Informe de laboratorio de bioquímica

Practica N°4 vitaminas y minerales

Presentado por: Pacheco Corcho María Angélica

Luisa Ramos Hernández
Natalia Paola Reyes Ávila}
Surique Mestra Kathy Yulieth
 Keyla Vega Altamiranda

Presentado A: María Eugenia Doria Rodríguez

Universidad de Córdoba
Facultad ciencias de la salud
Programa tecnología en regencia de farmacia
lll semestre
30/03/2020

Montería – Córdoba
 INTRODUCCIÓN

Las vitaminas las cuales son un grupo de sustancias orgánicas de composición

variada, necesarias en cantidades muy pequeñas (del orden miligramos o
microgramos al día) para el correcto funcionamiento del organismo; Por eso las
llamamos micronutrientes. Son compuestos esenciales que no pueden ser
sintetizados por la mayoría de los animales, por lo que deben ingerirse en la dieta,
en algunos casos se incorporan en forma de provitaminas que, posteriormente,
son transformados en su forma activa.
Desempeñan funciones catalíticas y algunas desarrollan funciones metabólicas
especificas en las rutas de transformación de los micronutrientes (lípidos, hidratos
de carbono y proteínas). A diferencia de estos, no son utilizadas ni como
combustibles, ni para formar estructuras celulares.
 OBJETIVOS

 Separar algunos constituyentes de la leche

 Identificar la presencia de vitaminas y minerales en la leche
 Reconocer la vitamina A presente en la mantequilla
 TEORIA RELACIONADA
Algunas enzimas requieren para su función la presencia de sustancias no
proteicas que colaboran en la catálisis. Estas sustancias se llaman en general
cofactores. Los cofactores de naturaleza orgánica se suelen denominar
coenzimas.
Hay coenzimas que no pueden ser sintetizadas integralmente en el organismo,
sino que algunos de sus componentes o precursores deben ser incorporado a
partir de la dieta. Entre los precursores exógenos necesarios para el normal
desarrollo, crecimiento y reproducción de una variedad de seres vivos se
encuentra un grupo de biomoléculas orgánicas llamadas vitaminas, además de
otras sustancias de carácter inorgánico frecuentemente conocidas como
minerales.
Las vitaminas son sustancias presentes en los alimentos en pequeñas cantidades
que son indispensables para el correcto funcionamiento del organismo. Actúan
como catalizador en las reacciones químicas que se produce en el cuerpo humano
provocando la liberación de energía.
El mineral es una sustancia natural, de composición química definida,
normalmente solido e inorgánico y que tiene una cierta estructura cristalina. Es
diferente de una roca, que puede ser un agregado de minerales o no minerales y
que no tiene una composición química especifica.
 MATERIALES Y REACTIVOS
 Vaso de precipitados de 400ml
 Probeta de 50ml
 Erlenmeyer de 100ml
 Pipetas de 5 y 10ml
 Agitador de vidrio
 Tubos de ensayo (5)

 Ácido acético al 10%

 Ferrocianuro de potasio al 1%
 KCL
 NaOH al 10%
 Alcohol isobutilo

 Gradilla
 Embudo de vidrio
 Espátula
 Vitamina A
 Leche

 Oxalato de amonio al 4%
 Ácido molibdico (solución)
 Acido 1,2,4 aminonaftolsulfonico
 Cloroformo
 PROCEDIMIENTO
1. Precipitación de la caseína
En un vaso de precipitado de 400ml; agregamos 50ml de leche y 50ml de
agua destilada, se añadió con una pipeta gota a gota y con agitación
constante ácido acético al 10% hasta la formación de un precipitado
flocúlenlo de caseína. Se dejó decantar y se filtró sobre gasa; se descanto
la caseína que no era de interés en la presente practica y se conservó el
filtrado para las posteriores pruebas cualitativas de vitamina B1 (tiamina) y
minerales.

50ml 50ml
De leche de agua destilada ácido acético al 10%

Vaso de precipitado precipitado flocúlenlo de caseína

2- vitamina B1
Se vertieron 2.5ml de filtrado en un tubo de centrifuga; añadimos una
pequeña cantidad de KCL, y 0.5ml de ferrocianuro de potasio al 1% y 1ml
de NaOH al 10%, se mezcló y se disolvió totalmente el KCL. Se agregaron
2.5ml de alcohol isobutilo, se agito cuidadosamente por 2 minutos y se
centrifugo por 5 minutos a 200 rpm. La formación de precipitado nos indicó
la presencia de vitamina B1.

