CUANTIFICACIÓN DE ETANOL PRESENTE EN BEBIDAS

ALCOHÓLICAS POR REFRACTOMETRÍA

Burbano,L. (1085949160), Quintero,D. (1143878540), Zúñiga,C.

(1144206992)
lauravanessabv.22@gmail.com​; ​quinterodaniel190@gmail.com​ ;
carolina.zuniga00@usc.edu.co

Universidad Santiago de Cali

Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Microbiología
Laboratorio de Análisis Instrumental
Docente: Harold Diaz Segura
Fecha práctica: Marzo / 10 / 2020
Fecha entrega: Marzo / 27/ 2020
Resumen

En la práctica de laboratorio se calculó la concentración de etanol en el aguardiente marca

“Sello blanco” de 24% mediante la realización de dos líneas de calibración, se calculó
además las pendientes de estas curvas de calibración para determinar si había interferencia
de matriz haciendo uso de una prueba t y se calculó la concentración de etanol en la
cerveza, esto mediante la técnica de refractometría. En primer lugar, para la línea de
calibración por patrón externo del aguardiente se utilizaron 5 balones aforados de 50 mL
que contenían un % de concentración de 9.6%, 19.2%, 28.8%, 38.4% y 48% de etanol al
96% con agua destilada, se midió a estos y a la muestra de agua ardiente su índice de
refracción, se hizo su respectiva curva de calibración la cual fue lineal y creciente y se
determinó la concentración de alcohol, la cual fue de 27.4 v/v. Posteriormente, se hizo la
línea de calibración por adición estándar del aguardiente con 6 balones aforados de 50 mL
que contenían un % de concentración de 9.6%, 19.2%, 28.8%, 38.4% y 48% de etanol al
96% con agua destilada y 10 mL de aguardiente, se midió a estos su índice de refracción,
se hizo su respectiva curva de calibración, la cual fue lineal y creciente y se determinó que
la concentración de alcohol era de 9.3 v/v. Seguidamente al comparar las pendientes de las
dos curvas de calibración, de 0.0006 y 0.0005 respectivamente mediante una prueba t, se
determinó que había interferencia de matriz. Finalmente se hizo la cuantificación de etanol
con cerveza marca “Poker” enlatada mediante destilación, se midió su índice de refracción y
se determinó la concentración de alcohol la cual fue 4.6 v/v.

Palabras Clave: Etanol, adición estándar, índice de refracción, curva de calibración, patrón
externo.

1. DATOS CÁLCULOS Y RESULTADOS en un refractómetro ATAGO Pocket PAL-RI a

temperaturas entre 36.5 - 36.7, para corregir el
Curva de calibración patrón externo: índice de refracción se empleó la ecuación 2,
En primer lugar se realizó una línea de ya que este dispositivo trabaja a una
calibración empleando etanol con pureza 96% temperatura de 20ºC.
V/V, este se dispuso en 5 balones aforados y
se llevaron a un volumen final de 50mL, en la
tabla 1 se pueden observar las concentraciones
que fueron calculadas con la ecuación 1 y el
Ec 1
debido indice de refracción, el cual fue medido
 Ec 2
Tabla 1. Concentración (% V/V) de etanol 96% con su
respectivo índice de refracción.
En la gráfica 1, se encuentran los datos de la
curva de calibración por patrón externo
obtenidos a partir de la tabla 1.
Gráfica 1. Curva de calibración por patrón externo entre el
índice de refracción y la concentración del etanol 96%
V/V.
Seguido a esto se realizaron los respectivos
cálculos de mínimos cuadrados, con el fin de
conocer las sumatorias de cada cuadrante
(X,Y) y así comprobar la linealidad de la curva,
empleando las ecuaciones 3, 4 y 5, los
resultados obtenidos se plasmaron en la tabla
2.
Ec 3.
Ec 4.
Ec 5.
Tabla 2. Sumatorias de los ejes X y Y, obtenidos a partir
de los mínimos cuadrados.
Haciendo uso de las ecuaciones 6 y 7 se
calcularon los coeficientes de correlación (r) y
determinación (r​2​), posteriormente se evaluó
por medio de la prueba t Student la linealidad
de la recta, con un nivel de confianza del 95% y
n-2 grados de libertad, teniendo en cuenta que
si Texp > Ttab se acepta la hipótesis nula (H​0​),
tabla 3.
H​0​: Si hay linealidad y correlación entre los
datos.
H​a​: No hay linealidad ni correlación entre los
datos.
Ec 6.
Ec 7.
Tabla 3. ​Parámetros estadísticos y test de hipótesis para r
y r​2​.
 Seguidamente se realizaron los cálculos
respectivos para saber la concentración de
etanol que se encontraba en una muestra
comercial de aguardiente “Sello blanco” 24%
V/V y de cerveza poker en lata 4%V/V (Ec 8), la
incertidumbre de la medición SX​o (Ec 9) y el
porcentaje de error (Ec 10) para las dos
muestras, teniendo en cuenta el índice de
refracción obtenido en el refractómetro, tabla 5,
6, 7 y 8 respectivamente.

