Descripción del desarrollo embrionario de

Bocachico (Prochilodus magdalenae)

Description of the embryonic development of Bocachico
(Prochilodus magdalenae)

Anaya-Niño, G; Cordero-Zarza, W; Sierra-Liñán, L; 1Galeano-Martinez, M; Rubio-Bur

gos, D.

Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Biología, Universidad de Córdoba. Email: 1

mariagalemar@gmail.com

ABSTRACT: There is a great interest in the development of fertilization methods for fish
reproduction. For the observation of the embryonic process of Prochilodus magdalenae. The
Bocachico fish were treated with Carpa Pituitary Extract (EPC) according to the degree of
sexual maturity. In this work we study the reproductive process and the embryonic
development of Prochilodus magdalenae, observing step by step the different stages of this
event. The eggs produced by this species are translucent and have a large perivitelline space,
are of the telolecite type, and have disc-shaped meroblastic segmentation. During the study,
the periods of zygote, blastula, gastrula, segmentation and hatching of the larvae were
observed. The different stages of development were recorded successfully. The time
required to carry out this research from the fertilization process to the time of egg hatching,
where the larva breaks the membrane, was 12 and a half hours.

KEY WORDS: Carp pituitary extract, hatching, fertilization, segmentation, telolecito.

RESUMEN: Existe un gran interés en el desarrollo de métodos de fertilización para la

reproducción de peces. Para la observación del proceso embrionario de Prochilodus
magdalenae. Los peces de Bocachico se trataron con Extracto de Pituitaria de Carpa (EPC)
según el grado de madurez sexual. En este trabajo se estudia el proceso reproductivo y el
desarrollo embrionario de Prochilodus magdalenae, observando paso a paso las distintas
etapas de este suceso. Los huevos producidos por esta especie son translúcidos y tienen un
gran espacio perivitelino, son de tipo telolecito, y presentan segmentación meroblástica
discoidal. Durante el estudio se pudieron observar los periodos de cigoto, blástula, gástrula,
segmentación y eclosión de las larvas Las diferentes etapas de desarrollo se registraron con
éxito. El tiempo requerido para llevar a cabo esta investigación desde el proceso de
fecundación hasta llegar al momento de la eclosión del huevo, donde la larva rompe la
membrana, fue de 12 horas y media.

PALABRAS CLAVE: Extracto pituitario de carpa, eclosión, fertilización, segmentación

