En la práctica de laboratorio se realizó un cultivo de agar nutritivo de naturaleza

sintética, es decir, obtenido de un medio comercial deshidratado para el que se

conoce su composición exacta, el cual se elaboró en tubos de ensayo al 2,5% de
agar-agar y 1,5% de suplemento, disueltos en agua destilada. El agar-agar son
moléculas que polimerizan los líquidos, el cual no es nutritivo, se utiliza para dar
consistencia al medio de cultivo. La composición del suplemento cuenta con
moléculas de peptona, extracto de levadura, dextrosa, vitaminas, entre otros
nutrientes necesarios para el crecimiento de microorganismos. El agar nutritivo es
un medio sólido y simple, que se emplea como medio de cultivo para el
aislamiento de bacterias poco exigentes nutricionalmente.
AGAR. Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo.
En el agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que no es
utilizado como nutriente por los microorganismos. [ CITATION Uni19 \l 9226 ]
Para conseguir medios sólidos se agrega a un medio líquido agar en una
proporción del 1.5% al 2%. Hoy en día se presenta en forma de polvo que incluye
el agar, el punto de fusión de estos medios oscila alrededor de los 98ºC y se
solidifica al enfriarse al 42-45ºC.[ CITATION Jan01 \l 9226 ]
Los medios sintéticos o químicamente definidos llevan fuentes de carbono,
nitrógeno, sales que suplan iones (P, K, Mg, Fe, Ca, etc.), otros elementos como
estimuladores de crecimiento pero siempre a concentraciones conocidas. [ CITATION
Min \l 9226 ] La mayoría de los medios de cultivo se encuentran bajo la forma de
liofilizados a los que es preciso rehidratar. [CITATION Uni19 \l 9226 ]
El medio de cultivo de agar nutritivo es no selectivo, en el cual la pluripeptona y el
extracto de carne constituyen la fuente de carbono, nitrógeno y aportan nutrientes
para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico y el agar es el agente solidificante. [ CITATION Lab \l 9226 ]

Antes de su esterilización los medios líquidos se reparten en los recipientes

adecuados (tubos, matraces, etc.). Si es un medio sólido y se ha de distribuir en
tubos ó en matraces será necesario fundir el agar en baño Maria u horno
microondas, una vez fundido y homogenizado, se distribuye en caliente a los tubos
ó matraces (no en placas Petri) se tapa y se esteriliza en el autoclave. Una vez
finalizada la esterilización los medios se dejaran enfriar a temperatura ambiente y
en el caso de medios sólidos contenidos en tubos deberán, en su caso, inclinarse
para que al solidificarse adopten la forma de agar inclinado ó pico de flauta(slant)
si tal es su finalidad
Los medios con contenido acuoso han de ser esterilizados en el AUTOCLAVE
mediante calor húmedo. En este sistema el vapor de agua sobrecalentado a 121
(2 atm) o 111 ºC (1.5 atm) difunde muy rápidamente, haciendo que los elementos
termosensibles de las células se desnaturalicen, especialmente sus enzimas. Por
lo tanto, una vez preparados los medios de cultivo hay que proceder a su
esterilización en autoclave, realizada habitualmente a 1 atm de sobrepresión
(121ºC) durante 15 ó 20 min., salvo en el caso de medios cuyos componentes
sufran alteraciones tales que los hagan inadecuados para el crecimiento.
[ CITATION Cen10 \l 9226 ]

Por otra parte, todo el material de vidrio se esteriliza mediante calor seco en el
Horno Pasteur. Una vez limpio, el material se envuelve en aluminio o se introduce
en un contenedor y se mantiene en el horno durante dos horas a 160ºC. [ CITATION
Cen10 \l 9226 ]

https://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/2394/4.METODOLOGIA.pdf?
sequence=4
https://es.slideshare.net/carolinacartagenad/cultivo-y-aislamiento-de-bacterias
http://www.etpcba.com.ar/DocumentosDconsulta/ALIMENTOS-PROCESOS%20Y
%20QU%C3%8DMICA/Manual-de-Microbiolog%C3%ADa.pdf
http://agro.unc.edu.ar/~microbiologia/wp-content/uploads/2014/04/Guia-de-
Trabajos-Practicos.pdf
https://issuu.com/sandralucia.71/docs/manual_preparacion_de_medios_de_cul
https://es.slideshare.net/JuanHM3/medios-cultivo-microbiologia
http://agro.unc.edu.ar/~microbiologia/wp-content/uploads/2014/04/Guia-de-
Trabajos-Practicos.pdf