Ec 8.

En la tabla 4, se consignaron los datos Ec 9.

respectivos a la regresión con sus respectivos
límites de confianza.

Tabla 4. Datos obtenidos para la regresión de la pendiente

Ec 10.
Tabla 5. Índice de refracción de una muestra de
(b) y el intercepto (a), con sus respectivos límites de
aguardiente “Sello blanco” 24% V/V.
confianza y desviaciones.

Tabla 6. Datos obtenidos para la muestra de aguardiente

“Sello blanco”, señal, concentración, desviación, intervalos
de confianza y porcentaje de error respectivamente.

Tabla 7.Índice de refracción de una muestra de cerveza

Poker 4%V/V.
 Adición estándar:
Para el método de adiciones estándar se
añadieron diferentes volúmenes de etanol 96%,
dejando el volumen de muestra (aguardiente
“Sello blanco” 24%) fijo para todas las
soluciones, el cual fue de 10 mL, de igual forma
Tabla 8. Datos obtenidos para la muestra de cerveza
que se hizo con la curva de calibración por
marca Poker, señal, concentración, desviación, intervalos
de confianza y porcentaje de error respectivamente.
patrón externo, se le midió el índice de
refracción haciendo uso de un refractómetro
ATAGO Pocket PAL-RI a temperaturas entre
36.1 - 36.3, se corrigió el índice de refracción
haciendo uso de la ecuación 2 y a este se le
restó el valor obtenido del blanco (agua
destilada), tabla 10.

Tabla 10. Concentración (% V/V) de etanol 96% con su

respectivo índice de refracción y la resta con el blanco
(agua).

A partir de los datos obtenidos anteriormente se

procedió a calcular los límites de detección y
cuantificación para la curva de calibración por
patrón externo, empleando las ecuaciones 11 y
12, tabla 9.

Ec 11. Posteriormente se realizó la curva de adición

estándar (gráfica 2) a partir de los datos
obtenidos en la tabla 10.
Ec 12.
Donde:
m: pendiente de la curva
K: es una constante arbitraria perteneciente a
los números enteros, para el límite de detección
K=3 y para el límite de cuantificación K=10.
S​R​: desviación de la regresión o desviación
estándar de los residuos.

Tabla 9. Limites de deteccion y cuantificacion para los

Gráfica 2. Curva de calibración por adición estándar entre
datos obtenidos a partir de las muestras.
el índice de refracción menos el blanco (ɳ - blanco) y la
concentración del etanol 96% V/V.

Seguido a esto se realizaron los respectivos

cálculos de mínimos cuadrados, con el fin de
conocer las sumatorias de cada cuadrante
(X,Y) y así comprobar la linealidad de la curva,
empleando las ecuaciones 3, 4 y 5, los
resultados obtenidos se plasmaron en la tabla
11.
Tabla 11. Sumatorias de los ejes X y Y, obtenidos a partir
de los mínimos cuadrados.
Se realizaron cálculos de regresión para la
gráfica y se consignaron en la tabla 13.
Tabla 13. Datos obtenidos para la regresión de la
pendiente (b) y el intercepto (a), con sus respectivos
límites de confianza y desviaciones.

