ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DEL LITORAL

FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA, CIENCIAS

BIOLÓGICAS, OCEANOGRÁFICAS Y RECURSOS
NATURALES
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO

CÓDIGO

MATERIA Cultivo de Plancton FMAR02519

NOMBRE Marcela Denisse Muzzio Villafuerte

PARALELO 1

Usos y cuidados de la autoclave como método de esterilización (olla de

TEMA DE LA PRÁCTICA
presión)

FECHA 14/01/2017

1. Objetivo General:

 Utilizar el Autoclave como método de esterilización de materiales de Laboratorio.

2. Objetivos Específicos:

 Dar a conocer el proceso de utilización de la autoclave, mediante la esterilización de

botellas con agua de mar.
 Conocer la correcta manipulación de este aparato para evitar futuros accidentes, ya
que maneja grandes cantidades de vapor y temperaturas altas.

3. Introducción:

La esterilización es un procedimiento por el cual se llega a la eliminación total de todas los

microorganismos como bacterias, hongos, virus etc., es un término utilizado de forma
absoluta, donde un objeto está esterilizado o no, sin ningún rango intermedio.
La autoclave es un aparato diseñado con el fin de esterilizar los materiales de laboratorio,
utilizando el vapor de agua (de manera que el agua no llegue a la ebullición, a pesar de estar
en una alta temperatura). En su uso se basa en la coagulación de las proteínas presentes en
los microorganismos gracias a la temperatura y presión. El funcionamiento se da a través de
la entrada de vapor de agua y evitando su salida, hasta obtener 103 KPa como presión
interna, provocando que el vapor llegue a 121°C. Generalmente el proceso dura de 15-20
minutos, dependiendo, inclusive puede llegar a 40 minutos. El contener fluido a una presión
alta implica que estos aparatos deben ser de manufactura sólida como metal procurando que
su construcción sea totalmente herméticas. Por otra parte hay materiales como el plástico a
excepción del polipropileno y el papel que no pueden ser esterilizados en la autoclave. Es
un instrumento que puede estar en cualquier laboratorio sin algún requerimiento especial. La
presión y temperatura varían según los materiales a esterilizar. Las autoclaves presentan
medidores de temperatura para verificar el funcionamiento del aparato.

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Figura 1.Principales partes de la autoclave

4. Materiales y metodología
Materiales:
Los materiales a utilizar son: una autoclave y botellas con agua de mar que serán auto
clavadas.

Metodología:
En esta se colocaron adentro de la olla botellas de vidrio con agua de mar para
posteriormente utilizar para preparar medio f/2, además de agua, luego se la cierra con la
tapa asegurando con los pernos, estos deben ser ajustados usando una llave, al hacerlo, estos
deben estar en forma de cruz y siempre poner el perno que está situado al frente, antes de
continuar con los que están ubicados en los lados. Una vez instalado el equipo, se conecta y
presiona el botón de encendido, luego se sube la perilla al máximo, esta corresponde a la
temperatura; se espera hasta que se caliente e indique 5 toneladas. Después, levantamos la
válvula con una varilla para dejar salir el vapor, hasta que indique 0, luego se baja la válvula
hasta que el manómetro llegue a 15 toneladas, y tratar de mantener esa presión
aproximadamente unos 30 minutos, luego se alterna la subida y bajada de tal forma que el
15 quede constante. Una vez que pase el tiempo, la válvula se sube hasta que no haya señal
de vapor y obviamente que la olla esté fría, se mueve la perilla hasta marcar la temperatura
más baja, de esta forma para poder apagar y desconectar el aparato.

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5. Resultados:

El proceso de esterilización duró aproximadamente una hora, porque eran 3 botellas

medianas y una grande. Como resultado, se obtuvieron las botellas esterilizadas, listas para
preparar medio f/2.

6. Recomendaciones y Conclusiones:

Conclusiones:

 Se dio a conocer el manejo de la autoclave, así como la importancia de la colocación

de los pernos en la autoclave, ya que esto mantiene un equilibrio y evita que la tapa
se salga debido a tanta presión a la que se somete. Por otra parte el tiempo depende
del tamaño de los materiales.
 Se esterilizaron las 4 botellas con agua de mar, usando la autoclave.

Recomendaciones:

 Tener el área despejada y limpia.

 Recordar que primero se coloca el anillo antes de la tapa.
 No apretar tanto los pernos.
 Revisar la distancia entre la tapa y la olla, debe tener una proporción igual en cada
lado.
 Poner atención cuando se marque las 15 toneladas, para poder liberar el vapor caso o
de lo contrario, los materiales pueden romperse (en caso de los vidrios) o echarse a
perder (plásticos), inclusive la tapa se puede salir.

7. Bibliografía:

 Equipos y laboratorio Colombia. (2011). AUTOCLAVES DE LABORATORIO.

2011, de ISONET Sitio web:
http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1498

 RAFAEL VIGNOLI. (2002). ESTERILIZACION Y DESINFECCION. 2002, de

CEFA - Instituto de Higiene Sitio web:
http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf

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8. Anexos:

Autoclave sin tapa Autoclave y tapa Autoclave y botellas a esterilizar

Fuente: Marcela Muzzio Fuente: Marcela Muzzio Fuente: Marcela Muzzio

Autoclave encendido Anillo y Tuerca Marca 0 toneladas

Fuente: Marcela Muzzio Fuente: Carlos Palacios Fuente: Carlos Palacios

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