UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZONICA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA TIERRA

CARRERA DE AGROINDUSTRIAS

INFORME DE LABORATORIO

Materia: Microbiología Agroindustrial

Tema: Siembra e identificación de microorganismos en jugos de frutas
Nombre: Jimmy López
Semestre: Quinto Paralelo “A”
Docente: Ing. Paulina Ulloa

Puyo - Ecuador

Fecha Nota

10/01/2018
 UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA
LABORATORIO DE BIOLOGÍA Y ENTOMOLOGÍA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA TIERRA

TEMA: SIEMBRA E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS EN JUGOS

DE FRUTAS
1.INTRODUCCIÓN

En la naturaleza, la mayoría de los microorganismos no se encuentran aislados, sino

integrados en poblaciones mixtas. Para llevar a cabo el estudio de estos microorganismos y
de sus propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar con especies aisladas,
obteniendo cultivos axénicos o puros. Un cultivo axénico o puro es aquel que contiene un
sólo tipo de microorganismo y que procede generalmente de una sola célula; el crecimiento
de ésta origina, en medio sólido, una masa de células fácilmente visible que recibe el nombre
de colonia. Para obtener cultivos puros a partir de una población microbiana mixta, se utilizan
las denominadas técnicas de aislamiento, que fueron desarrolladas durante el siglo XIX. En
un principio, Lister utilizó diluciones seriadas en medio líquido con esta finalidad, pero la
presencia de contaminación, es decir, de microorganismos no deseados, dificultó el
aislamiento. La escuela de Robert Koch introdujo los medios sólidos, complementados con
agar, y las placas de Petri en Bacteriología, permitiendo así la separación física de las colonias
sobre la superficie del medio de cultivo o en el interior del mismo. El aspecto de las colonias
sirve para diferenciar distintas especies microbianas.
El proceso de colocar las bacterias u otros microorganismos cultivables en medios de cultivo,
recibe el nombre de siembra; esta operación la podemos realizar a partir de muestras
biológicas o de un cultivo microbiano a otro, esto se hace con el fin de reconocer la
morfología microscópica y macroscópica de estos microorganismos incluyendo su
comportamiento. Existen técnicas adecuadas para realizar estos cultivos, mediante el uso de
algunos elementos importantes para realizar siembras como: el mechero, el asa bacteriológica
(asa redonda), o micológica (asa en punta), los espacios adecuados, las condiciones asépticas
y los medios de cultivos ya preparados y atemperados a 37°C.

2.OBJETIVOS GENERAL

Conocer los procedimientos adecuados para el aislamiento e identificación de

microorganismos a partir de jugo de frutas.

3.OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Reconocer el desarrollo y crecimiento de microorganismos de interés.

 Aplicar diferentes técnicas de siembra y aislamiento de cultivo en los diferentes
medios aprendidos en clases.
 Identicar colonias obtenidas en la preparación de medios de cultivo y realizar el
correspondiente conteo de acuerdo a las cantidades halladas en la caja de Petri , Petri
film y tubos.
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4.MATERIALES

Materiales
 Cuchillo
 Cajas Petri
 Petri film
 Tubos de ensayo
 Mechero
 Fosforera
 Pipeta electrónica
 Muestras de: jugo de frutas
 Funda hermética
 Asas microbiológicas

4.PROCEDIMIENTO

Caja Petri
Aislamiento: Para ello se toma una pequeña cantidad de muestra con un asa de platino y se
reparte sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio puedan
separadase inmovilizadas las células bacterianas. Tras la incubación en condiciones
adecuadas, cada célula viable origina una colonia visible resultado de sucesivas divisiones
celulares.

Tubos de ensayo
Por picadura y estría en la superficie: En este método se siembra por picadura en el fondo
del tubo y a medida que va saliendo del botón se realiza una estría en la superficie del gel,
esto se hace con la finalidad de estudiar los cambios que ocurrieron en superficie y
profundidad. A lo largo del canal se desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la
parte superior o inferior del tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los nutrientes
del medio
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Placas Petrifilm
1. Coloque la Placa Petrifilm en una superficie plana y nivelada. Levante la película
superior. Con la Pipeta Electrónica 3MTM, o una pipeta equivalente perpendicular a
la Placa Petrifilm, coloque 1 mL de la muestra en el centro de la película cuadriculada
inferior.
2. Libere la película superior dejando que caiga sobre la dilución. No la deslice hacia
abajo
3. Espere por lo menos 1 minuto a que se solidifique 10 el gel y proceda a la incubación.
4. Incube las placas caras arriba en grupos de no más de 20 piezas. Puede ser necesario
humectar el ambiente de la incubadora con un pequeño recipiente con agua estéril,
para minimizar la pérdida de humedad.
5. Las Placas Petrifilm pueden ser contadas en un contador de colonias estándar u otro
tipo de lupa con luz. Consulte la “Guía de interpretación” para leer los resultados.

