CODIGO: P-SA-89

METODO COLORIMETRICO PARA FECHA DE

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DETERMINACION DE CLORO RESIDUAL
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METODO COLORIMETRICO PARA

DETERMINACION DE CLORO RESIDUAL LIBRE EN
AGUAS

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

REFERENTE DE LABORATORIO SECRETARIO DE SALUD REPRESENTANTE DE LA
REPRESENTANTE DE CALIDAD DIRECCIÓN
DIRECTOR (S) TECNICO (S)
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1. OBJETIVO

Determinar la cantidad de cloro residual libre presente en aguas, mediante el

método Colorimétrico HACH método 8021 – USEPA DPD Method.

2. ALCANCE

El método es aplicable a todas las muestras de aguas para consumo humano,

aguas potables tratadas envasadas, estanques de piscinas y estructuras similares
que ingresan al laboratorio de salud pública del Meta.

No es aplicable para determinación de cloraminas en aplicaciones médicas.

3. DEFINICIONES

Análisis de blanco analítico: Es el someter una alícuota de agua reactiva a todo

el proceso de análisis por el cual pasa una muestra real. Los laboratorios deben
realizar los análisis de blancos para corregir la señal de fondo del sistema de
medición. El análisis de blancos se realizará en forma periódica o con cada lote de
muestras según lo requiera el método.

Cloro residual libre: La cantidad de cloro que queda presente en el agua después
de la reacción con la materia orgánica a la que está expuesta. Si se comprueba su
presencia se concluye que la mayoría de los microorganismos fueron eliminados
del agua.

Método DPD: Es el análisis más común empleado, en ausencia del ión Yodo, el
cloro reacciona con el indicador DPD, para dar una coloración roja. Se puede
realizar por titulación volumétrica o colorimetría.

4. RESPONSABLES
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Es responsabilidad de los profesionales del Laboratorio de salud Pública grupo

salud ambiental, cumplir con los lineamientos establecidos en este documento, sin
hacer ningún cambio que no esté debidamente documentado y autorizado.

5. GENERALIDADES

Referencias

Adaptación Standards Methods for the examination of water and wastewater.

El procedimiento citado es equivalente al método 330.5 de USEPA y el método
4500-Cl para Aguas Potables.

Manual de Análisis HACH.

6. DESARROLLO

6.1. Fundamento

El Cloro presente en la muestra en forma de Acido Hipocloroso y/o de ión

hipoclorito (cloro libre o cloro disponible) reacciona inmediatamente con el DPD
(N,N dietil p-fenileno-diamina) a la vez que el cloro libre presente en la muestra
para formar un color rosa proporcional a la concentración de Cloro. Los
resultados del ensayo se miden a una longitud de onda de 530 nm.

El análisis se realizará empleando el método No 80 predeterminado, en el

instrumento Espectrofotómetro Visible DR 2800 para el análisis de Cloro
Residual Libre, por lo tanto, se seguirán las instrucciones recomendadas por el
fabricante para el montaje del mencionado método.

6.2. Materiales

6.2.1. Equipos

Espectrofotómetro DR 2800 HACH

6.2.2. Reactivos

• Sobres de reactivos de Cloro Libre DPD en polvo, para celda cubeta de

10 ml marca HACH.
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• Solución estándar de cloro residual de bajo rango.

• Agua Desionizada sin demanda de Cloro.
• Kit estándar secundario DPD-Cloro LR HACH de verificación y control.

6.2.3. Otros

• Celdas o cubetas cuadradas de una pulgada de vidrio o cuarzo de 10 ml

• Tijeras.
• Balón Aforado en vidrio capacidad 100 ml clase A.
• Pipetas aforadas clase A de 10 ml.
• Pipetas Aforadas Clase A de 1 ml.

6.3. Procedimiento

6.3.1. Controles y/o curvas de calibración

Chequeo de Exactitud

Use el método de adición de estándar para validar el método, reactivos,

instrumento y encuentre si existen interferencias en la muestra.

Vaya a opción * Adición de patrones* en el menú del instrumento

Seleccione el valor de la concentración estándar, volumen de la muestra y
volumen de adición.
Abra la solución estándar (Cloro, Ampolla de 2 ml de 25 a 30 mg/L)
Prepare tres muestras adicionando 0.1 ml, 0.2 ml, 0.3 ml de la solución
estándar respectivamente a 3 porciones de 10 ml de muestra. Mezcle bien.
Use el procedimiento del método (Ver 6.3.4.3) para la lectura de más mimas,
tenga en cuenta de medir desde la concentración más baja a las más alta.
Seleccione *Gráf* para comparar los resultados esperados con los resultados
actuales, si los resultados actuales son significativamente diferentes de los
resultados esperados, asegúrese que los volúmenes de la muestra y
volúmenes adicionados son medidos exactamente.

