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Investigación Original

Micropropagación y crioconservación de plantas de interés económico. Abril 2023

Micropropagación y crioconservación de plantas de


interés económico.
Guillermo Eduardo Paniagua Acevedo1
Universidad Dr. José Matías Delgado, Facultad de Agricultura e Investigación Agrícola “Julia Hill de O ‘Sullivan”. Km. 8 1/2
carretera a Santa Tecla, Antiguo Cuscatlán, La Libertad, El Salvador, C.A.

Resumen: Esta investigación pretende evaluar el potencial de germinación y el


conocimiento en general del proceso de crioconservación, así como la importancia
de características puntuales de la célula que influyen directamente en la viabilidad
del producto que se somete a congelación para lograr una técnica exitosa. Para
lograr dicho propósito, la investigación se basará en los conocimientos de
propiedades fisicoquímicas del tejido y la célula, siendo este el proceso afectado
por diferentes variables como la permeabilidad y el volumen osmóticamente
inactivo. A medida que aumenta la población mundial, las fronteras agrícolas y
urbanas se expanden cada vez más, ocupando el hábitat natural de numerosas
especies de plantas. Este fenómeno está provocando enormes pérdidas en la
diversidad genética de las especies de plantas nativas muchas veces llegando a su
completa extinción. Otro factor que favorece el desequilibrio en el mantenimiento de
la variabilidad genética es el uso masivo en agricultura de especies seleccionadas,
por su potencial nutricional, alta productividad o resistencia a enfermedades y estrés
ambiental, esto, inherentemente tiene un impacto en la economía del mundo y
suscita un llamado a la atención para salvaguardar la diversidad de cultivos para un
futuro con seguridad alimentaria.
Palabras clave: Crioconservación, propiedades fisicoquímicas, variabilidad genética

Micropropagation and cryopreservation of economic interest


plants.

Abstract: This investigation intends to evaluate the germination potential and the
general knowledge of the cryopreservation process, as well as the importance of
specific characteristics of the cell that directly influence the viability of the product
that is subjected to freezing to achieve a technique successful. To achieve this
purpose, the research will be based on knowledge of the physicochemical properties
of the tissue or cell, this being the process affected by different variables such as
permeability and osmotically inactive volume. As the world's population increases,
the agricultural and urban frontiers expand more and more, occupying the natural
habitat of numerous plant species. This phenomenon is causing enormous losses in

1
Estudiante de la carrera de Ingeniería en Alimentos, Facultad de Agricultura e Investigación Agrícola (FAIA),
Universidad Dr. José Matías Delgado. e-mail: 201800736@ujmd.edu.sv

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Micropropagación y crioconservación de plantas de interés económico.

the genetic diversity of native plant species, often leading to their complete
extinction. Another factor that favors the imbalance in the maintenance of genetic
variability is the massive use in agriculture of selected species, due to their nutritional
potential, high productivity or resistance to diseases and environmental stress, this
inherently has an impact on the world economy and raises a call for attention to
safeguard crop diversity for a future with food security.

Keywords: Cryopreservation, physicochemical properties, genetic variability

1. Introducción: La ejecución de programas de mejoramiento genético para


la creación de nuevos cultivares que satisfagan las demandas agroindustriales está
estrechamente relacionados con el mantenimiento de los accesos almacenados en
las diferentes Bases de Datos Germoplasma salvaguardado en varias instituciones.
Actualmente, el mantenimiento el germoplasma se realiza con mayor frecuencia a
través del banco de semillas y colecciones de campo. Sin embargo, estas formas
de mantenimiento están lejos de ser satisfacer las necesidades actuales y futuras
debido al costo de mantenimiento, además del alto riesgo de contaminación y
pérdida de viabilidad durante muchos años, en el caso de los bancos de semillas y
también por la acción de plagas, enfermedades o condiciones ambientales adversas
a las que están expuestas las colecciones de campo.

En la actualidad existen dos grandes centros de almacenamiento de germoplasma,


uno de estos ubicado en Colombia, el edificio Semillas del Futuro, administrado por
la Alianza de Bioversity International y el Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT), ubicado en Palmira, Valle del Cauca, el cual alberga más de 65.000
variedades de cultivos contribuyendo a su conservación y proporcionando, además,
material genético sin costo para que los investigadores cultiven nuevas variedades
resistentes al cambio climático, promoviendo así la innovación científica.

