describe más adelante en este artículo.
Uso intermitente
La quinta categoría de la re-utilización implica una forma
diferente de estrés ocasionada por el secado de la membrana
entre lotes. Algunas membranas pueden ser dañadas por los
reiterados ciclos de secado, en particular si son secadas en
hornos de aire caliente. Los contaminantes residuales, fluidos
de limpieza, o residuos pueden concentrarse en el filtro du-
rante el secado, ejerciendo aún más estrés químico sobre la
membrana y comprometiendo su funcionalidad sin ser detec-
tados por pruebas de integridad de rutina. En cada uno de
estos casos en que un usuario final considera la reutilización
para economizar en los costos de filtración, corresponde que
todas las condiciones de proceso y reutilización sean valida-
das apropiadamente en cuanto al desempeño del filtro y los
lixiviables. Es de importancia crítica que no se encuentren
comprometidas la capacidad del filtro para retener las bacte-
rias y la capacidad de las pruebas de integridad del filtro para
predecir la integridad del mismo.

Aplicaciones de reutilización en servicios de líquidos

El riesgo de re-utilización, incluyendo la importancia crítica del
proceso de filtración, debe evaluarse para cada aplicación,
además de las condiciones del proceso. Algunos procesos

Farmespaña INDUSTRIAL NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 25

filtración
pueden ser considerados menos críticos
que otros y pueden no requerir los niveles
más altos de aseguramiento de la esterili-
zación. Dichos procesos utilizan filtros de
grado esterilizante para control de partícu-
las y/o de carga biológica, pero no garanti-
zan la esterilidad de los efluentes. En estas
aplicaciones, un usuario puede considerar
la reutilización de aquellos filtros de forma
más agresiva. Otros procesos requieren un
nivel razonable de aseguramiento de la es-
terilización, sugiriendo un mayor riesgo en
la reutilización. Las aplicaciones más críticas
requieren los más altos niveles de garantía
de la esterilización alcanzables y se hacen a
menudo mediante la combinación de filtros
de grado esterilizante con el efluente de
los filtros de control de carga biológica y,
en algunos casos, el uso de la filtración en
serie con doble filtro de grado esterilizante
de 0,2 μm, 0,2 μm a 0,1 μm, o doble de 0,1
μm. Con tal redundancia, puede haber un
equilibrio entre la reutilización de filtros de
corriente aguas arriba y filtros finales de uso
único, o la re-asignación de los filtros finales
del lote previo como filtros corriente arriba
para lotes subsiguientes. En cada caso,
cualquier percepción de ventaja económi-
ca por la reutilización de los filtros debe
sopesarse contra el riesgo de falla, la que
puede ser causada por conexión prematu-
ra, pérdida de la integridad, aumento de la
contaminación de lixiviables o penetración
bacteriana. Ejemplos de aplicaciones para
filtros de grado esterilizante utilizados tanto
como filtros no esterilizantes de control de
carga biológica o de partículas como este-
rilizantes o ambos, incluyen la filtración de:
• Medios de cultivo para fermentadores o
biorreactores de cultivos celulares
• Aditivos para fermentadores o biorreac-
tores
• Suero para medios de cultivos celulares
• Agua de proceso
• Soluciones buffers de cromatografía
• Soluciones buffers de diafiltración
• Solventes
• Desinfectantes
• Reserva de productos intermedios
• Principios activos farmacéuticos no esté-
riles (Active Pharmaceutical Ingredients
- API)
• Granel final de APIs estériles
• Medios de cultivo estériles para valida-
ción de llenado aséptico
• Inyectables esterilizados en forma ter-
minal
• Inyectables estériles llenados aséptica-
mente
26 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL
• Soluciones tópicas y oftálmicas estériles
llenadas asépticamente.
Cada una de estas aplicaciones tiene sus
propios requerimientos y factores de riesgo
para el control de carga biológica y/o fil-
tración esterilizante. Además de las condi-
ciones de reutilización (enjuague, limpieza,
re-esterilización, secado), cada aplicación
de re-utilización debe considerarse inde-
pendientemente basándose en su impor-
tancia crítica para el aseguramiento de la
esterilización y cualquier otra influencia en
el efluente filtrado.
