EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS A PARTIR DE LEVADURA

Introducción:
Los ácidos nucleicos son las biomoléculas responsables del almacenamiento y
transmisión de la información genética del individuo. Son un grupo de compuestos que
poseen en su estructura bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina, guanina y
uracilo; pentosas: ribosa y 2-desoxirribosa, y grupos fosfato. El tipo de bases
nitrogenadas y pentosa presente dependerán del tipo de ácido nucleico. El ADN y el
ARN difieren en el tipo de base y la pentosa que forman parte de su estructura. Los
ácidos nucleicos se encuentran normalmente unidos a proteínas sencillas del tipo
histonas y protaminas, denominándosele a esta combinación nucleoproteínas, que no
son más que uno de los tipos de proteínas conjugadas que existen en las células.
Existen las desoxi-nucleoproteínas y las ribo-nucleoproteínas, aunque éstas se
encuentran en todos los tipos de células, no se encuentran en ellas en las mismas
proporciones, por ejemplo, las células de levadura son ricas en ribo-nucleoproteínas,
mientras que las células del timo del ternero son ricas en desoxi-nucleoproteínas.
Su extracción a partir de las diferentes células, puede hacerse con soluciones
alcalinas diluidas, soluciones buffer (pH 4-11) y soluciones de cloruro de sodio.
genético de organismos unicelulares como la levadura (Saccharomyces
cerevisiae) puede ser extraído con relativa facilidad. La ruptura de las membranas se
puede realizar con un álcali diluido y calentamiento. Una vez liberados los ácidos
nucleicos, estos son precipitados en medio ácido y etanol (alcohol acidulado),
hidrolizados con H2SO4 y calentamiento, y finalmente aislados por centrifugación.
Detección de ARN
Los nucleótidos de ARN pueden ser identificados de manera indirecta utilizando la
prueba de Bial ya que esta reacción detecta la presencia del furfural producido en
medio ácido por la ribosa. El reactivo de Bial contiene orcinol disuelto en HCl
concentrado. El ácido provoca la formación del furfural y el orcinol se condensa con
este último para producir cromógenos de color verde-azul.

Detección de ADN
La presencia de ADN se puede verificar mediante la reacción del Dische o
difenilamina, en la cual la 2-desoxirribosa del DNA reacciona con ácido sulfúrico para
producir aldehído hidroxilevulínico o 4-hidroxipentanal. Este compuesto reacciona
con la difenilamina originando como producto un compuesto químico de color azul
(figura 2). Esta reacción es específica ya que sólo la 2-desoxirribosa produce el 4-
hidroxipentanal en medio fuertemente ácido.
AUTOEVALUACIÓN

1 ¿Porqué la determinación de ribosa y 2-desoxirribosa representa una forma indirectade

reconocer la presencia y cantidad de ácidos nucleicos?

2. Mencione otras muestras biológicas a partir de las cuales podamos cuantificarácidos nucleicos.

3. Mencione otros componentes químicos que podamos cuantificar para medirindirectamente la

concentración de ADN y ARN.
ENZIMAS