6.3.2. Acondicionamiento y manejo de equipos

El acondicionamento y manejo de equipos se realiza según hoja de vida

(F-SA-18) de los mismos.
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6.3.3. Condiciones Ambientales

El análisis no exige condiciones ambientales específicas.

6.3.4. Descripción del método

6.3.4.1. Condiciones previas

• Las muestras deben ser analizadas inmediatamente y no deben

conservarse para un futuro análisis.
• Si la muestra sale de los límites o la muestra vira a un color amarillo
después de adición del reactivo, diluya la muestra con un volumen
conocido de agua sin demanda de cloro y de buena calidad y repita la
prueba.
• No lea muestra para cloro libre y total en la misma celda, el Yodo
presente en el “sobre para cloro total” puede interferir en el análisis de
cloro libre. Se recomienda usar celdas separadas.
• Revise las fichas de seguridad (MSDS/SDS) para las sustancias
químicas usadas.
• El “swift test free clorine” puede ser usado en lugar del “sobre de cloro
libre para 10 ml” “DPD FREE CHLORINE RGT”.
• Recoja las muestras en botellas limpias de vidrio. No use recipientes
plásticos porque estos pueden tener una demanda larga de cloro.
• Para mejores resultados mida el valor de blanco de reactivos para
cada nuevo lote de reactivos.

6.3.4.2. Preparación de la muestra

La muestra no requiere preparación específica para el análisis.

6.3.4.3. Método

− Encienda el espectrofotómetro DR 2800

− Presione el método almacenado Número 80
− Llene la celda de medición de referencia con 10 ml la muestra.
− Limpie la celda de medición con un paño que no produzca pelusa
− Inserte la muestra en el compartimiento de la celda del equipo.
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− Presione *Zero* (El display muestra 0,00 mg/L)

Prepare la muestra:

− Llene una segunda muestra de medición con 10 ml de muestra.

− Adicione el contenido de un sobre de reactivo en la celda de medición.
− Mezcle (de manera circular) la celda de medición por 20 segundos –
Un color rosa se desarrollará si el cloro está presente.
− Limpie la celda de medición con un paño que no produzca pelusa.
− Dentro de 60 segundos posteriores a la adición del reactivo, inserte la
celda de medición en el compartimiento de la celda del equipo.
− Pulse *READ* (Los resultados se muestran en mg/L Cl2 ).
.

6.3.5. Cálculos y/o valores de referencia

El cálculo del contenido de Cloro Residual Libre se hace mediante lectura

directa en el equipo, expresada en mgCl/L.

El rango de medición está definido entre 0.02 y 2.00 mgCl/L.

6.3.6. Obtención de resultados

Los resultados se expresan mgCl2 /L o ppm (, volumen de la muestra y

volumen de la muestra enriquecida y se registran en el F-SA-65 “Resultados
Fisicoquímicos de Aguas de Consumo Humano”.

Si las muestras se encuentran mayor a 2 ppm, diluya la muestra con un

volumen conocido de agua de alta calidad libre de cloro residual, algunas
pérdidas de cloro pueden ocurrir al realizar la dilución. Multiplique los
resultados por el factor de dilución.

6.3.7. Aseguramiento de la calidad de los resultados

ü Realizar análisis del estándar “Kit estándar secundario DPD-Cloro LR HACH”

para verificación y control cada vez que se corra un lote de muestras. Registrar el
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resultado en el formato F-SA-143 CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE

ENSAYOS FISICOQUIMICOS-CLORO.
ü Verificaciones del sistema cada vez que se corran muestras en el
espectrofotómetro.

6.3.7.1. Control de calidad interno

Para asegurar que las condiciones de funcionamiento en las lecturas de las

muestras son las adecuadas, se tiene en cuenta:

1. Realizar un chequeo de exactitud (ver actividad 6.3.1 ) y se tiene en cuenta

que los valores esperados se encuentren entre:

a. – 1.27 mg/L Cl2 para la muestra de estándar de 1.25 mg/L Cl2.

2. Se verifica las condiciones de operación del equipo en el control interno de

equipos F-SA-34.

Cálculos de la Solución patrón

ü La solución patrón utilizada es el “Kit estándar secundario DPD-Cloro LR

HACH”, el cual contiene un blanco y tres estándares predeterminados según el
certificado de Analisis del Fabricante. Este valor se registra en el formato F-SA-
143 CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE ENSAYOS FISICOQUIMICOS-
CLORO.