Guías normativas sobre reutilización de
los filtros de grado esterilizante
Directrices de la FDA y la ICH
Una revisión de las guías de la Adminis-
tración de Alimentos y Medicamentos de
los EE.UU. (Food and Drug Administration -
FDA) y la Agencia Europea de Medicamen-
tos (European Medicines Agency - EMEA),
indica que no se tratan específicamente el
uso y la reutilización de los filtros de gra-
do esterilizante para APIs no estériles o
productos farmacéuticos terminados no
estériles1-2. Esta orientación también se
aplicaría a la utilización de filtros de gra-
do esterilizante en la fabricación de AIs no
estériles y APIs de biotecnología desde la
fermentación hasta la purificación corriente
abajo, incluyendo los medios esterilizados
por filtración, aditivos, buffers e interme-
diarios de proceso. Aunque el uso de filtros
de grado esterilizante en la elaboración de
APIs no estériles y fármacos no estériles
(es decir, para el control de carga biológi-
ca) puede considerarse buena práctica de
fabricación actual (cGMP), sólo se propor-
ciona orientación específica para el uso y la
reutilización de los filtros de grado esteri-
lizante como guía para fármacos estériles.
Hay un aspecto de la ICH Q7A: Guía de
Buenas Prácticas de Fabricación de Princi-
pios Activos Farmacéuticos que puede con-
siderarse aplicable para la reutilización de
los filtros de grado esterilizante incluso con
APIs no estériles. ICH Q7A establece: “El
equipo debe estar construido de manera
que las superficies de contacto con las ma-
terias primas, productos intermedios o APIs
no alteren la calidad de los APIs y los pro-
ductos intermedios más allá de la especifi-
caciones oficiales u otras establecidas”2. En
virtud de esta orientación, el impacto po-
tencial de los filtros de grado esterilizante
en el API, incluidos los datos de sustancias
extraíbles que pueden ser proporcionados
por el fabricante del filtro, en los casos en
La Comisión Europea en sus
Guías para Buenas Prácticas
de Fabricación de Productos
Medicinales para Uso Humano
y Veterinario (Anexo I, sobre
la Fabricación de Productos
Medicinales Estériles),
establece: “No debe utilizarse
el mismo filtro durante más de
un día de trabajo a menos que
tal uso hubiera sido validado“
que los filtros son reutilizados en la fabrica-
ción de la API, el usuario final también de-
bería considerar el impacto potencial sobre
el producto de las bacterias retenidas y del
producto o residuos de agente de limpieza
insuficientemente retirados de la superficie
de filtro. Con respecto a la fabricación de
fármacos estériles, puede encontrarse en
21 CFR 211.65 (a) una declaración corres-
pondiente sobre cGMP para los productos
farmacéuticos terminados, que afirma: “El
equipo debe construirse de manera tal que
las superficies de contacto con los compo-
nentes, materiales en proceso, o los fárma-
cos no sean reactivas, aditivas, o absortivas
de modo que puedan alterar la seguridad,
identidad, fuerza, calidad o pureza del fár-
maco más allá de los requisitos oficiales u
otros establecidos“3. La misma considera-
ción se aplicaría para el impacto potencial
de las superficies de los filtros re-utilizados.
La Guía para la Industria de Fármacos Esté-
riles Producidos por Procesamiento Asépti-
co – GMP actuales de la FDA presenta dos
puntos de vista con respecto al uso y re-uti-
lización de los filtros esterilizantes. Para los
fármacos estériles, la guía establece, “Los
filtros esterilizantes deben descartarse de
forma rutinaria después del procesamiento
de un lote único”4. Aunque esta afirmación
parece no apoyar la reutilización de filtros,
es seguida por la premisa, “Sin embargo,
en aquellas instancias en las que el uso re-
petido pueda ser justificado, la validación
del filtro estéril debe incorporar el número
máximo de lotes a ser procesados”. Este
concesión indica que cuando los filtros de
grado esterilizante van a ser reutilizados,
la validación del proceso de esterilización
por filtración debe evaluar el impacto de la
limpieza y la re-esterilización en el proceso
del usuario final. La guía continúa afirman-
do, “Es importante que la prueba de inte-
gridad sea realizada después de la filtración
para detectar cualquier tipo de fugas o perforaciones del filtro
que pudieran haber ocurrido durante la filtración”. Esta guía
se aplica a lotes individuales y campañas de lotes. Es de in-
terés crítico que la guía sugiere que las fugas o perforaciones
del filtro presumiblemente capaces de comprometer el ren-
dimiento de la esterilización serán detectadas por la prueba
de integridad.
