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DETERMINACIÓN DE BIOAEROSOLES
Charris-Pabon, L. Gutiérrez-Salcedo, A. Hernández- Henao, J. Jiménez-Negrete, M. Cuello-
Rodelo, J
RESUMEN
El presente informe redacta el estudio de las partículas atmosféricas en el aire bajo muestras graduadas, con
la finalidad de identificar la concentración de bioaerosoles y los tamaños de las partículas de las sustancias
obtenidas en la cafetería de la Universidad de la Costa CUC, usando como equipo el impactador de cascada
de seis etapas consecutivas, donde se dejó el equipo por un tiempo de monitoreo de cinco minutos, luego del
proceso de incubación por un tiempo de 48 horas, se procedió a realizar el conteo y identifación de las
colonias macroscópica y microscópicamente. en este caso se identificaron seis tipo de colonias repartidas en
las seis etapas de las cajas Petri, teniendo en cuenta que en la etapa tres se tuvo presencia de hongos,
pasando así a la fijación de cada colonia identificada en un porta objetos para tinción de Gram que ayudo a
la identificación de bacterias donde se evidenciaron dos tipos como coco y bacilos, donde se presenta
concentraciones de UFC de 7,069.13 hasta 452,297 UFC/m3 de bacterias del género Bacillus Gram positivas
en todas las etapas del impactador.
ABSTRACT
This report draws the study of atmospheric particles in the air under graduated samples, in order to identify
the concentration of bioaerosols and the particle sizes of substances obtained in the cafeteria of the
University of the Costa CUC, using the six-stage waterfall impactor in a row as a team, where the equipment
was left for a monitoring time of five minutes, after the incubation process for a time of 48 hours, the
macroscopic and microscopic colonyes were counted and identified. in this case, six types of colonies were
identified in the six stages of Petri boxes, considering that in stage three there was presence of fungi, thus
passing to the fixation of each colony identified in an object holder for Gram staining that helped the
identification of bacteria where two types of coconut and bacilli were evident.
- MARCO TEÓRICO.
Las bombas de vacío trabajan solamente en un rango de Bacteria que descompone la materia orgánica a temperaturas
presiones limitado, por ello la evacuación de los sistemas de que oscilan entre 30 y 40 C. El agua es utilizada como medio
vacío se realiza en varias etapas, usándose para cada una de de eliminación de excretas y otros desechos; puede también
ellas una clase de bomba diferente. contener microorganismos patógenos de asiento no
intestinales, por ejemplo, flora de la piel (ECURED, 2019).
El funcionamiento de una bomba de vacío está caracterizado
por su velocidad de bombeo y la cantidad de gas evacuado Microscopio
por unidad de tiempo. Toda bomba de vacío tiene una Este aparato permite observar lo que es invisible a simple
presión mínima de entrada, que es la presión más baja que vista. Existen diversos tipos de microscopios, desde la lupa,
puede obtenerse, y también un límite superior a la salida o formada por una sola lente, hasta el microscopio electrónico.
presión previa. Si la presión previa aumenta por encima de
este valor, el bombeo cesa. (POMPETRAVAINI, 2007, - El microscopio simple o también llamado lupa,
págs. 5,6,7) consta de una de sólo una lente biconvexa o plano-
convexa, que proporciona una amplitud moderada
Siembra. del objeto.
Sembrar es introducir artificialmente una porción de muestra - Los microscopios de luz, compuestos u ópticos, usan
(inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un lentes, para enfocar y amplificar los rayos de luz que
cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. pasan a través de un espécimen o rebotan en él. La
capacidad de definición de estos microscopios es de
Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una aproximadamente de 1 micra (una millonésima parte
temperatura adecuada para el crecimiento. Para llevar a cabo de metro). Este microscopio es el que utilizamos
este proceso es necesario aplicar una serie de reglas dentro del laboratorio de Biología, en el que más
fundamentales, tales como: adelante identificaremos sus partes y aprenderás
como usarlo.
