Examen parasitológico

El examen parasitológico es una prueba para identificar enteroparásitos, organismos que

viven en el tracto digestivo a expensas del huésped y, generalmente, son ingeridos a
través del agua o alimentos contaminados. La prueba permite detectar a los parásitos en
sus variadas etapas de desarrollo: huevos, quistes, hasta formas maduras y móviles.
El examen Parasitológico se realiza bajo dos modalidades: El examen Parasitológico
Simple, en el cual se analiza una sola muestra de heces, mientras que el Examen
Parasitológico Seriado consiste en analizar muestras de tres días consecutivos,
incrementando notablemente las posibilidades de identificación de parásitos, debido a
que la eliminación de los mismos puede ser intermitente.

¿Para qué sirve el examen parasitológico de heces?

Este examen permite diagnosticar una eventual parasitosis intestinal, enfermedad debida
a la presencia de un parásito en el tubo digestivo. Las heces del paciente son recogidas
en un pote estéril y luego analizadas en laboratorio.

La parasitosis intestinal se encuentra más frecuentemente en los países en vías de

desarrollo, donde es un problema de sanidad pública.
Numerosos agentes parasitarios son responsables de las parasitosis intestinales.

Como realizar un examen parasitológico

La adecuada selección del procedimiento y su correcta aplicación.

Biología de cada parásito.
Intensidad de la infección.

RECOMENDACIONES PARA LA REALIZACIÓN DEL EXAMEN

Adecuada obtención, transporte y procesamiento de la muestra.

Equipamiento disponible en óptimas condiciones.
Diseño físico del laboratorio, el cual debe cumplir con los requerimientos de cada
equipo que interviene en el procesamiento de las muestras, así como ajustarse a normas
ergonómicas y de bioseguridad.
Tiempo dedicado por el profesional al análisis delas muestras.
Sólida formación y experiencia del profesional que realiza el examen.
Examen parasitológico de heces

Examen parasitológico de heces

Las muestras de heces pueden ser recogidas de varias maneras:

 Heces frescas sin conservantes: Si el paciente presenta deposiciones líquidas o
heces con moco y sangre, se debe examinar rápidamente una muestra de las
mismas siempre que no haya tomado carbón, crema de bismuto, sustancias
baritadas o esté medicado con hierro.
 Heces con conservantes: El paciente debe colocar en un frasco con conservante
(formol 10%, SAF, etc.), una pequeña cantidad de materia fecal de todas las
deposiciones del día y durante 8 días seguidos.
 Heces después de tomar un purgante salino: El paciente durante 2 días no
debe ingerir verduras de hoja, legumbres o cítricos. Puede ingerir bananas o
manzanas peladas, es decir, frutas que no tengan hollejo. La noche anterior a la
recolección de la muestra deberá tomar un purgante salino (no oleoso) y luego
recogerá la 2° deposición en un frasco limpio, preferentemente de tapa a roscas.
 Los distintos modos de recolección presentan ventajas y desventajas. Las heces
frescas permiten ver la movilidad de los protozoos y larvas de helmintos. Las
que tienen conservantes permite obtener parásitos que se eliminan de manera
intermitente, aunque Trichomonas hominis no se detecta con conservantes.
 Las heces recogidas luego de la administración de un purgante salino, permiten
el diagnóstico más rápido, pero no puede realizarse en personas con dolores
intestinales, diarrea o en quienes estén contraindicados los purgantes. La muestra
debe ser procesada rápidamente. Permite ver la movilidad de los protozoos y se
logra una mejor visualización de los macroparásitos dado que en el tamizado
aparecen pocos restos debido a la no-ingestión de verduras, legumbres y frutas.
 La recolección seriada de las heces puede darse a todos los pacientes y al
recoger durante 8 días aumenta la posibilidad de hallar los parásitos que tengan
un ciclo más largo y que puedan completarlo durante la recolección. Esta
recolección es engorrosa para el paciente; el formol inmoviliza a los protozoos
pero conservan su morfología lo que hace posible su diagnóstico.
 Una vez remitidas al laboratorio las muestras obtenidas como se ha señalado
anteriormente se procede al análisis parasitológico.