Guías europeas
La Comisión Europea en sus Guías para las Buenas Prácti-
cas de Fabricación de Productos Medicinales para Uso Hu-
mano y Veterinario (Anexo I, sobre la Fabricación de Produc-
tos Medicinales Estériles), establece: “No debe utilizarse el
mismo filtro durante más de un día de trabajo a menos que
tal uso hubiera sido validado“5. Si bien esta afirmación pa-
rece permitir un uso prolongado y la reutilización potencial
de filtros, la validación de proceso debe tomar en considera-
ción cualquier efecto de la reutilización sobre el filtro. La guía
continúa afirmando, como en las Guías API, que, “El filtro no
debe afectar el producto por eliminación de componentes
desde el mismo o por la liberación de sustancias hacia él”. De
nuevo, aquí debe considerarse la lixiviación de contaminantes
o residuos de limpieza desde los filtros usados antes de la re-
utilización y debe validarse la ausencia de cualquiera de los
efectos mencionados.
Recomendaciones de la Asociación de Fármacos Paren-
terales (Parenteral Drugs Association - PDA)
Las recomendaciones para la industria sobre la re-utiliza-
ción de filtros de grado esterilizante hasta la fecha ha sido li-
mitada. La primera edición del Informe Técnico 26 de la PDA,
“Filtración de Líquidos de Grado Esterilizante” en 1988 se en-
focó exclusivamente sobre la esterilización del fármaco final y
no abordó la reutilización de filtros de grado esterilizante6. La
revisión de este documento de 2008 considera aplicaciones
de los filtros de grado esterilizante en biotecnología y produc-
tos farmacéuticos elaborados fuera de los EEUU, y establece,
“Los filtros esterilizantes deben descartarse en forma rutinaria
después del procesamiento de un único lote”. Pero la revisión
también amplía la guía de la FDA de procesamiento aséptico
sobre la re-utilización declarando, “Sin embargo, en aquellas
instancias donde el uso repetido pueda ser justificado, la vali-
dación del filtro estéril, incluyendo las pruebas de integridad
del filtro, desafío bacteriano y limpieza, deben incorporar el
número máximo de lotes a ser procesados”6. Como co-autor
de ambos documentos de la PDA, este autor apoya las reco-
mendaciones de ésta de someter a los filtros en la medida
de sus ciclos de re-utilización y de limpieza a un desafío bac-
teriano.
Observancia coercitiva de la FDA
La FDA ha hecho cumplir activamente sus directrices sobre
la re-utilización de filtros bajo GMP. Una Carta de Advertencia
de la FDA a un establecimiento de elaboración de produc-
tos farmacéuticos ha declarado: “Falla en validar el período
extendido de re-utilización de los filtros (editado) utilizados
para varias formulaciones y lotes de diferentes productos
inyectables. Los datos de la validación de enjuague fueron
inadecuados para probar que los componentes residuales del
lote previo fueron eliminados. Su respuesta (al 483) falla en
asegurar que los productos (editado) no contienen residuos
inaceptables de lotes previos de diferentes productos que

Farmespaña INDUSTRIAL NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 27

filtración
utilizaron los mismos filtros. La inspección
encontró datos inadecuados de validación
de enjuague para apoyar que el residuo de
fármaco de los lotes previos fue eliminado.
Estamos preocupados por la posibilidad de
contaminación cruzada”7.
Otra Carta de Advertencia de la FDA a un
elaborador de productos oftálmicos estéri-
les enuncia: “De acuerdo con el informe de
la inspección del establecimiento, Ud. reuti-
liza los filtros esterilizantes en la medida en
que cumplen los estándares de integridad
del filtro del fabricante de (editado) o por
un máximo, según especificación interna,
de 50 re-utilizaciones. Estamos preocupa-
dos acerca de la efectividad de sus filtros
después de haber sido utilizados y auto-
clavados 50 veces. Entendemos que Ud.
realiza una prueba de integridad del filtro
por el método (editado) antes y después de
cada lote. Sin embargo, a fin de justificar
50 re-utilizaciones nos gustaría ver estudios
de validación de retención de bacterias uti-
lizando el producto tanto bajo el uso inicial
del filtro como después de la 50º re-utiliza-
ción. Además, no está claro para nosotros
si Ud. ha realizado pruebas de sustancias
extraíbles y lixiviables del filtro con produc-
to. Si Ud. tiene estos datos, le pedimos que
nos los proporcione. Si no, háganos saber
cuándo nos los podrá proporcionar”8.
