A - MANUAL OPERATIVO

INTRODUCCION
Este manual describe la metodología y los procedimientos que hay que aplicar para
hacer funcionar un laboratorio de producción de larvas de camarones de mar
(Penaeus vannamei y P. stylirostris) y su posible utilización en el Penaeus schmitti.

Las diferentes unidades del laboratorio son examinadas una por una :

• Cría de progenitores desde PL10 hasta adultos de 50 g (semi intensiva)

• Almacenamiento de progenitores
• Maduración
• Desove
• Eclosión
• Cría larval
• Producción de algas
• Artemia
• Almacenamiento intensivo.

Otro capítulo revisa, además, la patología general del laboratorio.

Cada capítulo comprende :

• Objetivos
• Normas de funcionamiento
• Programa diario de trabajo

Esta edición es una compilación de los últimos resultados de la técnica

IFREMER/FRANCE-AQUACULTURE, la cual está sujeta a una evolución constante.

Los datos reunidos en este manual tienen solamente un valor indicativo que no sirven
de mucho sin una buena aplicación. Siendo éste el papel del biólogo encargado de la
asistencia técnica, quien podrá adaptar y precisar este manual en relación con el
trabajo práctico de producción.

1 - CRIA DE PROGENITORES DESDE PL10 HASTA ADULTOS

DE 50 G (SEMI INTENSIVA)
La obtención de postlarvas de camarón para su cultivo puede lograrse de la siguiente
mañera :

Postlarvas del medio natural

postlarvas
Hembras maduras del medio natural
huevos
Progenitores del medio natural
maduración
Progenitores criados en cautiverio
La cría de progenitores en cautiverio es esencial en los paises donde existen los
camarones en el medio natural, o donde se plantea introducir especies foráneas para
desarrollar su cultivo.

Este sistema suscita también un gran interés para liberarse de los

factores aleatorios influyendo en el abastecimiento a partir del medio natural :
condiciones metereológicas, temporada de abundancia o ausencia de los animales,
confiabilidad del barco y su tripulación.

Adémas dicho sistema de ciclo cerrado es el único que permite la obtención contínua
de progenitores “libres de virus” y a más largo plazo una selección genética.

1.1. ASPECTOS PRELIMINARES

El método utilizado tiene que alcanzar la producción de animales más grandes que en
el caso del engorde y sus requerimientos más especificos de reproductores.

Entonces es necesario proporcionar a los animales tanto un medio de cultivo, como

una alimentación y un manejo del cultivo de alta calidad, sin que sean prioritarios los
gastos de producción.

Este mejoramiento de la calidad puede lograrse por medio de densidad de cría más
baja, de suministro de agua y/o de aire sin limitación, o de una alimentación natural y/o
artificial la más cercana posible de lo que requieren los animales para reprodurcise.

Por eso, la cría de progenitores difiere significativamente del engorde normal, aun del
cual salen las técnicas.

Ahora, es posible obtener, en 8 a 12 meses de cría, progenitores de las principales

especies de camarón de cultivo.

Sin embargo, según la especie considerada y según elsitio de cultivo, difieren las
técnicas así como los resultados.

1.1.1. Técnicas de cría

Las técnicas actuales son de 2 tipos :

- Semiextensiva en estanques de tierra en 3 fases hasta el tamaño de reproducción.

Las densidades de siembra son muy bajas, y disminuyen en cada fase, lo que permite
utilizar al máximo la producción natural del medio de cultivo. Esta producción natural
se debe a una fertilización exógena (fertilizantes orgánicos e inorgánicos).

El recambio de agua es de moderado a alto y no hay aeración.

- Intensiva en estanques de hormigón en 2 fases. Las densidades de siembra son

altas, a pesar de que disminuyen a cada fase. En este caso, la producción natural del
medio proviene de una fertilización endógena (excreciones de camarones, ciclos de
vida de los organismos de planctón).

El recambio de agua es de bajo a moderado, y el suministro de aire es bastante fuerte

(oxigenación y agitación).
En ambas técnicas se utiliza en la primera fase el mejor alimento balanceado de
engorde que existe. En la última, se sustituye por un alimento balanceado especial
para progenitores, y además un alimento fresco hace parte de la ración.

1.1.2. Calidad del agua

El soporte principal del medio de cultivo es el agua. Del agua dependen unos
parámetros físico-químicos siendo los más importantes :

- La salinidad puede variar de 10 a 38 ‰. Como tal, no parece un parámetro esencial

para el crecimiento. Pero el aporte de agua dulce conteniendo muchos minerales
puede favorecer la producción primaria, es decir la calidad del medio y de la
alimentación.

Las especies como P. schmitti alcanzan salinidades de 45 ‰. Sin embargo, para

obtener progenitores de mejor calidad de reproducción se necesita agua con
características más marinas - 30 a 35 ‰ como óptimo - en los últimos meses de su
crecimiento.

La temperatura debe mantenerse entre 22–24°C y 31–33°C. P. stylirostris es una

especie de baja temperatura. Modera su crecimiento bajo los 22°C y no crece a una
temperatura inferior a los 20°C.

Para P. vannamei, la temperatura óptima se encuentra entre los 25°C y 30°C. Para P.
monodon entre 27°C y 31°C.

Hay que evitar subidas importantes -hasta 38°, 40°C-en el agua del fondo que se
puede calentar muy rápido después de lluvias fuertes : la capa superficial de agua
dulce obra como un lente.

- El pH, en agua de mar bien taponado, queda normalmente entre 7 y 8,7 sin problema
para los camarones. Es también un indicador de la cantidad de fitoplanctón en el agua.
Deben evitarse las variaciones bruscas.

- El oxígeno disuelto, si pasa bajo de 4–5 mm, puede moderar el crecimiento de los
camarones. La concentración letal, menos de 1 ppm, no se encuentra normalmente en
condiciones normales de cría. Pero, en caso de agua sin aeración, conteniendo mucho
fitoplanctón, el oxígeno puede bajar al final de la noche, hasta 2 ppm, lo cual debe
evitarse.

Es necesario evitar tambien una caida rápida del bloom de fitoplanctón que significa un
incremento de la materia orgánica que consume oxígeno.

- El amonio, en condiciones normales de cría, nunca alcanza la dosis tóxica de 0,1

ppm N. Sin embargo, este parámetro debe controlarse con cuidado : aumento súbito
de la materia orgánica, especialmente en cría intensiva. El mismo control es necesario
para los nitritos y los nitratos que no deben sobrepasar los 2 y 5 ppm N
respectivamente.

- El disco Secchi : la profundidad de su desaparición debe ser entre 40 y 70 cm. Más,

significaría que falta producción natural. Menos, que el riesgo de caida del fitoplanctón
es bastante grande.
- Los otros parámetros deben permanecer en los valores siguientes :

Fosfato mg P/l < 5

Silicato mg Si/l < 100
Mercurio ug/l < 1
Plomo ug/l < 5
Cadmiun ug/l < 5
Zinc ug/l < 10
Cobre ug/l < 1
HCH ng/l < 50
Heptacloro hg/l < 100
Aldrine ng/l < 100
DDT ng/l < 20
Hidrocarburos ug/l < 10

Mientras estos parámetros se mantienen en la escala de tolerancia, sus variaciones no

afectan mucho el crecimiento ni la calidad de los animales.

Para mantener estos parámetros a valores aceptables se modula el recambio de agua

a lo largo de la cría.

Cuando aumenta la biomasa, aumenta también el consumo de oxígeno, a menudo

factor limitante, debido a los camarones directamente, como a la materia orgánica viva
o muerta del medio.

Los valores promedio de recambio de agua por día se situan alrededor de 5 a 10 % al

inicio de la cría para alcanzar 20 a 30 % al final de esta. Esta recambio de agua puede
hacerce en continuo (24 horas) como en secuencia (y más importante) unos días por
semana.

Eso se decide en relación con las medidas y observaciones del medio de cultivo.

1.1.3. Calidad de la alimentación

La alimentación es una de las operaciones más importantes y la calidad del alimento

es un factor determinante para cumplir los requisitos específicos de los progenitores.

En general, un buen alimento hace el crecimiento menos dependiente de la producción

natural. En el caso de la cría de progenitores no es suficiente y el buen alimento -el
mejor para le engorde- tiene como complemento una buena producción natural, el
suministro de alimento fresco y de un peletizado de muy alta calidad.

Entonces, la calidad de la alimentación depende tanto del manejo del medio de cultivo,
como de la composición del balanceado, de sus materias primas, de su fabricación,
del tiempo y condiciones de su almacenamiento.

- Las fórmulas como los componentes son importantes. en el peletizado de engorde, la

tasa de proteínas debería alcanzar alrededor de 35 a 40 % (40 % mínimo para P.
monodon), la de lípidos queda entre 6 y 12 %.
El peletizado para una fase terminal óptima es un alimento a muy alta tase de
proteínas, preparado para maduración.

Las mejores fórmulas son las que contienen harina de camarón, orujo de soya y harina
de pescado, de carne y de huesos.

La influencia de las proteínas es sensible :

Camarón = Calamar > CPSP (Concentrado de proteínas solubles de pescado).

Harina de pescado > Soya.

El efecto del calamar parece importante sobre el crecimiento y más sobre la respuesta
en maduración.

El CPSP tiene un poder atractivo además de ser una fuente concentrada de proteínas.

La levadura láctica o de cerveza tiene un efecto positivo sobre el crecimiento.

En la premezcla vitamínica, la vitamina C y el inositol son importantes. La

concentración de vitamina C en el alimento debería ser alrededor 30 mg/kg.

- La producción natural y el alimento fresco son esenciales por lo que suministran un

complemento orgánico de valor en vitaminas y minerales principalmente : algas
verdes, diatomeas…, rotiferos, copepodos, gusanos…, calamares, mejillones…

Los organismos del planctón y de la meiofauna béntica son particularmente

importantes para las postlarvas y los juveniles, pero su contribución no puede
ignorarse en la alimentación de los animales más grandes.

La producción natural por camarón, en semiintensivo, disminuye cuando aumenta la

densidad de cría (predación sobre un stock natural limitado). Al contratio, en intensivo,
esta producción natural permanece alta (tal vez a base de materia orgánica en
suspensión, colonizada por bacterias).

En esta forma es consumible por P. stylirostris y sobre todo por P. vannamei, mucho
más que por P. monodon.

- La ración-cantidad de alimento -a distribuir disminuye con el precio promedio de los

camarones y aumenta con su número y su densidad.