- Efectuar la siembra asépticamente para evitar - El microscopio estereoscópico o de disección, es un
contaminar la muestra, para esto es necesario que los microscopio compuesto doble, en estos aparatos las
medios de cultivo e instrumentos que se utilicen se imágenes conservan los relieves que pueden
encuentren esterilizados. observarse simultáneamente con los dos ojos. El
aumento que se obtiene es relativamente bajo, sin
- Que se realicen solo los manipuleos indispensables. embargo, pueden realizarse micro disecciones sobre
la platina a la par que la persona se encuentra
- Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser observando por los oculares.
posible utilizando un mechero o bien Flujo laminar.
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- Los microscopios electrónicos utilizan haces de cuenta que deben colocarse de forma correcta, es decir, que
electrones en vez de luz. Los electrones se enfocan queden planos. Seguidamente, se procede tomar las
con campos magnéticos, no con lentes. Cuando un muestras, este proceso se realiza durante 5 minutos y a una
haz de electrones incide en el vacío sobre un objeto, altura de 1.5 metros del suelo. Se coloca el rotámetro para un
las partículas incidentes pueden ser absorbidas, caudal de 28,3 L/s.
transmitidas y modificarse de distintas formas.
Algunos tipos de microscopios electrónicos pueden Seguidamente, se retiraron las muestras, de forma ordenada,
distinguir estructuras de unos cuantos nanómetros se rotularon, tal como se observa en la figura 2 y se llevaron
(milmillonésimas de metro) (Aguilar, 2013). a la incubadora por un tiempo de 72 horas a 37°C.
3. DESARROLLO EXPERIMENTAL
Lugol violeta
Cristal violeta
Aceite de inmersión
Alcohol acetona
3.2 Procedimiento.
Seguidamente, se le dio inicio a la etapa de observación Para calcular la concentración de UFC se hace uso de la
microscópica, donde con mucha precaución, los siguiente ecuación.
implementos necesarios y con ayuda de un asa, se fijó muy
ligeramente la muestra de cada uno de los cultivos
clasificados en un portaobjetos, para realizar este proceso fue
𝑈𝐹𝐶 𝑋 1000
necesario mantener encendidos todos los mecheros bunsen 𝐶𝑈𝐹𝐶 = 𝑬𝒄. 𝟏.
que se encuentran en el laboratorio. 28,3 𝑋 𝑡
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Gram positivas y Gram negativas radica en la constitución CUESTIONARIO
física-química que tiene la pared celular, la pared de las
bacterias Gram negativas contienen más lípidos y al ser ¿A qué tipo de riesgos están expuestos los seres humanos
tratadas con alcohol se le extraen, quedando los poros que están en contacto con los microorganismos
grandes y permitiendo la salida del complejo CV-1.En encontrados?
cambio en las bacterias Gram positivas por tener bajo
contenidos de lípidos los poros resultantes son más Las enfermedades víricas transmitidas por el aire por las
pequeños alcanzando a impedir la salida del complejo CV-1. bacterias identificas son: Amigdalitis, faringitis, bronquitis,
Otra explicación similar, está relacionado con el escarlatina producida por la especie Cocos y el Carbunco
peptidoglucano, compuesto que forma como especie de pulmonar producida por la especie de Bacillus. Muchas de
rejilla y está presente en mayor cantidad en la pared de las las especies de Bacillus no tienen a causar variedad de
bacterias Gram positivas. El tratamiento con alcohol acetona enfermedades; Los cocos que pueden causar infecciones en
causa una disminución en el diámetro de los poros, pero en los humanos son los estafilococos, los estreptococos, los
las Gram negativas por tener menos cantidad de neumococos y los meningococos, pero muchos agentes
peptidoglucano los poros quedaran lo suficientemente externos tienden a generar o transportar estas enfermedades
grandes para permitir la salida del CV-1. infecciosas y contagiosas que padecen los animales y pueden
trasmitirse al ser humano; se identifica que cerca al área de
En la Figura 3 se observan cocos y bacilos, los cuales no se estudio, la presencia de aves y felinos (Gatos), muy posibles
pudieron identificar si eran Gram positivos o Gram portadoras de bacterias (U., 1969)
negativos, debido a que existió error en el procedimiento de
la tinción de Gram, 1º) Una posible causa pudo ser a la ¿Cuáles son las posibles fuentes de estos contaminantes
cantidad de colorante que se aplicó en la prueba, esto no en el lugar de estudio?