Un revisor de la FDA ha declarado pú-
blicamente que la re-utilización de filtros
esterilizantes está “desaconsejada para fár-
macos estériles”, mientras que simultánea-
mente reconoce que la re-utilización de fil-
tros de grado esterilizante es “común en la
producción de API”9. El revisor recomienda,
“La validación de la retención microbiana
debería incorporar procesos múltiples de
esterilización y filtración” y “correlacionar
la validación de la retención microbiana, la
prueba de integridad del filtro siguiente a
múltiples ciclos de esterilización/re-utiliza-
ción y la esterilidad del API/producto”9. La
FDA está actualmente solicitando que los
registros de lote indiquen cuando los filtros
estériles hayan sido previamente re-utiliza-
dos, tal como lo declara en la observación
483 de Octubre de 200810.
Validación de la re-utilización de filtros
Siguiendo las recomendaciones de PDA y
FDA, está indicado un programa de estudio
multifase sobre la retención bacteriana para
la validación de la filtración esterilizante
con filtros reutilizados. El Informe Técnico
26 de PDA7,8 y las guías de procesamiento
aséptico de la FDA4 actualmente requie-
28 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL
ren estudios de carga biológica preliminar
de productos o fluidos de proceso para
determinar la adecuabilidad de conducir
estudios de retención bacteriana sobre
discos de filtro de membrana utilizando
tanto la bacteria de desafío estándar Bre-
vundimonas diminuta (ATCC19146) como
un aislamiento de carga biológica bajo las
condiciones del caso más desfavorable. Es-
tas pruebas de desafío deben incluir lotes
múltiples de membranas de filtros (habi-
tualmente tres) y “al menos uno de los tres
lotes de membrana utilizados para el estu-
dio de validación de retención bacteriana
deben tener un valor de pre-estudio o de
prueba de integridad pre-utilización cerca-
no a las especificaciones de prueba del fa-
bricante” (es decir, representando la mem-
brana menos retentiva)6. Un estudio de esta
extensión debería ser suficiente para de-
mostrar la capacidad de la membrana del
filtro para esterilizar el fármaco o el fluido
de proceso en un solo uso. El estudio, sin
embargo, no debería predecir el desem-
peño del filtro después de ciclos múltiples
de lavado, re-esterilización y re-utilización.
El desafío bacteriano debe realizarse sobre
filtros de producción sujetos a las condicio-
nes actuales, o preferentemente las más
desfavorables que incorporen la extensión
completa de ciclos de limpieza, enjuague,
o re-esterilización y re-utilización.
Los procesos de reutilización que vincu-
lan lotes múltiples, tanto sin enjuague de
filtro entre lotes como con enjuague con
solvente entre lotes, pueden a menudo
llevarse a escala menor y modelarse en la
mesada del laboratorio. Sin embargo, pro-
cesos de re-utilización más complejos, tales
como los que abarcan ciclos múltiples de
limpieza y reesterilización, o secado entre
campañas, son difíciles de simular en el la-
boratorio con filtros de disco, cápsula o aún
de cartucho. En tales casos es preferible su-
plementar las pruebas de desafío de disco
de lote único con una serie de desafíos bac-
terianos conducidos en filtros de cartucho
de producción que hayan sido expuestos
a la extensión completa del proceso actual
de ciclos de uso, limpieza, re-esterilización
y reutilización. Los cartuchos de producción
habituales son apropiados para esta se-
gunda fase dado que la “membrana en el
caso más desfavorable” es evaluada en el
estudio inicial de disco y la prueba de los
cartuchos de producción usados sirve para
confirmar la compatibilidad del proceso tal
como se mide mediante el mantenimiento
de las propiedades de retención bacte-
rianas. Tales pruebas pueden ser el único
medio para determinar si las propiedades
esterilizantes de un filtro permanecen sin
afectarse por las condiciones de los múlti-
ples ciclos de proceso de re-utilización. Las
pruebas de integridad pueden ser insufi-
cientes tal como lo demuestra el siguiente
estudio de un caso.