Haciendo uso de las ecuaciones 6 y 7 se

calcularon los coeficientes de correlación (r) y
determinación (r​2​), posteriormente se evaluó
por medio de la prueba t Student la linealidad
de la recta, con un nivel de confianza del 95% y
n-2 grados de libertad, teniendo en cuenta que
si Texp > Ttab se acepta la hipótesis nula (H​0​),
tabla 12.

H​0​: Si hay linealidad y correlación entre los

datos.
H​a​: No hay linealidad ni correlación entre los
datos.

Tabla 12. ​Parámetros estadísticos y test de hipótesis para

r y r​2​.

Seguidamente se realizaron los cálculos

respectivos para saber la concentración de
etanol que se encontraba en la muestra
comercial de aguardiente “Sello blanco” 24%
(Ec 13), la incertidumbre de la medición SX​ E
(Ec 14), el intervalo de confianza (Ec 15) y el
porcentaje de error (Ec 16), teniendo en cuenta
el índice de refracción obtenido en el
refractómetro y la resta del blanco, tabla 14 y
15.

Ec 13.

Ec 14.
Ec 15.
Ec 16.
Tabla 14. Índice de refracción menos el blanco (ɳ - blanco)
de una solución de aguardiente “Sello blanco” 24%.
Tabla 15. ​Datos obtenidos para la muestra, señal,
concentración, desviación, intervalos de confianza y
porcentaje de error respectivamente.
Finalmente se calcularon los limites de
deteccion y cuantificacion empleando las
ecuaciones 11 y 12, tabla 16.
Tabla 16. Limites de deteccion y cuantificacion para los
datos obtenidos a partir de la muestra.
Comparacion de metodos:
Mediante la comparación de las pendientes, se
determinó a través de una prueba de
significación t si hay interferencia de matriz, al
comparar las curvas del patrón externo y la
adición estándar (gráfica 3).
Gráfica 3. Comparación de sensibilidades entre el índice
de refracción de las curvas de calibración por patrón
externo (ɳ) y adición estándar (ɳ-blanco) para la muestra
de aguardiente vs el % V/V.
Para determinar tales efectos de matriz se
plantearon las hipótesis respectivas:
H​0​: La pendiente de la curva de calibración por
patrón externo, no difiere significativamente de
la pendiente de la curva de calibración por
adición estándar para la determinación de
etanol en la muestra de aguardiente, por lo que
no hay evidencia de efectos de matriz.
H​a​: ​La pendiente de la curva de calibración por
patrón externo, si difiere significativamente de
la pendiente de la curva de calibración por
adición estándar para la determinación de
etanol en la muestra de aguardiente, por lo que
hay evidencia de efectos de matriz.
Posteriormente se procedió a calcular la
desviación de la regresión S​R (Ec 17) y la
prueba t (Ec 18).
Ec 17.
Ec 18.
Donde:
f​1 y f​2​: son los grados de libertad (n-2), en este
caso 4 y 3 respectivamente.
S​R1 y​ S​R2​: desviación de la regresión para la
curva de patrón externo y adición estándar
respectivamente.
b​1 y b​2​: pendiente de patrón externo y adición
estándar respectivamente.
SXX​1 y SXX​2​: sumatoria del cuadrante XX para
las respectivas curvas.
A su vez, ya que el índice de refracción varía
dependiendo de la longitud de onda de la luz y
de la temperatura​(3)​, la interacción entre la
radiación y el medio ocasiona una reducción en
la velocidad de la luz mientras ésta camina a
través del medio​(2)​. Este fenómeno está
relacionado con el índice de refracción por:
Ec. 2