permitió la verdadera identificación de la flora encontrada en En el sitio de muestreo existían diferentes fuentes como el
el muestreo. 2º) Prolongación en el tiempo de coloración. 3º) polvo procedente de las continuas brisas en el área, los
Posible contaminación con los reactivos por en el uso de las desechos generados diariamente, debido a que inciden en
pipetas. descomposición orgánica; otra posible fuente puede
En la Figura 4 se observan escasos Cocos Gram positivos y considerarse los seres humanos, debido a que gran parte de
estructuras de hongos como son l como son las hifas entre estas bacterias las transportamos en nuestro cuerpo. Por otro
los cuales está la (Candida albicans) que es el único hongo lado, cerca del sitio de muestreo se encuentra árboles que
que se puede teñir con la tinción de Gram, por lo tanto, se pueden ser fuentes de emisión de bacterias y animales.
consideran Gram positivas, porque retienen el CV-1 Proponga una forma de mitigación para este tipo de
tomando un color violeta oscuro, contaminantes.
Finalmente, gracias a las concentraciones obtenidas de UFC Una mitigación directamente no se podría como tal por la
de bacterias del género Bacillus, se puede decir que la zona en que fue extraída la muestra (cafetería principal cuc)
calidad del aire es un poco inestable, por lo cual se pueden ya que es una lugar de espacio abierto, pero se puede crear
llegar a presentar impactos en la salud de las personas un plan para disminuir la contaminación en ese punto donde
expuestas, ya que estas bacterias presentan un tamaño entre fue obtenida la muestra, esto se puede llevar a cabo
4-10 μm, pudiendo estar localizadas en la cavidad nasal y motivando e incentivando a toda la comunidad estudiantil y
faringe del sistema respiratorio. no estudiantil que se encuentre en el lugar o en cualquier
punto de la universidad con el fin de que hagan una buena
disposición de los residuos y desechos en los lugares que le
corresponde, no obstante darle un aseo continuo a cada área
esto con la finalidad de una menor exposición a los
biaerosoles.
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CONCLUSIONES https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-1-4684-
6438-2_8
Una vez realizada la experiencia de laboratorio de
determinación de bioaerosoles es posible afirmar que las U., M. e. (16 de agosto de 1969). INCREMENTO DE
bacteria encontrada y analizada corresponde al género INFRAESTRUCTURA:"ESTABLECIMIENTO DE UN
LABORATORIO PARA ESTUDIOS.DE
bacilos y cocos Gram positivas ,Gram negativas, estas
CONTAMINANTES EN AIRE, AGUA Y SUELO
pueden causar graves daños a la salud humana como MEDIANTE TÉCNICAS ATÓMICAS Y NUCLEARES".
enfermedades de piel e infecciones internas, por tal motivo Obtenido de
podemos concluir que cuando esta bacteria está en altas https://www.osti.gov/etdeweb/servlets/purl/20935679
concentraciones en el aire provocara un gran impacto en la
salud de las personas expuestas, ya que por su tamaño son de
fácil inhalación, causando enfermedades respiratorias y
cutáneas. Aguilar, M. I. (2013). Obtenido de
https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m
9.html
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UNIVERSIDAD DE LA COSTA, CUC
DEPARTAMENTO DE CIVIL Y AMBIENTAL
ANEXOS
CAFETERIA
CODIGO FORMA RELIEVE TEXTURA COLOR ETAPAS # colonias
Y1 Redondas sin relieve lisa amarilla 1-2-3-5-6 24
Y2 Redondas sin relieve lisa blanca 1-2-3-5 64
Y3 Asimetrica sin relieve lisa blanca 1-3-4-6 9
Y4 Asimetrica con relieve lisa amarilla 1 1
Y5 asimetrica larga sin relieve lisa blanca 2 1
Y6 Redondas sin relieve lisa naranja 3 3
Tabla 3 Caracterización macroscópicas de las bacterias identificadas
UFC
Y1 169,611
Y2 452,297
Y3 63,604
Y4 7,067
Y5 7,067
Y6 21,201
Figura 5 Flora mixta, constituida por basilos Gram positivos y bacilos Gram negativos.
Figura 6 cocos y bacilos, los cuales no se pudieron identificar si eran Gram positivos o Gram
negativos