Estudio de un caso: Riesgo de re-
utilización
El estudio de caso aquí descripto pone de
relieve un ejemplo del riesgo de la reutiliza-
ción de los filtros de esterilización sin la rea-
lización de una validación completa de la
re-utilización a escala de proceso Los deta-
lles de los procesos específicos se excluyen
para mantener la confidencialidad. En este
caso, una empresa farmacéutica estaba uti-
lizando un cartucho filtrante de membrana
de grado esterilizante de gran área, plega-
do, para preparar un API estéril a granel de
antibióticos en un disolvente para el cual el
filtro de membrana seleccionado tenía una
compatibilidad algo limitada. La capacidad
limitada se estimó aceptable y no relacio-
nada. Los filtros se enjuagaron con agua
después de cada uso, seguido de limpieza
con una solución cáustica. El cáustico fue
enjuagado del filtro con agua (el grado de
eliminación no fue cuantificado o validado).
El filtro fue sometido luego a un ciclo de
SIP entre cada uno de los lotes para los
que fue re-utilizado. La integridad del filtro
fue probada antes y después de cada lote
y cumplió consistentemente el límite reco-
mendado de la prueba de integridad para
el número máximo de ciclos de reutilización
especificados.
Las pruebas de esterilidad de cada lote
filtrado no tuvieron nada fuera de lo común,
y no hubo informes sobre falta de esterili-
dad del producto. Para suplementar el nivel
de confianza proporcionado por pruebas de
integridad del filtro y las pruebas de esteri-
lidad de los lotes, el fabricante del fármaco
llevó a cabo un desafío bacteriano en un
filtro que había alcanzado su vida máxima
de reutilización especificada. Siguiendo las
condiciones de desafío basadas en el Mé-
todo de Prueba Estándar ASTM para la De-
terminación de la Retención Bacteriana de
Filtros de Membrana Utilizados para la Fil-
tración de Líquidos11, se demostró la pene-
tración bacteriana en el filtro. Se determinó
que el filtro utilizado ya no cumplía la defi-
nición de un filtro de grado esterilizante (es
decir, el 100% de retención bacteriana de
B. diminuta a un nivel de desafío de > 107
filtración
UFC / cm2 de área efectiva de filtración)4.
La prueba de retención bacteriana del
filtro reutilizado falló a pesar del hecho de
que el filtro continuaba pasando las pruebas
de integridad correlacionadas al 100% de
retención bacteriana bajo condiciones de
desafío comparables llevadas a cabo pre-
viamente en filtros sin uso por el fabricante
del filtro. Se hicieron varias observaciones
claves a partir de este estudio. En primer
lugar, después de la reutilización, el filtro
aún mostraba una alta eficiencia de reten-
ción de bacterias, pero ya no era capaz de
cumplir la retención pretendida del 100%
de B. diminuta y la definición normativa de
filtro de grado esterilizante. En segundo lu-
gar, la baja carga biológica controlada en
el producto, junto con las propiedades de
retención del filtro reducidas, pero todavía
significativas, fueron suficientes para preve-
nir la penetración bacteriana detectable en
el proceso, como lo evidencia el éxito de
las pruebas de esterilidad y la ausencia de
eventos de no esterilidad en el producto.
En tercer lugar, el daño producido al filtro
por el proceso de reutilización no fue de-
tectable por una prueba estándar de inte-
gridad del filtro. Esta tercera observación
puede parecer contradictoria a quienes
creen que la pruebas de integridad del filtro
pueden detectar cualquier caso de poros
agrandados, fugas, o defectos que pueden
comprometer el rendimiento del filtro este-
rilizante. La correlación de dichas pruebas
como flujo difusivo o punto de burbuja se
basan en desafíos bacterianos realizados
en filtros intactos y en membranas o cartu-
chos con daños o defectos reales ocasio-
nados durante la fabricación, manipulación
y la instalación del filtro. La población de
filtros sometida a validación de retención
bacteriana del fabricante para el filtro y los
estudios de correlación de pruebas de inte-
gridad no incluye los filtros con daños cau-
sados por incompatibilidades de proceso
por la reutilización realizada por el usuario
final. Estas incompatibilidades se pueden
producir con limpieza, re-esterilización y re-
utilización no validadas.