Otro de los centros de almacenamiento de germoplasma se encuentra en Noruega,


La Bóveda Global de Semillas de Svalbard funciona como la caja de seguridad de
un banco, pero para semillas. Es un depósito donde resguardar un ejemplar de cada
semilla existente en los bancos genéticos de todos los países para ser replicada en
caso de desaparición a causa de catástrofes naturales o conflictos bélicos. Es una
contribución noruega a la biodiversidad del planeta y una forma de asegurar el
abastecimiento de alimentos para el mundo. A diferencia del banco de germoplasma
ubicado en Colombia, la bóveda de Noruega no es un banco genético al cual los
investigadores o interesados pueden recurrir, sino que está pensado para que los
bancos genéticos nacionales o regionales guarden allí sus semillas para ser
replicadas en caso de que se pierdan como consecuencia de catástrofes naturales
o conflictos bélicos. Funciona como la caja de seguridad de un banco.
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En El Salvador se cuenta con una reserva de Germoplasma o bien llamado “Banco


de Germoplasma” o “Banco de Semillas del CENTA” este último, por sus siglas en
español: Centro Nacional de Tecnología Agropecuaria y Forestal, este recinto está
destinado a la conservación de la diversidad genética de cultivos y sus especies
silvestres, especies autóctonas o en peligro de extinción, medicinales, alimenticias
subutilizadas de El Salvador; y se encarga de localizar, recolectar y conservar los
recursos fitogenéticos de interés prioritario para la sociedad. Este banco conserva
342 especies distribuidas en 193 especies medicinales, aromáticas y alimenticias,
75 especies silvestres de cultivos y 74 cultivos.
2. Materiales y Métodos

Podemos clasificarlos de acuerdo con la velocidad de congelamiento y


descongelamiento en protocolos de congelación lenta-descongelación lenta,
congelación lenta-descongelación rápida en las cuales la adición del crioprotector
suele hacerse por pasos y el descenso de la temperatura se realiza lentamente en
un congelador programable. La descongelación rápida se hace rápidamente a
temperatura ambiente o en un baño de agua a 30°C para evitar la recristalización.

La congelación ultrarrápida fue originalmente descrita para la congelación de


embriones, por Trouson en 1986. Implica la rápida deshidratación celular, utilizando
altas concentraciones de crioprotector, usualmente DMSO y sacarosa, seguida de
inmersión en nitrógeno líquido.

La vitrificación tampoco requiere la utilización de un congelador programable; se


basa en la congelación rápida en una mezcla de altas concentraciones de
crioprotectores, que a bajas temperaturas aumentan su viscosidad formando un
sólido amorfo, sin formación de hielo.

2.1 Descripción general del cultivo de tejidos en la conservación de


germoplasma vegetal
Según IBPGR (1991), el germoplasma es el material que constituye la base física
de herencia y se transmite de una generación a otra a través de las células
reproductivo. En una visión más amplia, el germoplasma puede ser considerado la
suma total de los materiales hereditarios de una especie. Otros, todavía definen el
germoplasma como un individuo o clon que representa una especie o cultivo que se
puede mantener en un reservorio.
Se han adoptado varios procedimientos relacionados con la biotecnología con grado
variable de éxito en la mejora de varias especies de interés económico: 1)
micropropagación; 2) la regeneración de híbridos somáticos, tanto intergenéricos

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como interespecíficos, por la fusión de protoplastos; 3) la obtención de haploides;