Una distribución en exceso produce restos no consumidos, pues aumentan las

poblaciones bacterianas y fitoplanctónicas, quienes consumen oxígeno.

Por el contrario, algún parámetro anormal, como el oxígeno, puede acarrear una
disminución del consumo.

- La calidad del alimento ingerido disminuye con el tiempo de permanencia en el agua.

Del tipo de fabricación debe salir la mejor establidad en el agua del peletizado, tanto
estabilidad mecánica, como química. En este sentido, la técnica de presión con
adjunción de vapor da mejor resultado a menos costo.
- Para resolver estos problemas, y dar al alimento su efecto máximo, la distribución se
fracciona en varias comidas, haciendose de mañana, tarde y noche, o en continuo.

Se observan en los camarones del medio natural, una máxima actividad digestiva por
el amanecer y el atardecer. En estanques, especialmente con los camarones que se
entierran el día, el efecto del alimento es más alto cuando es distribuido en el
atardecer en vez de la tarde.

Experimentos han demostrado que el crecimiento es mejor con una distribución

continua de noche que con una distribución puntual al atardecer. Se mejora también el
indice de conversión del alimento. Sin embargo, un consumo diurno es más probable
en cría intensiva cuando hay más oxígeno.

1.1.4. Técnicas y especies

Las especies que están consideradas para la cría de progenitores son :

P. schmitti (local)
P. vannamei, P. stylirostris, P. monodon (foraneas)

Las respuestas de estas especies a las técnicas de cría son diferentes.

- El efecto de los parámetros físico-químicos es equivalente sobre las diferentes

especies.

- El efecto de la densidad de cría es más importante para P. monodon que para P.

stylirostris y P. vannamei. Es decir que disminuye el crecimiento cuando aumenta la
densidad. En agua “clara” (con poca turbiedad), este efecto aumenta rapidamente.
Entonces son razones de disponibilidad en alimentación natural, así como de
comportamiento.

- El efecto de la alimentación (balanceado más producción natural) es fuerte. Pero P.

monodon es muy exigente en cuanto a la composición de su alimentación. P.
vannamei necesita una producción natural muy abundante que no aprovecha bien en
el semiextensivo, cuando P. monodon y P. stylirostris aprovechan menos de la
producción en intensivo.

Los mejores resultados de reproducción fueron obtenidos con los progenitores criados
de la manera siguiente:

- P.
en cría intensiva.
vannamei
- P.
en cría semiextensiva.
monodon
- P. en cría intensiva a densidad más baja que P. vannamei o en cría
stylirostris semiextensiva (especialmente la última fase).
es una especie muy cerca de P. vannamei, entonces debería probarse
- P. schmitti
la cría semiextensiva puede lograr buenos resultados.

1.2. LA TECNICA SEMIEXTENSIVA

Esta técnica conviene para P. monodon y P. stylirostris, debe probarse para P.

schmitti.
1.2.1. Estanques

Son estanques de tierra, fondo y diques de superficie variable entre unos miles de m2
y l hectárea. Los criterios de eleccion dependen principalmente de la cantidad de
progenitores a suministrar al Centro de Desove.

Su forma óptima es rectangular con una relación anchura-longitud de 1/1,5 o 2 para

favorecer la circulación del agua entre entrada y salida. Una forma más larga permite
reducir el número de compuertas (entrada y salida) para la misma superficie. Por
ejemplo un estanque de l hectárea 2 veces más largo que ancho sería construido con
una o dos entradas y una salida.

Su profundidad mínima debe ser 1 m para evitar las grandes variaciones térmicas y el
crecimiento de algas bénticas.

El suministro de agua se hace por medio de un canal abierto con posibilidad de caudal
importante.

La compuerta de entrada tiene filtros de mallas que impiden el ingreso de otros

animales. El nivel de agua es regulable por la compuerta de salida.

1.2.2. Esquema de cría

La cría se hace en dos fases. La primera, de la postlarva a 20 g es una fase de

engorde, que se desarrolla directamente en 1 etapa, o en 2 incluyendo el preengorde
hasta 1 a 2 g y luego el engorde.

La segunda, de 20 g al tamaño de reproducción se hace directamente.

Entre cada etapa, los camarones son cosechados, seleccionados y cambian de

estanques.

Las densidades y varias condiciones de cría son diferentes de 1 etapa a la otra. Sin
embargo, los parámetros como oxígeno, amonio, nitrato, nitrito, deben mantenerse en
los valores óptimos.

1.2.2.1. Primera fase

A - En dos etapas

Al Prengorde PL10 a 1–2 g

- densidad
3–5/m2
inicial
- cambio de
5–10 %/día continuo
agua
- pH 8,3 – 8,5
- Secchi 40–50 cm de profondidad
-
7 días por semana Peletizado molido (0,3–0,8 mm) (1) 15-8 % de la
Alimentación
biomasa 4–6 comidas de 7–8 de la mañana y entre 5–6 de la tarde y
de PL10 a
10–11 de la noche.
PL25-35
 Peletizado molido (1 mm) (1) 10 a 3 % de la biomasa 3–4 comidas
PL20–25
aproximadamente a 7–8 de la mañana y entre 5–6 de la tarde y 10–11
a 1–2 g
de la noche.
- Duración 1–1,5 mes

(1) Puede utilizarse, con mejores resultados un alimento especialmente peletizado

para los juveniles y conteniendo más protéínas (35-34 %).

A2 Engorde de 1–2 g a 15–20 g

- Densidad
1–2/m2
inicial
- Cambio de
10–20 % por día
agua
- pH 8–8,5
- Secchi 40–70 cm
7 días por semana
-
Peletizado 5 a 2 % de la biomasa
Alimentación
3–4 comidas
- Duración unos 3–4 meses

B - En una etapa

PL5-10 a
15–20 g
Densidad
2–3/m2
inicial
Duración unos 3–4 meses

Cambio de agua, parámetros y alimentación siguen la misma secuencia que en A. La

supervivencia/selección final es alrededor de 50 %.

En el caso B, puede ser mejor utilizar PL10 que PL5.

1.2.2.2. Segunda fase

- Densidad
0.3–0.5/m2
inicial
- Cambio de
agua 15–25 % por día
promedio
- pH 7,5–8,5
- Secchi 40–70 cm de profundidad
preferentemente 30–35‰ en los 2 últimos meses antes de la primera
- Salinidad
cosecha.
- peletizado 3 a 1.5 % de la biomasa.
Alimentación • 5 días tipo engorde
• 2 días tipo progenitores y durante los 2 últimos meses.
• 2 días tipo engorde
• 3 días tipo progenitores
• 1 día alimento fresco
 • 6–10 % biomasa
• 1 día-ayuno
unos 4 meses antes de la primera cosecha de proge nitores (5–6
- Duración
meses para P. monodon).
-
Supervivencia 30–50 %
y selección

1.2.3. Preparación y control del medio de cultivo

1.2.3.1. Preparación del estanque

El medio de cultivo es un conjunto de varios elementos que tienen interrelaciones

entre ellos. Particularmente en el caso de la cría semiintensiva, la constitución y el
estado del estanque son de gran importancia.

A - El fondo

Los fondos de tierra -más o menos arcillosos o lodosos- pesados, que se impregnan
en agua, son los más dificiles de poner de nuevo en buen estado, entre dos crías.

Hay que dejarlos secar completamente. Necesita entre 8 días y l mes, según el sol. Se
necesita aerear el suelo, usándo equipos agrícolas como rastrillo o arado de disco, lo
que permite una oxidación de la materia orgánica reducida y una destrucción de las
bacterias y formas de vida nocivas.

Las características de un suelo normal son aproximadamente :

• pH 7.2
• Hierro 25 ppm
• Aluminio ∈
• Sulfato 550 ppm
• Fosfato 10 ppm

El pH de un suelo ácido puede corregirse echandole una o dos veces por año, con
dosis de una a 2 toneladas de cal viva por hectárea. Además la cal tiene las ventajas
de desinfectar, de reorganizar la estructura del suelo, favoreciendo su actividad
biológica y activar la acción de los fertilizantes inorgánicos. Es necesario dejar el pH
estabilizarse antes de sembrar.

B - Predadores y competidores

Además del rastrillo y del encalamiento, sobre todo si el fondo y los diques no secan
bien, es necesario eliminar cangrejos, moluscos, eventualmente peces… que pueden
quedarse. Se utiliza cloro (1 a 10 litros por 1 000 m2) o rotenona, químico caro (0,25
kg/ha).

Durante la cría, la llegada de predadores (peces, cangrejos) y competidores (peces,

moluscos, crustáceos) se impide usando mallas de filtración a la compuerta de entrada
de agua.
Estas mallas de 1 000 micrones y 700 o 500 micrones (se utilizan las dos a fin de
moderar su obstrucción) deben limpiarse y controlarse cada día.

1.2.3.2. El medio líquido

Los parámetros físico-químicos, así como la alimentación natural de los camarones

(planctón y meiofauna béntica) están estrechamente relacionados con la composición
del medio líquido y a sus evolución. Ella misma es directamente dependiente del
aumento de la biomasa de camarones, del alimento y de los residuos orgánicos.

El control para evitar cualquier evolución desfavorable se hace principalmente por

medio del recambio de agua, pero también modificando la ración del alimento y por
fertilización.

A - Fertilización

Tiene como objeto desarrollar la producción natural consumible por los camarones y
dar sombra al medio de cultivo, particularmente al inicio de la cría, cuando la biomasa
es baja.

Los fertilizantes orgánicos son usados directamente por los heterótrofos o siguen el
ciclo normal de destrucción y mineralización bacteriana.

Los fertilizantes inorgánicos tienen una acción más rápida.

Los elementos más importantes son el nitrógeno y el fosfato y con una relación N/P de
10 átomos a l en la composición.

Se puede utilizar hasta 60–80 kg por hectárea. Parece más eficaz hacer varias
fertilizaciones durante toda la cría, la más fuerte siendo entre 2 a 15 días antes la
siembra de los camarones, cuando se llena el estanque. Se utiliza en este momento
de 4 a 30 kg de NPK/ha. Si no se inicia correctamente el bloom fitoplanctónico, se
repite la dosis.

La urea (1 a 4 kg/ha/semana) es también utilizada junto al superfosfato (1 a 5

kg//ha/semana).

La composición de los fertilizantes varía de :

• 20 a 50 pare nitrógeno - 46 si urea

• 15 a 30 para fosfato - hasta 40 si superfosfato
• 0 a 15 para potasio

y esta relacionada al sitio.