Limitaciones de las pruebas de
integridad
Las membranas de los filtros a menudo
son consideradas como capilares cilíndri-
cos múltiples, en los cuales la retención de
bacterias se rige únicamente por el tamaño
de exclusión de las bacterias incidentes que
son más grandes que los poros más gran-
des de la membrana. En virtud de este mo-
30 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL
delo, los ensayos del tipo punto de burbuja La degradación de estas condiciones ha-
pueden indicar la presencia de poros ex- bitualmente no ocurre en un proceso de
cesivamente grandes o defectos (es decir, fabricación validado de membrana y la li-
agujeros, bypass de sello) en la membra- mitación de las pruebas de integridad para
na y las pruebas de flujo difusivo pueden detectar las desviaciones en estas variables
proporcionar una medición cuantitativa del de retención puede ser menospreciada.
flujo que demuestre la ausencia de poros El análisis de la fallas de los cartuchos
excesivamente grandes o defectos. filtrantes plegados re-utilizados identificó
La retención de bacterias a través de finalmente la causa raíz de la penetración
membranas microporosas, sin embargo, del filtro. El daño incurrido durante los
no es únicamente una función de la exclu- múltiples ciclos de reutilización se mani-
sión por tamaño por poros cilíndricos más festó mediante degradación química de
pequeños que la bacteria incidente. Otras la membrana, los que resultó en un adel-
propiedades de las membranas pueden gazamiento que se localizó en la cresta de
contribuir a la retención, tales como la for- los pliegues del cartucho filtrante, como
ma y la tortuosidad de la estructura poro- se muestra en la Figura 1. El daño químico
sa, el espesor de la membrana (es decir, la localizado y el adelgazamiento de las cres-
longitud de la trayectoria del flujo a través tas del pliegue son típicamente indicativos
de los poros de la membrana desde aguas del secado parcial del filtro por medio del
arriba hacia aguas abajo), y las fuerzas de cual los componentes del fluido capaces de
adsorción, que pueden producirse entre las atacar químicamente a la membrana bajo
bacterias y las paredes de cualquier poro lo condiciones de vapor caliente están con-
suficientemente grande para la inserción de centrados en las crestas de los pliegues du-
las bacterias. Los ensayos de tipo de flujo rante la evaporación desde esos puntos. En
difusivo y de punto de burbuja no son com- este caso, la degradación parcial del grosor
pletamente capaces de detectar cambios de la membrana fue atribuida a exposición
en estos factores secundarios de retención. a cáusticos calientes durante la fase de re-
esterilización SIP del ciclo
de re-utilización.
La presencia de cáusticos
residuales previa a la SIP fue
atribuida a enjuague insufi-
ciente del agente cáustico
de limpieza, por medio del
cual la subsiguiente eva-
poración del agua desde
el cartucho antes de la re-
esterilización causó concen-
traciones aumentadas del
cáustico en las crestas del
pliegue durante la fase de
Figura 1: Diagrama de la sección de un filtro de membrana plegado re-esterilización SIP del ci-
mostrando las ubicaciones de degradación parcial del espesor de la
membrana sobre las crestas de los pliegues ocurrida durante la limpieza y clo de re-utilización. La ele-
re-esterilización inadecuadas. vada temperatura del vapor
sobre el cáustico residual
concentrado en las crestas
del pliegue causó luego la
degradación química acele-
rada de la cara de la superfi-
cie en las ubicaciones antes
mencionadas. El compromi-
so en el espesor de la mem-
brana en estas regiones
localizadas fue suficiente
para permitir la penetración
bacteriana. Sin embargo,
dado que el daño no se ex-
Figura 2: El daño de la membrana durante la re-utilización puede ser tendió a toda la membrana
detectable o no detectable mediante las pruebas de integridad de filtros del
tipo de flujo difusivo (Forward-Flow, FF) o punto de burbuja (Bubble Point, BP) (no había agujeros ni poros
filtración
agrandados), y las áreas delgadas estaban
limitadas a un área total muy pequeña en
las crestas de los pliegues, las medidas de
las pruebas del tipo punto de burbuja y la
prueba de difusión de flujo no excedieron
sus límites de aprobación/falla. Como se
ilustra en la Figura 2, la prueba de punto de
burbuja sólo puede detectar defectos del
tipo de un orificio en todo el espesor. Las
pruebas del tipo de flujo difusivo pueden
proporcionar valores que se relacionan en
principio, al espesor de la membrana, pero
fueron incapaces de detectar las limitadas
áreas adelgazadas aisladas en algunas de
las crestas de los pliegues en este caso.
