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Clase No. 2
Docente: Miryam Astudillo
ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN
El término higiene, podemos tomarlo como remover la mugre, lo cual se hace con
detergentes, y es un término aplicado principalmente a la limpieza (que es lo mismo).
Y los bactericidas lo que hacen es eliminar las bacterias dañando la pared celular o
inhibiendo la síntesis de proteínas, y sin proteínas las bacterias no pueden seguir viviendo,
así que estos antibióticos son para los pacientes inmunodeficientes.
NOTA: Dependiendo de la infección, hay tratamientos con antibióticos que pueden tener
una duración de hasta 14 días, como es el caso del tratamiento de una gastritis confirmada
por Helicobacter pylori, que puede llegar a tener un tratamiento con antibióticos de hasta 10
días.
RESISTENCIA
1.Los priones son los más difíciles, porque son proteínas que se autoreplican y que están
relacionados con algunas enfermedades como el virus de las vacas locas.
2. Cryptosporidium (parásito), que produce enfermedad diarreica en los pacientes
inmunodeficientes, cuando el paciente es VIH positivo y empieza a tener diarrea por
Cryptosporidium empieza a entrar en la fase clínica de SIDA.
3. Las esporas, las estructura de resistencia de las bacterias, son de los más difíciles de
combatir. Recuerden que lo que no es espora (estructura de resistencia) es forma
vegetativa (bacilo, coco). Una bacteria esporula cuando se le acaba la comida; con base a
ese fuerte estrés, activa los genes de esporulación y empieza a sintetizar ácido dipicolínico
donde empaqueta su ADN, y ya sin ADN la bacteria se va a morir pero queda el material
genético guardado en la espora, no importa que la forma vegetativa se lise o se rompa
porque ya está la espora.
4. El proceso para eliminar bacterias es mucho más exigente cuando se habla de
micobacterias, una muy importante es la Mycobacterium tuberculosis. En Cali, después de
la Guajira, es el lugar donde más tenemos tuberculosis en Colombia; si miramos las
estadísticas en Cali la tuberculosis ni sube ni baja, es decir, que está estable; eso hace que
la prevalencia en Cali sea del 42%, mientras que en Colombia la prevalencia es de 24%.
Tenemos problemas con los sistemas de control de la tuberculosis en Cali, esto incluso
puede verse afectado por intereses políticos donde incluso conviene que la gente se muera
por esta infección.
5. Los quistes de Giardia: parásito que produce diarrea.
6. Tenemos virus sin envoltura.
7. Trofozoitos, que también son parásitos.
8. Bacterias gramnegativas, como pseudomonas. La P. aeruginosa es muy fácil que se
de en ambiente hospitalario, en los ríos, en floreros, etc. Y produce infecciones muy severas
en pacientes quemados, si hay oportunidad de que la bacteria llegue a una herida produce
muchos problemas. Además como se da en ambiente hospitalario es multiresistente a los
antibióticos porque hacen intercambio genético con otras bacterias del ambiente
hospitalario. Esto es un problema iatrogénico, por falta de buen manejo del paciente
quemado, se permite que son contamine con las bacterias ambientales.
9. Candida, es una levadura
10. Aspergillus, es el hongo que le sale a los tomates, que es como un algodón blanco.
Produce una toxina que está relacionada con cáncer de hígado. Importante no quitarle solo
el pedazo dañado y comerse el resto pues no se sabe las hifas hasta donde han entrado en
la pulpa, porque eso se ve microscópicamente. Hay que preguntarle a los pacientes esos
hábitos de comer alimentos que están medio dañados. Aunque no todos los pedacitos son
malos, por ejemplo la mortadela cuando se pone verde es por los lactobacillus que se usan
para producir alimentos embutidos; entonces en la mortadela si se puede retirar ese
pedacito.
11. Virus grandes sin cápside.
12. Bacterias grampositivas como enterococos. Los enterococos (Enterococcus) como
su nombre lo dice, están en el intestino. Esa bacteria también es un poquito recalcitrante a
nivel hospitalario, también tiene mucha resistencia a algunos antibióticos, y dolor de cabeza
"resistencia a vancomicina", ya se conoce como VRE (Vancomicina resistente
enterococcus o Vancomycin-resistant Enterococcus), entonces, importante es que lo
podemos encontrar a nivel hospitalario y como es un coco, pues también tiene cierta
resistencia por su forma. Y Staphylococcus aureus está muy fácilmente en las partes
húmedas de nuestras superficies, ¿Cuales son las húmedas? las axilas, la nuca, detrás de
las orejas, el periné, los dedos de los pies, y si no se los lavan pues con mayor probabilidad,
inclusive esa bacteria cuando está en aislamiento primario tiene olor a pecueca, entonces,
es el mismo olor que se queda en los pies sin lavar.