OBSERVACIONES
 KCL 0.5ml de ferrocianuro de potasio 1%

1ml de NaOH 10%

2.5ml de filtrado se
obtuvieron unas pequeñas
Partículas de color rojo

Alcohol isobutilico

luego le agregamos los se obtuvo

como resultado
2.5ml de alcohol isobutilico un color más visible
Al obtener estos resultados, observamos que esta sustancia destilaba
pequeñas partículas, lo que indico que en la formación de precipitado hubo
presencia de vitamina B1.

3- CALCIO
A 0.5 ml de filtrado se adicionaron unas gotas de solución de oxalato de
amonio al 4%. Se observó el precipitado que se formó. (se dejó reposar por
10min).

OBSERVACIONES

Oxalato de amonio al 4%

0.5 ml de filtrado se obtuvo una formación de

cristales

Pudimos evidenciar que el calcio se fue al fondo por un exceso de oxalato

de amonio, que precipito el calcio como oxalato de calcio.

4- FOSFATOS
A 0.5 ml de filtrado se adiciono 0.5 ml de ácido molibdico y 0.5ml de ácido
1,2,4 aminonaftolsulfonico. Se observó la coloración obtenida.

OBSERVACIONES

0.5 de ácido molibdico 0.5ml de ácido 1,2,4

aminonaftolsulfonico
 0.5ml de filtrado luego se le agrega 0.5ml de ácido 1,2,4
. aminonaftolsulfonico

observamos que la coloracaion obtenida en la

solucion . fue de color rojo, la cual se
dividia en un color mas . . oscuro y uno mas claro.

5- VITAMINA A
En un tubo de ensayo; se disolvió un capsula de vitamina A de 100u, luego
se disolvió en 1ml de cloroformo y se adicionaron 5 gotas del reactivo de
carr-price. En presencia de vitamina A, se produjo un intenso color azul que
desapareció al poco tiempo.

OBSERVACIONES

Contenido de
Capsula de vitamina A vitamina A
 Contenido de la capsula de vitamina A
Disuelta en el tubo de ensayo 1ml de
cloroformo

5 gotas de reactivo de carr-price

Contenido de vitamina A + 1ml de cloroformo se obtuvo una coloración

azul
la reacción se considera positiva para la vitamina A, una vez se forma una
coloración azul inestable a la luz.
 ANALISIS DE RESULTADO
Para la precipitación de la caseína pudimos analizar que al añadir ácido acético a
la leche se desnaturaliza la caseína, ya que la caseína es una proteína conjugada
de la leche del tipo fosfoproteína (fosfoproteínas son un grupo de proteínas que
están químicamente unidas a una sustancia que contiene ácido fosfórico) que se
separa de la leche por acidificación y forma un amasa blanca, observando así el
fenómeno de coagulación de la leche. Esto porque la caseína tiene baja
solubilidad en un PH acido de 4.6 y como el ácido acético cambio el PH de la
leche que es 6.6 estado donde la caseína se carga negativamente y se solubiliza
en forma de mísera, pasándolo a un PH más acido donde la carga negativa de la
superficie de la micela se neutraliza (los grupos fosfato se protonan) y la proteína
neutra precipita.
la vitamina B1, también conocida como tiamina es una molécula que consta de 2
estructuras cíclicas orgánicas interconectadas: un anillo pirimidina con un grupo
amino y un anillo tiazol azufrado unido a la pirimidina por un puente metileno. Es
soluble en agua e insoluble en alcohol. Su absorción ocurre en el intestino delgado
(yeyuno, íleon), como tiamina libre y como difosfato de tiamina (TDP). En forma
activa el pirofosfato de tiamina o difosfato de tiamina, es sintetizado por la enzima
tiamina pirofosfoquinasa, la cual requiere tiamina libre, magnesio y ATP, actuando
como coenzima en el metabolismo de los hidratos de carbono, permitiendo
metabolizar el ácido pirúvico. Además, participa en la síntesis de sustancias que
regulan el sistema nervioso.
En la práctica del calcio, la determinación del calcio en una muestra de leche que
se llevó a cabo mediante un análisis gravimétrico de precipitación. Se separó la
caseína (parte solida) y el suero de la leche (parte liquida) el cual es quien
contiene el calcio. Cuando se evidencio que le calcio se fue al fondo por el exceso
de oxalato de amonio el cual fue convertido en oxalato de calcio, esto se dio
porque se da un cambio de PH en la sustancia que provoca el precipitado
obteniendo así la formación de cristales que fue observada en la práctica. Por otro
lado, cabe analizar que los cristales de oxalato de calcio en la orina son los
componentes mayoritarios de los cálculos renales y la formación de los cristales
de oxalato de calcio es, además, uno de los efectos tóxicos del envenenamiento
por etilenglicol.
Los fosfatos son las sales o los esteres del ácido fosfórico, el fosfato forma parte
de los nucleótidos los monómeros en que se basa la composición del ADN y
demás ácidos nucleicos. Además, hay fosfato en la composición de algunos
lípidos formadores de membrana como los fosfogliceridos, donde su elevada
constante de ionización contribuye a la carga eléctrica de la cabeza hidrófila. Por
lo que respecta a la determinación del fosforo se utiliza un procedimiento
colorimétrico, que es un método general para determinar este elemento en
diferentes tipos de matrices en las muestras de leche se trata con ácido molibdico
para la obtención de fosfato y acido 1,2,4 amononaftolsulfonico, para la obtención
de la coloración.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. ¿Cuál es el fundamento químico de los procedimientos desarrollados
en la práctica?