4) selección in vitro de variantes de somaclones; y 5) transformación.
Además, las técnicas de propagación vegetativa in vitro son adecuadas para
programa de introducción, almacenamiento e intercambio de germoplasma,
contribuyendo a prevenir la pérdida de variabilidad genética. Sin embargo, el uso de
biotecnología en el mejoramiento genético de plantas depende de protocolos de
regeneración in vitro a partir de cultivo de células y/o tejidos, incluyendo
embriogénesis somática y superbrotación.
2.2 Conservación, preservación e intercambio de germoplasma
Aunque los términos conservación y preservación son ampliamente utilizados, vale
la pena resaltar la diferencia entre ellos. Frankel y Soule (1981) propusieron que La
conservación es un conjunto de políticas y programas diseñados para mantener a
largo plazo de las comunidades en condiciones potenciales para continuar
evolución, mientras que la preservación es el mantenimiento de individuos o grupos
sin el efecto de evolución.
La variación genética se puede mantener bajo diferentes sistemas y metodologías.
Sin embargo, entre las metodologías más destacadas para los recursos genéticos
son las reservas genéticas para la conservación de la diversidad genética in situ y
las colecciones de germoplasma para la conservación de la variabilidad genética ex
situ, en qué individuos, semillas, embriones u otras estructuras pueden mantenerse
plantas en diferentes condiciones, dependiendo del material utilizado: en el campo
o en invernaderos, en cámaras secas a baja temperatura, en cultivo con bajas
concentraciones salinas (conservación in vitro) o criopreservado.
La conservación de la variación genética de las muestras mantenidas fuera de su
ambiente natural en colecciones de germoplasma in situ, representa un desafío
permanente para evitar alteraciones genéticas en la muestra poblacional sometida
al paro o “congelación” del proceso evolutivo que actuó sobre la población en el
Tiempo de muestreo. Por otro lado, cuando la conservación de las muestras sea
llevada a cabo en su entorno natural, el proceso evolutivo continúa y con él nuevas
formas de variación genética pueden ocurrir y ser muestreadas (Frankel, 1981).
Según Pascual et al. (1997), el Banco de Germoplasma destinado a la preservación
de la máxima variabilidad genética vegetal existente, desde nuevos cultivares hasta
especies silvestres, surgió con el objetivo de:
▪ conservar las fuentes genéticas para uso futuro en mejoramiento y estudios
▪ genética;
▪ mantener colecciones de diferentes genotipos debidamente caracterizadas y
▪ evaluados para su uso en programas de mejoramiento y,

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▪ prevenir y evitar la pérdida de recursos genéticos.


Deben tenerse en cuenta algunos criterios a la hora de elegir los cultivos y
materiales a ser conservados:
1) importancia económica y social; 2) amenaza de pérdida de variabilidad
genética; 3) necesidad de uso en mejoramiento genético y 4) factibilidad de
conservar el germoplasma recolectado
2.3 Conservación in vitro
La conservación in vitro de material genético es una técnica prometedora para
mantenimiento de genes, que podría estar fácilmente disponible. mantenerse al día
plantas o segmentos de estas de diferentes orígenes y genotipos en condiciones de
crecimiento mínimo o incluso en criopreservación, se puede tener de estos
materiales para su uso en mejoramiento genético, pudiendo utilizarlo para
intercambio entre instituciones del país o del exterior sin riesgos de estar llevando
plagas o enfermedades a nuevas regiones; otra ventaja es el pequeño espacio
necesario para conservar una gran cantidad de genotipos.
La conservación de germoplasma a través de la preservación in vitro es
especialmente útil para especies con semillas recalcitrantes, como la mayoría
especies perennes tropicales, que pierden su viabilidad en un corto período de
tiempo en los sistemas de conservación convencionales. Además, esta forma de la
conservación es importante para las especies de propagación vegetativa que,
produciendo semillas o no, presentan alta segregación genética debido al alto grado
de heterocigosidad, implican la necesidad de mantener las plantas en Bancos
Activos del germoplasma (BAG) es aumentando el costo de conservación de las
muestras. La conservación in vitro presenta algunas desventajas como: necesidad
de subculturas periódicos, riesgo de pérdida por contaminación, riesgo de daño a
equipo de control posibilidad ambiental de variación genética en el tiempo cultivo e
inviabilidad del material.
Existe un gran número de especies vegetales cuya conservación es accesible a
técnicas in vitro (Tabla 1); sin embargo, se debe considerar cuidadosamente las
ventajas y desventajas de la conservación in vitro para cada caso concreto (ROCA
et al., 1991)
El material vegetativo utilizado en este tipo de cultivo es el explanto, que puede ser
tomados de diferentes estructuras vegetales. Se debe preferir el material
genéticamente modificado. estable, como el meristemo. Callos, anteras, células
suspendidas y protoplastos, son materiales considerados inestables y, por tanto, no
se utilizan en la preservación.