Para así obtener: Donde “𝑐” y “𝑣” son las velocidades de

propagación de la radiación en el vacío y en el
medio. Por tanto, el índice de refracción
quedaría definido por la ecuación 3 que refleja
el índice de refracción absoluto. (1) Ya que la
velocidad de la luz en el aire es siempre mayor
que la velocidad en un líquido o sólido, el
índice de refracción siempre será mayor de 1.
(3)
Teniendo en cuenta los valores estadísticos de
t (t​cal = 0,13 y la t​crit = 2,36) para 7 grados de
libertad, las pendientes resultan ser
significativamente diferentes a un intervalo de Ec. 3
confianza del 95%. Por lo tanto, hay evidencia
El índice de refracción está directamente
de efectos de matriz durante el análisis del
relacionado con el número, la carga y la masa
etanol en la muestra de aguardiente.
de las partículas vibrantes de la sustancia a
través de la cual se transmite la radiación. Así,
2. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
se ha comprobado que para un grupo de
La refracción de la luz es una propiedad física
compuestos estructuralmente parecidos, el
característica de muchas sustancias; es el
índice de refracción varía con la densidad y el
cambio de dirección de una onda
peso molecular de la muestra. Por eso, esta
electromagnética al pasar de un medio a otro,
técnica se utiliza para la caracterización e
debido al cambio de velocidad que
(1)​
identificación de especies líquidas de manera
experimenta. ​ El índice de refracción cumple la
efectiva. Sin embargo, también se emplean
siguiente relación, conocida como ley de Snell,
para medir sólidos y gases, como vidrios o
que define el llamado índice de refracción (h):
gemas.​(2,3)