 INTRODUCCIÓN
El (Prochilodus magdalenae) es la principal
especie de la pesca continental colombiana;
aún se estima que su captura ha disminuido
en 90% en los últimos 40 años; de todos
modos ha sido declarado en peligro crítico
de extinción, debido a su importancia socio
cultural y ecológica generando retos
investigativos, la sobrepesca y deterioro de
su hábitat (Mojica, 2002). El bocachico, al
igual que las otras especies reofílicas de la
cuenca del río Sinú, ha sido afectado por la
construcción de la Hidro eléctrica URRA
( García, 2000). El repoblamiento ha sido
una de las acciones impulsadas para atenuar
estos impactos; lo cual ha incrementado la
demanda de alevinos de esta especie.
Como es sabido el desarrollo embrionario en
peces en cautiverio para tener éxito necesita
de la participación humana, mediante
reproducción inducida, la siguiente
investigación se desarrolló para evidenciar
todo este proceso, desde su inducción
pasando por todos sus estadios hasta la
eclosión, El proceso embriológico de estas
especies se puede ver afectado por distintos
factores, por ejemplo la temperatura, está
estrechamente relacionada con el tiempo de
incubación de los huevos en peces y con su
desarrollo embrionario, generalmente hay
un rango optimo de temperatura que varía en
unos 8° C que pueden influir de manera
positiva o negativamente en el desarrollo del
embrión, siendo el ambiente también uno de
los factores influyentes en el proceso de
fecundación, de manera que posiblemente el
tiempo tardío de la eclosión donde la larva,
sale de la membrana plasmática se debe a
estas condiciones.
El ciclo reproductivo de los peces puede ser
dividido en dos grandes fases: la primera
fase la componen la proliferación,
crecimiento y diferenciación de los gametos
(espermatogénesis y vitelogénesis); mientras
que la maduración y preparación del ovocito
y espermatozoide para la liberación y
fecundación constituyen la segunda fase
(espermiación y maduración final del
ovocito) (Mynolas, 2010). En la mayoría de
los peces la espermatogénesis y la
vitelogénesis se presenta en cautiverio,
cuando las condiciones ambientales y el
manejo del cultivo son adecuados (Okumara,
2003). Existen diferentes tipos de huevo
según sea la organización del vitelo en su
organización pueden ser isolecitos,
centrolecitos y telolecitos(que este se da en
los peces) que en cualquier caso, se da la
primero fase que es la segmentación y se
produce las divisiones celulares y terminan
en un estado de blástula; segundo la
gastrulación en donde las células se
reorganizan y dan lugar a los blastodermos y
por último la diferenciación y organogénesis
lo cual forman los tejidos y órganos los
cuales fijan la estructura del nuevo individuo
para desarrollarse.
DISEÑO METODOLÓGICO
ÁREA DE ESTUDIO
La investigación de desarrollo embrionario
en Prochilodus magdalenae fue desarrollada
el día martes 22 de octubre en el Centro de
Investigación Piscícola (CINPIC) y en el
laboratorio de Botánica de la Universidad de
Córdoba con coordenadas geográficas 8°47
´30.87¨ N, 75°51´45.91¨en el casco urbano
de Montería-Córdoba. En la zona se presenta
un clima cálido tropical, a pesar de ellos
durante la investigación se presentaron
precipitaciones durante el día.
Figura 1: Ubicación geográfica del
laboratorio de Botánica, Universidad de
Córdoba. [Mapa de Montería Colombia en
Google maps]. Recuperado el de 22 de
octubre del 2019.
presentando un peso corporal de 300gr al
encontrarse potencialmente fértiles, se
reconocieron por sus abdomen abultado,
papila urogenital enrojecida y levemente
protruida. Por otra parte la de los machos se
reconoció por la emisión de semen ante la
leve presión de la región abdominal. Para
confirmar el estado de madurez de la especié
La primera inyección se aplicó a las 2:30 pm
inyectando primera dosis 20% y la segunda
inyección se aplicó 9:30 (80% de la dosis).
Figura 2: Inyección de EPC, tomada por
Day rubio
La fertilización en seco consistió en extraer a
la hembra los huevos antes que ocurriera el
desove natural. Con una ligera presión
abdominal, los huevos se fueron depositando
en una vasija, evitando el contacto con el
agua. El semen recolectado por medio de un
masaje abdominal se mezcló con los huevos.
A continuación se agregó agua para que el
ovocito iniciara su proceso de hidratación y
el esperma se activará. Posteriormente se
lavó el exceso de espermatozoides y los
huevos se depositaron en incubadoras
verticales de 200 L a 25 ºC, (Fig.3)
conectadas a un sistema cerrado de agua.
Para la observación del desarrollo
embrionario las muestras fueron
recolectadas primero en intervalos de 15 min
y luego de 30 min, tiempos en HPF, hasta la
eclosión de los huevos y observadas con un
estereoscopio.
RESULTADOS Y DISCUSION
Una vez realizado el proceso de inducción
en la incubadora se observaron los óvulos
fertilizados presentaron un color traslúcido
los cual es una característica favorable para