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Tabla 1. Géneros que pueden ser cultivados in vitro


Cultivos Géneros
Propagados Vegetativamente
Solanum Olea
Manihot Ananas
Musa Ficus
Ipomoea Agave
Xanthosoma Vainilla
Colocasia Allium
Dioscorea Piper
Canna Saccharum
Propagados Sexualmente Vitis Tubérculo andinos
Citrus Anacaradium
Elaeis Theobroma
Coccus Hevea
Malus Chinchona
Persea Cinnamonium
Mangifera Coffea
Macadamia Camellia
Durio Artocarpus
Fuente: Roca et al (1991)

Existen dos formas de conservación in vitro, una limitando el crecimiento hasta la


tasa mínima y la otra según la supresión total del crecimiento y metabolismo celular
(criopreservación).
3. Resultados y Discusión
Dependiendo de las características específicas de cada germoplasma vegetal,
puede se pueden utilizar una o más formas de conservación. En general y para
situar mejor la conservación de germoplasma in vitro, las diversas formas en que se
puede hacer.
3.1 Crecimiento mínimo o crecimiento cero
El cultivo de tejidos in vitro, también conocido como colección activa, es otra opción
para la conservación de especies con semillas recalcitrantes con alta
heterocigosidad y propagación vegetativa.
El rápido crecimiento de los cultivos requiere más mano de obra y aumenta la
posibilidad de pérdidas por accidentes de contaminación microbiana durante el
trasplante continuo de las subculturas, siendo necesario, pues, reducir al minimizar
la frecuencia de subcultivos y minimizar la posibilidad de variación genética.
Para mantener las plantas con un crecimiento mínimo o nulo, algunas se utilizan
técnicas (PASQUAL, 1998):

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▪ Cambio en las condiciones ambientales, especialmente en la reducción de la


temperatura en el cuarto de cultivo a 0-6°C (especies templadas) y para 15-
20ºC (especies de clima tropical y subtropical. Puede utilizarse también, la
reducción de la presión atmosférica y la disponibilidad de oxígeno
provocando una reducción en la tasa de crecimiento.

▪ Modificación en el medio de cultivo básico, omitiendo o reduciendo algunos


factores esenciales para el crecimiento normal. Duplicar la concentración de
sacarosa en el medio por encima del 3% del medio estándar, puede aumentar
la longevidad de la planta in vitro sometida a reducción del crecimiento.

▪ El uso de retardadores del crecimiento como el ácido abscísico o efecto


osmótico, como manitol y sorbitol.

▪ Recubrimiento de estructuras con una capa de aceite mineral, reduciendo la


de crecimiento y de ahí la necesidad de frecuentes subcultivos.
El almacenamiento de germoplasma de crecimiento lento es un método viable para
mantener grandes colecciones en un espacio pequeño, libre de infestaciones de
plagas y enfermedades, Sin embargo, el crecimiento lento está limitado en dos
aspectos: primero, no se considera muy seguro para los sistemas que no son de
celdas organizada e insensible. Aunque se han reportado algunos éxitos en
conservación, la posibilidad de ocurrencia de variación somaclonal en estos los
cultivos deben ser considerados, presentando un gran riesgo; en segundo lugar, las
condiciones no se consideran lo suficientemente estables para la conservación de
germoplasma a largo plazo, incluso para cultivos de explantes aéreos (IBPGR,
1983). Se necesita una tecnología análoga al almacenamiento de semillas
ortodoxas secas a baja temperatura; solo para crioconservación, conservación por
congelación a la temperatura del nitrógeno líquido (-196ºC) o cercano a esta
temperatura, ofrece esta posibilidad (WITHERS, 1998).
3.2 Crioconservación
La criopreservación de la colección base se refiere a la conservación de material
biológico en condiciones de temperatura ultrabaja en nitrógeno líquido a -196 °C, o
en su fase vapor, a (-150ºC) (KARTHA, 1985). Este concepto define en forma amplia
la crioconservación misma.
La criopreservación es capaz de interrumpir todo el metabolismo celular y ha sido
considerada la forma más prometedora de conservación a largo plazo para células,
tejidos y órganos vegetales. A partir de estos explantes, será posible plantas
regeneradas en cualquier momento, sin riesgo de variaciones genéticas en la

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materia preservada. La criopreservación, como todos los métodos, tiene su ventajas


y desventajas (Tabla 2).