Análisis Parasitológico

 Las muestras de heces deben ser homogeneizadas. Si las heces son formadas se
agrega agua o solución fisiológica hasta obtener una muestra semi-líquida. Se
realiza:

a) Examen microscópico directo: con objetivos de 100x y 400x aumentos para la

búsqueda de trofozoitos, quistes, ooquistes, huevos y/o larvas de parásitos
intestinales. Esta observación microscópica puede hacerse sin coloración o con
coloraciones húmedas como lugol, eosina, azul de metileno, etc.
b) Concentración: De huevos, larvas y quistes en heces ha llegado a ser un
procedimiento de rutina como parte de un examen completo para la detección de
los parásitos intestinales, que se puede realizar como complemento del examen
directo.
c) Examen macroscópico: consiste en tamizar la muestra una vez concluido el
examen microscópico directo, para identificar la morfología de los helmintos
macroscópicos.
d) Examen microscópico previa coloración: con las heces llegadas al laboratorio
u obtenidas por métodos de concentración se pueden preparar extendidos para
ser fijados y teñidos con coloraciones específicas para cada parásito que se
quiera investigar
e) Escobillado anal: el análisis parasitológico se debe completar, sobre todo en
los niños, con un hisopado anal seriado: es una técnica específica para la
detección de Enterobius vermicularis, nematode cuya hembra coloca los huevos
en la zona perianal. Los exámenes microscópicos y macroscópicos de heces
presentan poca sensibilidad para este parásito. La técnica consiste en pasar ocho
gasas estériles por la zona perianal, por la mañana y sin higiene previa. Se
realiza durante ocho días, recogiendo las gasas en un frasco con formol al 10%.
Obtenida la muestra, se centrifuga durante 10 minutos a 3.000 rpm, se descarta
el sobrenadante y el sedimento se observa por examen microscópico directo con
100x y 400x aumentos para la búsqueda de huevos del parásito. Debe agotarse el
sedimento antes de dar por negativo el análisis.

f) Montaje húmedo directo

Este método sigue siendo el “gold standard” para el diagnóstico de la

enfermedades parasitarias. Se usa principalmente para observar las
características morfológicas de los protozoos y detectar la movilidad de los
mismos en su forma de trofozoito. El preparado directo se realiza con una
pequeña cantidad (una gota) de heces entre porta y cubreobjeto; no debe ser
mayor porque resultaría demasiado espesa para el examen, ni menor porque
disminuiría la posibilidad de encontrar parásitos. La observación se realiza
utilizando un objetivo de 10x aumentos y ante un elemento sospechoso se
examina con 40x aumentos.
 Para poder observar con más detalle la morfología de los protozoos
(especialmente los núcleos) se puede hacer un montaje húmedo coloreado,
colocando una gota de colorante en el borde del portaobjeto o se prepara un
nuevo montaje. Varias soluciones de yodo son recomendadas, por ejemplo
Lugol y de Dobell y O´ Connor; otras como solución de eosina o azul de
metileno.
Los trofozoitos y quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos y ooquistes
de Isospora belli pueden ser identificados en el extendidos directo. Los ooquistes
de Cryptosporidium difícilmente son observados, salvo en grandes infecciones,
al igual que las esporas de Microsporidium que son muy pequeñas y de forma
semejante a restos en materia fecal.
Extendidos coloreados permanentes: la detección y la correcta identificación de
la mayoría de los protozoos intestinales dependen del examen de estos
extendidos observados con un aumento de 100x. La utilización de extendidos
permanentes no solamente nos proporciona un archivo durable de los protozoos,
sino que pueden ser utilizados, cuando la identificación es dificultosa, para
consultar con especialistas.
El método más clásico es la hematoxilina férrica de Heidenhain, pero la
generalidad de los laboratorios seleccionan técnicas más breves como la
coloración Tricrómica.
Es importante mencionar que la mayoría de las dificultades en las coloraciones
de trofozoitos y quistes se deben a una fijación inadecuada, al uso de preparados
muy densos o por heces muy viejas.

Técnicas de Concentración

La concentración de huevos, larvas y quistes en heces ha llegado a ser un

procedimiento de rutina como parte de un examen completo para la detección de
los parásitos intestinales y se puede realizar como complemento del examen
directo.
Los procedimientos de concentración permiten la detección de protozoos y/o
helmintos empleándose dos métodos: de sedimentación y flotación, o una
combinación de ambos, para separar los protozoos y los huevos de helmintos de
las heces, utilizando las diferencias en el peso específico.
Se deben emplear cuando la cantidad de muestra fuera pequeña, en un control de
tratamiento o cuando se deba transportar poca cantidad de muestra a un lugar
distante.