Durante la cría la cantidad total, así como la frecuencia de aplicación (cada semana a
cada 2 meses), dependen de la riqueza del suelo y de la evolución del medio de
vultivo, y están en relación estrecha entre ellas.

Una buena dilución del fertilizante inorgánico (se utiliza sólo en agua) se obtiene
disponiéndolo en un saco a la entrada del agua, o en bidones flotando en el estanque.

B - Recambio de agua
No debe dejar desarrollarse un “bloom” fitoplanctónico demasiado fuerte en relación a
la biomasa de camarones. Tal “bloom”, sin fertilización continua endógena no puede
mantenerse. Entonces es necesario evitar una dosis excesiva de fertilizantes.

Sin embargo, si se produce este “bloom” la solución es cambiar una cantidad grande
de agua hasta 50 % en un día.

De manera general, el mantenimiento del fitoplanctón a valores óptimos -disco de

Secchi- se hace siempre modulando el flujo de agua alrededor de su valor promedio
óptimo.

Recomendar un cambio de agua continuo de 10 % día, quiere decir durante 24 horas

por día, pero el volumen de recambio puede variar de cada lado de este 10 %
dependiendo de las características del agua.

En este sentido se puede probar un recambio secuencial y 10 % por día quiere decir 2
días por semana a 30–40 % o un día a 60–80 %.

C - Los controles de rutina

El diagnóstico de evolución del medio y su manejo salen de varios criterios simples.

Cada día

• Oxígeno disuelto - día y noche

• pH
• Temperatura de fondo y superficie (estratificación)
• Disco de Secchi
• Observación “de visu” del color (verde, pardo) y del aspecto (transparencia,
turbiedad…) del agua.

El color corresponde a la mezcla de especies de algas, y una mezcla es

siempre preferible a la dominación de una o dos especies : en este caso, el
bloom es más instable.

• Observación del comportamiento de los animales. Si están inmóviles o

nadando en la superficie, hay seguramente un problema de temperatura o
oxígeno. Si están siempre nadando alrededor del estanque, puede faltarles
alimento.
• Limpieza de las mallas de filtración a la entrada y salida.

Frecuentemente

• Amonio - nitrato - nitrito.

• Observación por buceo de los camarones : mortalidad, actividad, mudas,
parásitos… del fondo : restos de alimento, zonas de reducción, homogeneidad
del medio, etc.

Se registran todos estos datos permanentemente.

1.2.4. Operaciones sobre los animales

Se trata de una cría de progenitores, entonces todas las manipulaciones de camarón,
por cualquier razón, deben hacerse con el mayor cuidado.

1.2.4.1. La siembra

El traslado del centro de cría larval a los estanques debe prepararse en los últimos
días de cría.

La temperatura y la salinidad se ajustan a las de los estanques de recepción en medio

día (3 a 5 puntos) a dos días (aproximadamente 10 puntos). La alimentación es
normal, la última comida haciéndose 1 a 2 horas antes del envase de las postlarvas.

- El transporte es generalmente corto (2–4 horas). En este caso, es más fácil utilizar
tanques de plástico o de fibra de vidrio de 100 a 1 000 litros, llenos de agua,
equipados de aereación y/o oxigenación.

La densidad es 2 000 a 4 000 PL5 por litro o 500 a 1 000 PL20.

La temperatura del agua est 23–24°C como máximo.

- Si el transporte necesita más tiempo, se hace usando bolsas de plástico (dobles) de

20 a 40 litros, llenas con 4 a 10 litros de agua, e infladas con oxígeno. Se colocan en
cajas isotérmicas (1 cm de espesor).

La densidad es 1 000 PL5 por litro o 100 a 200 PL10.

Se baja de repente la temperatura hasta 20–22°C y se mantiene con bolsas de hielo

en las cajas.

La siembra de las postlarvas o juveniles es un cambio muy fuerte de sus condiciones

de cría, y debe hacerse con un stress mínimo.

Cambio de temperatura : si la diferencia es de 2–3 °C entre el agua de transporte y la

del estanque, la aclimatación puede realizarse ne 15–30 minutos. Si es más alta,
necesita más tiempo.

La salinidad es normalmente la misma.

Cambio de alimentación : una producción natural importante es un elemento muy

favorable en todos los casos. En cría intensiva, un bloom de rotíferos tiene un efecto
positivo.

1.2.4.1.1. Estado sanitario

Se observa a cada muestreo y buceando sin molestar los animales.

Los aspectos mas importantes son :

• El color y el aspecto general del carapacho ;

• La firmeza de la carne (excepto si mudan);
• La ausencia de algas epifitas, de parásitos, hongos y necrosis;
• El estado de las branquias y de los apéndices y antenas : completos y limpios ;
• La actividad de los camarones y la presencia regular de mudas ;
 • La ausencía de muertos. Pero una baja mortalidad es difícil observarse.

Entre las enfermedades más características tenemos:

• Unas manchas blancas sobre los pleuros abdominales (P. vannamei y sobre
todo P. stylirostris). En relación con algunas malas condiciones del medio
(temperatura alta, oxígeno…).
• Los pleuros branquiales flácidos y volteados (P. monodon). En relación con
fondos reducidos.
• Carapacho azul y blando (P. monodon), rosado y blando (P. vannamei y P.
stylirostris). De origen nutricional, ligado a la ausencia o escasez de alimento
fresco.
• Carne flácida y color rojo-morado obscuro (P. monodon). Origen mixto
nutricional y ambiental.

Una área privilegiada para la observación de los animales es la zona profunda cerca
de la salida de agua.

1.2.4.1.2. Estimación del peso

Una serie de muestreos permite seguir y controlar el crecimiento de los camarones

1.2.4.2. Control y muestreo

La frecuencia de muestreo varía de 2 semanas en preengrode intensivo a l mes en las

otras etapas.

Se utilizan atarrayas para los animales grandes y jaulas y jamos de mallas finas y
tractadas para los más pequeños.

Los artes fijos son más selectivos, pues menos eficientes en este caso.

En necesario repartir las muestras en varios sitios del estanque, y los camarones se
distribuyen más regularmente si no se hace una comida antes del muestreo. Además,
la repartición de las clases de tamaño siendo heterógenea, el número mínimo de
camarones debe ser de 50 a 100 por muestra.

1.2.4.2.1. Estimación del número

Esta estimación es importante, en relación con el peso promedio, para definir bien la
ración de alimentos.

• Puede evaluarse observando el consumo de los camarones durante varios

días. Los restos de alimento, en relación con lo que fue distribuido, dan una
estimación del consumo real, es decir, a un tamaño conocido, del número de
animales.
• El método por atarraya debe evitarse para progenitores por lo que necesita
muchas lances, y que pueden ser dañados los camarones.
• Al inicio de cada etapa de la cría, el número debe ser muy bien conocido. Se
utiliza generalmente el método por pesada de muestreos (obtención del peso
promedio) y del total.

1.2.4.3. La cosecha
Puede ser de dos tipos: total o parcial la cual permite hacer la selección en el mismo
tiempo.

1.2.4.3.1. Cosecha parcial

Se hace por medio de artes fijos dispuestos en el estanque durante unos días. Son de
red de pesca o de plástico, de tipo jaula o nasa de una bolsa o más.

Su malla está relacionada con el tamaño de selección que se desea.

Los camarones que se sacan de estas artes de pesca no son dañados, si se controla
frecuentemente su presencia.

Cosechados en pequeñas cantidades, pueden seleccionarse más fácilmente, y su

número deseado se alcanza sin problemas de conteo.

P. monodon y P. vannamei, entran bien en este tipo de artes, no así, el P. stylirostris.

Las cosechas parciales se hacen al final de las primeras y segundas fases. Al fin de la
etapa de preengorde se puede utilizar tanto la cosecha parcial como total.

1.2.4.3.2. Cosecha total

Después de varias cosechas parciales, la cosecha final se hace por vaciado total del
estanque, y concentración de los camarones dentro de un foso de pesca afuera de la
compuerta de salida. Si la pendiente del fondo es regular y si el flujo de agua es
suave, los camarones salen solos.

1.2.4.4. Selección y transporte

Las selecciones en cada etapa se hace observando el tamaño y el aspecto general.

Se sacan para la etapa siguiente los más grandes y los que están en buen estado,
siguiendo los criterios del párrafo 1.4.2.1.

El transporte de un estanque al otro entre dos fases o etapas se hace en tanques o

bidones con agua, y aereación si la espera es larga. Hay que controlar las condiciones
de temperatura y salinidad de los 2 estanques (cosechas y recepción) y eventualmente
aclimatar los camarones.

El transporte hasta el centro de desove se hace también en tanques de 100 a 1 000 1

según la cantidad de animales. No se llenan completamente y se tapan. Disponen de
aire u oxígeno.

Un movimiento fuerte del agua puede dañar los camarones por golpes contra la pared
o entre ellos, hay que evitarlo. Además de la conducción suave del camión, puede
utilizarse una red de pesca, muy flexible u suave, dispuesta en el agua. Si es largo el
transporte, se colocan bolsas de hielo herméticas en el tanque.

La salinidad y la temperatura no deben tener diferencias entre el estanque, el agua de

transporte y eltanque de recepción. Pues, si una aclimatación es necesaria, se hace
en más horas o unos días en el tanque de recepción.
Los progenitores procedentes de los estanques llegan generalmente al tanque de
maduración, lo que evita una manipulación excesiva.

2 - UNIDAD DE ALMACENAMIENTO DE LOS GENITORES

2.1. OBJETIVO

Los genitores son producidos en las piscinas previstas o si es necesario, son

capturados en su medio natural, teniendo solamente en cuenta su tamaño y no su
estado de maduración.

El estanque de almacenamiento es un volumen de reserva para las necesidades

periódicas del departamento de maduración.

El biólogo encargado del departamento de progenitores es el responsable de esta

unidad.

2.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

- Densidad de los
: 0.3/m2
animales
- Peso de los animales : > 50 gr
- Agua : Temperatura : 24°– 30°C
Salinidad : 28‰ – 36‰
Filtración : no
Renovación : 10 a 20 %/día
- Aeración : no
- Luz : natural
- Alimentación : balanceado + alimentos frescos
- Tiempo de utilización : Cada estanque debe ser limpiado cada 4 meses

- El oxígeno es el parámetro más importante, debe ser superior a 2ppm, la medida

óptima se encuentra alrededor de 6 a 7 ppm. Estos datos corresponden a medidas en
el fondo de las piscinas.