Tabla 2. Principales ventajas y desventajas de la criopreservación


Ventajas Desventajas
Conservación por tiempo indeterminado sin
pérdida de la viabilidad Complejidad técnica y biológica de los procesos
de congelación y descongelación
Preservación de estructuras (células, tejidos y
órganos)

Evita la variación somaclonal Cada cultivo exige un procedimiento específico,


exigiendo el desarrollo de un protocolo para cada
En banco de germoplasma es un proceso caso
económico
Fuente: Pasqual (1998)

La crioconservación se puede utilizar para todo tipo de explantes, tales como:


meristemas, suspensiones celulares, embriones (somáticos, cigóticos o nucleares)
protoplastos. En general, las estructuras más pequeñas son más apto para
congelación, como deshidratación y congelación ocurren más rápida y
uniformemente en estructuras más pequeñas.
Según Santos (2000), en los últimos veinte años se han publicado en la literatura
numerosos informes de crioconservación de plantas propagadas vegetativamente,
cereales y gramíneas, plantas ornamentales, árboles frutales tropicales y
templados, legumbres y oleaginosas, estimulantes medicinales y aromáticas, entre
otros, (Tabla 3). El material joven, en la etapa meristemática, es más apropiado
porque sus células son pequeñas y contienen citoplasma denso con pocas vacuolas
y, por lo tanto, poca agua (Engelmann, 1991). Sin embargo, otros tipos de material
planta como puntas de ápice, raíces, células cultivadas, protoplastos, polen,
anteras, embriones somáticos y cigóticos y semillas enteras de diversas especies,
se han regenerado con éxito después de la congelación en nitrógeno líquido durante
períodos de tiempo que van desde unas pocas horas hasta algunos años. (KARTA,
1985; CONERS, 1987; GOES, 1993.

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Tabla 3. Lista de algunas especies de plantas de importancia económica criopreservadas con suceso

Grupo / Especie Explante/Técnica Supervivencia (%)

a) raíces, bulbos y tubérculos


Ajo (allium sativum L.) M/V 90
Patata Inglesa (solanum spp.) A/E-D 10
Patata dulce (ipomea patatas L.) A/V 23
Mandioca (manihot esculenta crantz) EZ/CL-R 97
b) Cereales y gramíneas
Trigo (triticum spp.) EZ/CL 70
Maíz (zea mays L.) EZ/CL 80
Caña de azúcar (Saccharum officinale L.) A/E-D 38-91
c) Plantas Ornamentales
Clavo (Dianthus caryophyllus L.) G/CL 90
Crisantemo (Chysanthemum spp.) A/CL 90
d) Fructíferas, tropicales y templadas
Banana (musa spp.) SC/CL 42
Agrias (citrus sinensis (L) Osb.) ES/CL 5
Manzanas (malus spp.) G/CL -
Fresa (Fragaria spp.) SC/V 87
Pera (Pyrus communis L.) A/E-D 47
Enredadera (Vitis vinifera L.) A/E-D 30
e) legumbres y oleaginosas
Maní (arachis hypogea L.) EZ/CL 90
Coco (cocos nucifera L.) EZ/D 70
Garbanzo (cicer spp.) A/V 60
Olivo (Olea europea L.) EZ/D 70
f) Estimulantes, medicinales y aromáticas
Café (Coffea arabica L.) EZ/D 95
Té (Camellia sinensis) EZ/D 95

Tipo de material: A – ápice caulinar; ES – embrión somático; EZ – embrión cigótico; G – yema lateral; meristema; SC
– suspensión celular Técnica de congelación: CL – congelación lenta; CL-R -
congelación lenta y rápida; D – deshidratación; E-D encapsulación-deshidratación; V – vitrificación.
Fuente: Santos (2000)

Los métodos de crioconservación se pueden dividir en pasos conocidos tales como:


pre-crecimiento, crioprotección, refrigeración, almacenamiento, descongelación y
regeneración (WITHERS, 1984, 1985a, 1985b; KARTHA, 1985).

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▪ Pre-crecimiento: consiste en una fase preparatoria, donde el cultivo se


