TEMA: “Generalidades acerca del microscopio óptico”

1. Introducción
El microscopio óptico desde su descubrimiento ha sido parte fundamental del avance de las
ciencias biológicas ya que permite observaciones que están fuera del alcance de la
visibilidad directa del ojo humano[ CITATION Bri15 \l 22538 ]. Por este motivo para mejorar
la capacidad de observación se han ido introduciendo técnicas que aumentan la resolución
de los microscopios ópticos, como son el contraste de fase, el campo oscuro o la técnica de
fluorescencia; también se han creado microscopios mucho más avanzados que el
microscopio óptico compuesto el cual posee dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular,
montados en extremos opuestos de un tubo cerrado [ CITATION Isa08 \l 22538 ].
Las propiedades físicas de este instrumento son la capacidad de aumento el cual se
denomina magnificación y la resolución, la cual viene dada por la resolución del objetivo,
puesto que si éste no es capaz de separar claramente dos puntos muy próximos, tampoco
podrá separarlos el ocular; es así que si se desea aumentar la resolución de un microscopio,
o se disminuye la longitud de onda de la luz que ilumina, o se aumenta la apertura numérica
del objetivo[ CITATION Uni \l 22538 ].

2. Objetivos
Objetivos General
Establecer las características y manejo adecuado del microscopio óptico.

Objetivos Específicos
- Conocer los diversos tipos de microscopios y sus aplicaciones.
- Describir qué es y cómo se obtiene la apertura numérica.

3. Datos Obtenidos y Resultados

Tabla N ° 1: Poder de Magnificación

Lentes oculares Lentes objetivos Magnificación Total
10x 4x 40x
10x 10x 100x
10x 40x 400x
10x 100x 1000x

Tabla N ° 2: Poder de Resolución

Lente Objetivo Apertura numérica nm µm
(AN)
4x 0.13 2115.538 2.11538
10x 0.25 1098 1.098
 40x 0.65 422.30 0.4223
100x 1.25 219.6 0.2196

Cálculos demostrativos:
 Cálculo del Poder de Magnificación:

PM =4 x∗10 x
PM =40 x

 Cálculo del Poder de Resolución:

0.61∗λ
PR=
AN

0.61∗450 nm
PR=
1.25

PR=219.6 nm

Figura 1. Partes de un microscopio óptico.

4. Discusión

Descripción de las partes de un microscopio óptico:

Según [CITATION Hey \l 22538 ] el microscopio está formado por dos sistemas:
El sistema mecánico consta de las siguientes partes (Figura 1):
1. Sirve para darle estabilidad al instrumento.
2. Se fija a la base, sirve para transportarlo y soportar las piezas del microscopio
3. Sirve para un enfoque rápido.
4. Sirve para lograr la nitidez de la imagen.
5. Es una placa metálica con una perforación central. Sobre ella se coloca la preparación
que se va a observar.
6. Sostienen la muestra.
7. Permite el movimiento de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás.
8. Tiene como función soportar los oculares.
9. Es una pieza capaz de girar que se encuentra en la parte inferior del tubo óptico sobre la
que se montan los objetivos.
10. Se encuentra debajo de la platina y sostiene el condensador. Tiene un tornillo sobre una
cremallera que permite bajar y subir el condensador hasta lograr el ajuste lumínico
deseado.
El sistema óptico; dentro del cual está el sistema de iluminación, consta de las siguientes
partes (Figura 1):
11. Son las lentes más importantes del microscopio porque controlan el aumento posible y
la calidad de la imagen. Los aumentos más ampliamente utilizados son: 5x, 10x, 20x,
40x, y 100x. El aumento 100x es de inmersión. Cada objetivo tiene grabadas unas cifras
que indican el aumento propio, la apertura numérica, la longitud del tubo ocular y el
grosor de los cubreobjetos que debe utilizarse en la preparación para una correcta
observación.
12. Son los lentes situados en la parte superior del tubo óptico, los más cercanos al ojo del
observador. Dan una segunda amplificación a la imagen previamente aumentada por el
objetivo. Su aumento se encuentra indicado en la estructura metálica que lo contiene y
oscila entre 5X y 15x.
13. Está sostenido por el porta condensador y se encuentra formado por un sistema de lentes
que concentran los rayos luminosos sobre la preparación en ángulo suficientemente
grande como para llenar la apertura del objetivo. Su apertura numérica está grabada en
el cuerpo metálico y debe ser igual o muy aproximada a la del objetivo que se emplea.
El condensador puede ser utilizado con filtros para la luz natural o con filtros
coloreados, si así lo precisa la observación; en algunos casos el microscopio no tiene
condensador y entonces está provisto solamente de un diafragma (iris), que permite
controlar la cantidad de luz que incide sobre la preparación.
14. Tiene dos caras: una plana y otra cóncava. Cuando el microscopio tiene condensador lo
correcto es usar la cara plana del espejo, lo mismo que cuando no tiene condensador y
se trabaja con luz natural. La cara cóncava del espejo se usa sólo cuando el microscopio
no tiene condensador y la iluminación proviene de una fuente artificial (lámpara).

Discusión de los datos obtenidos y resultados:

En la presente práctica se realizaron cálculos del poder de magnificación (PM) y cálculos

del poder de resolución (PR) como se puede observar en las Tablas N o 1 y N o 2
respectivamente, para estos cálculos fue necesario conocer que el poder de magnificación se
obtiene al multiplicar los aumentos del lente con los aumentos del objetivo; este poder nos
permite visualizar los detalles que se desean observar en la muestra, y como lo expone
[ CITATION Hey \l 22538 ], con esto se logra una mejor definición y mayor profundidad de
campo.