Los problemas de bajada repentina de oxígeno ocurren de mañana (5 a.m.) cuando la

concentración de algas es muy alta y, luego, su consumo de oxígeno es muy
importante durante la noche.

En estos casos hay que practicar inmediatamente un cambio de agua.

- El fondo de la piscina : la condición de la capa superficial es un buen indicador del

nivel de oxigenación. Esta capa no debe estar reducida (color negro), este color indica
una falta de oxígeno para destruir la materia orgánica : sobras de comida, heces, etc.

Este fenómeno que va empezar en algunos lugares antes de dispersarse en toda la

piscina, puede ser controlado con el cambio de agua, la cantidad de comida distribuída
y la limpieza cada cuatro meses del fondo.

2.3. PROGRAMA DE TRABAJO

En la mañana :

• - 8 : 00 a.m. :

Apuntar la temperatura y la concentración de oxígeno en la superficie y fondo

de la piscina.

Verificar : - la cantidad de sobras de comida

- el flujo de entrada de agua

Si hay algunos animales muertos o pocos activos aumentar el flujo de agua.

En la tarde :

• 3 : 00 p.m. :

Anotar la temperatura y el oxígeno, como en la mañana.

• 3 : 30 p.m. :

Distribución de la comida según instrucciones (entre 2 y 5 gr de balanceado por

animal, es mejor poco que mucho).

3 - UNIDAD DE MADURACION

3.1. OBJETIVO

Esta unidad de maduración debe reunir las condicones favorables para el desarrollo
de las gónadas (glándula sexual) con la finalidad de obtener la reproducción de los
animales.

La reproducción se produce en el tanque de maduración : el macho fecundando la

hembra madura, es la “fecundación natural”. En este caso, se observa en el vientre de
la hembra, entre las patas IV y V, dos masas blancas : los espermatóforos.

La mayoría de las veces las hembras (75 % de los casos) están maduras pero no
fecundadas. En ese caso el técnico practica la inseminación.

La responsabilidad de esta unidad es entregada a un biólogo, ayudado por un técnico.

La planificación y la organización del trabajo se realizará en coordinación con los
responsables de las otras unidades.

3.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

- Biomasa por
: maxi 250 gr/m2
tanque
- Sex ratio : l macho por cada hembra
-
Temperatura : 28°C ± 1°C
Agua
Salinidad : 28 ‰ a 36 ‰
Filtración : 20 micrones
 Renovación : 200 % por día
- Aeración : 2–3 m3 por hora
- Luz : fotoperíodo natural
alimentos frescos : calamar, concha, cangrejos, etc
Alimentos balanceados, para maduración.
- Alimentación : Se determina la tasa en relación con el tamaño de los
animales y de su consumo.
Total alrededor de 8 a 10 % de la biomasa.

- Un peletizado es importante para aumentar el número de maduraciones de cada

hembra. Pero, el efecto puede ser negativo con respecto a la calidad de los productos
gonadales. Entonces es necesario complementar la dieta con variados alimentos
frescos. Su conservación debe ser rigurosa para alcanzar una calidad óptima.

- El parámetro más importante es la temperatura : 28°C. Una variación mínima influye

en el proceso de maduración.

- El cambio de agua se hace diariamente de las 8:00 p.m. a las 4:00 p.m. del día
siguiente.

La aeración, fuerte en el centro del tanque, se provee las 24 horas.

3.3 PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

En la mañana:

• - 8:00 a.m.
• Se limpian los tanques de todos los desperdicios de comida y de las
mudas. Estos desperdicios se recuperan en una malla que corona los
registros.

Si se encuentra una cantidad de desperdicios superior a la normal,

avisar al biólogo.

• Se pescan los animales muertos, anotar la cantidad y el número del

tanque.
• Se toma la temperatura del agua en cada tanque y se apunta con una
precisión de 0,1°C.
• Una vez a la semana se cuenta la cantidad de animales dentro de cada
tanque y se apunta.

Al mismo tiempo otros trabajadores preparan la comida.

Una mezcla en cantidades iguales de :

• carne de cangrejo
• carne de conchas
• calamar

Los cangrejos, tipo manglar, son conservados en viveros especiales, antes de

la distribución se aplastan. Las conchas : ostiones o almejas son almacenadas
vivas en unas mallas en las piscinas de genitores, el “pescado” de la concha se
 corta en pedazos de 5 × 5 mm. Se saca el calamar de la cámara frigorífica y se
corta de la misma manera que las conchas.

• 9: 30 a.m.

Distribución de la comida siguiendo las normas.

• 10:00 a.m.

Se efectuan todos los trabajos importantes : arranque de tanques nuevos,

recombinaciones, limpieza completa del tanque, ablación ocular etc.

La limpieza del tanque y los equipos diversos, éstos pasarán por un baño de
cloro. Las paredes de los tanques se limpian con cloro. Después, se prepara el
tanque y se practica una circulación cerrada durante una noche con cloro
(antes de poner los animales hay que medir que no queden restos de cloro).

• 12:00 a.m.

Interrupción de toda la actividad en la sala. “SILENCIO TOTAL”, 4:00 p.m. se

interrumpe el sistema de agua de los tanques.

En la tarde :

Afuera se efectuan todos los trabajos de preparación y de reparación de los diversos

equipos de este departamento : mallas, tubos etc.

APAREAMIENTO DE P. stylirostris (AQUACOP 1977)

• - 6:00–7:00 p.m.

Un equipo compuesto de l biólogo y l trabajador pasa revista a todos los

tanques para detectar las hembras grávidas es decir listas a desovar. Con una
lámpara portátil se chequea el nivel de desarrollo de las gónadas de cada
hembra (ver esquema). La hembra seleccionada se pesca con una sacadora
(jamo).

Se pueden presentar 2 casos :

 • La hembra es fecundada por el macho en el tanque : fecundación
natural, en este caso se observa los espermatóferos en el vientre de la
hembra.
• La hembra está lista a desovar pero no tiene espermatóferos, se
practica la inseminación artificial.

Cada hembra está acompañada de una marca con el número del

tanque de donde ella sale. Esta marca se coloca en el tanque de
desove.

• - 8:00 p.m.
• Se inspecciona el caudal de la circulación del agua que empieza y se
revisan si las valvulas de aire de los tanques están abierta.
• Al final de la pesca, los trabajadores distribuyen el alimento balanceado.

LOS ANIMALES, ESPECIALMENTE LAS HEMBRAS GRAVIDAS, DEBEN

SER MANIPULADOS CON BASTANTE CUIDADO.

* Llenar con precisión la hoja diaria “Departamento de maduración”.

NOTA : Gestión de los tanques.

El objetivo consiste en mantener la unidad en su producción óptima y evitar que

queden en el sistema animales no productivos.

Para eso es necesario vigilar diariamente la cantidad de desove por tanque y al final
de cada semana establecer datos promedios.

ABLACION DEL PEDUNCULO OCULAR

Aspecto esquemático de los ovarios vistos por transparencia justo antes del desove.
(AQUACOP 1977)
Una hembra que no desova o que pone huevos de mala calidad puede ser sacada.
Las otras que todavía desovan bien pueden recombinarse con las de otro tanque de la
misma edad.

Mediante los valores promedios, se establece también la duración posible de

producción de un tanque, así como la cantidad de animales necesarios para cada
producción períodica.

Las hembras o machos que hallan muerto, o que no maduren se reemplazaran con los
animales que están en el estanque de stock de reproductores.

DEPARTAMENTO DE MADURACION

Tanque de Tanque de Desove Huevos Huevos % OBSERVAC

Maduración Desove Tipo Total Fecundados Fecun. IONES
 4 - UNIDAD DE DESOVE

4.1. OBJETIVO

Esta unidad debe asegurar la producción de huevos. El biólogo de “maduración” se

encarga también de ella.

Las hembras grávidas que salen de los tanques de maduración entre las 6:00 p.m. y
las 8:00 p.m., son depositadas dentro de tanques de 300 litros para desovar (una por
tanque).

4.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Biomasa por tanque : 1 hembra

Agua Temperatura : 28°C ± 1°C
Salinidad : 28 ‰ – 36 ‰
Filtración : 5 micrones
Renovación : Continua # 15 % por hora
Aeración : Suficiente para conservar los huevos en suspensión
Luz : Oscuridad
Alimentación : No
Tiempo de utilización : 14 horas/24

4.3. PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

A la salida del estanque de maduración, después de la inseminación (6:00 hasta 8:00

p.m.) la hembra grávida pasa directamente en un tanque de desove. El animal queda
toda la noche en este tanque.

En la mañana :

• - 5:00 a.m.

Se pescan las hembras en los tanques de desove y cada una regresa a su

propio tanque de maduración con su marca.

• - 6:00 a.m.

Se vacían los tanques y todos los huevos son recuperados en los filtros
cascos, cada desove queda aislado nunca se mezclan.

Después los huevos pasan por la malla de 200 μ y se recuperan en la malla de

100 μ, los huevos son así limpiados, no quedan desechos de heces etc. Toda
esta manipulación se practica en el agua, los huevos nunca permanecen en las
mallas fuera del agua.

A la salida del filtro de 100 μ los huevos llegan al balde de 10 litros. En este
balde practicamos dos muestras para conocer :

• La cantidad de huevos por desove :

 Después de haber bien agitado y homogeneizado el balde se saca 1 ml
con la pipeta y se llena una cavidad de la placa de cuenta. Se repite
esta manipulación dos veces.

• La calidad de los huevos, es decir la cantidad de huevos fecundados

por desove :

Del mismo balde se saca por lo menos 100 huevos con la pipeta (se
llena una cavidad de la placa de cuenta) con el fin de establecer el
porcentaje de los huevos buenos que van a dar una larva.

Las cavidades de las placas tienen un número correspondiente al

número del tanque de desove de donde salen los huevos. Existen dos
series de placas con la misma numeración para los dos tipos de
cuentas.

• - 7:00 a.m.

Los huevos pasan en el departamento eclosión

• - 8:00 a.m.

Todo el material : tanques, baldes, pipetas etc. es limpiado con agua dulce.
Una vez por semana el mismo material pasa por cloro.

En la tarde :

• - 3:00 p.m.

La sala de desove debe estar lista para recibir las hembras grávidas a partir de
5:00 p.m., tanques llenos etc.

• - 5:00 p.m.

Para la inseminación de las hembras grávidas no fecundadas, llenar los dos

fregadores con agua y disponer las mallas de 5 mm. Una va recibir los machos,
no más de diez en diez. La otra recibe las hembras grávidas que salen del
tanque, no más de cinco y se practica la inseminación.