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
● Métodos químicos
● Métodos físicos:
- Temperatura
- Radiación
- Filtración
TEMPERATURA
1. Calor húmedo
El calor es esterilizante, desde el punto de vista de las bacterias, ¿Cuál sería la estructura
que debería eliminarse para decir que hay esterilidad? Las esporas, ¿Por qué? son la
forma de resistencia, resistente todo (luz del sol, radiación, desinfectantes, todo),
entonces, ¿Como hay que eliminarlas? con el calor, llevándolas a temperaturas altas para
destruir su estructura química. Entonces, todos los sistemas de esterilización tienen que
tener un indicador de proceso esporicida, porque las esporas son las más difíciles de
eliminar. Si elimina las esporas, elimina todo lo demás (Pseudomonas, S. aureus,
mycobacterium).
Entonces, una forma de conseguir esterilización con el calor, es utilizar el Autoclave
Tenemos 121 grados, 1 ATM de presión, 15 libras por 15-20 minutos, este es el sistema del
autoclave.
Pregunta compañero: Profe, si hay bacterias que pueden sobrevivir temperaturas
superiores a los 121 ºC, entonces en este caso, ¿No nos interesa porque no son
patológicas o la presión en ese método también las eliminan?
Respuesta profesora: Esas bacterias que pueden hacer metabolismo a 100 ºC, por
ejemplo, las bacterias que están en las calderas, de donde sacan la Taq Polimerasa (que
trabaja a 95 ºC), en ese momento podemos tener sobrevida de ese metabolismo, y ahí es
cuando necesitamos la presión interna que se da por el vapor contenido allí (15 libras de
presión) que también elimina los microorganismos, no solo la temperatura.
● Agua hirviendo : (para eliminar esporas pero ya NO se usa porque NO sirve)
Hace muchos años las enfermeras hervían las agujas lo que causó muchos casos de
tétanos.
100 grados centígrados se pueden conseguir hirviendo el agua, pero para eliminar las
esporas se tendría que hervir por 14 horas, lo cual resultaría muy costoso.
2. Calor seco
● Horno
El horno normal que se le conoce como horno
de pasteur, puede ser 170 grados x 2 horas y
180 grados x 1 hora, entre más se baje la
temperatura más se aumenta el tiempo.
Calibrado, certificado, controlado, digital, que
nos da 180 grados centígrados por una hora y
así hacemos esterilización. Ahí metemos lo que
no podemos meter en el autoclave. (Nota: la
profesora dijo que en la imagen había un error
en cuanto al tiempo)
● Congelación
Depende de cómo se haga. Es decir, si tenemos congelación con un protector, las bacterias
no se mueren, se guardan congeladas protegidas con glicerol o con la grasa de la leche, por
ejemplo.
Cuando se hace la congelación, se forman cristales de hielo que “chuzan” las paredes de la
bacteria por lo que habrá muerte.
La temperatura del congelador doméstico es (-18 grados) suficiente para preservar los
alimentos altamente perecederos como el pescado y la carne 3 meses.
Pero no es práctico esterilizar por congelación, ya en el hospital se usa más el autoclave y
los métodos químicos para eliminar el microorganismo, sin embargo, seguimos teniendo
infecciones asociadas al cuidado de la salud (ya no se llaman infecciones hospitalarias
porque por ejemplo alguien podría infectarse en un consultorio de estética).
● Flameado. Se toma un mechero, se flamea, y así estamos esterilizando el asa para
poder hacer cultivos, de lo contrario los cultivos saldrían contaminados
● Incineración. Hay cosas que deben ser incineradas, todo el material de desecho se
incinera (ej:materiales de desecho de laboratorio como si se trabaja con animales).
RADIACIÓN
Muchas radiaciones son bactericidas, pero son muy costosas por ejemplo: Gamma, X...
● Luz ultravioleta, Es la que más empleamos. Se emplea mucho en los consultorios
de odontología, a esta luz se le debe hacer control, dicha luz ilumina pero con el
tiempo de uso puede prolongar la longitud de onda y ya no es esterilizante; la luz UV
incide sobre las bases del ADN y daña sus enlaces, impidiendo la replicación de las
bacterias y ocasionando su muerte. Si la luz UV tiene 300 horas de uso
determinadas, se debe llevar un registro para saber cuánto tiempo de uso lleva.
● Radiaciones ionizantes. se emplean mucho en la industria de alimentos.
FILTRACIÓN
Para lo que se daña con el calor, por ejemplo: vacunas, soluciones de proteínas, algunos
jarabes. Esto tiene que ir estéril, porque va a ser por vía digestiva, pero es mejor que no
vaya contaminado porque se va deteriorar antes que se consuma
Se coloca un Erlenmeyer que tiene un tubo que se conecta a una bomba de vacío, la tapa
del Erlenmeyer será un portafiltros con un filtro con una porosidad del tamaño de la bacteria
más angosta (0.1 micrometros) porque esperamos que en esa solución no haya una
micobacteria que es una de las bacterias más delgaditas o una leptospira que es de las más
angostas. Es muy difícil que un líquido pase por ahí, por eso se le conecta la bomba al
vacío.