En el cálculo del poder de resolución es necesario conocer la apertura numérica (AN) en la

 cual según lo explica el [ CITATION htt \l 22538 ] para su cálculo es necesario conocer el
índice de refracción del medio, que según [ CITATION Reb18 \l 22538 ] es la relación entre el
seno del ángulo de incidencia y el seno del ángulo de reflexión; y también el ángulo de
apertura que es el formado por los rayos extremos que intervienen en la imagen [ CITATION
Mic18 \l 22538 ].

Se obtienen los resultados expuestos en la Tabla N o2 sin realizar cálculos extras para
obtener la apertura numérica gracias a que la misma viene dada en los objetivos del
microscopio y se entiende que el poder de resolución es entonces; la relación que existe
entre la apertura numérica y λ que representa la longitud de onda de luz que generalmente es
de 450 nm[ CITATION Her14 \l 22538 ]; con esto se entiende que a mayor distancia de
trabajo la resolución será baja y que al contrario cuando la distancia sea corta la resolución
podrá ser mucho mejor.
También se puede deducirse que para aumentar el PR de un instrumento o disminuir el
límite de resolución, se puede:
1. disminuir lambda
2. aumentar AN
3. disponer de corpúsculos, que al imprimirles grandes velocidades se comporten como
ondas. Este es el caso de los electrones en el microscopio electrónico, cuyos electrones
tienen una lambda igual a 0.05 Å.

5. Conclusiones
- En esta práctica se manejó un microscopio óptico, el cual es uno de los instrumentos de
laboratorio más usado y por lo tanto es fundamental el identificar las partes ópticas,
mecánicas y lumínicas de este, sus características y a su vez el manejo adecuado de este
instrumento.
- Gracias a la elaboración del cuestionario se logró conocer los diversos tipos de
microscopios y sus aplicaciones, a su vez las diferencias y características de cada uno de
estos.
- En base a los cálculos realizados del poder de resolución que se muestran en la tabla N o
2 y la consulta bibliográfica se logra conocer con exactitud qué es y cómo se obtiene la
apertura numérica.

6. Recomendaciones
- Las características de un microscopio óptico pueden variar dependiendo de si es un
microscopio simple o compuesto por lo cual se recomienda conocer las pequeñas
diferencias entre cada uno de estos.
- Es conveniente usar fuentes bibliográficas que brinden una información confiable de los
diversos tipos de microscopios.
- Es recomendable saber la importancia que la apertura numérica tiene en los cálculos de
poder de resolución.

7. Cuestionario
 Establezca las diferencias entre un microscopio óptico normal y el de contraste de
fase.
Tabla N ° 3. Diferencias entre un microscopio óptico normal y de contraste de fase
 Microscopio óptico normal Microscopio de contraste de fase

Utiliza un haz de luz Utiliza un cono hueco de luz

estrecho
Se pueden hacer observaciones de Se pueden hacer observaciones de
organismos vivos coloreados organismos vivos transparentes o
sin teñir
Los componentes de la muestra se Los componentes de la muestra se
visualizan gracias a las diferencias observa gracias a que las células
de contraste que existen entre ellos poseen índices de refracción
y el medio que los rodea distintos al medio y por lo tanto
producen un desvío en los rayos de
luz que las atraviesan, que son
retardados
El contraste de la preparación Contiene un dispositivo en forma
puede controlarse con el diafragma de anillo que reduce la intensidad
del condensador (diafragma de de la luz y provoca un cambio de
apertura) fase de un cuarto de la longitud de
onda
La imagen que forma es virtual, Forma una imagen oscura con un
invertida y muy amplificada fondo brillante
Elaborado por: Medina, Anabell.
Fuente: [ CITATION Isa08 \l 22538 ]
 Explique las principales características de un microscopio electrónico de barrido y
uno de fuerza atómica.
Según el [ CITATION Ins14 \l 22538 ] las principales características de un microscopio
electrónico de barrido son:
 Utiliza electrones en lugar de luz para formar una imagen.
 Cuenta con un dispositivo (filamento) que genera un haz de electrones para
iluminar la muestra.
 Posee diferentes detectores que recogen después los electrones generados de la
interacción con la superficie de la muestra para crear una imagen que refleja las
características superficiales de la misma.
 Puede proporcionar información de las formas, texturas y composición química
de los constituyentes de la muestra.

Según [ CITATION Cas05 \l 22538 ]las principales características de un microscopio

electrónico de fuerza atómica son:
 Es un equipo importante para la elucidación de la microestructura de materiales.
 Se basa en la interacción local entre la punta y la superficie de una muestra.
 Proporciona imágenes tridimensionales de superficies con alta resolución
espacial en tiempo real.
 Es utilizado en la caracterización de materiales para determinar sus propiedades
físicas.

 ¿Qué es la apertura numérica?

La apertura numérica es un número que expresa la capacidad de una lente para resolver
detalles finos en un objeto que se está observando; esta se deriva de una fórmula
matemática (n sin α ); en donde n es el índice de refracción del medio que se encuentra
 entre la lente y la muestra; y α es la apertura angular de la lente. El tamaño físico de la
lente es importante para determinar la n de la lente y, para aprovechar al máximo la
lente, se debe emplear un sistema de condensación ligera que llene completamente la
lente posterior del objetivo con luz. Para hacer esto, la Apertura Numérica del sistema
de condensación debe ser igual o superior a la apertura numérica de la lente[ CITATION
htt \l 22538 ].

8. Bibliografía

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