el estudio en el desarrollo embrionario en
peces. Tienen un periodo de crecimiento de
horas para el caso del pez cebra (Danio
rerio) uno de las especies más utilizados para
identificar las capas embrionarias dentro de
la biología del desarrollo (Gilbert,
2005).Pero esto depende de las condiciones
ambientales que se pueden presentar a la
hora de realizar el desove del pez. Durante el
desarrollo de Prochilodus magdalenae se
presentan diferentes periodos, el primero
denominado periodo de cigoto en donde se
presentó a los 00:34 HPF, se comenzó a
distinguir el polo animal y el vegetal,
además de otras partes observadas (Fig.3a).
Posteriormente pasados 01:23 HPF se
observa que ocurre una segmentación se ven
2 blastómeros se pueden observar en la
(fig.4b) . Se presentó el periodo de
segmentación o clivaje que se caracteriza
por una serie de divisiones rápidas que
llevan a un aumento en el número de
blastómeros y a una disminución del tamaño
de las mismas (Gilbert, 2005). En donde se
presentan varias divisiones consecutivas del
polo animal, observándose la discoblástula
con 4 segmentaciones y ocho blastómeras,
presentando dos planos verticales y paralelos
al plano del primer ciclo de división (Fig.5c)
Transcurridos 01:47 HPF, se presentó ocho
segmentaciones y 16 blastómeras (Fig.6d).
La división se dio en cuatro planos verticales
y paralelo al plano de la segunda división.
Por último y para terminar este periodo de
clivaje y darle inicio al periodo de
blastulación transcurridos 02:03 HPF se
identificó el blastodisco dado que no es
posible enumerar el número de blastómeras
porque una cubre a la otra, pueden ser de 32
a 64 células que presentan. Además de
observar una pequeña “invaginación” en el
polo animal, dándose en un plano horizontal
(Botta, 2010) (Fig.7e).
Los cigotos de los peces tienen solo un
pequeña área del cigoto que está libre de
vitelo es por esto que fue observado el
pequeño espacio perivitelino y por lo tanto
las divisiones celulares se producen
solamente en un pequeño disco del
citoplasma dando origen a un patrón de
segmentación discoidal (Gilbert, 2005). Por
lo tanto la primera y segunda segmentación
fueron de tipo longitudinal la cuarta
presento un segmentación meridional y la
ultima de tipo ecuatorial.
Se identificó lo inicios del desarrollo y
desenlace de la blastulación (Fig.7e)
entendiéndose esto como la fase que le sigue
a la segmentación y antecede a la gástrula,
dando inicio a dicho proceso, cuando el
número de divisiones de los blastómeros
supera las 64 segmentaciones.(Gilbert 2005).
Partiendo de esto, se evidencia el comienzo
del proceso mencionado, para analizarlo, se
observó la muestra luego de las HPF casos
similares fueron las siguientes imágenes, se
percibió la blástula por primera vez luego de
las segmentaciones anteriores. En la imagen
observada a las 02:03 HPF, demuestra los
inicios de la epibólia, a las (Fig.8f) con un
aumento estimado del 10%
aproximadamente de la movilidad de la
epibólia, a partir de la examinación de la
muestra, se afirmó que el porcentaje de
desplazamiento de la epibólia era del 20%
este fue en crecimiento y finalmente hasta
llegar a un 50% aproximadamente demos-
trando la finalización de la etapa de
blastulación, para da pie a la gastrulación.
Terminado el proceso de blastulación se
inició a una nueva etapa llamada gastru-
lación, donde los blastómeros se organizan
para formar la epibólia que recubre la célula
huevo. Al haber trascurrido 4 horas desde la
fecundación se puede observar como la
epibólia lleva un 80% recubierto del huevo
indicando que muy pronto se formara el
tapón vitelino y algunos rasgos de la zona
cefálica y caudal, siendo esta la última fase
de este proceso y dando origen a la
organogénesis. Donde observaron cuatro
etapas una inicial cuando se dio el
movimiento progresivo de células hacia el
polo vegetal (epibólia), la siguiente cuando
la epibólia llegó al 50%, luego cuando el
porcentaje de epibólia llegó al 80-95% (se
observa el tapón vitelino) (Fig.5h) y en la
última etapa se observó el cierre del
blastoporo, haciéndose más evidente la
diferenciación del eje cráneocaudal. (Díaz et
al, 2010).
Se pudo notar que se evidencio una etapa
muy fundamental para el embrión en
formación llamada organogénesis, donde se
comenzarán a diferencias más detallada-
mente las características específicas del
organismo (Fig.9g) Para la (Fig.10h) se
logra observar las somitas, características
que lo definen como vertebrado: notocorda,
somitas, cola post natal o zona caudal
(Botero, 2004)
Transcurridos 11 horas HPF del huevo, se
pudo observar que la mayoría de las larvas
presentan movimiento fuerte y rectilíneo
(Fig.11i) a las 12 horas se observaron larvas
tratando de eclosionar(Fig.12j), solo el 80 a
90% logra romper la membrana externa a las
08:46 HPF, dado a que ya las larvas
presentan estructuras más desarrolladas y
fuertes (Fig.12j)
a b