A) Concentración por Sedimentación

Los parásitos se concentran por acción de la gravedad, suspendiendo las heces

en agua corriente, agua destilada o solución salina y dejando que sedimenten
naturalmente o por centrifugación. Estos métodos son principalmente útiles para
la concentración de quistes, ooquistes y huevos.
Ventajas: es fácil de realizar, no requiere observación microscópica inmediata y
se puede aplicar a la concentración de la mayoría de los parásitos intestinales.
Desventajas: la observación microscópica puede dificultarse por concentración
de elementos no parasitarios.

Sedimentación espontánea:

a) Método de sedimentación sencilla

 1. Homogeneizar unos 10 gramos de heces en 10 veces su volumen de agua
corriente.
2. Verter la materia fecal en copas de vidrio o vasos de precipitado de 250 a 500 ml
3. Dejar que sedimente durante 1 hora.
4. Eliminar por sifón los dos tercios superiores, o verterlos con cuidado, para
eliminar los detritus.
5. Agregar agua hasta llenar casi el recipiente y resuspender las heces con varilla.
6. Repetir la operación 1 o 2 veces más hasta que el sobrenadante quede
relativamente límpido.
7. Eliminar el líquido y con una pipeta obtener una pequeña porción del sedimento
para
8. Observación microscópica.

Es un método lento y de poca concentración para los protozoos intestinales. Los

huevos de helmintos sedimentan en el fondo del recipiente en un estado viable y
sin deformación.

 Método de Lumbreras modificado

1. Se utiliza para la búsqueda de huevos de Fasciola hepática en heces o bilis. No

se puede utilizar un método de centrifugación porque los huevos se rompen ni de
flotación porque son muy pesados.

2. Colocar 2 ml de la muestra (heces o bilis) en una copa de Lumbreras o tubo de

centrífuga.
3. Agregar 5 ml de solución detergente al 10% para emulsionar las grasas.
4. Agregar 0,5 ml de alumbre férrico al 1% para favorecer el gradiente de
densidad.
5. Homogeneizar suavemente.
6. Dejar en reposo 30 minutos.
7. Sacar con pipeta pasteur una gota del fondo de la copa.
8. Observar con microscopio.

Sedimentación por centrifugación:

 Método de Charles Barthelemy modificado por Bacigalupo y Rivero.

1. Mezclar 10 gramos de heces con 50 ml de solución fisiológica, o agua de la

canilla.
2. Tamizar a través de un colador metálico.
3. Filtrar sobre gasa en un embudo.
4. Recoger 10 ml del filtrado en un tubo de centrífuga.
5. Centrifugar 5 minutos a 1500 rpm. Descartar el sobrenadante.
6. Repetir esta operación 3 veces o hasta que el sobrenadante quede límpido.
7. Resuspender el sedimento con solución fisiológica o agua de la canilla más 2 ml
de éter sulfúrico. Tapar con tapón de goma y agitar vigorosamente para extraer
las grasas.
8. Centrifugar 1 minuto a 1500 rpm. Descartar el tapón graso de un golpe seco,
conservando el sedimento.
9. Examinar con microscopio el sedimento.
 Método de formol- éter o de Ritchie

1. Filtrar 10 ml de suspensión de heces por un embudo con una capa de gasa.

2. Recoger 10 ml del filtrado sobre un tubo de centrífuga.
3. Centrifugar 5 minutos a 2000 -2500 rpm. Descartar el sobrenadante.
4. Repetir esta operación 3 veces o hasta que el sobrenadante quede límpido.
5. Resuspender el sedimento con formol 10%. Dejar 5 a 10 minutos en reposo.
6. Agregar 3 ml de éter sulfúrico. Tapar con tapón de goma y agitar vigorosamente
30 segundos para extraer las grasas.
7. Centrifugar 1 minuto a 1500 rpm. Se forman cuatro capas: 1) capa de éter, 2)
tapón de restos fecales, 3) capa de formol, 4) sedimento. Descartar las 3 capas
primeras, conservando el sedimento.
8. Examinar con microscopio el sedimento.

B) Técnicas de Flotación
El método de flotación emplea un medio líquido más pesado que los parásitos
permitiendo que los mismos suban a la superficie y puedan ser recuperados de la
película superficial.

Ventajas: el preparado es más límpido, facilitando la observación microscópica.

Desventajas: debe hacerse la observación microscópica en menor tiempo

debido a que la película superficial puede destruirse y los parásitos caer al fondo
del tubo, a su vez, los parásitos de mayor peso que la solución empleada no
flotarán.