Las medidas de índice de refracción frente al

Ec. 1
Donde “𝑖” y “𝑟” son los ángulos de incidencia y
refracción que forma el haz con la normal a la
superficie de separación.
aire, en lugar de frente al vacío, introducen un
error despreciable (0.03%), por lo que la
mayoría de los valores tabulados se han
realizado frente al aire y las medidas habituales
también se suelen hacer frente al aire.​(2) Las
variables más importantes en la medición del
índice de refracción son la longitud de onda de
la radiación incidente y la temperatura, por eso
ambas variables deben especificarse a la hora
de reportar los resultados, La temperatura es
un parámetro que influye en las mediciones del
índice de refracción, ya que en la mayoría de
los líquidos el valor disminuye
aproximadamente 0.00045 al aumentar 1 °C;
En general, la disminución del índice de
refracción con el aumento de temperatura, se
debe a la disminución de la densidad y
constante dieléctrica del medio. El índice de
refracción es característico de cada líquido a
una temperatura determinada, comúnmente 20
°C, por lo que se utiliza como criterio de
identificación de compuestos puros. Por lo
anteriormente mencionado, si la medición no
se toma a 20 °C, debe realizarse una
corrección. Para la mayoría de los líquidos
orgánicos, el índice de refracción cambia entre
0.00035 a 0.00055 unidades/°C. Si no se
conoce el factor de corrección exacto para un
líquido particular, se elige generalmente
0.00045 unidades/°C. Usando este valor, la
ecuación 4 nos permitió calcular el índice de
refracción a 20 °C pues el mismo fue tomado a
otra temperatura. Los valores comúnmente
medidos de n fueron mayores que 1, debido a
que la luz está pasando del aire a un medio
más denso (sustancia de análisis). (3) Conviene
mantener bien limpios los prismas y efectuar
varias medidas del índice de refracción para
promediar el valor final.
Para la línea de calibración por patrón externo
se obtuvieron los índices de refracción
reportados en la Tabla 1. Concentración (%
V/V) de etanol 96% con su respectivo índice de
refracción. A partir de los cuales se realizó la
curva de calibración, mostrada en la Gráfica 1.
Curva de calibración por patrón externo entre el
índice de refracción y la concentración del
etanol 96% V/V donde se observa cómo se
forma una tendencia lineal y creciente respecto
al índice de refracción y a la concentración
porcentual v/v de los balones aforados
evaluados, pues mientras una variable
aumenta, lo hace también la otra, demostrando
de esta manera una correlación exacta y
precisa de los valores y una función que
muestra la relación entre estas variables.
Seguido a esto se realizaron los cálculos de
mínimos cuadrados, con el fin de conocer las
sumatorias de cada cuadrante (X,Y) y así
comprobar la linealidad de la curva, estos
valores son reportados en la Tabla 2.
Sumatorias de los ejes X y Y, obtenidos a partir
de los mínimos cuadrados, que demostraron
dado nuestro conjunto de variables ordenadas
(variable independiente, variable dependiente)
y una familia de funciones, una función
continua que mejor se aproxime a los datos
para encontrar aquellos valores de a y de b que
hagan mínima la suma de los cuadrados de las
desviaciones de las observaciones respecto de
la recta que representa el modelo en el sentido
vertical, de acuerdo con nuestros datos
obtenidos y el criterio de mínimo error
cuadrático se entiende que mientras más nos
alejamos del centro de los valores de la
variable X, más imprecisas serán nuestras
estimaciones del valor de la variable Y, lo
parece razonable pues se aprecia una leve
pero notoria diferencia entre nuestros datos.
Más adelante se procedió a hallar los
coeficientes de correlación (r) y determinación
(r​2​), que dadas las hipótesis H​0​: Si hay
linealidad y correlación entre los datos. H​ a​: No
hay linealidad ni correlación entre los datos, por
medio de la prueba t Student y teniendo en
cuenta que si Texp > Ttab se acepta la
hipótesis nula (H​0​), teniendo en cuenta los
datos de la Tabla 3. ​Parámetros estadísticos y
test de hipótesis para r y r​2​, Texp 126.0263 fue
mayor a la t teórica 2.78 y se aceptó la