Ep pv

pa
pv

00:34 HPF 00:57 HPF

c d

b
pv

b
v

01:23 HPF 01:47 HPF

e f
me

db v

02:03 HPF 02:38 HPF

Figura 3: (ep): espacio perivitelino, (pv): polo vegetal, (pa): polo animal, (b): blastómeras, (v): vitelo,
(db): disco blástula, (me): movimiento epibólia Fuente: M, Galeano fotos tomadas en estereoscopio con
objetivo de 25x
b
g h

bp
tv
v

bp 03:29 HPF 04:29 HPF

vo
j zc
i vot vot
sm

v sm
pa
vo
zc pa

05:23 HPF 08:46 HPF

Fig. 4: (bp): borde periblasto. (v): vitelo, (tv): tapón vitelino, (vot): vesícula otica, (vo): vesicula óptica, (zc):
zona cefálica, (sm): somitas. Fuente: M, Galeano fotos tomadas en estereoscopio con objetivo de 32x
Letra HPF Etapa del desarrollo
Luego que las células del blastodermo han
cubierto cerca de la mitad de la célula
vitelínica del pez (y más temprano en huevos
de pez con vitelos más grandes), se produce
un engrosamiento a lo largo del margen del
blastodermo en epibolización. Este
engrosamiento es denominado anillo
germinal, y está compuesto de una capa
superficial, el epiblasto, y de una capa
interna, el hipoblasto. No se comprende
cómo se produce el hipoblasto. Algunos
grupos de investigadores afirman que el
hipoblasto se forma por la involución de las
células superficiales a partir del blastodermo
bajo la margen seguida por su migración
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
¿Qué función cumple el EPC en la práctica
desarrollada?
El extracto pituitario de carpa (EPC) es una
dosis que se le aplica al pez en estado de
maduración, se aplica según el peso del
animal. Tiene como función la reproducción
inducida, hormonas liberadoras de hormonas
luteinizante (HLHL), gonadotropina
responsable de la liberación de hormona
estimulante del folículo (FSH) y de hormona
(lH) de la pituitaria anterior. Intervienen en
la función de las gónadas (testículos y
ovarios).
¿Explique la influencia de las variables
ambientales sobre el proceso de maduración
gonadal en peces?
La menor sobrevivencia en las etapas de
eclosión y larval se presentan
principalmente por la deficiente calidad
físico-química del agua o específicamente
las fluctuaciones de temperatura y el nivel de
turbidez alto que afecta el proceso de
fertilización y eclosión.
¿Detalle el proceso de formación de las
capas embrionarias en peces?
hacia el polo animal.
Una vez que se ha formado el hipoblasto, las
células del epiblasto y del hipoblasto se
intercalan sobre el futuro lado dorsal del
embrión para formar el engrosamiento
localizado, el escudo embrionario. Como se
verá, este escudo embrionario es
funcionalmente equivalente al labio dorsal
del blastoporo de anfibios, debido a que
puede organizar un eje embrionario
secundario cuando es trasplantado al embrión
huésped.(Gilbert, 2005).
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen al profesor de
Biología del Desarrollo Carlos Nisperuza
cuando se llevó a cabo este estudio, a
Argemiro Cordero por su ayuda técnica y a
todo el equipo del (CINPIC) y a la
Universidad de Córdoba por su apoyo en
esta investigación.
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