alimenta con condiciones de tolerancia a las heladas. Implica la
suplementación de compuestos osmóticamente activos en el medio, además
de otras sustancias;
▪ Crioprotección – consiste en la aplicación de uno o más compuestos que
permiten la célula para tolerar los cambios físicos y químicos relacionados
con la congelación y descongelación;
▪ Enfriamiento: el enfriamiento se puede hacer lento o rápido. las dos formas
proporcionan diferentes mecanismos de supervivencia. En el enfriamiento
lento, el hielo se forma fuera de la célula, evitando la cristalización del hielo
en la célula. Como el agua se retira hacia el medio extracelular, la célula se
deshidrata y esto la deshidratación reduce la cantidad de agua disponible
para la formación dañina de cristales de hielo, entonces el contenido de agua
se solidifica y normalmente la formación de cristales de hielo que son
inofensivos para la integridad de la célula. El enfriamiento rápido induce la
congelación intracelular, evitando deshidratación celular. Este tipo de
enfriamiento minimiza la formación de hielo nocivo por la formación de
pequeños cristales de hielo debido a agentes crioprotectores. Generalmente,
el enfriamiento rápido es mucho más difícil de lograr ese enfriamiento lento;
▪ Almacenamiento: se realiza en cilindros o tanques criogénicos que
contienen nitrógeno, manteniendo la especie a (-196 ºC) en fase líquida, o (-
150 ºC) en la fase de vapor
▪ Descongelación: este paso es tan importante como la fase de enfriamiento.
Debe hacerse rápidamente para asegurarse de que no se acumule hielo en
la célula y se descongele con posibilidad de recristalizarse en grandes
cristales dañinos;
▪ Regeneración: restaurar el crecimiento tras la criopreservación es una de
las etapas críticas de este método. Se debe permitir que los procesos
detenidos por congelación se reanuden con mínima perturbación osmótica y
física.

3.3 Oleaginosas, consideradas una fuente de riqueza nutricional y alto


interés económico
Las semillas oleaginosas son el aliado perfecto en la lucha contra graves problemas
de salud como la diabetes, las enfermedades cardiovasculares y la desnutrición.

Las semillas oleaginosas son uno de los grupos de cultivos más grandes en
términos de producción, investigación, ensayos y comercialización en todo el
mundo. Algunas semillas oleaginosas son esenciales en la alimentación y el cuidado
de la salud, y son materias primas para la industria del petróleo, la alimentación

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Micropropagación y crioconservación de plantas de interés económico.

animal y productos no comestibles. Las semillas oleaginosas son los alimentos


básicos de la cultura, la economía, la industria y el comercio del mundo.

Diez son los cultivos más productivos y valiosos del mundo: soja, canola, cardo,
algodón, girasoles, aceitunas, maíz, lino, maní y sésamo. Los cultivos de interés en
la región son la soya, canola, cardos y girasoles.

Las semillas oleaginosas se utilizan de muchas maneras, como en formas naturales


como las aceitunas, las semillas de girasol, los cacahuetes y las almendras, o como
fibras textiles en el caso del algodón y el lino, o como colorantes o aceites
combustibles en el caso del cártamo, de aquí su vital importancia en la economía
de las sociedades actuales.

Sin embargo, la principal ventaja de las semillas oleaginosas es la obtención de


aceite vegetal y manteca para cocinar, hacer pan, hornear y producir alimentos
nutritivos, pero la pasta también se utiliza en la alimentación animal y gracias a la
nueva tecnología, las semillas oleaginosas producen subproductos comestibles y
no comestibles, productos que incluyen compuestos médicos, jabones, productos
químicos agrícolas, barnices, plásticos y combustibles como el biodiésel.

Cada semilla oleaginosa tiene sus propias propiedades y características inherentes


y únicas, y cada una tiene su propia historia de origen y desarrollo. Son ejemplos
representativos de cursos largos en muchas culturas nacionales.

4. Conclusiones

Es necesario desarrollar procedimientos específicos para cada tipo de cultivo,


porque diferentes sistemas de cultivo reaccionan de manera diferente a
crioconservación, pero la crioconservación es más adecuada que el crecimiento
lento para la gran variedad que existe.

Dado que muy pocos materiales biológicos soportan temperaturas por debajo de
cero en su estado natural, algunos protocolos de criopreservación implican una
etapa de tratamiento con crioprotectores, que son productos químicos capaces de
para bajar la temperatura a la que se produce la congelación, reduciendo así el agua
intracelularmente y cambiando el tamaño de los cristales de hielo formados, lo que
minimiza los daños. Alta solubilidad y baja toxicidad son características esenciales
para el éxito de un crioprotector. El glicerol fue el primer compuesto químico utilizado
en la crioprotección, seguido del dimetilsulfóxido (DMSO). Aunque hoy en día
existen una serie de crioprotectores, estos dos compuestos siguen siendo los más
utilizados.
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Micropropagación y crioconservación de plantas de interés económico.

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