• - 8:00 p.m.
• Tapar los tanques
• Ajustar los caudales de agua y de aire de los tanques para la noche.
• Llenar con precisión la hoja diaria

NOTA:

Para seguir los resultados del sector maduración, con los datos de la hoja diaria, es
muy interesante establecer los diagramas siguientes :

- producción de nauplios por

-promediomensual
día
- número de huevos total por
-" "
desove
- porcentaje de fertilización -" "
DIFERENTES ASPECTOS DE LOS HUEVOS
(AQUACOP 1977)

PRIMER NAUPLIO
 5 - UNIDAD DE ECLOSION

5.1. OBJETIVO

El objetivo es obtener una separación completa entre los huevos malos y los huevos
fecundados siendo éstos quienes dan las larvas. El biólogo de “maduración se
encarga también del funcionamiento de este departamento.

La eclosión de las larvas empieza a las 8:00 a.m. y acaba a la 1:00 p.m.

5.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Biomasa : 1 desove # 150 000 huevos/filtro

Agua Temperatura : 28°± 1°C
Salinidad : 28 ‰ – 37 ‰
Filtración :5 μ
Cambio de agua : continuo
Aeración : mínima
Luz : oscuridad + una mancha luminosa
Alimentación : no
Tiempo de utilización : 6 horas/24 horas

Los huevos se reparten uniformemente sobre la malla del sistema de eclosión,

evitando los amontonamientos. El flujo de agua filtrada (5 μ) de abajo hacia arriba
permite una buena oxigenación. El módulo debe estar completamente oscuro a la
excepción de un agujero en la tapadera al nivel de la salida del agua. Los nauplios de
buena calidad se dirigen activamente por fototropismo hacia la mancha luminosa de
donde son llevados por la corriente hasta el sistema de recuperación. Eso permite
seleccionar solamente los nauplios de mejor calidad pues son los únicos que pueden
nadar activamente. Los otros de menor calidad quedan en la malla.

5.3. PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

En la mañana :

• - 6:00 a.m.
• Llenar los tanques.
• Instalar todo el sistema de colección de nauplios : filtros, tapas (el
hueco de la tapa deber situarse IMPERATIVAMENTE arriba del tubo de
salida del filtro de eclosión).
• Ajustar el caudal
• - 7:00 a.m.

Los huevos que salen de la unidad de desove pasan en los filtros de eclosión a
razón de un “casco” = 1 desove de una hembra por filtro. Manipular los huevos
con cuidado.

Durante toda la mañana chequear frecuentemente el buen desarrollo de las

operaciones.

En la tarde :

• - 1:00 p.m.
 A esta hora consideramos que todos los huevos han nacido.

Siguiendo la órden del biólogo encargado de las larvas, todos los nauplios son
reunidos en un tanque de cría o divididos en dos partes, según la cantidad.
Para lo cual se vacian los “cascos” en baldes para transportar los nauplios
hasta los tanques de cría larval.

• - 2:00 p.m.

Limpiar todo el material con agua dulce. Una vez por semana todo el material
pasa por un baño de cloro : cuidado con las mallas de los filtros, el cloro las
afecta, no dejarlas más de 10 minutos en este baño.

6 - UNIDAD DE CRIA LARVAL

6.1. OBJETIVO

La función de esta unidad de cría larval consiste en llevar los nauplios, (primer estadio
larval a la salida del huevo), hasta el estadio POSTLARVA (edad de salida hacia la
camaronera).

El encargado de esta unidad es un biólogo ayudado por un técnico.

6.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Densidad inicial :90 naupios por litro

AguaTemperatura:28°C
Salinidad :35 – 37 ‰
Filtración :5 micrones
de 0 hasta 100 % por día, depende del estado
Cambio :
larval
Aeración :Continua, aumentando con el desarrollo larval
Luz :natural
Tratamientos :fungicidas, antibióticos, EDTA, nutrientes
Alimentación :algas - nauplios de artemia - micropeletizados

Ver la hoja teórica adjunta, explicando la secuencia de las operaciones.

6.3. PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

En la mañana :

• - 8:00 a.m.
• Colocar los cartuchos de los filtros, 5 micrones Abrir las redes del
circuito larvas, y dejar el agua circular.
• Contar las larvas de cada tanque
 TRATAHIENTOS
ALIHENTACION
TAMA PREVENTIVOS
CA
NO DE ALGAS ART MICRO ANTIBIO ED
MBI ANTIF
EST MALL (células por ml) EMI - TA NUTRI
D O ONGO TICOS*
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3 90
1 90–
P4 100 500 - - - 0.1 40 id - - - id
4 100

* Se utiliza uno sólo en un periodo de cria

CRIA LARVAL de Penaeus vannamei

Hoja diaria teórica (27°C)

Para lo cual, abrir un poco más el aire del tanque para homogeneizar el
volumen, con la jarra contar tres veces la cantidad de larvas en 1 litro.
Utilizar el promedio para obtener la cantidad total de larvas.

• Medir la temperatura en cada tanque con una precisión de 0.1°C y

apuntar.
 • Sacar una muestra de un litro de cada tanque y mandarla a la sala de
observación, vaciar en un becker limpio.

SIEMPRE RESPETAR LA NUMERACION DE LAS JARRAS Y DE LOS

TANQUES.

• Mientras, los biólogos chequean :

• Los etadios larvales
• La calidad de las larvas : comportamiento, actividad,
alimentación, mudas, necrosis, muertas, etc.
• La concentració n de algas y/o de artemia

Después llenar la órden de trabajo del día y las hojas de cría tanque por
tanque.

• - 9:00 a.m.

Siguiendo la órden de trabajo se practica :

• Los cambios de agua,

Colocar los filtros verticales con la malla apropiada y aplicar la

secuencia siguiente :

DIA ESTADIO MALLA TIPO DE CAMBIO DURACION

4 Z1 100 μ (1) MN 20 minutos
5 Z2 200 μ " 30–40 "
6 Z3 200 μ " 2 hora
7 Z3-M1 300 μ (2) BN de 20% 1 hora
8–12 M1-P1 300 μ BN de 60% 1/2 hora
13–15 P2-P4 500 μ BN de 60% 3/4 hora

1. MN, significa que se efectúa una circulación a “mismo nivel”, las

válvulas de entrada de agua y de salida por el filtro, están
sujetas de tal manera que se puede conservar el tanque lleno
sin bajada de nivel (flujo de entrada = flujo de salida).
2. BN, significa “bajada de nivel”, se baja el nivel del tanque de 20
o 60 % y se practica la circulación cuando el nivel está bajo.
Después se sube el nivel.
• La entrega de alimentos

En coordinación con los departamentos de algas y de artemia se

distribuyen las cantidades indicadas en la órden de trabajo

• -- Tratamientos

Después de la circulación se pesa la cantidad de producto o se mide el

volumen según la órden de trabajo y se disuelve en un litro de agua
antes de echarlo en el tanque de cría.
APUNTAR EN LA ORDEN DE TRABAJO CADA VEZ QUE SE REALIZA UNA
MANIPULACION.

En la tarde :

• - 1:00 p.m.
• Iniciar los nuevos tanques con los nauplios que salen del departamento
eclosión.
• Sacar una muestra de cada tanque, los biólogos deben practicar el
mismo tipo de observación que en la mañana y llenar la orden de
trabajo
• Con estos datos :
• Completar con alimentos si fuera necesario
• Hacer los tratamientos
• - 3:30 p.m.
• Limpiar con cloro y enjuagar con agua dulce todo el material pequeño.
Ponerlo en orden.
• Cerrar las válvulas principales de llegada de agua.
• Vaciar las redes de agua
• Destapar y sacar los cartuchos de los filtros 5 μ
• Limpiar los filtros de arena según el proceso indicado
• Los biólogos deben llenar correctamente las hojas de cría.
• Cerrar las cortinas de cada cámara

NUNCA EL MATERIAL DE UNA CAMARA O DE UN TANQUE PUEDE SERVIR PARA

UN OTRO SECTOR DE LABORATORIO.

TANQUE No. : STYLIROSTRIS

CRIA No. : DESDE VANAMEI
Cambio ALIMENTACION
D Fecha Est. No/L Vm3 Nb/T T°C OBSERVACIONES
Agua Nb/ml Qadd.
D1

D2

D3

D4

D5

D6

D7

D8

D9

D10

D11

D12
D13

D14

D15

ORDEN DE TRABAJO

FECHA: MANANA

Tanque No. T Cambio Aliment. Art/ Nut. ml.

Ext. No/L Vm. Algas/ml Antibio. Tref/ml.
No. T C de Agua ALGAS ml. EDTA.gr
1

10

11

12

13

14

15
ESTADIOS NAUPLIOS
ESTADIOS ZOEA
 7 - UNIDAD DE PRODUCCION DE ALGAS

7.1. OBJETIVO

En el departamento de algas se produce el fitoplanctón, alimento de los primeros

estadios larvales.

Se producen tres especies :

Una diatomea : Chaetoceros sp. y

Dos flagelados : Isochrysis galbana (T iso) Platymonas suesica

Los encargados de este departamento son un biólogo y un técnico

7.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Agua Temperatura : 24 ± 3°C sin alta variación

Salinidad : Optima 30 – 35 ‰
Filtración : l micrón y 0.22 micrones según la fase de cultivo
Cambio : Cultivo en volumenes sucesivos sin recambio
Aeración : Aire del surpresor, enriquecido con 1% de CO2
Fluorescentes de 40 W abasteciendo 3 000 lux (area
Luz :
interiores)
Alimentación : Nutrientes según la especie y la zona de cultivo

Volumenes en sala

- Para todas las especies :

Solución No l

Na2 EDTA 45.00 g

H3 BO3 33.60 g
Na NO3 (K NO3) 100.00 g (116.00 g)
Na H2 PO4,
20.00 g
2H2O
MN Cl2, 4 H2O 0.36 g
Fe Cl3, 6 H2O 1.30 g
Solución N 2
o
1.00 ml

Disolver en un litro de agua destilada

Solución No 2 (Trazas de metales)

Zn Cl2 2.1 g
Co Cl2, 6H20 2.0 g
(NH4) 6 Mo7024, 4H2O 0.9 g
 CuSO4, 5H2O 2.0 g

Disolver en 100 ml de agua destilada, añadir HCl para obtener una buena
disolución.

Solución No 3 (Vitaminas)

Tiamina (Bl) 200 mg

Cianocobalamina (B12) 10 mg
Biotina (*) (H) 10 mg

Disolver en 100 ml de agua destilada.

