UNIDAD 2

Organización tisular
métodos histológicos
 NIVELES DE
ORGANIZACIÓN DE LOS
SERES VIVOS
NIVEL SUBATÓMICO

Formado por las partículas constituyentes del átomo

(protones, neutrones y electrones).
Átomo
Compuesto por los
átomos que son la
parte más pequeña
de un elemento
químico. Ejemplo:
el átomo de hierro
o el de carbono.
Moléculas

Formado por las moléculas que son

agrupaciones de dos o más átomos
iguales o distintos. Dentro de este
nivel se distinguen las
macromoléculas, formadas por la
unión de varias moléculas.
Las células se organizan en tejidos
 TEJIDOS

Conjunto organizados de
células con funciones
especificas
Matriz extracelular
Tipos de tejidos
Conjunto de procedimientos aplicados a un
material biológico (animal o vegetal) con la
finalidad de prepararlo y conferirle las
condiciones óptimas para poder observar,
examinar y analizar sus componentes
morfológicos a través de los microscopios
fotónicos y electrónicos.
Examen microscópico de un trozo de tejido o
una parte de líquido orgánico que se extrae de
un ser vivo.

Examina las células o tejidos bajo un

microscopio para verificar si hay daños o
enfermedad
1. Obtención del material
2. Fijación -Mantener las estructuras
en el estado más parecido al
que poseían in vivo.
-Evitar la lisis celular y
la proliferación bacteriana
-Dar cierta solidez o
dureza al tejido o material.
-Detiene los procesos
vitales pero en ciertas
condiciones mantiene las
actividades de algunos
componentes moleculares,
Alcohol etílico por ejemplo la actividad de
Alcohol metílico algunas enzimas
Esto se consigue inmovilizando (por coagulación o precipitación) las
moléculas proteínicas e inhibiendo principalmente las enzimáticas
haciéndolas insolubles. Esta acción garantiza la integridad de las células
y tejidos; se efectúa por mediante agentes químicos denominados
fijadores.
Requisitos de un buen fijador
• Actuar rápido para detener los
procesos de Autolisis
• Poder de penetración
• Conservación
• No interferir en procesos siguientes
• Endurecer los tejidos
• Darle Mayor consistencia
El tiempo de la fijación
depende del tamaño
de la muestra.
3. Deshidratación
Esto se hace por que si se
colocara el tejido en una
solución al 100% de alcohol
inmediatamente, el agua
saldría muy rápido del tejido y
se deformaría.

Serie gradual de soluciones acuosas de menor a

mayor de agente deshidratante, por ejemplo, Alcohol
Etílico o Acetona.
4. Aclaramiento El tejido se torna transparente o claro en el xileno,
esto se debe a que cambia su índice de refracción.

Tolueno, Benzol o
Cloroformo

Eliminación de alcohol
5. Infiltración e Inclusión

La inclusión se logra al infiltrar la parafina

liquida o cualquier medio de inclusión en
estado líquido al tejido, que disuelve el medio
de aclaramiento y penetra en el tejido.

Por lo general se coloca la muestra de tejido

en un recipiente y se le agrega la parafina
fundida a 60º C, colocando la muestra en una
estufa de 30 minutos a 6 horas manteniendo
la temperatura a 60º C.
6. Selección o corte
❑El taco ahora se puede cortar en secciones lo
suficientemente delgadas como para permitir el
paso de la luz.

❑La mayor parte de los preparados para

microscopia óptica tienen un grosor entre 3 a 10
micrómetros.

❑Para estos cortes se utiliza un aparato llamado

MICROTOMO .
7. Coloración y Montaje
Las tinciones son combinaciones de colorantes
ácidos y básicos que permiten obtener suficiente
contraste de color en los cortes histológicos
comunes
Hematoxilina y COLORACION O TINCION DE LA MUESTRA
Eosina: La PAS (Ácido Tricrómico de
hematoxilina al Peryódico de Nissl: Tiñe de
Masson: Tiñe de
ser básica tiñe Schiff): Tiñe color morado el
color azul la
ácidos de color carbohidratos retículo
colágena, de rojo
morado (núcleos (mucopolisacári endoplásmico
la queratina, y
con DNA y dos) de color rugoso y los
de morado los
RNA), mientras rojo, por corpúsculos de
núcleos (muy
que la eosina es ejemplo las Nissl en las
utilizada para los
un ácido y tiñe células neuronas.
cortes de piel).
bases de color caliciformes en
rosado el intestino.
(citoplasma).
Pentacrómico de Movat: Tiñe de
amarillo la colágena, los músculos de
color rojo, de azul mucopolisacáridos, la
elastina de color negro, y los núcleos de
morado.

Wright: utilizado en frotis sanguíneos,

permite observar todas las células
sanguíneas, coloreando los eritrocitos de
color rosado, con un centro claro.
Permite observar todas las células
sanguíneas, coloreando los eritrocitos de
color rosado, con un centro claro.

Reyes Mota: Tiñe la elastina de color

morado.
 EJEMPLOS DE COLORACIONES Tricrómico de Van Gieson.
Resultados:
Coloración Hematoxilina-Eosina
Células:
Resultados:
- Núcleos: negro - azul
Núcleos y material basófilo en
- Citoplasma: amarillo
tonos de morado.
Citoplasma en tonos de rosado
Colágeno: rojo intenso
Glándula salival Sublingual,
Piel humana, objetivo 40X
objetivo 40X

Impregnación Argéntica
Resultados:
Célula (neurona):
-Soma y prolongaciones
(dendritas, axón) de color
pardo oscuro

Corteza cerebral de rata,

objetivo 40X
Ácido Periódico de Schiff (PAS)
Hematoxilina
Resultados:
- Núcleos: azul
-Células caliciformes y Chapa
estriada en fucsia

Intestino delgado, objetivo 40X

Corte de piel con tricrómico de Masson

 MONTAJElos
Para observar adecuadamente Y cortes
OBSERVACION
teñidos conEN EL MICROSCOPIO
el microscopio óptico, se ha de proceder a cubrir las
preparaciones mediante un cubreobjetos.

Para ello se requiere la utilización de una sustancia

cementante o medio de montaje.

Si durante la técnica de tinción se han empleado

colorantes hidrosolubles, deben utilizarse medios de
montaje no-acuosos, es decir hidrofóbicos.

Si por el contrario, los colorantes utilizados son no-

iónicos, es preceptivo utilizar un medio de montaje
hidrosoluble. Antes de su aplicación, los cortes deben
hidratarse convenientemente.