hipótesis nula H​ 0​: Si hay linealidad y
correlación entre los datos y rechazó la Ha: No
hay linealidad ni correlación entre los datos, por
tal motivo se demuestra que hay linealidad y
correlación.
Seguidamente a partir de los datos de la Tabla
5. Índice de refracción de una muestra de
aguardiente 24% V/V, se realizaron los cálculos
respectivos para saber la concentración por el
método de curva de calibración de patrón
externo de etanol que se encontraba en una
muestra comercial de aguardiente del 24%,
cuyos resultados fueron reportados en la Tabla
6. Datos obtenidos para la muestra de
aguardiente, señal, concentración, desviación,
intervalos de confianza y porcentaje de error
respectivamente, obteniendo una
concentración de etanol de 27.4 v/v con un
porcentaje de error del 14% y una variación de
0.4, lo cual demuestra la buena precisión de los
refractómetros, según el cálculo de la variación
ya que este se obtuvo bajo, sin embargo el
error asociado se puede deber a alteraciones
en el momento de la preparación de la muestra
debido a errores sistemáticos; un error puede
ser por parte del analista que no realizó una
adecuada medición de los índices de refracción
en el refractómetro o que interpretó desde su
consentimiento un dato, pues cada persona
tiene una visión diferente en la medida del
índice de refracción. Por otra parte en la
preparación de los patrones y de la muestra,
los volúmenes fueron tomados con pipetas, las
cuales se tenían que lavar para ser utilizadas y
el agua impregnada en las paredes luego de
ser lavadas pudo afectar la concentración de la
muestra por pequeñas diluciones, produciendo
un error a la hora de encontrar la
concentración. (2)
​ adelante se procedió a hallar los coeficientes
La adición estándar es aplicable a todo análisis
en el cual los efectos de matriz sobre la
concentración real del analito sean
considerablemente altos, es decir, que afecten
significativamente la señal del analito, el
método de adiciones estándar es un método
mucho más exacto que el método de
calibración normal, ya que al eliminar los
efectos de matriz presentes en la cuantificación
del analito permite mejorar considerablemente
la exactitud del resultado, sin embargo entre los
inconvenientes encontramos que su precisión
se ve desmejorada (repetitividad
reproducibilidad) ya que no se trabaja en el
centroide de la curva (generalmente no se
conoce una concentración teórica del analito) y
la determinación de la concentración es
realizada utilizando la técnica de
(2)
extrapolación.​
Para el método de adiciones estándar, de igual
forma que se hizo con la curva de calibración
por patrón externo, se obtuvieron los índices de
refracción reportados en la Tabla 10.
Concentración (% V/V) de etanol 96% con su
respectivo índice de refracción y la resta con el
blanco (agua). A partir de los cuales se realizó
la curva de calibración, mostrada en la Gráfica
2. Curva de calibración por adición estándar
entre el índice de refracción menos el blanco (ɳ
- blanco) y la concentración del etanol 96%
V/V, donde se observa cómo se forma una
tendencia lineal y creciente respecto al
n-blanco y a la concentración porcentual v/v de
los balones aforados evaluados, pues mientras
una variable aumenta, lo hace también la otra,
demostrando de esta manera una correlación
exacta y precisa de los valores y una función
que muestra la relación entre estas variables.
Seguido a esto se realizaron los cálculos de
mínimos cuadrados, con el fin de conocer las
sumatorias de cada cuadrante (X,Y) y así
comprobar la linealidad de la curva, cuyos
valores son reportados en la tabla 11 y 12, más
de correlación (r) y determinación (r​2​), que
dadas las hipótesis H​0​:Si hay linealidad y
correlación entre los datos. H​a​: No hay
linealidad ni correlación entre los datos por
medio de la prueba t Student y teniendo en
cuenta que si Texp > Ttab se acepta la
hipótesis nula (H​0​), pues Texp que es 25.5904
es mayor a la t teórica 3.18 es decir, se acepta
la hipótesis nula H​0​: Si hay linealidad y
correlación entre los datos y rechaza la Ha: No
hay linealidad ni correlación entre los datos, por
tal motivo se demuestra que hay linealidad y
correlación.
y