El líquido que vamos a esterilizar se pone en el portafiltros y la bomba de vacío succiona. El
líquido pasa sin bacterias, pues estas quedan retenidas en el filtro.
Entonces, hacemos esterilización por filtración a lo que se daña en el autoclave, como por
ejemplo los azúcares caramelizan, las proteínas se alteran, etc.
MÉTODOS QUÍMICOS
BIOCIDAS
Todas las sustancias químicas son biocidas, todo lo que mide microorganismos son
biocidas.
-Antisépticos para tejido vivo.
-Desinfectantes para superficies inertes.
-Preservantes que se emplean mucho en la industria alimenticia.
Para saber si un biocida va servir para la esterilización, desinfección,etc se debe mirar qué
nivel del proceso de desinfección necesita el instrumento que se va a emplear (desinfectar o
esterilizar). Hay niveles y criterios.
❖ Nivel intermedio: deja las esporas viables, elimina la forma vegetativa bacteriana
más difícil de erradicar que son las micobacterias, es micobactericida. El indicador
de desinfección de nivel medio son las micobacterias.
- Alcoholes: Generalmente como desinfectante se acompaña con Yodo, no
mata las esporas y elimina la micobacteria.
- Yodo: Tiene color y deja todo manchado de amarillo pero ya se está
buscando quitarle el color. (Nota: en la diapositiva dice Povidona Yodada)
- Compuestos con cloro y bromo (halógenos)
❖ Nivel bajo: se aplica en superficies que implican bajo riesgo de infección (ejemplo:
pisos, paredes, muebles) o bacterias que no implican riesgo de infección en general.
- El óxido de etileno
también es de nivel bajo,
no sube la temperatura a
más de 60° C; es como
una especie de horno que
tiene una bala óxido de
etileno, entonces todo lo
que se pueda alterar por
medio de los
desinfectantes se puede
colocar en óxido de etileno
para nivel medio.
● Pregunta: no se
entiende.
● Respuesta: No, lo que pasa es que inclusive en un extendido, en un examen
directo, (que llaman aquí baciloscopia, el único país que lo llama así) del esputo
donde hay Mycobacterium tuberculosis, el alcohol va combinado con la acetona para
que la fucsina fenicada entre por la pared y tiña la Micobacteria, eso es bacilo ácido
alcohol resistente (BAAR); el comportamiento in vitro no nos garantiza que la
bacteria está muerta por que el tiempo de contacto es corto y además la
micobacteria está protegida por moco, células epiteliales, etc.
En el laboratorio no importa que la bacteria muera por la presencia del
alcohol-acetona pues esta sigue siendo coloreada y se puede usar para diagnóstico.
El bajo nivel se usa para erradicar las bacterias del polvo, las bacterias que no tienen
mucha virulencia.
- Mercuriales: Es un metal
pesado que hace desinfección de bajo
nivel, mucha gente lo aplica para la
limpieza de heridas.
CRITERIOS
1. Crítico: Todo lo que estará en contacto con superficies estériles (órganos, la sangre,
músculos, huesos, etc.), en este caso se usa el glutaraldehído, el peróxido de hidrógeno. El
alcohol no sirve.
2. Semicríticos: los que están en contacto con nuestras partes contaminadas, es decir, las
mucosas
Aunque el endoscopio sea para mucosas, la pinza endoscópica debería estar esterilizada
para evitar transmisión de infecciones entre pacientes con los que se use. En este
semicrítico también estarían las gasas, etc.
3. No crítico. Los de bajo riesgo de infección como los pisos, aunque al suelo es importante
tenerlo en cuenta en situaciones en las que el paciente es un bebé que aún gatea y en su
casa tenemos una mascota, que así esté vacunada igual se debe tener precaución, porque
las vacunas son para evitar enfermedad, mas no infección. El animal puede tener el riñón
infectado, eliminar espiroquetas leptospira por ejemplo, lo que causaría una leptospirosis,
pero el animal no presenta síntomas de enfermedad porque está vacunado. En tales casos,
los desechos de las mascotas deben ser retirados con elementos de nivel bajo o nivel
medio mejor, por ejemplo amonio cuaternario, porque los demás tienen muchos olores, y los
metales pesados tienen mucho problema de manipulación. El amonio cuaternario se
consigue como quacs, otros que son omnibus que tienen además de amonio otro
desinfectante para mejorar la eficacia.
Así como las bacterias, los desinfectantes también actúan a diferentes niveles para producir
la muerte bacteriana; y muchos tienen acciones combinadas.