(*) La vitamina H se utiliza únicamente para los flagelados.

- Para las diatomeas :

Solución No 4

Sodio metasilicato 20 g

Disolver en 1 litro de agua destilada

Solución No 5

K NO3 100 g

Disolver en 1 litro de agua destilada

A excepción de la solución No3 (vitaminas) todas las soluciones son autoclavadas 30

minutos a 125°C.

Utilizar 1 ml de la solución No1 (+ solución No2), de la solución No4 y de la solución No5

y solamente 0,1 ml de la solución de vitaminas N o3 para preparar un litro del medio de
cultivo.

- Volumenes exteriores :

Flagelados Diatomeas
KNO3 4g 4g
Difosfato de sodio 1g 1g
Metasilicato - 4g

Cantidades por 1 m3

- Rotación de los diferentes volumenes :

10 ml tubos de ensayo 7 días (cepas madres)

250 ml frascos 4 a 11 días
 5l frascos 3 días
30 l tanques 3 días
300 l tanques 3 días
1 m3 tanques exteriores 2 días

Después de 4 días de crecimiento en los frascos de 250 ml, este volumen pasa a 3
litros ; 4 días ---- 30 litros, así hasta los tanques exteriores de 1 m3 (Chaetoceros,
Isochrysis).

6.3 PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

En la mañana :

• - 8:00 a.m.
• Colocar los cartuchos 1 μ en los filtros
• Cerrar los circuitos de agua
• Sacar una muestra de todos los volumenes (de 5 litros a 1 m3) listos
para una transferencia.
• El biólogo deberá chequear estas muestras e inscribir sus
observaciones en el “Reporte diario”.
• Sacar el material estéril de la autoclave para almacenamiento en la sala
de preparación.
• Chequear la temperatura de la sala y de algunos tanques.
• Medir el pH en los 300 litros y apuntar.
 CELULA DE MALASSEZ PARA CONTAR
LAS CELULAS DE ALGAS

• - 9:30 a.m.
• Llenar los diferentes tanques 30 l, 300 l, 1 m3 con el agua de mar
filtrada.

Si la temperatura de esta agua es superior a 25°C, llenar los tanques el

día anterior para que se enfrie durante la noche.
 • Siguiendo la hoja “Reporte diario” del biólogo transferir los 300 litros en
el l m3, los 30 l en los 300 l y las botellas de 5 l en los de 30 l.
• El biólogo practica las transferencias de los volumenes pequeños :
tubos de ensayo y fiolas en la sala de cepa.
• - 11:00 a.m.
• Añadir los nutrientes en los tanques iniciados.
• Siguiendo las directivas de los biólogos de larvas pasar las diferentes
cantidades necesarias de algas en los tanques de cría larval.

En la tarde :

• - 1:00 p.m.
• Limpiar muy bien los diferentes tanques vacíos con un detergente
especial y con agua dulce caliente.
• Preparar las botellas, las fiolas, los tubos de ensayo para el paso por la
autoclave.
• Preparar el material pequeño : tapones, tubo de vidrio, etc.
• - 3:30 p.m.
• Limpiar el piso de todos los cuartos con cloro y agua dulce.
• Poner en órden el material.
• Sacar los cartuchos de los filtros, abrir todos los circuitos de agua
salada.

UNA VEZ POR SEMANA PASAR POR CLORO TODA LA TUBERIA (red agua
de mar).

NOTA :

Preparación de los medios de cultivo :

- Tubos de ensayo y frascos de 250 ml deben ser esterilizados vacíos y después de

haberlos llenado con agua de mar esterilizada con los nutrientes según la fórmula
indicada en en el párrafo 2.

TODAS LAS MANIPULACIONES DE MATERIAL ESTERIL SE EFECTUAN

CON EL MECHERO DE LADO. CUIDADO, LAS VITAMINAS SON
DESTRUIDAS A MAS DE 55°C.

- Se esterilizan las botellas de 5 litros, se llenan con el medio de cultivo, y después,

añadir las vitaminas.

- Tanques de 30 l, 300 l y 1 m3, llenarlas con agua filtrada (1 μ + UV), añadir los
nutrientes después de la inoculación.

• CUIDADO NUNCA MEZCLAR DOS ESPECIES

• Identificar siempre los recipientes de cultivo (especie, fecha, origen, etc.).
• Los recipientes de cultivo deben estar siempre tapados (excepto para un
trabajo).
• Evitar al máximo las variaciones de temperatura y dejar las puertas cerradas.
 MANTENIMIENTO DE CEPAS Y SECUENCIA DE CULTIVO

• Cada tubo tiene ≠ 10 ml de medio de cultivo

≠ 1 ml de inóculo
• Cada frasco tiene ≠ 200 ml de medio de cultivo
≠ 11 ml de inóculo
• Un tubo de inóculo, 1 o 2 tubos de arranque y 1 tubo de cepa NUNCA
MEZCLAR

DEPARTAMENTO DE ALGAS REPORTE DIARIO

Fecha

E S P E C I E Tanque No. Volumen Litros Cel/ml OBSERVACIONES

 8 - UNIDAD DE ARTEMIA

8.1. OBJETIVO

El objectivo consiste en producir suficiente cantidad de nauplios de Artemia salina para

alimentar las larvas presentes en el laboratorio desde el estadio Mysis I hasta la salida
hacia la nursery.

Se ponen los huevos de Artemia salina o “cysts” (forma de resistencia encapsulada).

en los tanques de eclosión para obtener los nauplios, este proceso toma de 24 a 35
horas.

Trabajando solamente con los huevos de artemia, sin usar ningún tipo de
micropartículas para llevar las larvas de MI hacia PL5, se cuenta aproximadamente : 4
kg de cysts para producir l millón de postlarvas.

8.2. NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Biomasa : Nunca más de 10 g de huevos/litro

Agua Temperatura : 20°– 30°C
Salinidad : 0 – 40 ‰
Filtración : 5μ
Cambio de agua : No
Aire del surpresor suficiente para conservar los huevos en
Aeración :
suspensión
Luz : Natural y oscuridad
Alimentación : Nada
Rotación de los
:
tanques

El tiempo de eclosión de las artemias depende de la cepa, de una manera general, es

posible recuperar los primeros nauplios 24 horas después, se practica otras colectas a
30 y 48 horas. 2 días después se limpia el tanque con cloro y se empieza un nuevo
cultivo.

8.3. PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

En la mañana :

• - 9:00 a.m.

Pescar en los tanques con agua desde hace 48 horas, para eso :

• Parar la aeración
• Sacar el tubo central
• Tapar el tanque y esperar 10 minutos

Los nauplios de artemia son atraídos a la base del cono del tanque por
la luz de la cinta transparente, los huevos livianos flotan en la superficie.

• Hacer pasar muy despacio los nauplios en una malla de 200 μ y

recogerlos en un filtro “casco” (malla de 100 μ). Los desechos quedan
en la malla de 200 μ.
 • Almacenar, si fuera necesario, los nauplios en un tanque de 100 litros.
• Llenar con cloro los tanques vacíos.
• - 9:30 a.m.
• Pescar en los tanques con agua hace 24 horas :

Mismo procedimiento que el anterior.

• Cuando todas las artemias son sacadas, rellenar los tanques con agua
salada para la prosecución del proceso de eclosión.
• - 10:00 a.m.
• Vaciar los tanques llenos de cloro y enjuagar bien.
• Llenar estos tanques con 300 litros de agua dulce
• Poner en estos tanques la cantidad de huevos indicada por el biólogo.
• Dejar hidratar estos huevos durante l hora
• Completar los tanques con 700 litros de agua de mar (filtrada 5 μ) para
obtener una salinidad de 25 % (óptimo para la cepa San Francisco Bay
Brine Shrimp).

CICLO DE VIDA DEL ARTEMIA

• - 10:30 a.m.
• Siguiendo las órdenes de los biólogos de larvas distribuir las artemias
en los diferentes tanques.

CONSERVAR LAS ARTEMIAS 15 MINUTOS EN UN BALDE DE AGUA

DULCE ANTES DE SU DISTRIBUCION A LAS LARVAS.

En la tarde :

• - 3:00 p.m.
• Pescar una segunda vez en los tanques inciados unas 30 horas antes.

Proceder como en la mañana.

 • Distribución.
• - 4:00 p.m.
• Limpiar el piso y todo el material (baldes, filtros) con cloro.

NOTA :

• La sala artemia es un área sucia del laboratorio a nivel bacteriológico, entonces

las reglas sanitarias aplicadas en el laboratorio deben ser reforzadas en este
lugar.
• Frente a la variabilidad de la calidad entre las diferentes cepas de artemia y a
veces entre los diferentes lotes de una misma cepa, antes de iniciar un cultivo
con un nuevo lote, es necesario chequear :
• el porcentaje de eclosión
• el tiempo de eclosión
• En algunos casos es necesario practicar una decapsulación. Técnica para 500
g de artemia :
1. Hidratar durante l hora los huevos en 10 litros de agua dulce aireada.
2. Durante este tiempo preparar :
• disolver 50 gr de sosa (NaOH) en llitro de agua dulce, poner el
frasco en la refrigeradora.
• disolver 20 gr de tiosulfato en 6,5 litros de agua dulce.
3. Después de una hora de hidratación, recuperar los huevos en una malla
de 100 μ
4. Preparar la solución de decapsulación :
• 8 “berlingots” (envases) de cloro
• La solución de sosa

Completar hasta 6,5 litros de agua dulce

5. Decapsulación :
• Poner los huevos en la solución de decapsulación bien aireada
• Controlar la temperatura
• Esperar 10 a 15 minutos
6. Enjuagar los huevos en una malla de 100 μ, con el agua de mar.
7. Poner los huevos en la solución de tiosulfato durante 10 minutos. Cortar
la aeración y dejar decantar para sacar a la superficie los huevos
vacíos.
8. Enjuagar los huevos con agua de mar. Están listos para la distribución.

9 - ALMACENAMIENTO INTENSIVO

9.1 OBJETIVO

Esta unidad sirve como fase de adaptación y preparación de las postlarvas entre la
cría larval y el preengorde.

Además, permite reagrupar tanques diferentes y evitar una multiplicación de los

transportes y siembras en las granjas.

El biólogo de cría larval se encarga de este departamento con la ayuda de un técnico.