Las áreas delgadas no fueron detectadas
porque no elevaron la difusión del flujo en
forma que excediera el límite de la prueba
de flujo.
Limpieza de cartuchos filtrantes
La limpieza es un tema complejo que va
más allá de un simple enjuague y re-utiliza-
ción. La limpieza involucra la remoción de
todos los materiales residuales del lote pre-
vio del sistema completo, incluyendo todas
la tubuladuras, tanques, válvulas y filtros.
Un flujo de agua para inyección (WFI) (o flu-
jo de solvente puro) siguiente al enjuague
final debe mostrar que el sistema está lim-
pio a un nivel pre-definido de limpieza uti-
lizando métodos analíticos validados. Si se
utiliza cualquier material de limpieza in situ
(clean in place - CIP), éste también debe
ser enjuagado por completo. Debe tenerse
en mente que la limpieza puede conducir
a que el material de los tanques y tubos
corriente arriba sea filtrado y permanezca
sobre los filtros. Esta retención puede dar
como resultado una lixiviación en el próxi-
mo lote de producto. Es responsabilidad
de cada usuario desarrollar y validar un mé-
todo apropiado de limpieza. Los usuarios
deben consultar a los fabricantes de filtros
sobre la adecuabilidad de los protocolos de
limpieza previstos.
Con respecto a la CIP de un filtro utili-
zado para procesamiento de líquidos, hay
varios puntos adicionales a considerar:
• Algunos líquidos de proceso pueden
promover el desarrollo bacteriano, los
cual puede provocar la aparición de en-
dotoxinas pirógenas bacterianas en el
filtro como un producto de degradación
derivado de las células bacterianas rete-
nidas. Los niveles de endotoxina deben
mantenerse bajos. Por consiguiente, el
arrastre de cualquier fluido que promue-
va el crecimiento bacteriano de un ciclo
32 NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 Farmespaña INDUSTRIAL
de producto al próximo es problemático.
• Toda vez que el filtro tiene cualquier
cantidad apreciable de obstrucción (es
decir, bajo caudal o elevada diferencial
de presión), los poros tapados no per-
miten el pasaje fácil de líquido y debido
a esto dificultan el acceso de las solucio-
nes de limpieza a los poros obstruidos.
• El líquido de limpieza fluirá preferente-
mente a través de las trayectorias lim-
pias, dejando los recorridos “más su-
cios” virtualmente sin afectar.
• Algunos residuos de productos y com-
ponentes de soluciones de limpieza
siempre permanecen sobre el filtro en
alguna medida. Cualquier proceso de
limpieza necesita ser definido en térmi-
nos de los límites aceptables de mate-
rial residual lixiviable detectado por una
prueba definida validada.
La limpieza y re-utilización de un filtro en
aplicaciones farmacéuticas puede ser más
o menos dificultosa dependiendo de la
magnitud de los siguientes factores:
• Niveles de carga biológica bacteriana
en la alimentación
• Actividad de apoyo del crecimiento del
producto
• Obstrucción del filtro
• Actividad biológica del producto, com-
ponentes del producto o derivados.
• Resistencia del producto, componentes
del producto o derivados a la solubiliza-
ción
• Adherencia del producto, componentes
del producto o derivados al material del
filtro
• Dificultad para seleccionar un método
aséptico o inhibidor del crecimiento
compatible con el producto para la con-
servación del filtro.
Estos riesgos proporcionan una base ra-
cional para el uso único de filtros descar-
tables. A menudo, cuando se toman en
consideración los riesgos, el fármaco o el
fluido de proceso es significativamente más
costoso que el filtro y el riesgo de la calidad
del producto o la seguridad del paciente
es demasiado grande para hacer que la re-
utilización del filtro sea atractiva.
Conclusión
La re-utilización de cualquier equipo des-
cartable está sujeta a riesgos y peligros que
deben ser controlados para asegurar que el
equipamiento permanece seguro y efectivo
y continúa cumpliendo las especificaciones
del fabricante y los requerimientos para su
uso. Las consideraciones siguientes preten-
den solamente identificar algunos de los
riesgos asociados con la re-utilización de
filtros de grado esterilizante. Estos concep-
tos no deben interpretarse como universal-
mente aplicables en todas las circunstan-
cias, dado que no liberan al usuario de la
responsabilidad completa por la re-utiliza-
ción múltiple de estos productos.