CALCULO
Petrifilm

𝑼𝑭𝑪 𝑼𝑭𝑪 𝑵º 𝒅𝒆 𝒄𝒐𝒍𝒐𝒏𝒊𝒂𝒔 × 𝒇𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒅𝒆 𝒅𝒊𝒍𝒖𝒄𝒊𝒐𝒏

𝒐 =
𝒎𝒍 𝒈 𝒎𝒍 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 𝒔𝒆𝒎𝒃𝒓𝒂𝒅𝒂

𝑼𝑭𝑪 𝟐𝟑 × 𝟏
=
𝒎𝒍 𝟎. 𝟏
𝑼𝑭𝑪
= 𝟐𝟑𝟎 = 𝟐. 𝟑 × 𝟏𝟎𝟐
𝒎𝒍

Caja Petri
𝑼𝑭𝑪 𝟐𝟎𝟎 × 𝟏
=
𝒎𝒍 𝟎. 𝟏
𝑼𝑭𝑪
= 𝟐𝟎𝟎𝟎 = 𝟐 × 𝟏𝟎𝟑
𝒎𝒍

Se rechaza por que el producto está muy contaminado

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5. RESULTADOS
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Fuente (NTE INEN 2 337:2008)

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Si bien se encontraron diferencias macroscópicas en cuanto a textura y color de las colonias

al emplear los medios de cultivo en cuanto a las diferentes técnicas de siembras utilizadas
tales como en caja Petri, Petrifilm y en tubos de ensayo se puede observar que el medio de
cultivo realizado en dicha práctica ,el cual se realizó con muestras de jugo de frutas a estudiar
por ende nos dimos cuenta que al final la diferencia se presenta un tanto a un color más claro
a diferencia del medio de cultivo seleccionado del internet el cual utilizamos para dicha
comparación de resultados. Por ende, esta tonalidad clara, varia por varios motivos ya sea la
concentración del jugo de frutas así también puede ser por una mayor cantidad de
concentración de Papa Dextrosa Agar utilizada en este medio de cultivo.
En cuanto a la velocidad de crecimiento, se observó diferencias entre los tres medios de
cultivo elaborados, aunque nuestro medio de cultivo PDA tuvo un comportamiento similar
al medio de cultivo requerido.
Respecto a la velocidad de crecimiento de cada cepa en los medios de cultivo, no se
encontraron diferencias individuales, pero sí al comparar los diversos medios de cultivo.
Laicamente dicha practica estaba destinada con el fin de investigar si tal producto (jugo de
fruto) poseía presencia de microorganismo por ende se pudo constatar que dicho producto
tenía presencia de contaminación el cual fue identificado gracias a las diferentes técnicas de
siembras realizadas.
Cabe destacar que se pudo observar pequeños puntos negros en la placa Petrifilm a diferencia
de la caja Petri en el cual se pudo ver que las colonias no se les pudo aislar por lo cual eran
incontables

DISCUSIÓN

Dentro del marco de discusión podemos enmarcar diversos aspectos importantes y

fundamentales de la práctica. Destacamos el resultado positivo sobre los medios de cultivo,
el cual nos indicaba que dicho producto si tenía inicios de contaminación y presencia de
microorganismos ya que en él aplicamos toda la teoría estudiada al momento de realizar el
preinforme, es decir, los diversos modos de cultivo fueron necesarios para hacer
comparaciones entre ellos, y de esta manera definir el que se acomodaría de mejor forma a
la práctica que elaboraríamos. Después de aplicar y utilizar los diferentes medios de cultivo
donde se utilizó las tres técnicas de siembras, es preciso decir que el producto de nuestra
practica tenía contaminación así también como el de algunos compañeros, ya que ellos
trabajaron con diferentes reactivos y diferentes muestras y eso también influye en todo debido
a los distintos productos.

6.COCLUSIONES

Mediante dicha práctica se logró Conocer los procedimientos adecuados para el aislamiento
e identificación de microorganismos a partir de jugo de frutas en general.
A su vez, también se reconoció el debido desarrollo y crecimiento de microorganismos de
interés en el cual se aplicó las diferentes técnicas de siembra y aislamiento de cultivo
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aprendidos en clases. Cabe destacar que principalmente se identificó colonias obtenidas

en la preparación de medios de cultivo finalizando así con el correspondiente conteo hallado
en la caja de Petri , Petri film y tubos.

7.-RECOMENDACIONES

 Los materiales del laboratorio deberán estar en un buen estado para que exista una
mejor manipulación al momento de hacer la practica en un menor tiempo.
 Ingresar al laboratorio siempre con el implemento (mandil) necesario para la práctica.
 Tener todos los materiales requeridos y necesarios por la guía y así no tener
inconveniente al momento de realizar dicha práctica.
 Tener precauciones con las sustancias a utilizar así también con los equipos de
laboratorio debido a que son costosos y de uso delicado. Por ende, es necesario
aprender a usarlos adecuadamente, siguiendo paso a paso las instrucciones dadas por
tu profesor.
 Utilizar cuidadosamente el material de vidrio para evitar heridas por corte.
 Al terminar cualquier experimento todos los instrumentos deben quedar limpios y
ubicados en un lugar destinado para ellos.

8.BIBLIOGRAFIA

Perez, N. (2010). Introduccion a la siembra de microorganismos. MONOGRAFIAS PLUS, 2.

Acevedo R, C. (2013). Biologia y Microbiologia Ambiental. Cartagena de Indias-Colombia: Primera

Edicion.

Patricia Hernandez, G. M. (2009). Manual de Practicas de Biologia. Bogota: Unisalle.

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