UNIVERSIDAD DE NARIÑO - PROGRAMA DE QUIMICA

PRACTICA DE BIOQUÍMICA: pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Docente: Jesús Cabrera

Introducción Efecto amortiguador del pH

La concentración de iones hidrógeno tiene gran importancia para
todos los organismos vivos. Por ejemplo, cambios pequeños en la
concentración de ión hidrógeno en la sangre de los animales producen
cambios notables en procesos fisiológicos tales como la respiración en
plantas y animales y también cambios en la conducta del individuo.
Cambios pequeños en la concentración de iones hidrógeno pueden
alterar la eficacia de las enzimas como catalizadores. Otro ejemplo de
la interminable lista es la que la mayor parte de microbios requieren
una regulación estrecha de la concentración de iones hidrógeno para
mostrar una rapidez óptima de división y crecimiento celular.
Empleo del potenciómetro.
Se define el pH como el logaritmo del recíproco de la actividad de ión
hidrógeno. Uno de los dispositivos más utilizados para medir el pH es
el electrodo de vidrio que es sensible directamente a la concentración
de iones hidrógeno de la solución en la que se sumerja el electrodo y
a la cual se desea medir su pH.
Todos los organismos vivos requieren regular la concentración de
iones hidrógeno en un margen estrecho de pH. Para ello utilizan
“soluciones amortiguadoras” o tampones o buffer. Un tampón es una
solución acuosa de un ácido débil y su sal o una base débil y su sal.
Por ejemplo: ácido acético y acetato de sodio: hidróxido de amonio y
cloruro de amonio. De tal manera que una adición de un ácido o una
base fuertes produce cambios muy pequeños en el pH, así, el cambio
de pH de una solución es mucho menor del que se esperaría si la
solución buffer no estuviera presente.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Mida el valor de pH de las siguientes sustancias y clasifíquelas
como ácidas o básicas.

SUSTANCIA pH ácido pH básico

Coca-cola recién destapada (con gas)
Coca cola al finalizar la práctica (sin gas)
Zumo de limón
Zumo de naranja
Zumo de mandarina
Alkaseltzer® (disolver 1 tableta en 100 mL de agua destilada)
Leche fresca
Leche dejada a temperatura ambiente durante 48 horas
Yogurth sin azúcar
Vinagre

2. Preparación de una solución amortiguadora o buffer de pH.

Lea el pH de la solución resultante:____________.
Usted acaba de preparar un buffer!
Determine el pH de una solución de ácido acético 0.2 N: _______ Para llevar a cabo el estudio de las propiedades de esta solución
Determine el pH de una solución de acetato de sodio 0.2 N: ____ buffer prepare 5 soluciones en sendos tubos marcados y haga las
Mezcle 25 ml de solución de ácido acético con 25 ml de solución anotaciones respectivas
de acetato de sodio.
.
SOLUCIÓN 1 2 3 4 5
Buffer 50 ml 20 ml 20 ml
Agua 20 ml 20 ml
NaOH 0.1 N 1 ml 1 ml
HCl 0.1 N 1 ml 1 ml
pH

3. Propiedades amortiguadoras de los fluidos biológicos.

a. En un vaso de precipitados de 50 ml coloque (según haya acordado cada grupo previamente con su profesor), 10 ml de solución buffer, o
plasma sanguíneo o sangre, o zumo de naranja, o zumo de mandarina, o zumo de limón, o vinagre, o leche o yogurth, y determine su pH
con el potenciómetro. (solo una muestra ala vez!). Regstre el pH inicial, luego adicione luego 1 ml de HCl 0.1 N, agite y determine el pH;
continúe agregando cada vez 1 mL de HCl y vaya determinando y registrando el pH después de cada adición de HCl, hasta alcanzar un pH
cercano a 2.0. ¡Anote cuidadosamente los resultados!
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b. En un erlenmeyer coloque otros 10 ml del fluido utilizado en el punto a. y repita el procedimiento anterior, pero esta vez, adicionando cada 1
ml de NaOH 0.1 N hasta alcanzar un pH cercano a 11.
CUESTIONARIO: (No es para entregar, pero resolver estas preguntas les será útil para elaborar el respectivo informe; recuerde que el
informe se entrega en el formato de artículo científico según las especificaciones ya suministradas a través de su representante)

1. Justifique los resultados de pH obtenidos en las distintas soluciones del punto 1 de la presente práctica de laboratorio.
2. Realice los cálculos para obtener los valores de pH en un experimento teórico similar al del punto 3., en el que se haya utilizado AGUA
en lugar del fluido convenido.
3. Realice las respectivas gráficas de titulación de los diferentes fluidos utilizados por TODOS LOS GRUPOS (todos los fluidos, no solo
el que su grupo utilizó en la práctica. Para ello se requiere que pidan los resultados obtenidos por los demás grupos y compartan los
suyos con los demás grupos). Para ver mejor el efecto y las diferencias entre los distintos fluidos, en una misma gráfica elaborada en
papel milimetrado, tracen los resultados de todos los fluidos tanto al adicionar base como ácido y los resultados teóricos que
calcularon para la titulación del agua.
4. ¿Cómo se puede demostrar que los fluidos utilizados presentan poder amortiguador?
5. Identifique que fluido presenta el mejor poder amortiguador, tanto en la región básica como en la región ácida. ¿Hay algún fluido que
amortigüe muy bien en las dos regiones? ¡Justifique su respuesta!
6. Consulte cual es el principal amortiguador existente en el plasma sanguíneo. Teniendo en cuenta que el plasma tiene un pH de 7.4; es
ese el mejor amortiguador para ese valor de pH? ¿Porqué funciona bien ese amortiguador y no el que teóricamente podríamos
recomendar?