Existen varios métodos de flotación, el más utilizado es el método de Faust

 Método de Faust o de Sulfato de Zinc al 33%

La concentración de sulfato de zinc para hacer flotar los elementos parasitarios

tiene un peso específico de 1.180. Solución acuosa de sulfato de zinc puro: 333
g. Agua destilada c.s.p.: 1.000 ml.

 Mezclar 10 gramos de heces con 50 ml de solución fisiológica o agua de

la canilla.
 Tamizar a través de un colador metálico.
 Filtrar sobre gasa en un embudo.
 Recoger 10 ml del filtrado sobre un tubo de centrífuga.
 Centrifugar 5 minutos a 1500 rpm. Descartar el sobrenadante.
 Repetir esta operación 3 veces o hasta que el sobrenadante quede
límpido.
 Agregar al sedimento final 2 o 3 ml de solución de sulfato de zinc al 33%
y homogeneizar con varilla.
 Completar con sulfato de zinc el tubo de centrífuga sin volver a
homogeneizar.
 Centrifugar 1 o 2 minutos a 1500 rpm.
 Extraer con aro de alambre unas gotas de la película superficial sin retirar
el tubo de la centrífuga o haciéndolo con sumo cuidado para evitar que
por agitación se destruya la película.
A. E XÁMEN PARASITOLÓGICO S ERIADO DE D EPOSICIONES EPSD

a) G ENERALIDADES

 Utilidad: diagnóstico de huevos de helmintos y quistes de protozoos.

 Ventaja: Técnica muy conocida y difundida, de procesamiento
rápido y económico.
 Desventaja: altamente dependiente del operador, mal rendimiento en
el diagnóstico de trofozoítos.

b) M UESTRA
 Se entrega al paciente 3 frascos conteniendo 10 mL de fijador.
 La muestra de deposición debe ser fresca, recién emitida y sin
mezclar con orina.
 El paciente no debe haber ingerido en los últimos 6 días:
antibióticos, purgantes, antiparasitarios, carbón ni bario.
 Las tres muestras deben ser tomadas día por medio y deben
mezclarse con el fijador para permitir su conservación.

c) P ROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

 Deben enumerarse los 3 frascos del paciente, 2 portaobjetos, 2

vasos y un tubo de centrifuga.
 Resuspender la emulsión fecal con una paleta de madera (si la
consistencia de la muestra es demasiado espesa agregar un poco
mas de fijador)
 Vaciar la mitad del contenido de cada vaso en un vaso.
 Tamizar la emulsión fecal a través de una malla hacia un vaso
observando el material retenido en busca de elementos parasitarios
macroscópicos.
 Tomar con una pipeta Pasteur una gota de la emulsión fecal y
colocarla en un portaobjeto (preparado directo).

d) P ROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

 Colocar alrededor de 10 mL de la emulsión tamizada en un tubo de

centrífuga.
 Agregar 1 mL de acetato de etilo y mezclar enérgicamente.
 Centrifugar por 4 minutos a 1500 rpm.
 Vaciar el sobrenadante, tomar una gota del sedimento en otro
portaobjeto.
 Agregar con un gotario una gota de tinción de MIF al lado de la
gota del sedimento, mezclar con un cubreobjetos y cubrir con este
mismo (preparado concentrado)
 Se debe mantener en cámara húmeda hasta su lectura.
e) L ECTURA

 La lectura del preparado directo yconcentrado se recorren

totalmentecon el objetivo 10X, seguido del 40X ysolo si fuese
necesario con el de 100X. La lectura debe ser ordenada y
sistemática, abarcando toda la preparación y evitando que los
recorridos se superpongan para no dejar áreas sin examinar.

I NFORME DE RESULTADOS

 Si el resultado es NEGATIVO, se debe informar:

EXAMEN PARASITOLOGICO SERIADO DE DEPOSICIONES,

METODO DE TELEMANN
 No se observan elementos parasitarios»
 Si el resultado es POSITIVO, se debe informar:

f) EXAMEN PARASITOLOGICO SERIADO DE DEPOSICIONES,

METODO DE TELEMANN

 Forma evolutiva del parásito + Nombre científico subrayado del

parásito»

g) C ONCLUSIONES

 El EPSD

 es el método más utilizado en el diagnóstico de las principales

enteroparasitosis en el ser humano, por tratarse de un procedimiento no
invasivo, fácil de realizar, de bajo costo y buena sensibilidad.