En la Tabla 4. Datos obtenidos para la
regresión de la pendiente (b) y el intercepto (a),
con sus respectivos límites de confianza y
desviaciones, y la Tabla 13. Datos obtenidos
para la regresión de la pendiente (b) y el
intercepto (a), con sus respectivos límites de
confianza y desviaciones se consignaron los
datos respectivos a la regresión con sus
respectivos límites de confianza y método de adiciones estándar es un método
desviaciones, donde se reporta el valor de la
pendiente para estándar externo de un valor de
0.0006 que es el que se compara con el dato
de la pendiente de adiciones estándar, el cual
fue de 0.0005 con el fin de determinar si había
interferencia de matriz haciendo uso de la
prueba t, la Gráfica 3. Comparación de
sensibilidades entre el índice de refracción de
las curvas de calibración por patrón externo (ɳ)
y adición estándar (ɳ-blanco) para la muestra
de aguardiente vs el % V/V obtenida,
demuestra que según las hipótesis: H​0​: La
pendiente de la curva de calibración por patrón
externo, no difiere significativamente de la
pendiente de la curva de calibración por adición
estándar para la determinación de etanol en la
muestra de aguardiente, por lo que no hay
evidencia de efectos de matriz y Ha: La
pendiente de la curva de calibración por patrón
externo, si difiere significativamente de la
pendiente de la curva de calibración por adición
estándar para la determinación de etanol en la
muestra de aguardiente, evidencia que se
presentan efectos de matriz, pues según la S​r
de 4.21x10​-4 y la t exp de 0.13 respecto a la t
crítica de 2.36 las pendientes resultan ser
significativamente diferentes a un intervalo de
confianza del 95%. Por lo tanto, hay evidencia
de efectos de matriz durante el análisis del
etanol en la muestra de aguardiente.
Seguidamente a partir de los datos de la Tabla
14. Índice de refracción menos el blanco (ɳ -
blanco) de una solución de aguardiente, se
realizaron los cálculos respectivos para saber
la concentración por el método de adiciones
estándar de etanol que se encontraba en una
muestra comercial de aguardiente del 24%,
cuyo resultado según la Tabla 15. ​ Datos
obtenidos para la muestra, señal,
concentración, desviación, intervalos de
confianza y porcentaje de error
respectivamente, fue de 9.3 v/v con un
porcentaje de error del 61%. Por lo
anteriormente mencionado, debido a que el
mucho más exacto que el método de
calibración normal, ya que al eliminar los
efectos de matriz presentes en la cuantificación
del analito, permite mejorar considerablemente
la exactitud del resultado, su precisión se ve
desmejorada (repetitividad y reproducibilidad)
ya que no se trabaja en el centroide de la curva
(el problema del centroide de la curva se
eliminó en gran medida al considerar este en la
preparación de las soluciones, razón por la cual
el volumen añadido a cada matraz de muestra
para la adición de estándar, representaba una
concentración teórica igual al centroide de la
curva.) y la determinación de la concentración
es realizada utilizando la técnica de
extrapolación (como se pudo observar en los
cálculos, para hallar la concentración del
analito en la solución de trabajo solución 1 sin
adición de estándar no sólo fue necesario
extrapolar la ecuación de la recta obtenida
hasta y=0, a este paso fue adicionado el hecho
de tener que restar el índice de refracción del
agua a las concentraciones obtenidas), lo
anteriormente mencionado se realizó puesto
que los datos obtenidos no corresponden como
tal al índice de refracción del etanol puro a una
temperatura de 20ºC, su señal podría
considerarse como la suma de 2 analitos
presentes, tanto del etanol como del agua, y
puesto que los índices de refracción en este
caso depende la concentración, dicha señal
obtenida debe ser corregida, razón por la cual
se hizo la resta del índice de refracción del
agua a la concentración de los balones
aforados evaluados en la curva de calibración.
De no haber hecho esto, la concentración que
se obtiene es demasiado grande, y carece de
sentido. (2)
​ utilizadas y el agua impregnada en las paredes
En lo que respecta a la exactitud del método,
se observó en la práctica que no se cumple con
lo estipulado por la teoría, ya que la exactitud
obtenida por el método de calibración regular
fue considerablemente mayor a la obtenida por
el método de adiciones de estándar, esto en
términos de % de error. Lo anterior significa no
solo que los efectos de matriz presentes son
nulos, o de existir estos, no interfieren con el
análisis normal de la muestra sino que lo más
probable es que haya existido un error
sistemático tanto en la preparación de la curva
como en la lectura de los patrones
correspondientes ya que como se mencionó
anteriormente, se esperaba un % de error bajo
en comparación con el obtenido haciendo uso
de la curva de calibración.​(2)
Respecto a la cuantificación de etanol con
cerveza marca “Poker” enlatada mediante