Los sistemas de reprocesamiento para
filtros de grado esterilizante pueden incluir
equipamiento para lavar, limpiar y re-esteri-
lizar los filtros. Cada pieza de equipamiento
utilizada para el reprocesamiento debe ser
apropiadamente diseñada, construida y va-
lidada. Los grados del agua y otros fluidos
utilizados en el reprocesamiento deben es-
pecificarse en el archivo maestro. Todos los
productos químicos utilizados en el repro-
cesamiento y todos los efluentes del filtro,
incluyendo residuos de fármaco, deben ser
manipulados y desechados en cumplimien-
to de los requerimientos locales, nacionales
y regionales para seguridad ambiental y
del operador. La documentación debe re-
gistrar con exactitud los procesos llevados
a cabo y los resultados de las pruebas de
desempeño y seguridad del filtro. Deben
realizarse pruebas de integridad, ausencia
de pirógenos y eliminación de los residuos
de fluidos o derivados previos para filtros
validados antes de la re-utilización. La prue-
ba de validación se ejecuta para establecer
el rendimiento y los límites de tiempo para
filtros esterilizantes re-utilizados en cada
proceso de elaboración.
La validación debe seguir las guías de
la FDA para procesamiento aséptico en el
cual factores tales como el pH, viscosidad,
caudal, presión, temperatura, compatibili-
dad química y efectos de shock hidráulico
deben considerarse cuando se establecen
límites para la re-utilización múltiple de fil-
tros. Además, deben instituirse los contro-
les y mantener los documentos para asegu-
rar que los filtros que contengan residuos
de producto o de agentes de limpieza que
pudieran afectar adversamente la calidad,
seguridad o eficacia del fármaco efluente
no sean utilizados en lotes subsiguientes.
A diferencia de los datos del fabricante
del filtro, los datos de las propiedades de
retención, pirogenicidad y residuos lixivia-
bles del filtro re-utilizado son específicos
para cada usuario de proceso y condiciones
de uso. A pesar de estas precauciones y de
los riesgos involucrados, algunas compa-
ñías farmacéuticas practican actualmente la
re-utilización de filtros esterilizantes porque
han desarrollado protocolos específicos de
producto y proceso para la re-utilización.
Las directrices regulatorias desalientan la
re-utilización de filtros, particularmente
para fármacos estériles. Cuando se justi-
fique, los filtros esterilizantes pueden ser
re-utilizados en algunos casos, pero su
re-utilización debe estar validada para no
comprometer el rendimiento del filtro este-
rilizante o la calidad del filtrado.
Además de los estudios básicos de
validación de esterilización, como se re-
comienda en el Informe Técnico 26 de la
PDA y las guías de procesamiento aséptico
de la FDA, la validación de filtros con re-
utilización múltiple debe incluir el estudio
completo de los filtros expuestos al número
máximo de ciclos de limpieza, re-esteriliza-
ción, secado y reutilización especificados.
Tales pruebas deben incluir desafíos bacte-
rianos así como también pruebas de integri-
dad del filtro. Estas pruebas deben evaluar
la compatibilidad química del filtro con los
fluidos del proceso y las condiciones del ci-
clo de re-utilización, la validez de los límites
Farmespaña INDUSTRIAL NOVIEMBRE/DICIEMBRE11 33
de las pruebas de integridad bajo las condi-
ciones de re-utilización, e incluir un análisis
químico de los efluentes de enjuague para
calificar cualquier lixiviado de residuos de
bacterias, producto o agentes de limpieza.
No se puede confiar únicamente en las
pruebas de integridad para predecir el
rendimiento de esterilización de los filtros
re-utilizados sin una validación adecuada
de desafío bacteriano utilizando cartuchos
filtrantes. Finalmente, los usuarios deben
considerar cuidadosamente el nivel de ries-
go y los costos de validación involucrados
en la re-utilización satisfactoria de filtros
esterilizantes versus la economía aparente
de la re-utilización de filtros cuando se di-
señan y califican procesos de esterilización
por filtración.
Publicado anteriormente en Pharmaceu-
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