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Instituto Superior Tecnológico Loja

Práctica de microbiología

PRÁCTICA N° 1

EXTRACCION DE ADN EN FRAGARIA USANDO METODOS


EXPERMENTALES CON BASES MOLECULARES
John Alexander Torres Malacatus

RESUMEN
El objetivo de esta práctica fue extraer el ADN de la fresa y así de esta manera conocer
su estructura interna, se eligió a la fresa ya que es octoploide esto quiere decir que, tiene
8 juegos idénticos de cromosomas, esto nos ayuda a que el ADN que se pudo extraer
sea visible sin la necesidad de un microscopio. Con la ayuda del amortiguador
compuesto por detergente líquido, agua y sal además de alcohol etílico este proceso
resulto mucho más fácil.
INTRODUCCIÓN
El ADN es el material genético o hereditario de los seres vivos. La extracción de este se
realiza para poder hacer estudios genéticos, de forense y biología molecular entre otras.
El ADN tiene dos cadenas de nucleótidos, estas están unidas entre sí. (“ADN (Ácido
Desoxirribonucleico) | NHGRI,” n.d.)
Los genes también llevan la información necesaria para fabricar moléculas de ARN que
intervienen en el proceso de síntesis de proteínas. El ARN es una molécula con una
estructura similar al ADN (BELLET, 2018). Podemos decir que el ADN es como un
mapa genético de la vida. Nuestro cuerpo está formado por distintos sistemas y todos
llevan a cabo distintas funciones que benefician a nuestro organismo y nuestra vida.
Todos los humanos somos iguales en genética en un 99,9%; pero ese 0,1% sobrante es
el que nos hace diferentes es lo que nos permite identificarnos y tener nuestro DNI
genético.(“Extracción de ADN – Conogasi,” n.d.)
METODOLOGIA
Se lavó muy bien las fresas, se procedió a licuarlas por completo y luego se vertió esta
mezcla en una funda ziploc. Para obtener el amortiguador se midió 6 ml de detergente
líquido y se lo mezclo con 6 ml de agua y 5g de sal, se mezcló muy bien y se añadió a la
mezcla que teníamos en el ziploc cerrándola por completo sin dejar aire por dentro y se
mezcló muy bien, cuando la mezcla este lista se procede a poner esta mezcla en un filtro
para obtener el concentrado de la mezcla y cuando ya esté todo filtrado se añadió un
chorro de alcohol etílico, se espera 5 minutos hasta que se pueda visualizar que el
ADN se separa de la mezcla.
RESULTADOS
Se pudo finalizar la práctica con éxito, pudiendo extraer el ADN de la fresa y
visualizarlo con facilidad, el alcohol, el cuál usamos como amortiguador cumple una
función muy importante ya que gracias a este el ADN puede separarse de forma rápida
rompiendo las cadenas de su estructura.
DISCUSIÓN
Con base a la práctica realizada, se pudo investigar a otros autores y sus conclusiones,
como es en el caso de Ana Zita una Doctora en Bioquímica que realizo un experimento
casero. Ella realizo su experimento con:
• Material vegetal, preferiblemente fresas (Fragaria vesca), kiwi (Actinidia
chinensis) o plátanos (Musa sp.).
• Mortero o licuadora.
• Bisturí o cuchillo.
• Baño de María (37ºC).
• Gasa o algodón.
• Probeta de 100 ml o taza para medir.
• Tubo de ensayo o frascos pequeños.
• Agua destilada.
• Detergente lavaplatos.
• Sal de cocina o cloruro de sodio NaCl.
• Papel de filtro y colador.
• Etanol o alcohol isopropílico con una concentración mayor a 70%, frio (5ºC).
En el procedimiento realizo lo siguiente:
Preparó una solución salina-jabonosa compuesta con 100 ml de agua (media taza), 10
ml de detergente lavaplatos (1 cucharada) o 20 ml de champú (sin acondicionador, dos
cucharadas) y 13 gr de NaCl o sal de cocina (una cucharada).
Luego corto en trozos la fruta explicando lo siguiente “Las fresas son octoploides es
decir, tienen ocho copias de cada cromosoma, El kiwi tiene 29 cromosomas y es
tetraploide. La banana o plátano tiene 11 cromosomas y la mayoría es triploide”. Luego
se trituro o licuo la fruta. Si usamos fresas, las podemos colocar en una bolsa con cierre
hermético y las machacamos. Luego vertemos la solución salina-jabonosa y
continuamos el proceso de romper las frutas. Opcionalmente, podemos colocar el
preparado en un baño de María a 37ºC durante 15 minutos para facilitar la extracción
Pasamos por un colador o papel de filtro para retirar el grueso de la sopa de fruta y
luego, a través de la gasa o algodón, hasta obtener 5 ml del líquido filtrado en un tubo
de ensayo o 50 ml en un frasco.
El jugo de fruta salado-jabonoso se cuela y se filtra para quitarle los sólidos, proteínas y
lípidos a la solución acuosa del ADN.
Sobre el jugo de fruta, vertemos lentamente por las paredes del tubo de ensayo etanol o
isopropanol frio. Dejamos reposar unos minutos. Debe aparecer una capa blanquecina
gelatinosa.
Si introducimos una varilla de vidrio o un palito de madera, con movimientos circulares
podremos recuperar el ADN enrollado en la varilla.
Hemos obtenido el ADN de la misma manera y con los mismos pasos que el
experimento de Ana Zita, cabe destacar que para una buena extracción debemos contar
con el ambiente apropiado ya que se podría generar una contaminación a nivel
microbiana.
CONCLUSIONES
• Se obtuvo el ADN de una fresa gracias al proceso exitoso y fácil que hemos
podido estudiar, y pudimos visualizar su estructura.
• Gracias a la metodología utilizada pudimos visualizar de manera rápida y fácil la
estructura del ADN en una fresa.
• El correcto proceso y manipulación por parte de los estudiantes además de la
guía del docente fueron de gran importancia para los resultados obtenidos.
ANEXOS

Figura 1 Amortiguador (mezcla de Figura 2 mezcla de las fresas licuadas


agua, detergente y sal) y el amortiguador
Figura 4 se añade el alcohol en la
Figura 3 momentos en el que se filtra
mezcla ya filtrada
la mezcla

Figura 5 y 6 ADN de la
fresa extraido
Bibliografía

ADN (Ácido Desoxirribonucleico) | NHGRI. (n.d.). Retrieved December 16, 2019, from
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/ADN-acido-Desoxirribonucleico

Extracción de ADN – Conogasi. (n.d.). Retrieved December 16, 2019, from


http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-adn/

Ana, Z. (19 de noviembre de 2019). Extracción de ADN (experimento casero). Obtenido de toda
materia: https://www.todamateria.com/extraccion-adn-experimento/

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