9.2 NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Densidad inicial : 15–25 PL5 por litro

AguaTemperatura: 24–30°C
Salinidad : 20–37 ‰
Filtración : No
Cambio : 50–75 % por día
Aeración : fuerte, continua
Luz : natural, reducida por tela de sombra
Alimentación : • Nauplio de artemia 1,5 a 2,5 (10) 6 por m2 y por día.
• Micropeletizado 2,5 a 4,5 g/m3/día
Estas cantidades dependen de la temperatura y de la
densidad.

NOTAS :

- Evitar una diferencia de temperatura y/o de salinidad entre tanques de cría larval y de
almacenamiento, cuando las PL5 pasan. Luego, una diferencia de 3–4 °C o de 5 ‰ en
el mismo día, es posible sin problema.

- Como el agua no está filtrada se obtiene un desarrolo fitoplanctónico natural en el

medio de cultivo, lo cual ayuda a la destrucción de la materia orgánica.

La luz está reducida para mantener un crecimiento regular de estas algas.

9.3 PROGRAMA DE TRABAJO DIARIO

• - 8:00 a.m.
• - Medir la temperatura en cada tanque, así como la salinidad y apuntar.
• - Sacar una muestra de postlarvas (uno o dos litros) de cada tanque y
mandarla a la sala de observación.

Chequear la calidad de las postlarvas como su comportamiento,

alimentación, muertas, etc.

Verificar el aspecto y la calidad del agua (turbiedad, restos de artemia,

micropeletizados, desechos, etc.).

Llenar la órden de trabajo del día y especialmente duración del cambio

de agua, salinidad requerida, alimentación.

• - Según la órden, se practica los cambios de agua en una malla de 500

micrones, haciendo una circulación a nivel bajo.

Verificar la salinidad y temperatura del agua.

• - 10:00 a.m.
• Empieza la distribución de alimentos, con la primera distribución de
nauplios de artemia (a nivel bajo, estando la circulación terminada).
Aproximadamente 40 % del total del día.
• Llenar los nuevos tanques - después de limpiarlos con agua dulce,
jabón y cloro - con agua de la misma salinidad que la del tanque de cría
larval de donde salen las PL 5.
 Medir la temperatura del agua, y prever la aclimatización de las PL 5.

Inocular con algas exteriores para iniciar el desarrollo fitoplanctónico.

• - 12:00 p.m.

Segunda distribución de nauplios de artemia

• - 4:00 p.m.

Limpiar con cloro y enjuagar con agua dulce todo el material pequeño. Ponerlo
en órden.

• - 6:00 p.m.

Tercera distribución de nauplios de artemia

• Durante la noche, empezando a las 9:00 p.m., y cada 3 horas, se hace

una distribución de micropeletizados. Para lo cual, pesar la cantidad
indicada en la órden de trabajo, ponerla en agua, y mezclar durante
unos minutos para homogeneizar bien y separar las partículas. Repartir
en todo el tanque.

10 - PATOLOGIA
La cría de animales terrestres o acuáticos a alta densidad ocasiona obligatoriamente
problemas de órden patológico, aún cuando las condiciones optimas de cría están
reunidas : calidad del medio, infraestructura, etc.

Las bacterias, los hongos y los virus son los agentes patógenos más frecuentes en los
laboratorios de camarón.

En este capítulo vamos a describir las medidas sanitarias generales de lucha contra
estas diferentes enfermedades sin olvidar que una adaptación es necesaria a las
condiciones ambientales de cada proyecto.

10.1. LAS BACTERIAS

- Necrosis externas :

El ataque bacteriano se manifiesta en la larva por una necrosis visible al microscopio.

Las necrosis empiezan muchas veces en una antena o un apéndice nuevamente

formado como los uropodos de una zoea III o los pleopodos de una mysis. Las
necrosis empiezan en la punta del apéndice el cual se vuelve castaño y progresan
hasta la base.

En este caso se encuentra larvas débiles y muertas, muchas veces listas a mudar el
viejo caparazón pegado al apéndice necrosado.

- Necrosis interna :
Esta enfermedad está relacionada con las necrosis externas y aparece especialmente
cuando el laboratorio ha funcionado durante tiempo con estas necrosis externas.

Estas bacterias atacan el sistema digestivo de la larva, empezando por la boca antes
de llegar al hepatopáncreas y al estómago : “estómago gris”. En tal caso las larvas
dejan de comer.

NECROSIS INTERNA

ESTOMAGO NEGRO

NECROSIS EXTERNA
 ATAQUE DE UN APENDICE

El ataque es más serio si empieza en las larvas jóvenes, en zoea I el tanque completo
es destruido en 24 horas. Si las necrosis empiezan en zoea III, una parte alcanza
mysis y la mortalidad dura algunos días. Las postlarvas parecen más resistentes a
esta enfermedad.

- Estómago negro :

Esta enfermedad es nutricional, y está relacionada con el uso de las

algas Chaetoceros. Se puede observar un conglomerado negro en el estómago.

Lo cual ocurre, cuando :

• El bloom de chaetoceros se encuentra en una fase decreciente.

• La densidad de chaetoceros es bastante elevada.

En este caso, controlar la calidad del cultivo de algas y su desarrollo en los tanques de
cría larval. Cambiar el agua y añadir nuevas algas.
10.1.1. PROFILAXIA

10.1.1.1. Concepción del laboratorio

a) Los planos

Los diferentes departamentos del laboratorio están aislados con paredes y coladores
para evitar el paso de las cepas patógenas que tienen un alto poder de contaminación.

Por ejemplo los tanques de cría larval están aislados, de dos en dos, en una cámara
cerrada con bloques. Eso permite en caso de problemas de limpiar y cerrar la cámara
afectada para evitar la propagación a toda la cría.

El laboratorio está abierto al exterior para asegurar un buen movimiento del aire y
evitar la acumulación de aerosoles patógenos.
 ESQUEMA DE COMUNICACION ENTRE LAS UNIDADES DE TRABAJO

Los únicos movimientos autorizados están indicados por las flechas :

Personal → y material o productos ⇒, y deben limitarse al mínimo necesario.

Cada zona entre dos unidades de trabajo debe considerarse como una esclusa
sanitaria.

b) La filtración

El agua de mar, (primera fuente para la introducción de organismos patógenos) pasa

por un filtro de arena (20 μ) y un filtro de cartuchos (5 μ), además en la sala de algas,
el agua pasa por un filtro de 1 μ y un filtro U.V.

c) Las redes

Las redes en todo el laboratorio estár deben instaladas de manera que los tubos
puedan vaciarse cada vez que se terminen las operaciones diaria. Así, es posible
evitar la acumulación de “aguas muertas” y la proliferación de gérmenes patógenos.

10.1.1.2. Los tratamientos

Dos antibióticos : Furazolidon y Cloranfenicol son utilizados de dos maneras :

- Preventivo : Para evitar la propagación de gérmenes y la aparición de enfermedades.

Para eso, es necesario, eliminar las bacterias patógenas del agua sin tocar las larvas.

- Curativo : para curar los animales que padecen enfermedades, en este caso el
antibiótico hace efecto en las necrosis celulares.

Dosis de tratamiento preventivo :

Día Estadio Furazolidon Cloranfenicol

1 N
2 N
3 Z1 0,2 g/m3 3 g/m3
4 Z1
5 Z2
6 Z3
7 Z3/M1 0,4 g/m3 5 g/m3
8 M1
9 M2
10 M3
11 M3/P1 0,5 g/m3 5 g/m3
12 P1
13 P2
14 P3
15 P4

* Furazolidon : El antibiótico se vierte después de la circulación, cuando el tanque está

lleno.

* Cloranfenicol: El antibiótico se vierte después de la circulación, cuando el nivel del

agua está bajo.
Dosis del tratamiento curativo :

Se practica en dos días :

• Primer día : misma dosis que un tratamiento preventivo.

• Segundo día :

Estadio Furazolidon Cloranfenicol

Z2 0,4 g/m3 5 g/m3
Z3 0,5 g/m3 6 g/m3
M 0,6 g/m3 8 g/m3
PL 0,7 g/m3 8 g/m3

El tratamiento preventivo se usa como rutina durante todo el año, pero el tratamiento
curativo se practica únicamente en caso de problemas graves en un tanque y de una
manera puntual.

10.1.1.3. Los ciclos de producción

Esquema teórico de producción por ciclo :

Furazolidon : 60 días
Cloranfenicol : 22 días
Vacío sanitario : 8 días

Este esquema de base varía según la época del año y son los resultados de los
antibiogramas quienes deciden siempre el cambio de antibióticos y el día del vacío
sanitario. Nunca hay que esperar más de 2–3 días antes de tomar una decisión. La
lectura de un antibiograma consistente precede la aparición de las necrosis en 50% de
los tanques de una semana. Este plazo da un margen de tiempo para preparar la
estrategia a seguir.

Esquema al año :

• Número de ciclo anual :4

• Número de vacíos sanitarios :
3 de 1 semana
1 de 2 semanas
 • Número de cría/tanque/ciclo (promedio) : 4

10.1.1.4. Los vacíos sanitarios

Los vacíos sanitarios de una semana corresponden a un vacío parcial de :

• 1 unidad de larvas
• 1 sala de maduración
• 1 sala de desove
• 1 sala de eclosión
• 1 sala de cultivo de algas (30 l y 300 l).

El vacío sanitario de dos semanas, una vez al año, corresponde a un vacío total del
laboratorio, excepto de la sala de cepas de algas.

Procedimiento :

Día 1 :

• LLenar todos los tanques y volumenes que deben ser limpiados con agua de
mar y cloro.
• Bañar todo el material en estos tanques clorados.
• Echar cloro en el piso y las paredes.
• Filtros 20 μ y 5 μ en el cloro (para la parte concerniente).
• Botar los cartuchos viejos.

Día 2 :

• Vaciado general : tanques, redes, filtros.

• Inyectar aire en las redes.
• Enjuagar y sacar el material pequeño.
• Desmontar y limpiar las válvulas.
• Condenar los accesos.

Días 3–4–5–6 :

• Nadie debe entrar en las áreas secas.

Día 7 :

• Instalar las válvulas.

• Instalar los filtros con cartuchos nuevos.

Día 8 :

• Primer día de cría (nauplios).

10.1.1.5. Prevención rutinaria

Un rigor diario en el trabajo es la mejor manera de evitar problemas patológicos. Los

principales factores de contaminación son en total cuatro : el agua, el personal, el
material, y la alimentación.
a) El agua :

- Chequear diariamente que los filtros (20 μ y 5 μ) funcionan normalmente. Hacer un

control bacteriológico una vez por semana.