destilación, después de medir su índice de
refracción reportado en la Tabla 7.Índice de
refracción de una muestra de cerveza marca
Poker 4%V/V se determinó la concentración de
alcohol, la cual según la Tabla 8. Datos
obtenidos para la muestra de cerveza, señal,
concentración, desviación, intervalos de
confianza y porcentaje de error
respectivamente fue de 4.6 V/V con un
porcentaje de error de 15% y una desviación de
0.3 lo cual demuestra la buena precisión de los
refractómetros, sin embargo el error asociado
se puede deber a alteraciones en el momento
de la preparación de la muestra pues los
errores sistemáticos pudieron influencia; un
error puede ser por parte del analista que no
realizó una adecuada medición de los índices
de refracción en el refractómetro o que
interpretó desde su consentimiento un dato,
pues cada persona tiene una visión diferente
en la medida del índice de refracción. Por otra
parte en la preparación de los patrones y de la
muestra, los volúmenes fueron tomados con
pipetas, las cuales se tenían que lavar para ser
luego de ser lavadas pudo afectar la
concentración de la muestra por pequeñas
diluciones, produciendo un error a la hora de
encontrar la concentración o ya que el
procedimiento se hizo a través de destilación
podemos encontrar errores en cuanto al corto
tiempo de duración del proceso, la cantidad de
muestra tomada (que pudo ser inexacta o
alterada debido a que los volúmenes fueron
tomados con pipetas, las cuales se tenían que
lavar para ser utilizadas y el agua impregnada
en las paredes luego de ser lavadas pudo
afectar la concentración de la muestra por
pequeñas diluciones) y la pérdida de vapor por
errores sistemáticos o aleatorios.
3. SOLUCIÓN AL CUESTIONARIO
Como se realiza la calibración del
refractómetro?
1. Limpiar correctamente la lente para
eliminar el polvo con una servilleta de
papel. Puede usarse agua si se
visualiza alguna mancha en el medidor.
2. Encender el equipo. Debería indicar por
la pantalla digital que no se dispone de
ninguna muestra ni se encuentra
calibrado. En caso de mostrar algo
diferente, presione RESET para
comenzar desde el principio.
3. Arrojar unas gotas de agua libre de
sales, azúcares y alcohol en la lente
para marcar el punto cero (ver debajo
las opciones disponibles) hasta cubrir la
lente dejando aproximadamente 2 mm
de borde.
4. Presionar el botón ZERO. Dependiendo
del modelo de refractómetro digital que
tengamos, veremos una luz en la lente
o alguna animación en la pantalla y
luego tendremos, por el display digital,
el aviso de que se encuentra en cero.
 5. Remover el agua de la lente y limpiarlo
con una servilleta de papel. Ya estamos
en condiciones de empezar a medir.​(4)
4. CONCLUSIONES
● El método de curva de calibración por
patrón externo es más preciso que el
método de curva de calibración por
adición estándar.
● La refractometría es un tipo de análisis
cuantitativo que se utiliza para el
análisis cualitativo como estándar de
pureza de un líquido.
● Se determinó la concentración de etanol
dentro de las dos curvas (patrón
externo y adición estándar) obteniendo
un mejor resultado en la curva de
patrón externo, lo cual indica las
posibles interferencias de efectos de
matriz durante el análisis del etanol en
la muestra de aguardiente, debido a las
variaciones de la señal analitica frente a
la concentración de la especie a
determinar.
● La concentración obtenida para el
destilado de cerveza, fue muy cercano
al valor real y con una desviación y
porcentaje de error relativamente
pequeños, lo cual demuestra la buena
precisión de los refractómetros aunque
también se pudieron presentar posibles
errores en el momento de la
preparación de la muestra pues los
errores sistemáticos pudieron
influenciar.
● El uso del refractómetro es importante,
ya que con él no solo se puede medir el
índice de refracción para bebidas
alcohólicas, si no que también se puede
utilizar en otros productos alimenticios
como lo son la determinación de sólidos
solubles en frutas y producto frutales.
● Es importante realizar el análisis con
material, en este caso las pipetas, en
unas correctas condiciones a la hora de
utilizar las sustancias y aún más
importante en el tratamiento de la
muestra, pues a esta es a la que se le
va a realizar el respectivo análisis, para
evitar posibles errores.
5. REFERENCIAS
[1] Refractometría (en línea) Visitada el 22 de
Marzo de 2020;
http://equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_
mo.php?it=398 3
[2] Refractometría (en línea) Visitada el 22 de
Marzo de 2020;
http://campus.usal.es/~quimfis/apoyo/Carmen/
Practicas/Practi caRefractometria.PD​F
[3] Determinación del índice de refracción 2 (en
línea) Visitada el 22 de Marzo de 2020;
file:///D:/Users/Usuario/Downloads/recursos_ar
chivos_70589_70589_478_recursos-archivos-7
0589-70589-157-capítulo-2-0418.pdf
[4]​Refractometro10.com. 2020. [online]
Available at:
<https://refractometro10.com/calibracion/>
[Acceso 22 Marzo 2020].