ESPECTROSCOPÍA ULTRAVIOLETA VISIBLE

La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-visible (UV/VIS) es una

espectroscopia de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiación electromagnética (luz) de las
regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético.
La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones
electrónicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar
algunos grupos funcionales de moléculas, y además, para determinar el contenido y fuerza de una
sustancia. Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de
soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados.

Fundamentos

La espectroscopía UV-Vis está basada en el proceso de absorción de la radiación ultravioleta-visible (radiación

con longitud de onda comprendida entre los 160 y 780 nm) por una molécula. La absorción de esta radiación
causa la promoción de un electrón a un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber radiación
de esta frecuencia son los electrones de enlace de las moléculas, por lo que los picos de absorción se pueden
correlacionar con los distintos tipos de enlace presentes en el compuesto. Debido a ello, la espectroscopía UV-
Vis se utiliza para la identificación de los grupos funcionales presentes en una molécula. Las bandas que
aparecen en un espectro UV-Vis son anchas debido a la superposición de transiciones vibracionales y
electrónicas.

La espectroscopía NIR esta basada en la absorción de la radiación a longitudes de onda entre 800 y 2700nm.
En esta zona del espectro electromagnético el proceso de absorción es debido a presencia de sobretonos y
bandas de combinación originados por transiciones vibracionales intensas que se producen a longitudes de
onda mayores.

Los espectros NIR están dominados por la presencia de bandas anchas de baja intensidad lo que restringe su
uso a muestras sólidas y líquidas. Se usa principalmente en análisis medioambiental, farmacéutico y de
alimentos, así como en la industria de polímeros y plásticos.

Cuando la radiación incide sobre una sustancia no toda ella se ve afectada por la misma; al átomo o
conjunto de átomos que absorben radiación se le denominaba cromóforo. En las moléculas existen
también átomos o grupos de átomos que no absorben radiación, pero hacen que se modifique
alguna de las características de la absorción del cromóforo, se denominaban a tales grupos
auxocromos

Aplicaciones

 Determinación de grupos funcionales en moléculas orgánicas

 Análisis de muestras bioquímicas
 Determinación de metales en compuestos de coordinación
 Análisis de semiconductores
 Medidas de color
 Determinación cuantitativa
 Seguimiento de la cinética de procesos químicos y bioquímicos

Equipamiento
  Espectrómetro UV-Vis/NIR Jasco V-670, de doble haz, que cubre el rango de longitudes de onda de
190 a 2700 nm. El equipo dispone de un monocromador único con doble red, una para la región UV-
Vis (1200 surcos/mm) y otra para la región NIR (300 surcos/mm). Los detectores son un tubo
fotomultiplicador para la región UV-Vis y un detector de PbS para la región NIR. El cambio, tanto de
los detectores como de las redes, se efectúa de forma automática a una longitud de onda fijada por el
usuario entre 750 y 900 nm. Las fuentes utilizadas son una lámpara de deuterio (190 a 350 nm) y una
lámpara halógena (330 a 2700 nm).

Equipamiento cofinanciado por el POICV 2000-2006. Generalitat Valenciana

Requisitos de las muestras

 Las muestras deben entregarse adecuadamente etiquetadas, envasadas y acondicionadas para

asegurar su identificación, integridad y conservación durante el transporte y garantizar la seguridad del
personal que lo realiza.
 El equipo dispone de una esfera integradora, por lo que se pueden analizar muestras tanto líquidas
como sólidas o en suspensión.
 El volumen mínimo de líquido a analizar es de 3 ml. Las muestras sólidas deben ser placas con
dimensiones comprendidas entre 20 (altura) x 20 (anchura) x 0.5 (grosor) mm y 65 (altura) x 50
(anchura) x 25 (grosor) mm. Las muestras sólidas en polvo deben estar molidas y no ser abrasivas.
 Para el análisis en el rango NIR de muestras en disolución evitar usar agua y alcohol como disolventes.
 La muestra deberá presentarse en disolución siendo la concentración la adecuada para el análisis. Si
no se cumple este requisito, la unidad podrá actuar sobre la muestra (preparando la disolución y/o
obteniendo la concentración adecuada de analito) en cuyo caso, previa aceptación del usuario, se
procederá a facturar un importe en concepto de preparación de la muestra.
 La disolución del analito debe ser estable en las condiciones de almacenamiento y análisis.
 Los disolventes y los tampones utilizados no deben interferir en la zona de medida del analito (ver
documentación de la unidad)