Cada practica tuvo una reacción, dependiendo de esta se obtuvo un

fundamento químico, en el que se basó la experiencia, así, para cada caso
tuvimos:
 PRECIPITACION DE LA CASEINA: debido a que la caseína es una
proteína; la adición de ácido acético, a este tipo de sustancia
produce la desnaturalización de la misma, lo que se denota como el
precipitado o filtrado en la práctica.

 VITAMINA B1: el filtrado de la caseína la mezclarse con el KCL, el

ferrocianuro de potasio y el NaOH al 10% al reaccionar con el
alcohol isobutilico causa la precipitación de la vitamina B1.

 CALCIO: en una mezcla de oxalato de amonio con el filtrado de

caseína, reacciona de manera que produce oxalato de calcio en un
precipitado. Ya que se caracteriza por ser insoluble en agua.

 FOSFATOS: la mezcla entre el filtrado de caseína y el ácido

molibdico, en donde el fosfato reacciona con el molibdico con la
muestra de una coloración amarillenta, de manera que produce el
ácido fosfomolibdico, el cual a partir del ácido 1,2,4
aminonaftolsulforico se reduce formando una coloración azul, debido
al molibdeno.
  VITAMINA A: el retinol reacciona con el cloruro de antimonio
produciendo, el intenso color azul, el cual es inestable a la luz, ya
que se desaparece al poco tiempo. Esta coloración al complejo
formado entre el cloruro de antimonio y retinol.

2. ¿Qué importancia presenta la vitamina A, la tiamina, el calcio y los

fosfatos en mamíferos?

La leche materna es un alimento especialmente diseñado durante miles de

años de evolución de los mamíferos; su composición se ajusta
rigurosamente a los requerimientos de cada especie.
LA VITAMINA A: es un nutriente esencial para diferentes funciones
biológicas. La más conocida es la de formar parte de la rodopsina pigmento
visual que permite la visión en penumbra, además, esta vitamina tiene una
importancia especial para la reproducción, el crecimiento y el
mantenimiento de los mecanismos que hacen que las células de la
superficie del aparato digestivo y de los bronquios alcancen y mantengan
sus características normales.

TIAMINA: participa fundamentalmente en el metabolismo de los hidratos de

carbono y aminoácidos. Funciona como coenzima vital para la respiración
tisular, es esencial para el crecimiento y desarrollo norma.

CALCIO: adaptado al espacio fisiólogo y al tamaño del animal puede

ayudar a prevenir afecciones causadas por falta de calcio, como la
osteofibrosis, o por un exceso de este mineral, como las calcificaciones
anárquicas. Los periodos de crecimiento y lactancia son épocas de gran
demanda de calcio.

EL FOSFATO: es un elemento esencial para los seres vivos, otros procesos

químicos de los seres vivos, los cuales no se pueden realizar sin ciertos
compuestos en base a fosforo.
Se encuentra formando parte de los minerales o de los componentes
orgánicos de los tejidos vivos como huesos y dientes, sin la intervención del
fosforo no es posible que un ser vivo pueda sobrevivir.

BIBLIOGRAFIA

PLUMER, D.T. Introduccin a la bioqumica prÆctica. Mexico. MaGraw- Hill

Latinoamericana, S.A. CONN, E y Stumpf, P.K. Bioqumica F. LOPEZ, E
y

ANZOLA, C. Guas de laboratorio de Bioqumica. Facultad de ciencias.

Universidad Nacional de Colombia sede BogotÆ

https://www.slideshare.net/carlosp09/practica-deellaboratorio