10.3 Criterio De Aceptación O Rechazo

ACCION PARA
CRITERIO RANGO DE ACEPTACION INCUMPLIMIENTO DE
CRITERIOS
Estándar 1: 0.21 +/- 0.09
Estándar 2: 0.85 +/- 0.10
Resultado del patrón Estándar 3: 1.51 +/- 0.14 Repetir Análisis
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El rango varía de acuerdo al

certificado de análisis del
fabricante.
Según Kit De Estándar
Verificación De Longitud De Repetir Análisis
Secundario Dr Check
Onda
Vigencia del reactivo Repetir Análisis
Reactivos vigentes
Verificación y mantenimiento
Mantenimiento de equipos Repetir Análisis
vigente

Interferencias:

SUSTANCIAS INTERFERENTES NIVEL DE INTERFERENCIA

Acidez Más de 150 mgCaCO3/L.
Alcalinidad Más de 250 mgCaCO3/L.
Interferencia Positiva en todos los
Bromuros, Br2
niveles.
Interferencia Positiva en todos los
Dióxido de Cloro, ClO2
niveles.
Interferencia Positiva en todos los
Cloraminas Inorgánicos
niveles.
Cloraminas Orgánicas Puede interferir.
Dureza Total Mayor de 1000 Mg CaCO3/L
Pre trate la muestra como sigue:
Ajuste la muestra a pH 6.0 a 7.0
Adicione 3 gotas de Arsenito de Sodio (5
g/Lt) y mezcle.
Manganeso Oxidado (Mn4+)(Mn+7)
Mezcle y espere un (1) minuto
Cromo*7
Use el test para medir cloro residual libre.
Reste este resultado del valor obtenido
sin tratamiento, para obtener el valor
correcto de cloro.
Causa un ligero incremento en lecturas
altas de cloraminas.3 mg/L de Cloramina
Monocloraminas
causan un aumento de 0,1 mg/L de
Cloro.
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Interferencia Positiva en todos los

Ozono
niveles.
Peróxidos Puede interferir.
Se puede ajustar el pH de la muestra con
Altos valores de pH
NaOH o H2SO4 1,0 N.

6.3.7.2. Control de calidad externo

El laboratorio participa en programas de evaluación externa como PICCAP

(programa interlaboratorio de control de calidad de agua potable) para agua potable.
Los resultados son registrados en el formato F-SA-109 “Análisis de Resultados
Control de Calidad Externo”

Como Donde Tiempo de

Responsabl Disposició
Registro conservarl conservarl conservació
e n final
o o n
Según Listado Según Listado
Maestro de Según Listado Maestro de
documentos F- Maestro de documentos F-
MC-04, Según documentos F- MC-04, Según
Director Técnico
F-SA-18 F-MC-03 - MC-04, Según F- F-MC-03 -
/Profesional de Medio físico y/o
Hoja de vida Listado MC-03 -Listado Listado
Laboratorio electrónico
de Equipos maestro de maestro de maestro de
registros y/o registros y/o tabla registros y/o
tabla de de retención tabla de
retención documental retención
documental documental
Según Listado Según Listado
Maestro de Según Listado Maestro de
documentos F- Maestro de documentos F-
F-SA-65
MC-04, Según documentos F- MC-04, Según
Resultados Director Técnico
F-MC-03 - MC-04, Según F- F-MC-03 -
Fisicoquímico /Profesional de Medio físico y/o
Listado MC-03 -Listado Listado
s Aguas de Laboratorio electrónico
maestro de maestro de maestro de
consumo
registros y/o registros y/o tabla registros y/o
Humano
tabla de de retención tabla de
retención documental retención
documental documental
Según Listado Según Listado
Maestro de Según Listado Maestro de
documentos F- Maestro de documentos F-
F-SA-143
MC-04, Según documentos F- MC-04, Según
Control de Director Técnico
F-MC-03 - MC-04, Según F- F-MC-03 -
calidad interno /Profesional de Medio físico y/o
Listado MC-03 -Listado Listado
de ensayos Laboratorio electrónico
maestro de maestro de maestro de
fisicoquímicos
registros y/o registros y/o tabla registros y/o
-Cloro
tabla de de retención tabla de
retención documental retención
documental documental
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Según Listado Según Listado

Maestro de Según Listado Maestro de
documentos F- Maestro de documentos F-
MC-04, Según documentos F- MC-04, Según
F-SA-34 Director Técnico
F-MC-03 - MC-04, Según F- F-MC-03 -
Control /Profesional de Medio físico y/o
Listado MC-03 -Listado Listado
interno de Laboratorio electrónico
maestro de maestro de maestro de
Equipos
registros y/o registros y/o tabla registros y/o
tabla de de retención tabla de
retención documental retención
documental documental
Según Listado Según Listado
Maestro de Según Listado Maestro de
documentos F- Maestro de documentos F-
F-SSA-109
MC-04, Según documentos F- MC-04, Según
Análisis de Director Técnico
F-MC-03 - MC-04, Según F- F-MC-03 -
resultados de /Profesional de Medio físico y/o
Listado MC-03 -Listado Listado
Control de Laboratorio electrónico
maestro de maestro de maestro de
calidad
registros y/o registros y/o tabla registros y/o
Externo
tabla de de retención tabla de
retención documental retención
documental documental

8. Anexos

No Aplica

9. Historial

IDENTIFICACIÓN DE LOS
VERSIÓN VIGENCIA CAMBIOS

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