- Diariamente limpiar los filtros de arena, utilizando la posición “backwash” de la

válvula. Una vez por semana, abrir la tapa y durante la operación de “backwash” agitar
la arena para eliminar los posos.

- A fines del día, vaciar y abrir los filtros 5 μ. Cada filtro tiene dos juegos de cartuchos :
uno en el cloro y el otro trabajando (limpiar los cartuchos clorados con agua dulce
antes de usarlos). Alternar cada 2 días. Hacer lo mismo con los filtros de la sala de
algas.

- Después de usarlos, vaciar los tubos PVC de la red de agua y poner aire en estas
tuberías.

b) El personal :

- El personal afectado a un departamento debe quedarse en este departamento. Evitar

a lo máximo los intercambios.

- Usar el lavapies.

- Hay que recordar que la sala de maduración y la sala de artemia son dos salas
“cargadas” en bacterias.

- Solamente el personal “algas” puede entrar en este departamento y el biólogo

encargado es el único que puede entrar en la sala de cepas.

c) El material :

MUY IMPORTANTE : Cada objeto tiene una función específica en cada departamento.

d) La alimentación :

- Algas : Todas las manipulaciones de transferencia de tanque a tanque deben

hacerse con un máximo de precaución y de limpieza.

- Artemia : Para destruir las bacterias patógenas,

“CONSERVAR LAS ARTEMIAS 15 MINUTOS EN UN BALDE DE AGUA DULCE

ANTES DE LA DISTRIBUCION A LAS LARVAS”.

Hacer un control bacteriólogico dos veces por semana.

10.1.2. METODOLOGIA DE BACTERIOLOGIA ADAPTADA

10.1.2.1. Los medios

a) Bactopeptona (Difco 0118–01)

Preparación :

• Conformarse a las cantidades indicadas en la caja.

• Esterilizar

Se usa en fase líquida (sin agar) para probar la calided bacteriológica de las algas.
Poner 1 ml del medio que hay que estudiar en un tubo de ensayo con 5 ml de
bactopeptona, si se pone turbio, descartar estas algas.

b) Marine Broth (MB 2216) (Difco 0791–01)

Preparación :

• 3,74 gr de Marine Broth

• 1,5 gr de agar
• 100 ml de agua destilada
• Esterilizar
• Vaciar en las cajas de Petri
• Conservar a + 6°C

Se usa para hacer cuentas de la totalidad de la población bacteriana y para las

pruebas de sensibilidad de los antibióticos (antibiogramas).

c) TCBS agar (Difco 0650–01)

Preparación :

• Disolver el polvo en agua destilada (seguir instrucciones de la caja)

• Poner a ebullición
• Vaciar en las cajas de Petri
• NUNCA ESTERILIZAR
• Conservar a + 6°C

Este medio permite el aislamiento específico de las bacterias tipo Vibrio.

10.1.2.2. Técnica de muestreo y de siembra

• TRABAJAR SIEMPRE DE MANERA ESTERIL CERCA DEL MECHERO

• TODO EL MATERIAL DEBE SER ESTERILIZADO DURANTE 1 HORA

(AUTOCLAVE 120°C)

La técnica de muestreo cambia según el medio por estudiar : agua, aire, animales.

a) Agua

La técnica está en función de la concentración de bacterias del medio por estudiar.

- Concentración baja : concentrar en un filtro 0,22 μ (Gelman) 10 ml del medio y poner

el papel filtro en la caja de Petri (ejemplo : agua de las redes).

- Concentración media : exponer 0,2 ml del medio por estudiar en la caja de Petri
según el dibujo más indicado (ejemplo : agua de la cría larval).
- Concentración alta : practicar una dilución del medio, 1 ml en un tubo de ensayo de 9
ml de agua estéril y repetir : dilución (10)-1, (10)-2, (10)-3, etc. Exponer 0,2 ml del
medio por estudiar en la caja de Petri.

b) Aire

Para probar la concentración en aerosoles de una sala, abrir 30 minutos una caja de
Petri. Lectura 24 horas después.

c) Larvas (camarones, artemia)

- Sacar los animales (10)

- Molerlos con una varilla de vidrio al interior de un tubo de ensayo con 10 ml de agua
de mar esterilizada.

- Sacar 0,2 ml de la mezcla y exponerlo en una caja de Petri.

TECNICA DE SIEMBRA DE UNA CAJA DE PETRI

* La numeración de las colonias bacterianas se practica 24 después.

10.1.2.3. Técnica antibiograma

a) Preparación :

- Sacar de la caja de Petri de 24 horas una colonia bien individualizada.

- Poner esta muestra dentro de un tubo con 5 ml de agua de mar estéril.

- Agitar ligeramente y esperar 10 minutos

- Practicar lo mismo con cada tipo de colonias (clasificarlas).

- Vaciar cada tubo dentro de una caja de Petri (medio Marine Broth, MB).

- Esperar 15 minutos y sacar el exceso de líquido con una pipeta.

- Disponer los discos antibióticos (Furazolidon, cloranfenicol, y otros si fuera

necesario).
- Dejar 24 horas a la temperatura ambiente.

b) La lectura

La lectura se hace midiendo el diámetro de la zona de inhibición.

- Cepa sensible : es una cepa que puede ser destruida con un tratamiento a dosis
habitual. I>D.

- Cepa intermediaria : es una cepa afectada con un tratamiento a dosis elevada (tipo
tratamiento curativo). d < I < D.

- Cepa resistente : Esta cepa no puede ser controlada con un tratamiento antibiótico. I
<d. En este caso, cambiar de antibiótico, si es posible, sino preparar un vacío
sanitario.

D d
(mm) (mm)
Furazolidon 17 14
Cloranfenicol 23 19

10.2. LOS HONGOS

Las larvas atacadas se vuelven blanquecinas. Una observación microscópica permite

detectar el mycelium, conocemos dos géneros : Lagenidium y Fusarium.

No hay tratamiento. Si solamente algunas larvas son atacadas, practicar un cambio

completo de agua de cría. Pescar las larvas, eliminar las muertas y las débiles,
después, limpiar todo el material utilizado en la manipulación con cloro. Empezar
nuevamente la cría en agua limpia.

Si todo está contaminado, la única solución es de añadir 50 ppm de cloro en el agua y

botar el tanque.
Para el tratamïneto preventivo se usa el Treflan, un fungicida capaz de inhibir la
germinación de las esporas. La dosis a utilizar se encuentra en la hoja teórica de cría.

HONGOS : LAGENIDIUM CALLINECTES

(Foto C.E. Bland, East Carolina University, Greenville, N.C.)

10.3. LOS VIRUS

Las informaciones sobre los virus son muy restringidas. Varios tipos de virus fueron
identificados en las diferentes especies de camarones Peneides. La mayoría de estos
virus son específicos de cada especie y son realmente patógenos durante los estadios
larvales. Los adultos son los únicos vectores de la enfermedad.

Cuadro de los diferentes virus conocidos y sus huéspedes :

Virus Huésped Area Geográfica

P.
•Baculovirus penai (BP) Florida, Misisipí
duorarum
P. aztecus
P. setifeus
P. Panamá, Costa
vannamei Rica
P.
Ecuador
stylirostris
P.
•Monodon baculovirus (MBV) Filipinas, Taiwan
monodon
Baculoviral midgut gland necrosis virus P.
• Japón del Sur
(BMNV) japonicus
P.
Infectious hypodermal y hematopoietic stylirostris Hawai
•
necrosis virus (lHHNV) P. Guam
monodon

Dos tipos de virus conciernen al P. vannamei y al P. stylirostris.

10.3.1. Baculovirus penaei (BP)

Aunque este virus fue observado en el P. stylirostris la experiencia demuestra que el

Baculovirus (BP) tiene realmente influencia en el P. vannamei durante sus estadios
larvales.

El ataque se caracteriza por una mortalidad masiva y repentina durante cualquier

estadio larval.

VIRUS : BACULOVIRUS PENAEI (BP)

HP : Hepatopanceras

PIB : Intranuclear polyhedral bodies

Este virus infecta las células epiteliales del hepapáncreas y del tubo digestivo,
apareciendo unos cuerpos de inclusión tetraédrico (ver foto) muy fácil de detectar con
el microscopio. Para lo cual aplastar entre una placa y la lama cubreobjeto una larva y
observar la parte del hepatopáncreas (amplificación 40).

En dos días la mortalidad de un tanque de cría es total, la contaminación de una cría a

otra es “galopante”.

Se tiene casi establecido que el virus afecta las larvas solamente cuando las
condiciones de cría son desfavorables o con mucho “stress” :

• Resistencia a los antibióticos.

• Mala calidad del alimento (algas o artemia).
• Importantes variaciones fisicoquímicos del medio de cría.
• Contaminación (hidrocarburos, etc.).

10.3.2. INFECTIOUS HYPODERMAL Y HEMATOPOIETIC NECROSIS (IHHN)

Este virus afecta exclusivamente al P. stylirostris al estadio juvenil de 0,05 hasta l

gramo. Se presenta como pequeñas partículas cúbicas y simétricas (16–18 nm).

10.3.3. PROFILAXIA

No existe un tratamiento conocido.

Un laboratorio funcionando normalmente sin ningún factor de “stress” no debe ser

afectado por el virus (B.P.). Existen dos tipos de contaminación :

10.3.3.1. Contaminación horizontal

Cuando los primeros cuerpos de inclusión triángulos, son observados, añadir sosa
(NaOH) en el tanque para subir el pH del agua de cría hasta ll. Solamente la sosa es
capaz de destruir los cuerpos de inclusión, el cloro no tiene ningún poder sobre el B.P.
Todo el material en contacto con el agua de cría debe sufrir este mismo tratamiento.
En caso de un ataque viral la separación en camarillas es primordial evitando asi una
contaminación completa en el laboratorio. Pero, si después de ciertos errores de
manipulación, algunas crías fueran afectadas, sería en vano luchar, sólo un vacío
sanitario total y riguroso podría erradicar la contaminación.

Durante este vacío sanitario parcial (en camarilla) o total regar las paredes y el suelo
con una solución de sosa, en efecto los cuerpos de inclusión pueden resistir varios
meses fuera del agua y volver a tomar ventaja de las condiciones propicias.

10.3.3.2. Contaminación vertical

Es muy importante poder individualizar los lotes de genitores a fin de destruir los
adultos portadores cuando el virus es detectado en las larvas.

Estudios, en curso de serología, podran posiblemente permitir la identificación de

estos adultos portadores, con un test simple.

Por último, la cría de genitores en ciclo cerrado permite trabajar solamente con los
animales libres de virus.