Tenemos:
❖ Las proteínas de la bacteria: el alcohol, el hidróxido de etileno, el calor y el pH bajo
que pueden desnaturalizarlas
❖ Oxidación: las de la diapositiva y las radiaciones que también hay en el ácido
nucleico
❖ El fenol coagula el citoplasma, el uso es muy restringido por el fuerte olor que
tiene y es tóxico, por eso se debe evitar la exposición por mucho tiempo.
Antes la coloración para hacer el examen de esputo era la Zielh Nielsen, la cual
implica mejorar la penetración del colorante a la bacteria con el uso de calor; se
coloca el mechero debajo de la placa y eso hace que se evapore y, como sabemos
que tiene fenol, el cual es tóxico, la persona que los está manipulando, está
respirando esos vapores y, en una ciudad en la que se tenga una buena carga de
tuberculosis en un hospital se pueden hacer en una mañana 10 baciloscopias,
imagínese la cantidad de tiempo que tienen estas personas expuestos. Entonces se
recomienda mascarilla de alta eficiencia que tengan filtro, pero no todo el mundo
cambia los filtros, la mascarilla la pueden comprar y dársela al personal, pero no le
dicen que el filtro hay que cambiarlo, entonces las personas llevan usando sus
mascarillas hasta 5 años
Hay otro problema, antes decían : las bacterias son resistentes a los antibióticos por
abuso de antibióticos y resulta que no solamente eso, tenemos también que los
biocidas pueden generar resistencia a los antibióticos. Mucha gente utiliza el
hipoclorito, cogen un balde y un detergente y le echan hipoclorito de sodio. Los jabones
tienen enzimas (materia orgánica) y la mayoría de desinfectantes se inactivan con materia
orgánica, entonces el hipoclorito hay que usarlo solo, no hay que usarlo con jabon. También
las bacterias están muy expuestas a alcohol glicerinado que se usa para las manos. Y se
exponen mucho las bacterias a estos desinfectantes, entonces se van a ir seleccionando y
recogiendo resistencia.
Hay evidencia, principalmente veterinaria, que los biocidas generan resistencia a los
antibióticos, lo hacen activando mecanismos de resistencia que son los mecanismos de
resistencia a los antibióticos, por ejemplo bombas de flujo, alterar la permeabilidad de
la superficie, cambiando los canales de entrada de antibióticos, cerrando las
porinas...
Esto se descubrió en la veterinaria porque si yo al agua de los pollitos le echo antibióticos,
estos van a desarrollarse mejor, tienen más peso y se alejan las infecciones, entonces por
eso se usa tanto en veterinaria y como nuestro sistema de vigilancia epidemiológica no es
tan robusto, y pues tenemos problemas grandísimos con personas que se mueren de una
infección que no tiene tratamiento antibiótico. Entonces activan controles genéticos,
disparando mecanismos de resistencia.
Ambiente hospitalario
¿Qué problemas tenemos a nivel hospitalario? R: tenemos gram negativos MDR (Multidrogo
resistentes), problema :
● Las bacterias se han cultivado a partir de superficies en las habitaciones varios días
después de que un paciente con bacteria MDR se haya retirado, entonces las
bacterias permanecen. Por eso, si un paciente ingresa a una habitación, el anterior
se había infectado con un patógeno , aumenta el riesgo de que el nuevo paciente se
contamine con ese microorganismo. Así hayan limpiado la habitación (pues la
limpiaron, pero no la desinfectaron) .
Hay bacterias en las superficies de las barandas, en los lavamanos, los teclados de los
computadores y estas las llevan a la estación de enfermería, al dispensador de agua, la
diseminan por todas partes, hay mucho intercambio entre las bacterias de la superficie y las
manos de las personas.
Para hacer la atención hospitalaria entre lo que más se emplea tenemos: el hipoclorito y el
amonio cuaternario (que es de bajo nivel). Entonces solamente debería utilizarse en pisos
pero no de salas quirúrgicas. Se usan también las evaporaciones de peróxido de
hidrógeno y también el alcohol. No hay estándar de oro para esa atención hospitalaria, y
esta sería una tecnología sin contacto, solamente una evaporación y con esta la
desinfección total del ambiente.
El personal de limpieza también es un problema crítico, aunque nadie lo ve como tal, ¿Por
qué? Porque esta gente es mal pagada, y mala paga tiene que ver con malnutrición y
malnutrición con enfermedades. Entonces la gente mal pagada no tiene sentido de
pertenencia, además están mal capacitados y si reciben una capacitación no les hacen un
parcial para ver si aprendieron; otra cosa importante es que no se consideran importantes
en el ambiente hospitalario, por eso ellos no hacen bien su trabajo y pueden iniciar una
epidemia por una bacteria multiresistente.